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百蕊片药理作用的实验研究



全 文 :百蕊片药理作用的实验研究
杨军 王静 k安徽省医学科学研究所 合肥 uvssytl
高美华 k安徽大东方药业有限责任公司 合肥 uvss{{l
李静美 k合肥神鹿药业有限公司 合肥 uvsswtl
摘要 目的 }观察百蕊片主要药理学作用 ∀方法 }采用体外细菌培养 !体内抗炎免疫及镇咳祛痰等
实验方法 ∀结果 }体外培养条件下百蕊片对金黄色葡萄球菌等有明显的抑制作用 ~对由二甲苯诱发的小
鼠耳廓炎症及大鼠棉球肉芽肿有显著的抑制 ∀百蕊片可显著促进小鼠气管对酚红的分泌 o对浓氨水所
致的小鼠咳嗽抑制明显 ∀此外 o百蕊片对小鼠体液免疫有一定的增强作用 o但对细胞免疫功能无明显影
响 ∀结论 }百蕊片具有显著抗菌 !抗炎 !镇咳和免疫增强作用 ∀
关键词 百蕊片 抗炎抑菌 止咳化痰 体液免疫
百蕊草 o别名百乳草 !小草 !地石榴 o为檀香
科植物百蕊草 Τηεσιυµ χηινενσε ×∏µ¦½q的干燥全
草 o始载于5图经本草6 ∀百蕊草为多年生寄生
草本 o根上有寄生根 o常附着在其它活体植物根
上而生长 ∀全草入药 o有清热解毒 o补肾涩精之
功效 ∀多用于治疗急性乳腺炎 !肺炎 !扁桃体炎
以及肾虚腰痛 !遗精等症 ∀近年来 o百蕊草的化
学成分 !药理及生药鉴别等研究已有一些报
道≈t ou  ∀针对百蕊片临床应用的适应症 o本文对
百蕊片的药理作用进行了系统的研究 ∀
1 材料与药物
111 动物 昆明种小鼠 o雌雄各半 o体重 t{ ∗
uuª~• ¬¶·¤µ大鼠 o雌雄各半 o体重 tws ∗ t{sªo由
安徽省医学科学研究所动物研究室提供 o具备
安徽省实验动物委员会核发的普通级实验动物
合格证 ∀
112 药品及试剂 百蕊片 o由合肥中药总厂提
供 o批号 |zswus ∀实验前以蒸馏水配制成不同
浓度的百蕊片溶液 o小 !中 !大剂量组分别相当
给予百蕊片 s qs{ os quw os q{sªr®ª体重 o为临床
人用量的等剂量 !v倍剂量及 ts倍剂量 ∀咽喉
消炎丸 }淮南第一制药厂 o批号 |zswst ∀给药剂
量为 s qssyªr®ª∀
彩色 ŒªŠ oŒª„ oŒª 单扩散板 o≤v o≤w免疫
单扩散板为北京科兴医用试剂研制开发中心的
产品 ∀其余所用化剂均为市售品 o分析纯 ∀
2 方法与结果
211 百蕊片体外抑菌实验 体外抑菌实验采
用混合法 o将百蕊片用少量的蒸馏水溶解 o加入
液态的琼脂中使之混合 o然后置入平皿中 ∀百
蕊片的浓度为 s qs{ h os quw h os q{s h ∀将培养
基分成若干等份 o每份用划痕法接种一种细菌 o
用作接种的细菌 ∀先在肉汤培养基中培养 y«o
再稀释 tsss倍使用 ∀接种细菌置 vz ε 温箱中
培育 uw«o观察细菌的生长情况 ∀同时 o另用等
量的滤菌的蒸馏水倾入琼脂培养基 o接种细菌 o
培育 uw«作对照 ∀结果见表 t ∀
表 t 百蕊片体外抑菌实验
分组
剂量
h
余葡
球菌
卡它
球菌
白色
念球菌
伤寒
杆菌
绿脓
杆菌
变型
杆菌
痢疾
杆菌
对照 p p p p p p p
百蕊片 s qs{ p p n p p p p
s quw n n n n n n n
s q{s n n n n n n n
注 }n为无细菌生长 p为有细菌生长
212 百蕊片对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影
响 取昆明种小鼠 xs只 o雌雄各半 o体重 t{ ∗
uuªo随机分成对照组 os qvu h os q|y h ov qus h
百蕊片组及 s qsuw h咽喉消炎丸组 ∀每组分别
#zyv# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 y期
灌胃 s qx°¯ r§o对照组灌服蒸馏水 s qx°¯ ∀连续
给药x§o末次给药t«后 o每只小鼠左耳涂
s qsx°¯ 二甲苯致肿 o右耳作正常对照 ot«后处
死小鼠 o以左耳重量减去右耳重量为肿胀度 o比
较药物的抗炎作用 o结果见表 u ∀
表 u 百蕊片对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
组 别 剂量 ªr®ª 肿胀率 抑制率 h
对照组 s q{y ? s qwx
百蕊片 s qs{ s qwv ? s quutl xs
s quw s qw{ ? s quutl ww qt|
s q{s s qwy ? s qtxtl wy qxt
咽消丸 s qssy s qxs ? s qtytl wt q{y
注 }≠ ξ ? σ  ν € ts 与对照组相比 t) Π s qsx
213 百蕊片对大鼠棉球肉芽肿的影响 取
• ¬¶·¤µ种大鼠 ws只 o雌雄各半 o体重ktys ? usl
ªo随机分成对照组 os qs{ os quw os q{sªr®ª百蕊
片组及 s qsuw h咽喉消炎丸组 ∀将动物¬³戊巴
比妥钠kvs°ªr®ªl麻醉后 o仰卧固定于鼠板上 o
在无菌操作下 o下腹部稍加剥离皮下组织 o然后
用眼科镊将 us°ª重灭菌棉球 u只分别植入腹
部皮下 o随即缝合皮肤 ∀术后次日给药 o连续用
药 z§∀第 {§动物脱颈椎致死后 o打开切口 o将
棉球连同周围结缔组织一起剥出 o剔除脂肪组
织 o置 ys ε 烘干 o称重 o将所得的肉芽肿重量减
去棉球重量 o即为肉芽肿净重 ∀计算每组动物
内芽肿均数和标准差k°ªrtssªl o比较各组肉芽
肿量 o计算抑制率 ∀结果见表 v ∀
表 v 百蕊片对大鼠棉球肉芽肿的影响
组别 剂量 ªr®ª 肉芽总重 °ªrtssª 抑制率 h
对照组 x{ q|u ? tx qzt
百蕊片 s qs{ vx qwu ? ts q{zul v| q{{
s quw uz qzu ? y qz{ul xu q{x
s q{s vv qzy ? tt qvvul wu qvy
咽消丸 s qssy vw q|v ? tw qwzul ws qzu
214 百蕊片对小鼠气管酚红分泌量的影响
取昆明种小鼠 xs只 o雌雄各半 o体重 us ∗ uxªo
随机分成对照组 os qvu h os q|y h及 v qus h百蕊
片组及 s qsvzx h 小儿奇应丸组 ∀禁食不禁水
tu«后 o每组分别灌胃药液 s qx°¯ o对照组灌服
蒸馏水 s qx°¯ ∀灌胃给药 s qx«后 o¬³酚红溶液
s qu°¯ rtsªo注射后 s qx«用湿布堵住小鼠口鼻 o
令其窒息死亡 ∀将小鼠仰位固定 o剥离气管 o用
小动脉夹夹住自甲状软骨至气管分支处的一段
气管并剪下 o放入盛有 u°¯ 生理盐水的试管中 o
再加 s qt°¯ ‘¤’‹ o用分光光度计测定其吸收度
值 ∀再根据标准曲线计算酚红含量k±ªr°¯ l ∀
结果见表 w ∀
表 w 百蕊片对小鼠气管酚红分泌量的影响
组别 剂量 ªr®ª 酚红分泌量 ±ªr°¯
对照组 { quy ? y qtw
百蕊片 s qs{ t{ qvu ? ty qy{
s quw vt qzw ? uw quxtl
s q{s uu quw ? { quvul
奇应丸 s qsvzx tw qzu ? v quwtl
215 百蕊片对小鼠氨水引咳作用的影响 取
昆明种小鼠 xs只 o雌雄各半 o体重 us ∗ uxªo随
机分成对照组 os qvu h os q|y h及 v qus h百蕊片
组及 s qsvzx h小儿奇应丸组 ∀禁食不禁水 tu«
后 o每组分别灌胃药液 s qx°¯ o对照组灌服蒸馏
水 s qx°¯ ∀灌胃给药 s qx«后 o分别将 x只小鼠
k各组 t只l置 vsss°¯ 密封的玻璃容器内 o每次
均恒压喷雾浓氨水kux h ∗ u{ h ‘‹w’‹lvs¶刺
激小鼠致咳 o将动物停留在容器内 vs¶o取出动
物 o观察次数r°¬±及潜伏期 o求 τ值比较 o结果
见表 x ∀
表 x 百蕊片对小鼠氨水引咳作用的影响
组别 剂量 ªr®ª 咳嗽次数r°¬± 咳嗽潜伏期 ¶
对照组 vs qxs ? w qwv tv qx| ? z qwz
百蕊片 s qs{ tu qus ? w qwuul v{ qzs ? tu qtuul
s quw tw qvs ? y qsyul vs qxs ? | quyul
s q{s tx qus ? w qtsul uz qxs ? tu qxvul
奇应丸 s qsvzx us qzs ? z qxwul us qws ? y q|utl
216 百蕊片对小鼠免疫器官重量的影响 取
昆明种小鼠 ys只 o雌雄各半 o体重 us ∗ uxªo随
机分成对照组 os qvu h os q|y h及 v qus h百蕊片
组及 s qsuw h咽喉消炎丸组 ∀每组分别灌胃 s q
x°¯ r§o对照组灌服蒸馏水 s qx°¯ ∀连续给药
z§o末次给药后 t«o自小鼠眼眶放血 o处死动
物 o分别称取体重 !胸腺 !肝脏及脾脏重量 o计算
脏器系数 o结果见表 y ∀
217 百蕊片对小鼠免疫球蛋白含量的影响
取昆明种小鼠 xs只 o雌雄各半 o分组及给药同
实验 216 ∀末次给药 t«后 o将各组小鼠自眼眶
放血 o加入已用 t h肝素化的抗凝试管中 o分离
#{yv# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 y期
血浆 ∀取待测血清 s qt°¯ o加生理盐水 s qv°¯
混匀 o测定ŒªŠ oŒª„各取 ts Λ¯ o测定Œª 取
表 y 百蕊片对小鼠免疫脏器系数的影响
组别 剂量ªr®ª
胸腺系数
°ªrª
脾系数
°ªrª
肝系数
ªrª
对照组 u qww ? s qxs u qyt ? t qtz s qsxu ? s qss|v
百蕊片 s qs{ u qyv ? s qvz u qx| ? s qws s qsxv ? s qsszt
s quw v quy ? s qzytl u q{v ? s qxt s qsxw ? s qssyy
s q{s u q{s ? s qxx u q{| ? s qwv s qsxx ? s qss{t
咽消丸 s qssy v qsz ? s qw{tl u q{{ ? s qvu s qsxy ? s qssxy
usΛ¯ ∀分别注入 Š o„ o 板孔中 o置水平湿盒放
vz ε 培养箱内 ow{«后观察结果 o用免疫测量仪
读出每孔扩散环的直径 o以标准曲线求出 Œª含
量 o结果见表 z ∀
表 z 百蕊片对小鼠免疫球蛋白含量的影响
组别
剂量
ªr®ª
ŒªŠ
ªr
Œª„
ªr
Œª
ªr
对照组 t qu{ ? s qs| s qvy ? s qsx s qt| ? s qswx
百蕊片 s qs{ t quu ? s qyx s qvs ? s qsz s qus ? s qsuw
s quw t quw ? s qsz s qu| ? s qsw s quu ? s qsvy
s q{s t qws ? s qtstl s qv| ? s qsw s qus ? s qsvt
咽消丸 s qssy t qu{ ? s qtw s qwu ? s qsxul s quu ? s qsv{
218 百蕊片对小鼠补体含量的影响 取实验
216中各组抗凝血浆样品各 s qt°¯ o加生理盐水
s qv°¯ 混匀后 o取 tsΛ¯ o加入扩散板小孔内水平
盒放 vz ε 培养箱内 ow{«观察结果 o用免疫测定
仪读出每孔扩散环的直径 ∀查 ≤v o≤w含量表 o
得出 ≤v o≤w含量 o结果见表 { ∀
表 { 百蕊片对小鼠 ≤v o≤w含量的影响
组别 剂量 ªr®ª ≤v °ªr°¯ ≤w °ªr°¯
对照组 s qtvt ? s qstt s quwt ? s qstt
百蕊片 s qs{ s qtux ? s qss| s quys ? s qsxx
s quw s qtuv ? s qsts s quyw ? s qsyv
s q{s s qtus ? s qsuv s qutx ? s qsux
咽消丸 s qssy s qtut ? s qstx s qut| ? s qsus
219 百蕊片对小鼠淋巴细胞转化率及 ∞花环
形成率的影响 ≠ 取实验216中各组抗凝血
s qt°¯ o加 t q{°¯ • °Œ tyws培养基中 o同时加
°‹„ s qt°¯ 于 vz ε 水浴 zu«o吸去上清液 o加入
‘‹w≤¯ok{ qvªrlw°¯ 混匀 vz ε o水浴 ts°¬± o离
心 ts°¬± o弃去上清液 o加 x°¯ 固定液 o室温置
ts°¬± o离心弃去上清液 ∀玻片浸泡于蒸馏水中
置冰箱 o加 u滴沉淀物于玻片 o自然干燥 o染色 o
计算 tsss个淋巴细胞数 o计算转化率 ∀ 另将
抗凝血 t°¯ o加 ‹¤±®. ¶液 t°¯ 稀释后 o叠加于
t°¯ 淋巴细胞分离液上 o离心 ts°¬± o吸出单个
核细胞层 o用 ‹¤±®. ¶液洗涤 u次 o弃去上清液 o
将沉淀的单核细胞用 ³‹z qs‹¤±®. ¶液配成 t qx
≅ tsyr°¯ 个细胞 ∀取 s qt°¯ 淋巴细胞液 o加入
s qt°¯ t h • …≤ 悬液 ovz ε x°¬±离心 o置 w ε u«
以上 ∀加入 s q{ h戊二醛 s qu°¯ 于 w ε vs°¬± o
弃去上清液 o制片 o干燥 o染色 o计算 tsss个淋
巴细胞 o凡细胞粘附的为花环形成 o计算形成
率 ∀结果见表 | ∀
表 | 百蕊片对小鼠淋巴细胞及 ∞花环形成率的影响
组别 剂量 ªr®ª 淋转率 h ∞花环 h
对照组 zw qs ? y quv tw qv ? v qts
百蕊片 s qs{ zs qt ? w q|u tw qy ? v qvw
s quw zv qx ? w qus tx qv ? v qws
s q{s zs qx ? w qus tw q{ ? u qt|
咽消丸 s qssy zu qx ? v q{s ty qv ? u qvs
3 讨论
实验发现 }百蕊片对金黄色葡萄球菌 !痢疾
杆菌 !伤寒杆菌等均有显著的抑制生长作用 ~可
明显抑制二甲苯所致耳廓肿胀作用 o显著抑制
大鼠棉球肉牙肿 o但各剂量组间未见明显量效
相关性 ∀百蕊片可提高小鼠气管酚红的排泄
量 o呈量效趋势 ~百蕊片大 !中 !小剂量组对小鼠
浓氨水引咳均有显著的止咳作用 o可显著长小
鼠每分钟咳嗽次数及咳嗽的潜伏期 ∀百蕊片对
小鼠胸腺系数有明显提高作用 ~大剂量组对小
鼠 ŒªŠ含量有明显增加作用 ∀
4 参考文献
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查 q中草药 ot||v ouwk{l }wu|
u 安徽省医学科学研究所植化室百蕊草组 1 百蕊草有效成分
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v 徐雷鸣 o汪素兰 1 紫外分光光度法测定百蕊草总黄酮含量 q
基层中药杂志 ot||x o|kwl }u|
w 安徽省医学科学研究所植化室百蕊草组 1 百蕊草有效成分
的化学研究k第一报l q中草药通讯 ot|zy ok{l }y
x 王先荣 o王兆全 o杜安全 1 百蕊草有效成分的化学研究 µ百
蕊草素 Œ∂ 的提取 !分离和鉴定 q现代应用药学 ot||w ott
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