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Comparison of Cytotoxicity of Different Processed Products of Gamboge on K562 Tumor Cells

藤黄及其炮制品对K562肿瘤细胞生长抑制作用的研究



全 文 :# 炮制#
藤黄及其炮制品对肿瘤细胞
生长抑制作用的研究
陆跃鸣 王耿 叶定江
南京中医药大学 
摘要 采用体外培养肿瘤细胞的方法观察了藤黄各炮制品对肿瘤细胞株 生长抑制作用及形
态损伤作用结果表明高压蒸制藤黄对肿瘤细胞的抑制作用最强其细胞的形态损伤作用与生长抑制作
用相一致∀
关键词 藤黄炮制 肿瘤细胞 增殖抑制率
藤黄为藤黄科植物藤黄的干燥树脂临床
多用于治疗痈疽肿毒!顽癣恶疮!损伤出血!牙
疳蛀齿!汤火伤≈∀近年来研究认为藤黄具有抗
肿瘤作用临床治疗乳腺癌!淋巴肉瘤!皮癌均
有效≈∀ 动物实验表明藤黄及其提取物对
≥≥  • 及淋巴网状肉瘤等有明
显的抑制作用∀体外培养肿瘤细胞实验也表明
藤黄及其提取物对  细胞!  ∞2细胞及
≥  ≤ 2等人癌细胞株均有明显的抑制作
用≈∗ ∀生藤黄有毒常须通过炮制减低毒性∀
本实验用体外培养肿瘤细胞的方法观察了藤
黄各炮制品对肿瘤细胞生长抑制作用及形
态损伤以优选其炮制方法∀
1 样品制备
11 生藤黄 购自南京市药材公司产地泰
国为藤黄科植物藤黄 Γαρχινια ηυνβυρψι
  ƒ 的干燥树脂∀
清水煮藤黄 将生藤黄加 倍量水置瓷
锅中煮沸趁热用单层纱布过滤!滤液加热
浓缩至稠膏状阴干∀
高压蒸制藤黄 ε  ° ∀
豆腐制藤黄 取豆腐一块置盘内中间挖
一不透气的槽放入藤黄再用豆腐盖严置笼
内蒸 待凝固后去净豆腐阴干∀ 每藤黄
用豆腐 ∀
荷叶制藤黄 荷叶煎汁加藤黄煮至烊化
单层纱布过滤煮沸 阴干∀每藤黄 用荷
叶 ∀
山羊血制藤黄 山羊血加水煮成凝块与
藤黄共煮 单层纱布滤去羊血块阴干∀每藤
黄 用山羊血 ∀
藤黄酸 中药炮制教研室提供∀
以上样品各取  精密称定用  
无水乙醇溶解后再加水稀释成所需的各种浓
度备用∀
12 细胞株 慢性髓性白血病细胞∀由
南京医科大学提供∀
13 试剂  ° 2  
小牛血清江苏省生物化学研究所∀
14 仪器 ≤  培养箱2 2≤   ∏
°2 ×  ∞≥°∞≤ ≤   ° ∀倒置
显微镜  ∏×  ≠  ∀
15 细胞接种 采用常规细胞培养取 孔
细胞培养板每孔加入细胞悬液  分别加入
各种浓度的药物溶液  ∀ 空白对照组加入
等量培养液∀ 在含有  ≤  ε 的培养箱内
培养∀
16 细胞形态的观察 将培养 的实验组
及空白组细胞置于倒置显微镜下观察细胞形
态及生长情况同时作显微照相记录∀ 按
× 分级法将细胞受损的形态改变定为 
级∗  ≈∀
17 对细胞增殖抑制 将照相记录后的细胞
制成细胞悬液利用细胞计数板显微镜下计
## 中国中药杂志 年第 卷第 期
数按下式计算增殖抑制率∀
增殖抑制率 空白组细胞数 实验组细
胞数空白组细胞数≅ 
以各个不同药物的对数浓度为横坐标由
相应的细胞增殖抑制率为纵坐标求出直线回
归方程根据该方程算出增殖抑制率  的药
物浓度≤ ∀
2 结果
21 细胞形态的观察 随着药物浓度的增加
悬浮生长的细胞的形态损伤也随之加重∀
低浓度时有大量圆形细胞细胞密度下降有
部分细胞出现透光性差细胞边缘不清随着浓
度增加该部分比例增大∀ 高浓度时细胞结构
模糊进而萎缩并发生崩解细胞严重破坏形成
碎片∀在藤黄及其炮制品中以藤黄酸和高压蒸
制藤黄抗肿瘤细胞生长作用最强细胞损伤达
 级荷叶制藤黄次之∀ 空白组细胞呈圆形透
光性好结构清晰∀
22 对细胞增殖抑制作用 不同浓度的藤黄
各炮制品对细胞作用 计数结果表明
在低浓度时就影响细胞的增殖∀ 随着药物浓度
的递增抑制作用也逐渐增强空白对照组及
 浓度的乙醇组培养 后细胞成活率
 ∀ 其结果见附表∀
由表中可看出藤黄酸和高压蒸制藤黄抗肿
瘤细胞生长作用最强荷叶制藤黄次之生藤黄
其作用较弱∀
以增殖抑制率为纵坐标各不同药物的对
数浓度为横坐标求出直线回归方程∀相关系数
 表明增殖抑制率与对数浓度成正比∀
3 讨论
本实验以体外培养肿瘤细胞的方法直接
观察了藤黄各炮制品及藤黄酸对肿瘤细胞
附表 藤黄及炮制品对
生长抑制率及 ≤ 的比较
组 别
生长抑制率 
   Λ 
≤ 
生 藤 黄     
水 煮 藤 黄     
豆 腐制藤黄     
山羊血制藤黄     
荷 叶制藤黄     
高压蒸制藤黄     
藤 黄 酸     
生长抑制作用∀该实验具有灵敏!快速!简便!经
济等特点∀
对肿瘤细胞作用 ≤ 在单体化合物
Λ 以下者认为有效Λ 以下者显
著有效∀藤黄各炮制品的 ≤ 均在 Λ 以
下其中尤以高压蒸制藤黄对肿瘤细胞生
长抑制作用最强荷叶制藤黄次之∀藤黄酸是藤
黄的主要成分之一具有抗癌活性≈在此作
为参照物∀实验还表明藤黄各炮制品对肿
瘤细胞的损伤与总数下降相一致细胞生长抑
制率与药物浓度呈正相关∀ 本实验为筛选具有
抗肿瘤的藤黄炮制方法提供了科学依据∀
4 参考文献
 江苏新医学院中药大辞典上海人民出版社Β

 江西省藤黄抗癌研究协作组中华皮肤科杂志 
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 丘相寰等江西医药 Β 
 项守仁等江西医学院学报 Β 
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) ) 收稿
## 中国中药杂志 年第 卷第 期