全 文 ：多指标试验全概率评分法
对鹤蟾颗粒剂提取工艺的研究
贺福元t o彭关富u o罗杰英t o邓凯文v o朱为群t
kt q湖南中医学院 药学院 o湖南 长沙 wtsssw ~
u q珠海金沙湖南药物有限公司 o湖南 长沙 wtsssw ~v q长沙高科技术开发区 o湖南 长沙 wtsstvl
≈摘要 目的 }优选鹤蟾颗粒剂的提取工艺 ∀方法 }用浸膏得率 !浙贝甲素二指标试验全概率评分法考察其醇
提部分乙醇浓度 !加醇量 !提取时间的最优条件 ~用浸膏得率 !总多糖 !鹤草酚三指标考察其水提部分浸泡时间 o加
水量 !煎煮时间最优条件 ∀结果 }醇提部分为 Αu Βu Χv o即干蟾皮 o浙贝母 o生半夏先粉碎成粗末 o用 y 倍药材量
zs h醇液浸泡 uw «后回流提取 tx «o再重复提取 t次 o过滤合并 u次滤液并浓缩成干膏 ∀水提部分为 Αu Βv Χv o即
余药k人参另打粉l加 tw倍药材量水 o浸泡 ws °¬±o煎煮 u «o过滤滤渣加 tu倍药材水煎 t qx «o过滤合并浓缩成干
膏 ∀结论 }方法合理 o最优工艺可信可靠 ∀
≈关键词 鹤蟾颗粒剂 ~全概率评分法 ~正交实验 ~鹤草酚 ~浙贝甲素 ~多糖
≈中图分类号 u{v ~ |ww qu n z ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsw2suxt2sw
鹤蟾方由仙鹤草 !干蟾皮 !猫爪草 !浙贝母 !生
半夏 !鱼腥草 !天冬 !葶苈子 !人参组成 o具有解毒祛
痰 o凉血逐瘀 o消痞散结的功效 o其片剂用于原发性
支气管肺癌 !肺部转移癌的治疗 o往往由于片剂崩解
度和溶出速率超限而影响临床疗效发挥≈t o现予剂
型改革成颗粒剂以提高其疗效 o本文对其剂改提取
工艺研究予以报道 ∀
1 仪器与药品
≤≥2|vs型薄层扫描仪k日本岛津l ~鹤草酚 !浙
贝甲素k中国药品生物制品检定所l ~葡萄糖k湖南范
大学生物化学试剂厂l ~硅胶k青岛海洋化工厂l ~其
他化学试剂均符合5中国药典6一部试药项下有关规
定或为分析纯 ∀
2 工艺设计
整个工艺设计为 v个部分 }干蟾皮 !浙贝母 !生
半夏粉碎成粗粉用醇液回流提取 ~仙鹤草 !猫瓜草 !
鱼腥草 !天冬 !葶苈子一起用水煎提 o醇液及水液浓
缩真空干燥成浸膏 ~人参打粉过 tus目筛 ∀三者混
合剂制成颗粒剂 ∀
3 提取工艺研究
3 q1 醇提艺研究
工艺条件的正交安排选乙醇浓度k Αl o加醇量
≈收稿日期 usss2s|2sx
k Βl o提取时间k Χl三因素三水平用 |kvwl表正交
安排实验 o其各实验因素水平数列表 t o表头安排列
表 u ∀
3 q1 q1 考察指标的确定 醇提部分中药材干蟾
皮 !浙贝母为臣药 o由于干蟾皮中蟾酥毒含量极小 o
所建立的方法不稳定 o采用浙贝母中浙贝甲素 o结合
浸膏得率二指标试验全概率评分法确定最优工艺 ∀
表 t 醇提部分因素水平表
水平
Α
乙醇浓度
r h
Β
加醇量
r倍
Χ
提取时间
r«
t |x {kw owl vkt qx ot qxl
u zs tuky oyl wku oul
v wx tyk{ o{l xku qx ou qxl
3 q1 q2 考察指标的测定
3 q1 q2 q1 浙贝甲素 精密称取醇提部分浸膏粉
vss ªo按文献≈u 进行含量测定 ∀由公式 }含量k h l
浙贝甲素量 ≅浸膏得率r干膏重计算 o结果列于表
u ∀
3 q1 q2 q2 浸膏得率 依正交安排制得各实验号样
品提取液 o测定其总体积k ςl o按5中国药典6附录浸
膏得率项下进行测定 o由浸膏得率k h l ≈干浸膏重
kªl ≅ ςk °¯ l r≈取样体积 k °¯ l ≅原药材重kªl 计
算求得结果列于表 u ∀
#txu#
第 uy卷第 w期
usst年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qw
³µqousst
3 q2 水提部分工艺研究
工艺条件正交安排选浸泡时间k Αl o加水量
k Βl o煎煮时间k Χl三因素三水平用 |kvwl表正交
安排实验 o各实验因素水平数列于表 v o表头安排列
表 w ∀
表 u 醇提部分正交实验结果
试验
号
浸膏得率
r h 概率
浙贝甲素
r h 概率
全概率
计分
t u qx{s s qswwy| s qst{z{ s qs|uuy s qs{uzx
u v qtzy s qsxw|t s qsv|tt s qt|ut s qtywy
v u qzss s qswyzz s qstvvs s qsyxvv s qsytyv
w x qtxt s qs{|ut s qsu|vu s qtwv| s qtvvs
x z qvws s qtuzt s qswsyu s qt||x s qt{xs
y y qwty s qttts s qsusty s qs||sw s qtstw
z { q{{t s qtxv{ s qssz|us s qsv{{| s qsy|yx
{ tu qws s qutxs s qsuzvt s qtvwt s qtxsv
| | qs|t s qtxzw s qsszs|s s qsvwsv s qsyxxt
表 v 水提部分因素水平
水平
Α
浸泡时间
r°¬±
Β
加水量
r倍
Χ
煎煮时间
r«
t us t{kts o{l t qxkt qs os qsxl
u ws uuktu otsl u qxkt qx ot qsl
v ys uyktw otul v qxku qs ot oxl
3 q2 q1 考察指标的确定 仙鹤草为方中君药 o选鹤
草酚为主要考察指标 o结合总多糖及浸膏得率指标 o
全概率评分确定最优工艺 ∀
3 q2 q2 考察指标的测定 鹤草酚≈v 精密称取干燥
至恒重的水提部分浸膏粉 t qsss ªo用 xs °¯ 甲醇超
声波提取 ts °¬±o过滤回收醇至干 o加 ux °¯ 氯仿溶
解制成样品液 ∀另取鹤草酚标准品 ts °ªo用 ts °¯
氯仿溶解制得标准品液 ∀分别吸取标准品液 x ots o
tx ous oux ovs Λ¯ 作标准曲线 o另取 x ots Λ¯ 及样品液
ts Λ¯ 点于含 ƒ ≤¨ v¯的硅胶 2≤ ≤¤薄层层析板上
k硅胶 w qx ªo与 s qx ª煅石膏混合 o加 s qt h ƒ ≤¨ v¯
溶液 tu qx °¯ o搅匀铺板 x qx ¦° ≅ ty ¦° x块 o室温
晾干l ∀用己烷2乙酸乙酯2冰乙酸ktsΒtsΒt qwl展开
至距原点 tu ¦° o取出空气中晾干 o显橙色斑点 o以 Κ¶
为 wus ±° oΚ 为 yvx ±° o≥÷ v双波长锯齿扫描法
测定 o按公式 o含量k h l 鹤草酚量r水部干膏量 o算
得 ∀总多糖 }精密称取干燥至恒重的浸膏粉 t qsss
ªo按文献≈w 进行测定 o由公式 }含量k h l 样品液
浓度 ≅ ux ≅ t sssr干膏粉重 o计算得出 ∀浸膏得率 }
同前述亦按5中国药典6一部相应项下要求进行测
定 ∀上述三者所得实验结果列于表 w ∀
表 w 水提部分正交实验结果
试验
号
浸膏得率
r h 概率
总多糖
r h 概率
鹤草酚
r h 概率
全概率
计分
t ty qwu s qtszw { qw{s s qs||tz s qwuys s qtssw s quuts
u ty qvs s qtsyy | qt{v s qtszw s qwwx{ s qtsxt s quvv{
v t| qwz s qtuzv ts qwy s qtuuv s qw|x| s qtty| s quyxs
w tx qxx s qtstz { qz{z s qtsu{ s qwwzs s qtsxw s quu{x
x t{ qy| s qtuuu | qz{u s qttww s qxst{ s qtt{v s quxzt
y tz qz{ s qttyv ts qtz s qtt|s s qxtyw s qtut{ s quywt
z ty qyt s qts{y | qxvz s qtttx s qwwzz s qtsxy s quv{{
{ tx qyv s qtsuu { q{vz s qtsvv s qwz|| s qttvu s quvy|
| ty qw{ s qtsz{ ts quz s qtust s qw{su s qttvu s quxw|
4 结果分析及讨论
对表 u ow中的结果用多指标试验全概率方法进
行数据处理 o具体运算及公式相关符号的意义可参
考文献≈x ∀本文醇提部分的浸膏得率 !浙贝甲素两
指标因浙贝甲素含量比浸膏得率小 u{v qx倍k Ψ浸r
Ψ浙l o因此可以认为浙贝甲素指标对浸膏得率指标
没有很大影响 o两指标可以认为互不相容 o但浙贝甲
素指标比浸膏得率指标重要 o本文按 °tΒ°u 浸膏
得率指标权重Β浙贝甲素指标权重 s quΒs q{计算 Π
( Αϕ) ∀两指标的 Π( Βι/ Αι) Ξιϕ/ Σϕ列于表 u各指
标的右侧 ∀两指标越大提示工艺越优 ,故 Π( Βι)u
Π( Αt) Π( Βι/ Αt) n Π( Αu) Π( Βι/ Αul o所对应值列
于表 u最右侧栏 ∀同理对提部分的浸膏得率 !鹤草
酚 o总多糖三指标进行全概率计分法处理 o亦认为三
者互不相容 o权重不同 o本文按 °tΒ°uΒ°v 浸膏得
率指标权重Β总多糖权重Β鹤草酚权重 s quΒtΒt计
#uxu#
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算 Π( Αϕ) ,三指标的 Π( Βι/ Αϕ) Ξιϕ/ Σϕ值列于表 w
各指标的右侧 ∀三指标越大提示工艺越优 ,故 Π
( Βι)v Π( Αt) Π( Βι/ Αt) n Π( Αu) Π( Βι/ Αu) n Π
( Αv) Π( Βι/ Αv) ,所对应值列于表 w最右侧栏 ∀对表
u ,w中的全概率计分 Πu , Πv 进行方差分析 o其结果
分别列于表 x oy ∀
表 x 醇提部分方差分析
来 源 ΣΣ Μ ΜΣ Φ Π
总变异 s qstzwy {
Α v qwtt ≅ ts p v u t qzsy ≅ ts p v tvy qv{ s qst
Β tv qzs ≅ ts p v u y q{w| ≅ ts p v xwz qyu s qst
Χ v qzsv ≅ ts p w u t q{xu ≅ ts p w tw q{s s qsx
∆ u qxs ≅ ts p x u t quxt ≅ ts p x
表 y 水提部分方差分析
来 源 ΣΣ Μ ΜΣ Φ Π
总变异 u qsyu ≅ ts p v {
Α t .xyw ≅ ts p w u z .{ut ≅ ts p x ut .u| s .sx
Β t .xuu ≅ ts p v u z .yts ≅ ts p w usz .st s .st
Χ v .zxs ≅ ts p w u t .{{s ≅ ts p w xt .tv s .sx
∆ z .vxv ≅ ts p y u v .yzy ≅ ts p y
故醇提部分最优工艺为 Αu Βu Χv o即干蟾皮 !浙
贝母 o生半夏先粉碎成粗末 o用 y倍药材量的 zs h醇
液浸泡 uw «再回流提取 t qx «o过滤 o滤渣再重提 t
次 o滤液合并浓缩至膏 ∀
水提部分最优工艺为 Αu Βv Χv o即余药k人参打
粉除外l o加 tw倍药材量水 o浸泡 ws °¬±o煎煮 u «o
过滤其渣再加 tu倍药材水煎 t qx «o合并滤液浓缩
至膏 ∀
对表 u ow中的浸膏得率 !浙贝甲素 !鹤草酚 !总
多糖结果直接进行单个方差分析 o其分析结果列表
z ∀
对比分析表 x oy oz可知中药复方提取工艺条件
的优选因考察指标不同 o或因对考察指分析方法不
同 o多指标试验各指标的权重不同其结果不一致 ∀
对于醇提部分以浙贝甲素的含量作指标与浸膏得率
作指标其各因素方差大小顺序相差较大 o提示两者
相关性差 o这可能原于不同浓度醇液的溶出成分范
围不同 o随着醇浓度降低而天然高分子多糖 !蛋白质
溶解急剧增加所致 ∀而水提部分鹤草酚 !总多糖 !浸
表 z 单项指标结果方差分析
成分 来源 ΣΣ Μ ΜΣ Φ Π
浙贝甲素 总变异 t quuz ≅ ts p v {
Α v .{ys ≅ ts p w u t .|vs ≅ ts p w tzz .yx s .st
Β { .sy{ ≅ ts p w u w .svx ≅ ts p w vzt .v| s .st
Χ v .uvu ≅ ts p x u t .yty ≅ ts p x tw .{{ s .sx
∆ u .tzu ≅ ts p y u t .s{y ≅ ts p y
醇提浸膏得率 总变异 |s .y{ {
Α {s .ut u ws .ts twt .w s .st
Β z .t{y u v .x|v tu .ys s .sx
Χ u .ztu u t .vxy w .zys s .sx
∆ s .xyzu u s .u{vy
鹤草酚 总变异 z .xyz ≅ ts p v {
Α t .ysv ≅ ts p v u { .stv ≅ ts p w vy .vz s .sx
Β x .ssy ≅ ts p v u u .xsv ≅ ts p v ttv .x| s .st
Χ | .twy ≅ ts p w u w .xzv ≅ ts p w us .zy s .sx
∆ w .wsz ≅ ts p x u u .usv ≅ ts p x
水提浸膏得率 总变异 tw .z| {
Α u .xxt u t .uzy tv .xw s .sx
Β w .w{w u u .uwu uv .{s s .sx
Χ z .xy| u v .z{x ws .t{ s .sx
∆ s .t{{w u s .s|wus
总多糖 总度异 x .sv{ {
Α s .s{{|| u s .swww| s .yzu| s .sx
Β v .yyy u t .{vv uz .zu s .sx
Χ t .tsy u s .xxvs { .vyw s .sx
∆ s qtvuv u s qsyytu
#vxu#
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膏得率作指标 o其各因素方差大小顺序相差较小 o这
可能由于鹤草酚 !总多糖亲水性强的成分随水量 o浸
泡时间及煎煮时间加长 o与大量的亲水性高分子如
多糖 !蛋白质溶出存在/相似相溶0所致 ∀因此在优
选工艺时 o用醇提应注重选择中小极性的有效成分
为考察指标 o而用水提时应用采用亲水性强的成分
为考察指标 o不能完全采用浸膏得率指标的方法来
优选最佳工艺 o而应采用多指试验全概率方法优选
最佳工艺 ∀
≈参考文献
≈t 文 棣 q中成药实用指南 q北京 }中国书店出版社 ot||x q{sz q
≈u 贺福元 o罗杰英 q鹤蟾颗粒剂中浙贝甲素的薄层色谱分析 q湖南
大学学报 ot||z ouwkxl }{z q
≈v 郑虎占 o董泽宏 o佘 静 q中药现代研究与应用 q北京 }学苑出版
社 ot||{ qwxx q
≈w 朱立文 q黄芪多糖含量测定方法的探讨与比较 q中成药研究 o
t|{z okyl }tt q
≈x 魏 毅 o罗杰英 q用多指标试验全概率评分法研究茶多酚颗粒
制备工艺 q中国中药杂志 ot||| ouwkxl }uz| q
≈责任编辑 李 禾
高效液相色谱法测定
少腹逐瘀颗粒剂中芍药苷的含量
张燕平t o马 跃u o李淑平u
kt q解放军总医院 o北京 tss{xv ~u q北京紫辰宣医药经营有限公司 o北京 tsssutl
≈摘要 目的 }建立一种测定少腹逐瘀颗粒剂中芍药苷含量的方法 ∀方法 }高效液相色谱外标法 o采用 ≠ • 2
≤t{ vz柱kts Λ° ow qy °° ¬§≅ uxs °° l o甲醇2四氢呋喃2水ky qyΒv qwΒ| qsl为流动相 o紫外检测波长 uvs ±° ∀结
果 }线性范围为 s qu ∗ t q{ Λª oρ s .|||| ,回收率为 |z .{ % , ΡΣ∆为 t qw h ∀结论 }本法测定少腹逐瘀颗粒剂中芍
药苷的含量 o操作简便 o结果准确 ∀
≈关键词 高效液相色谱法 ~芍药苷 ~少腹逐瘀颗粒剂
≈中图分类号 u{v ~|ww qu n z ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsw2suxw2sv
少腹逐瘀颗粒剂是根据清代王清任5医林改错6
之名方 o运用现代制药技术研制成的一种活血逐瘀 !
祛寒止痛之有效成药 ∀本方中赤芍为主要药物 o其
有效成分为芍药苷≈t ∀有关复方制剂中芍药苷的含
量测定方法有薄层扫描法≈u !高效液相法≈v ow ∀本
文运用高效液相色谱外标法对芍药苷进行了含量测
定 o为该制剂的质量控制提供了快速准确的测定方
法 ∀
1 仪器与试药
岛津 ≤2ts 高效液相色谱仪k日本l ~芍药苷
对照品k中国药品生物制品检定所 szvy2|ys{ o°≤
面积归一化法测得含量 |{ qs h以上l ~少腹逐瘀颗
粒剂k北京紫辰宣医药经营有限公司生产l ~其他化
学试剂均为国产 o 级 ∀
≈收稿日期 usss2sw2tv
2 方法与结果
2 q1 色谱条件
色谱柱 }≠ • 2≤t{ vzkw qy °° ¬§≅ uxs °° o
tsΛ°l ~流动相甲醇2四氢呋喃2水ky qyΒ v qwΒ| qsl ~
流速 t °¯ #°¬±p t ~紫外检测波长 uvs ±° ~理论塔板
数 按芍药苷峰计算应不低于 v x s s ~灵敏度
s qt ƒ≥ ~纸速 ts °°#°¬±p t ~柱温为室温 ∀
2 q2 供试品溶液及对照品溶液的制备
供试品溶液及阴性对照液 取本品 ty ªo研成
细粉 o精密称取 s qvu ªo置具塞锥形瓶中 o加甲醇 tx
°¯ o摇匀 o超声处理k功率 uxs • o频率 ws ®½lws
°¬±o放置至室温 o滤过 o滤液置 ux °¯ 量瓶中 o用
少量甲醇分次洗涤残渣与滤器 o洗液滤入同一量瓶
中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o即得 ∀
仿此法制得缺赤芍的阴性对照液 ∀
对照品溶液 精密称定芍药苷对照品 x °ªo置
#wxu#
第 uy卷第 w期
usst年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qw
³µqousst