全 文 ：#研究论文#
四倍体菘蓝体外抗内毒素 !抗病毒作用评价
王 寅 o乔传卓 o刘 盛 o张汉明
k第二军医大学 药学院 o上海 usswvvl
≈摘要  目的 }对四倍体菘蓝的药理作用进行评价 ∀方法 }以同源二倍体亲本为对照 o以鲎试剂法 !鸡胚法分
别考察四倍体菘蓝的抗内毒素 !抗病毒作用 ∀结果 }四倍体菘蓝的抗内毒素及抗病毒作用显著强于二倍体亲本 o相
同倍性菘蓝的叶的体外药理作用强于根 ∀结论 }四倍体菘蓝是优质高效的新品系 o具有很大的开发利用价值 ∀
≈关键词  菘蓝 ~四倍体 ~抗内毒素 ~抗病毒
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsy2svuz2sv
十字花科菘蓝 Ισατισ ινδιγοτιχα ƒ²µ·q是我国南
北各地大宗栽培的重要药用植物 o其根和叶分别为
常用中药材板蓝根 !大青叶的主要来源≈t  ∀课题组
于 t|{z年育成菘蓝人工同源四倍体 o经过数代单株
选育 o获得了稳定高产的品系≈u  ∀
为了更好地开发利用这一新品系 o本文以菘蓝
二倍体亲本为对照 o对四倍体菘蓝的体外抗内毒素 !
抗流感病毒作用进行评价 ∀旨在为保证药材质量及
研发新药提供科学依据 ∀
1 材料
二倍体亲本ku± € twl和四倍体ku± € u{l菘蓝
药材均栽培于上海市崇明岛新海农场的试验田 o经
作者鉴定为 Ισατισ ινδιγοτιχα ƒ²µ·q∀在实验时 o将
菘蓝的根和叶各自分开处理 ∀
将药材烘干 o粉碎 o过 ys 目筛 o称取 tss ªo加
xss °¯ 水煎煮 vs °¬±o过滤 o重复 v次 o合并滤液 o
水浴浓缩至约 tss °¯ o加乙醇至醇浓度为 {s h o冷
藏 uw «后过滤 o回收乙醇至无醇味 o以蒸馏水定容
至 tss °¯ o调节 ³‹ 值为 z qs ∗ z qx o压滤除菌及其他
杂质颗粒 o用安瓿分装 o封口 o煮沸消毒 o备用 ∀菘蓝
根 !叶的提取液浓度均为 t°ª# °¯ p t ∀
2 方法
2 q1 抗内毒素作用≈v 
鲎试剂k福州东方鲎试剂厂 o批号 |ztus{ os qt
≈收稿日期  t|||2s{2sw
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|yzs{z{l o上海市
科委星火计划项目k|{÷ ‹susu{l
°¯ r支 o灵敏度 s qx ∞˜# °¯ p tl ~细菌内毒素工作标
准品k福州东方鲎试剂厂 o批号 |{stsx ots ∞˜r支l ~
s q| h生理盐水k上海市长海医院 o批号 |{swszl ~电
热恒温水浴锅k上海医疗器械厂l ~注射器 o试管 o吸
管及容量瓶等均按5中国药典6/热源检查法0项目规
定处理 ∀
分别取 s qx °¯ 菘蓝提取液于 t ou号试管内 o在
u号试管内加入 s qx °¯ 生理盐水 o混匀 o吸取 s qx
°¯ 于已加有 s qx °¯ 生理盐水的 v号管中 o依次按同
法稀释 o得到稀释倍数分别为 t ou ow o{ oty ovu oyw o
tu{和 uxy的系列溶液 o并使各管的药液量都为 s qx
°¯ ~分别加入预先配制的浓度为 ts ∞˜# °¯ p t内毒
素液 s qx °¯ o摇匀 o于 xx ε ? u ε 水浴保温 vs °¬±o
分别取 s qu °¯ 于 s qt °¯ 鲎试剂中 o溶解 o封口 o于
vz ε ? t ε 水浴中温育 ys °¬±∀
加 s qu °¯ 细菌内毒素检查用水于 s qt °¯ 鲎试
剂中 o作阴性对照 ~加 s qt °¯ 细菌内毒素检查用水
和 s qt °¯ ts ∞˜# °¯ p t内毒素液到 s qt °¯ 鲎试剂
中 o作阳性对照 ∀其余同药物组处理 ∀
2 q2 抗流感病毒作用≈w 
甲型流感病毒毒株k„t 京防 {y2t∞≤ wrurzsl
由江苏省防疫站提供 ∀按照中华人民共和国国家标
准kŠ… tx||w2t||xl/流行性感冒诊断标准及处理原
则0项目规定进行 ∀
将鸡胚在实验室 v| ε 下孵育至 tu §胚龄 o备
用 ∀共进行以下实验 }≠对病毒的直接灭活作用 }将
大青叶提取液与病毒等量混合 ovz ε 作用 u «o接种
量为 s qu °¯ r胚 ~对病毒的治疗作用 }先将病毒以
#zuv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o‘²qy
∏±¨ ousss
s qt °¯ r胚的量接种至鸡胚内 ow «后 o再以 s qt °¯ r
胚量接种提取液 ~≈对病毒的预防作用 }每个鸡胚先
接种 s qt °¯ 提取液 ot §后再接种 s qt °¯ 的病毒 ∀
每组均接种 v个鸡胚 ovx ε 孵育 v天 ow ε 过夜
后收获尿囊液 o进行血凝实验 o在大孔塑料板内用生
理盐水将尿囊液以蒸馏水按 tΒts稀释 o再倍比稀释
为 tΒus otΒws otΒ{s otΒtys otΒvus和 tΒyws z个浓
度梯度 ∀每孔加入 t h的鸡红细胞悬液 o摇匀 o静置
wx °¬±后观察 o根据血球凝集程度的不同进行判
断 ∀以/ n n 0为终点 o即观察到红细胞在孔底形成
t个环状 o四周有小凝集块 o以此为标准测定血凝滴
度 ∀
设生理盐水对照组k排除血细胞自身的非特异
性凝集反应l和病毒对照组 o各组实验收取的尿囊液
均以血凝效价反映病毒在鸡胚中的增殖情况 ∀
3 结果
两种倍性水平菘蓝根和叶的抗内毒素作用见表
t ∀
表 t 四倍体和二倍体菘蓝药材的抗内毒素作用
样品 t tru trw tr{ trty trvu tryw trtu{ truxy
根ku±l p p p n n n n n n
根kw±l p p p p p ? n n n
叶ku±l p p p p p ? n n n
叶kw±l p p p p p p p n n
注 }p 表示无凝胶形成 ~n 表示有凝胶形成 ~? 表示形成
凝胶 o翻转后产生变形获流动 ~tr±表示将菘蓝提取液稀释 ±倍
四倍体菘蓝的根和叶的抗内毒素作用均明显强
于二倍体亲本 o相同倍性水平菘蓝叶的抗内毒素作
用强于根的作用 ∀
两种倍性水平菘蓝根和叶的抗病毒作用见表
u ∀
表 u 四倍体和二倍体菘蓝药材
的抗甲型流感病毒作用
样品
尿囊液平均血凝滴度
直接作用 治疗作用 预防作用
根ku±l tΒys tΒ{s tΒuzs
根kw±l tΒvs tΒys tΒxs
叶ku±l tΒtss tΒys tΒuss
叶kw±l ) tΒws tΒws
结果判断 }以药物试验组血凝效价比病毒对照
组低 w倍以上 o说明药物对病毒增殖有抑制作用 ∀
本试验中接种鸡胚所用的病毒血凝效价为 tΒvus o
生理盐水对照组为/ p 0 ∀药物试验组血凝滴度低于
tΒ{s o表明对病毒增殖有抑制作用 ∀二倍体亲本菘
蓝根 !叶对甲型流感病毒基本无作用或作用很弱 o四
倍体菘蓝根 !叶对甲型流感病毒的作用较强 ∀其中
四倍体菘蓝叶的提取液对甲型流感病毒的抑制作用
最好 o鸡胚尿囊液中甲型流感病毒基本不能增殖 ∀
4 讨论
板蓝根 !大青叶是临床常用的清热解毒类中药
材 ∀现代研究认为清热解毒类中药是一类针对机体
为主的抗感染药物 o具有抗病原微生物 o抗细菌内毒
素 o解热 o抗炎 o增强抗感染免疫等多种作用 ∀通过
评价菘蓝的抗病毒 !抗内毒素作用 o能较好的判定菘
蓝药材品质的优劣 ∀实验结果显示四倍体菘蓝的体
外抗内毒素 !抗病毒作用显著强于二倍体亲本 o表明
四倍体菘蓝是高产优质的新品系 o具有很好的开发
利用价值 ∀
植物人工同源多倍体培育时 o多倍体子代与亲
本之间会产生形态及化学上的变化≈u  ∀化学成分
研究表明四倍体菘蓝药材中的靛蓝 !靛玉红 !游离氨
基酸以及有机酸成分的含量均明显高于二倍体 o这
可能是四倍体菘蓝药理作用较强的物质基础 ∀
染色体加倍的巨型性效应在子代的不同器官表
现不均匀 o四倍体菘蓝叶的巨型性较明显 o其次生代
谢物积累多≈x  o实验结果也验证四倍体菘蓝叶的药
理作用较强 ∀
≈参考文献 
≈t  乔传卓 o崔 熙 1 菘蓝和欧洲菘蓝的鉴别研究 1 植物分类学
报 ot|{w ouukyl }uvz q
≈u  乔传卓 o吴美枢 o戴富宝 o等 1 菘蓝多倍体育种的研究 1 植物学
报 ot|{| ovtk|l }yz{ q
≈v  刘云海 1 板蓝根抗内毒素作用研究 1 中国药科大学学报 o
t||x ouykxl }u|z q
≈w  陈 奇 1 中药药理研究方法学 1 北京 }人民卫生出版社 ot||v o
ux{1
≈x  乔传卓 o戴富宝 o崔 熙 o等 1 两种倍性水平菘蓝的生药学研
究 q中草药 ot||x ouyk{l }wuv1
#{uv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o‘²qy
∏±¨ ousss
Εϖαλυατιον ον Αντιενδοτοξιχ Αχτιον ανδ Αντιϖιραλ Αχτιον ιν ϖιτρο
οφ Τετραπλοιδ Ισατισινδιγοτιχα
• „‘Š ≠¬±o±Œ„’ ≤«∏¤±2½«∏²oŒ˜ ≥«¨ ±ªo‹ „‘Š ‹¤±2°¬±ª
k≥¦«²²¯ ²© °«¤µ°¤¦¼ o≥ ¦¨²±§ ¬¯¬·¤µ¼  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o≥«¤±ª«¤¬usswvv o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ √¨¤¯∏¤·¨ ·«¨ ³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ©¨©¨ ¦·²© ·¨·µ¤³¯²¬§ Ισατισ ινδιγοτιχα ƒ²µ·qq
Μετηοδσ:≤²°³¤µ¬±ª·«¨ ¶¨ ¤¦·¬²±¶²©·¨·µ¤³¯²¬§ Ι . ινδιγοτιχα º¬·«·«²¶¨ ²©·«¨ §¬³¯²¬§³¤µ¨±·qΡεσυλτσ:׫¨ ¶¨ ¤¦2
·¬²±¶²©·¨·µ¤³¯²¬§ Ι . ινδιγοτιχα º µ¨¨ ²¥√¬²∏¶¯¼¶·µ²±ª¨µ·«¤±·«²¶¨ ²©·«¨ §¬³¯²¬§³¤µ¨±·q׫¨ ³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ©¨2
©¨ ¦·²©¯¨ ¤√ ¶¨º¤¶ªµ¨¤·¨µ·«¤±·«¤·²©µ²²·¶º¬·«¬§¨ ±·¬¦¤¯ ³¯²¬§¼ qΧονχλυσιον :× ·¨µ¤³¯²¬§ Ι . ινδιγοτιχᬶ¤±¨ º
¬¯±¨ ²© ¥¨··¨µ ∏´¤¯¬·¼ o§¨¶¨µ√¬±ª·² ¥¨ ¬¨³¯²¬·¨§¤±§∏·¬¯¬½¨ §²± ¤ ¤¯µª¨ ¶¦¤¯¨q
[ Κεψ ωορδσ] Ισατισινδιγοτιχα ~·¨·µ¤³¯²¬§~¤±·¬¨±§²·²¬¬¦¤¦·¬²±~¤±·¬√¬µ¤¯ ¤¦·¬²±
≈责任编辑 毛华训 
气相色谱2模糊聚类分析法用于红曲基原菌的鉴别
邢旺兴t o宓鹤鸣t o陈 斌t o陈士景u o贺 祥t o吴玉田t
kt q第二军医大学 药学院 o上海 usswvv ~ u q中国人民解放军第 ttz医院 o浙江 杭州 vtsstvl
≈摘要  目的 }建立中药红曲基原菌中挥发性成分的气相色谱分析法 ∀方法 }采用毛细管气相色谱法分析橙
色红曲霉等 z种红曲霉的挥发性酸和非挥发性酸 ~进样口温度 u{s ε o检测器温度 u{s ε o程序升温条件 }tvs ε ox
°¬±ψ ts ε #°¬±p t ψ uss ε ots °¬± oƒŒ⁄检测 ∀结果 }不同种红曲霉挥发性成分 !非挥发性成分和含量均存在显著
差异 o根据红曲霉挥发性成分或非挥发性成分指纹图谱的主要峰及其相对含量 o可以有效地鉴别红曲霉属真菌 ∀
结论 }毛细管气相色谱法模糊聚类分析对鉴别红曲霉属真菌具有一定的实用价值 ∀
≈关键词  红曲 ~红曲霉菌 ~气相色谱法 ~鉴别
≈中图分类号  • u{u qzts qv ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsy2svu|2sy
红曲是一种食疗兼备的传统中药 o具有活血化
瘀 !健脾消食等功效 ∀近年来的研究发现 o红曲同时
具有降脂 !降压 !降糖和抑制肿瘤生长的作用≈t  ∀
然而 o由于种种原因 o红曲基原真菌的命名在分类学
上尚有争议 o至今国际上没有统一的标准≈u  ∀作为
蛋白质或碳水化合物代谢终端产物而形成的短链脂
肪酸在微生物分类中具有特别重要的意义≈v  ~因
此 o在确定这类微生物在分类学上的位置时所产生
的困难 o可借助气相色谱法kŠ≤l分析脂肪酸的组成
≈收稿日期  t|||2s{2sw
≈基金项目  中国人民解放军 t||x重点课题k|y22sx|l ~国家
中医药管理局重点课题k|z22s|zl
来解决≈w  ∀也已成功地利用 Š≤ 法来鉴别挥发油类
生药的品种≈x ∗ {  ∀据报道 o红曲霉菌的发酵产物中
含有硬脂酸 !柠檬酸 !琥珀酸 !乳酸 !草酸 !蚁酸 !醋
酸 !杂醇油 !丙酮等 o红曲中富含的多不饱和脂肪酸
与传统记载的红曲活血化瘀 !健脾消食的功效相一
致 o这也可以部分说明红曲的降血作用≈|  ~但未见
用于红曲霉属的分类鉴定研究 ∀我们用 Š≤ 法测定
了红曲霉发酵产物中的挥发性成分 o并结合形态学 !
生物化学等结果 o评价 Š≤ 法在鉴别红曲霉属真菌
中的价值 ∀
1 材料与方法
111 菌株 见表 t ∀
#|uv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o‘²qy
∏±¨ ousss