全 文 ：表 1 UFLC 和 HPLC 测定羟基茜草素和大叶茜草素
Table 1 Determination of purpurin and rubimaillin in samples using UFLC and HPLC
序号 来 源 产 地 羟基茜草素/ ( mg g- 1 )
U FLC H PLC
大叶茜草素/ ( mg g- 1 )
U FLC H PLC
1 自采 陕西渭河 2 04 2 07 3 12 3 14
2 浙江中医药大学 陕西渭南 1 06 1 04 7 43 7 35
3 北京志新堂 陕西陇南 1 04 1 14 4 60 4 61
4 自采 山东烟台 1 68 1 70 7 94 7 91
5 北京老百姓大药房 山东聊城 2 88 2 84 4 67 4 70
6 自采 河南栾川 1 94 2 01 6 14 6 18
7 浙江中医药大学 河南信阳 1 53 1 53 5 14 5 06
8 北京航天中心医院 安徽合肥 1 12 0 94 4 77 4 82
9 浙江中医药大学 河北祁州 1 36 1 44 4 75 4 81
10 联康药店 河北保定 1 34 1 37 6 01 6 08
11 新街口药店 河北沧州 0 91 0 98 5 02 4 97
12 北京同仁堂远大路店 山西运城 1 18 1 24 2 42 2 40
13 新概念大药房 江西九江 0 97 0 84 3 96 3 90
14 中日友好医院 湖北随州 2 88 2 98 2 36 2 41
15 知春堂药店 北京 3 14 3 12 2 25 2 27
法精密度高、重现性好、快捷简便,适于茜草中羟基
茜草素和大叶茜草素的分析, 是一种高效、可行的质
量评价技术。
3 2 UFLC 色谱柱采用的填料粒径为 2 2 m, 色
谱柱内径为 3 0 mm, 色谱分析中极性小的成分不
容易被洗脱,如产生堆积会严重影响到色谱柱的使
用寿命。SIL- 20AC 自动进样器采用的管路内径
仅 0 1 mm, 易被堵塞,因此该方法对供试品溶液的
制备有特殊要求。本实验在供试品溶液制备中采用
了固相萃取小柱净化的方法制备供试品溶液。
3 3 采用 U FLC 与 HPLC 测定 15 份同样的茜草
样品中两种成分的量,结果表明,在测定结果差异不
大的前提下, U FLC 法可显著缩短分析时间, 羟基茜
草素和大叶茜草素的分析时间由 HPLC 法的 7 2、
25 3 min 缩短为 1 2、10 5 min。另因 UFLC 法使
用的色谱柱长度短, 平衡、冲洗色谱柱的时间也显著
缩短,减少了溶剂消耗。
3 4 U FLC 作为一种的新型液相色谱技术, 精密
度、稳定性和重现性都符合中药材质量控制和化学
分析要求。其分析效率高,在中药的快速检测方面
具有良好的应用前景。
参考文献:
[ 1] 王 军, 权勤波, 宋建建, 等 U FLC 同时测定复方氨酚烷
胺片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量 [ J] 中国药师, 2009,
12( 12) : 17751777
[ 2] Nikolin B, Imamovic B, M edanhodzicVuk S, et al . High
performance liquid chromatograph y in pharmaceut ical an aly
ses [ J ] B osn J B asic Med Sc i , 2004, 4( 2) : 59
[ 3] Kong W J, Zhao Y L, Xiao X H , et a l . Quan titat ive an d
ch emical f ingerprint analysis for qualit y cont rol of Rhiz oma
Cop tidi s Chinensis b ased on U PLCPAD combined with che
mometrics methods [ J] P hytomedicine, 2009, 16: 950959
[ 4] Min J Z, Shim izu Y, T oyo oka T , et al . Sim ultan eous deter
minat ion of 11 designated hallu cinogenic phenethylamin es b y
ult raf ast l iqu id chromatography w ith f lu or escence detection
[ J] J Ch romatogr B , 2008, 873: 187194
生干漆及煅干漆的生药学研究
赵 猛1, 2 , 魏朔南1 ,胡正海1 *
收稿日期: 20100427
基金项目:国家自然科学基金项目 ( 30870136) ,西北大学研究生创新基金
作者简介:赵 猛( 1980 ! ) ,男,讲师,在读博士,研究方向为结构植物学和资源植物学。
* 通讯作者 胡正海,教授,博士生导师。Tel: ( 029) 88302684。
( 1 西北大学生命科学学院 ,陕西 西安 710069; 2 山西师范大学,山西 临汾 041004)
摘 要:目的 对生干漆和煅干漆进行生药学研究。方法 采用生药性状描述、粉末特征鉴定、理化鉴别等方法,
对生干漆与煅干漆的主要性状进行了比较。结果 生干漆及煅干漆在生药性状、粉末特征及化学成分上均有一定
的差异。结论 可为生干漆及煅干漆的进一步开发利用提供理论依据。
关键词:生干漆; 煅干漆; 生药学
中图分类号: R286 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2010) 12 2089 04
2089中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月
干漆为漆树科 ( Anacardiaceae ) 植物漆树
Tox icodendr on v er nicif luum ( Stokes) F. A. Bar
kley 分泌的生漆液经干燥加工而成; 干漆又名漆
渣、漆底、漆脚、续命筒、黑漆, 我国历版药典均有收
录;有破瘀血、消积、杀虫等功效, 主要用于治疗闭
经、淤血、虫积腹痛等病症 [ 1]。临床所用煅干漆由生
干漆经煅制而成,目前对生漆的成分已有较多研究,
其主要成分为漆酚、漆酶、漆多糖和水分 [ 23]。此外,
生漆中还含有油分、甘露糖醇、葡萄糖、微量的有机
酸、烷烃、二黄烷酮以及钙、锰、镁、铝、钾、钠、硅等元
素,还发现有微量的 , 不饱和六元环内酯等挥发
性致敏物组分[ 4] 。但有关生干漆及煅干漆的研究较
少,药材性状及化学组分尚不明确。本实验对生干
漆及煅干漆进行生药学研究, 以期为该药品的生药
学鉴定提供基础资料。
1 实验材料与仪器
1 1 实验材料:实验所用生干漆、煅干漆购自西安
市藻露堂药店, 其原料由栽培于陕西省秦岭地区的
漆树采割而来; 生干漆及煅干漆材料均经西北大学
生命科学学院胡正海教授鉴定。
硫酸铜、浓硫酸、酒石酸钾钠、氢氧化钠、醋酸
铅、无水乙醇、对苯二胺、三氯化铁、丙酮、乙腈、氯
仿、正己烷等均为分析纯,高效液相色谱仪检测所用
甲醇、乙腈等试剂为色谱纯。
1 2 实验仪器: Olympus ! SZX7 体视显微镜; Lei
ca ! DC300F 显微镜; 岛津 LC ! 10ATvp 高效液相
色谱仪, SPD ! 10Avp 检测器, Class ! VP 工作站。
2 试验方法
2 1 药材性状及粉末特征:观察生干漆及煅干漆外
部性状后研磨成粉末,采用粉末制片法制片, 在体视
显微镜及透视显微镜下观察, 分别描述其粉末的显
微特征并拍照。
2 2 化学成分检验
2 2 1 漆酚的定性检测:称取研磨好的生干漆及煅
干漆粉末各 1 0 g,分别置于具塞锥形瓶中,添加 20
mL 无水乙醇, 室温下静置提取 24 h 后滤过, 取滤
液 2 0 mL,滴加醋酸铅溶液及三氯化铁溶液, 观察
其颜色变化,以无水乙醇为对照判断滤液中是否含
有漆酚类物质。
2 2 2 漆酶的定性检测:称取研磨好的生干漆及煅
干粉末各 1 0 g , 分别置于具塞锥形瓶中, 添加 20
mL 蒸馏水,室温下静置 24 h; 滤过,弃去沉淀,取滤
液 2 0 mL, 滴加联苯二胺溶液, 静置 30 m in, 观察
其颜色变化,以蒸馏水为对照判断滤液中是否含有
漆酶类物质。
2 2 3 漆多糖的定性检测:称取研磨好的生干漆及
煅干漆粉末各 1 0 g,分别置于具塞锥形瓶中,添加
20 mL 蒸馏水, 室温下静置 24 h; 滤过, 弃去沉淀,
取滤液 2 0 mL,滴加菲林试剂, 观察其颜色变化,以
蒸馏水为对照判断滤液中是否含有多糖类物质。
2 3 漆酚 HPLC 检测
2 3 1 漆酚提取分离: 采用 Elsohly [ 5]方法对生干
漆及煅干漆进行漆酚类物质的提取, 精确称取生干
漆及煅干漆 5 0 g ,分别用 100 mL 丙酮浸提 24 h,
提取液滤过,减压浓缩,浓缩后的浸膏用少量丙酮洗
下,待丙酮挥干后用蒸馏水氯仿 ( 30 ∀ 60) 萃取 2
次,每次萃取 5 h;萃取完成后弃去水相, 收集氯仿
部分减压浓缩,浸膏用少量正己烷洗下,待正己烷挥
干后用正己烷乙腈 ( 40 ∀ 60) 萃取 2次, 每次萃取
5 h; 收集乙腈部分减压浓缩,挥干后即为漆树漆酚。
将上述漆酚用甲醇溶解,定容至 25 mL,取 0 01 mL
溶液用甲醇稀释 10 倍, 经 0 45 m 有机相滤膜滤
过,即为供试样品溶液。
2 3 2 漆酚 HPLC 检测: 色谱柱为 Diamonsil C18
( 150 mm # 4. 6 mm, 5 m) ; 体积流量 0 5 mL/
m in;检测波长 254 nm ;柱温 35 ∃ ;流动相为乙腈
水 ( 78∀22) ;分析时间 50 min; 进样量 10 L。
3 实验结果
3 1 药材性状及粉末性状
3 1 1 药材性状: 生干漆外观为不规则团块状,由
黑色与黑褐色薄膜堆叠、板结而成, 多数团块呈黑
色,少量呈黑褐色,表面具多数孔隙; 质地坚硬, 不易
折断、磨碎, 断面黑色或黑褐色, 内层棕色并有空腔
存在,少数质地稍柔韧, 受外力作用断裂时有长约
0 5~ 1 0 cm 的黑色漆丝粘连。具有强烈漆臭, 遇
火易燃烧,燃烧时有大量黑色浓烟产生,燃烧后残存
有少量黑色粉末。
煅干漆药材外观大小不一, 多数呈 0 5 cm3左
右大小不规则团块状, 部分呈粉末状,均为黑色, 质
量较轻;大的团块表层具有金属光泽,表面有多数细
微孔洞;质地坚硬,断面整齐,受外力作用断裂时无
漆丝粘连。漆臭气味轻微, 遇火不易发生燃烧。
3 1 2 粉末性状:生干漆粉末在显微镜下可以观察
到呈无定形块状, 大小不一, 多数有光泽; 以半透明
块状物为主, 另有少量不透明块状物 (图 1A)。半
透明块状物多呈棕黄色、棕褐色, 似晶体, 而不透明
块状物均呈黑色 (图 1B)。结合生干漆生药外观推
测其粉末中黑色块状物应以生干漆未粉碎前表层物
2090 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月
质为主, 半透明块状物应为生干漆团块内部棕色
物质。
煅干漆粉末在显微镜下基本呈无定形黑色块状
(图 1C) , 断面整齐, 纹理清晰, 表层有光泽, 不透
明;另外,煅干漆中也含有极少量棕色半透明块状
物,但其颜色比生干漆中透明物质颜色深 (图1D)。
图 1 生干漆粉末 ( A)、生干漆半透明粉末 (B)、煅干漆粉末 (C) 和煅干漆中少量半透明粉末 (D) 的显微性状
Fig. 1 Microscopic characters of dried lacquer powder (A) , dried lacquer translucent powder (B) ,
calcined dry lacquer powder ( C) , and calcined dry lacquer translucent powder (D)
3 2 化学成分检测
3 2 1 漆酚检测结果:生干漆乙醇提取液经滤过后
液体呈透明的红棕色, 取滤液 2 0 mL,滴加三氯化
铁溶液后立即变为深绿色, 滴加醋酸铅溶液后有灰
色沉淀生成,呈现出典型的酚类物质显色反应。表
明生干漆提取液含有漆酚类物质。煅干漆乙醇提取
液经过滤后呈透明的深棕色, 溶液颜色较生干漆提
取液加深,提取液分别加入三氯化铁和醋酸铅溶液
后有轻微漆酚反应发生,反应强度较弱。对照组无
漆酚反应。
3 2 2 漆酶检测结果:生干漆水提液经滤过后液体
澄清、透明,呈浅粉色,分别取该提取液 2 0 mL 添
加联苯二胺溶液静置 20 min 后,溶液呈深绿色, 对
照组溶液颜色不发生变化; 说明生干漆水提溶液中
存在能与联苯二胺反应的酶类物质;因生漆中所含
酶类主要为漆酶,因此说明生干漆水提液中有漆酶
类物质存在。煅干漆水提液经滤过后液体澄清透
明,近无色,该提取液 2 0 mL 添加联苯二胺溶液静
置 40 min 后, 溶液呈浅绿色, 对照组颜色不发生变
化;同样说明煅干漆中也存在有漆酶类物质, 但其量
要低于生干漆。
3 2 3 漆多糖检测结果: 分别取生干漆水提液 2 0
mL 滴加菲林试剂后有少量砖红色沉淀产生, 而煅
干漆水提液滴加菲林试剂未发现有砖红色沉淀产
生;对照组溶液无变化,证明生干漆中含有少量可溶
性还原糖,而煅干漆中不含有此类物质。
3 3 漆酚 HPLC 检测: 生干漆及煅干漆提取溶液
经 H PLC 检测后发现, 生干漆提取物所含漆酚类物
质主要有两种 (图 2A)。生干漆经处理制成煅干漆
后,其中所含漆酚类物质的量及种类均发生较大变
化 (图 2B) ,煅干漆中这两种物质的量很少, 说明生
干漆中的漆酚类物质在高温煅制的过程中发生了较
大程度的分解。
图 2 生干漆 ( A) 与煅干漆提取液 (B) HPLC 色谱图
Fig. 2 HPLC Chromatograms of dry lacquer ( A)
and calcined dry lacquer extracts ( B)
4 讨论
干漆一般分为生干漆和煅干漆两种, 生干漆为
漆树分泌物表面干燥部分或盛放生漆的缸底之漆渣
(漆脚) ,取出晒干,捣碎生用;若将生干漆炒至烟尽
或密封铁锅内煅透后用, 此为煅干漆。根据实验观
察,生干漆与煅干漆在生药性状、显微特征以及理化
性质上均有较大差异。李映丽等 [ 6]曾在 20世纪 80
年代对干漆的生药学进行过研究, 但当时的研究未
进行生干漆及煅干漆中漆酶及漆多糖的检测,同时
仅采用显色反应来检测漆酚并得出煅干漆无漆酚的
结果。本实验针对上述问题对药材性状、显微特征、
理化成分以及漆酚量进行了研究, 结果表明煅干漆
中也有少量漆酚类物质存在,而且 H PLC 的检测结
果也证明了这一观点。并发现生干漆和煅干漆中也
能检测出漆酶反应的存在,而多糖仅在生干漆中能
检出,煅干漆中未检出。
干漆的最主要成分为漆酚[ 7] ,但漆酚有一定的
毒性并能引起人体过敏[ 8] ,临床使用须经煅制以减
少其中的漆酚来减轻生药毒性[ 9]。HPLC 的检测
2091中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月
结果表明煅干漆中漆酚的量低于生干漆, 降低了药
材的毒性,推测其可能的原因是漆酚中的酚羟基在
炮制过程中遇高温发生乙氧化反应而发生变化, 说
明经炮制后煅干漆毒性已大为减弱,适宜临床使用。
以干漆组方的重要制剂平消片 (胶囊) 经长期临床
实践,在抗肿瘤方面有良好的疗效 [ 1011] , 而以干漆
组方的传统中药制剂大黄蟅虫丸则具有祛瘀生新的
功效[ 12] ,其中干漆的活性成分及其药理作用尚目前
不明确,需进一步研究。
参考文献:
[ 1] 中国药典 [ S] 一部2010
[ 2] 李 林, 魏朔南 生漆漆酚类化合物的 HPLCESIMS 分析
[ J ] 中草药, 2008, 39( 12) : 17861787
[ 3] 赵一庆, 薄颖生 生漆及漆树文献综述 [ J] 陕西林业科技,
2003 ( 1) : 5562
[ 4] 杜矛民 中国生漆化学研究与应用开发 [ J] 涂料技术,
1993 ( 1) : 16
[ 5] Els ohly M A, Adawadkar P D, Bak er J K, et al . Separation
an d char acterization of Poison Ivy and Pois on Oak U rushiol
Congen ers [ J] J Nat Pr od , 1982, 45( 5) : 532538
[ 6] 李映丽, 吕居娴, 牛晓峰 干漆的生药学研究 [ J] 中国生
漆, 1988, 7( 2) : 14
[ 7] 金莲花 中药干漆的药理作用及临床应用 [ J] 现代医药卫
生, 2007, 23( 16) : 24672468
[ 8] 郭晓庄 有毒中药大词典 [ M ] 天津:天津科技翻译出版社,
1992
[ 9] 范治忠 生干漆的炮制与药用 [ J] 中国生漆, 1990, 9( 3 ) :
4245
[ 10] 方建龙, 赵安兰, 朱智斌, 等 平消胶囊治疗晚期恶性肿瘤
278例临床观察 [ J] 现代肿瘤医学, 2003, 11( 4) : 309310
[ 11] 费 雁, 张丽娟 平消片合并化疗治疗晚期恶性肿瘤 132 例
疗效观察 [ J ] 现代肿瘤医学, 2006, 14( 4) : 493494
[ 12] 梅全喜, 刘铁球 大黄蟅虫丸的临床新用途 [ J] 中药材,
2001, 24( 10) : 779780
金沙藤与海金沙化学成分的比较
严 海,王力生, 周艳林,吕高荣,邹节明*
收稿日期: 20100510
基金项目:广西优势中草药产业化资助项目 (桂科产 0444021)
作者简介:严 海( 1978 ! ) ,男,工程师,广西全州人,从事中药质量控制研究。T el: ( 0773) 5843106 Email: yan hai1978@ sina. com
* 通讯作者 邹节明,教授,博士生导师。Tel: ( 0773) 5842588 Emai l: z jm@ sanjin. com . cn
(桂林三金药业股份有限公司, 广西 桂林 541004)
摘 要:目的 比较金沙藤与海金沙药材主要化学成分的异同点。方法 分别用薄层色谱法、高效液相色谱法、气
相色谱法比较金沙藤与海金沙化学成分在色谱图中的区别。结果 金沙藤与海金沙在不同的色谱中存在大的差
异。结论 金沙藤中的黄酮、有机酸、萜类等次生代谢产物量显著高于海金沙, 作为药用有更好的物质基础。
关键词:金沙藤; 海金沙; 薄层色谱法; 高效液相色谱法; 气相色谱法; 化学成分
中图分类号: R286 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2010) 12 2092 03
金沙藤为海金沙科植物海金沙 L ygodium
j aponicum ( Thunb. ) Sw .、小叶海金沙 L . m icr o
p hy l lum ( Cav. ) R. Br. 或曲轴海金沙 L . f l exuo
sum ( L . ) Sw. 的干燥地上部分, 收载于%广西中材
标准&中, 具有清热解毒, 利水通淋的功能 [ 1]。海金
沙与其中一种金沙藤的植物来源相同, 为海金沙科
植物海金沙 L . j ap onicum 的干燥成熟孢子, 具有
清利湿热,通淋止痛的功能[ 23]。两味药材的功能相
近,临床均可用于治疗热淋、砂淋、血淋、膏淋、尿道
涩痛等。但金沙藤的药用部位为地上部分, 而海金
沙的药用部位为孢子,差距甚远,二者相似的功能和
主治是否没有科学依据,尚未见研究报道。本实验
从化学成分的角度, 选用银杏醇、咖啡酸、绿原酸、芦
丁、异槲皮苷、紫云英苷等具有抗炎、抗菌、抗氧化等
药理作用的化学成分为指标[ 46] , 综合运用多种色谱
方法对药效的物质基础进行比较, 为二者的临床准
确用药提供依据。
1 实验材料、仪器与试剂
1 1 材料: 金沙藤与海金沙均购自桂林中药材站,
经桂林三金药业股份有限公司钟小清高级工程师鉴
定, 金 沙 藤 为 海 金 沙 Lyg od ium j aponicum
( T hunb. ) Sw . 的干燥地上部分, 海金沙为海金沙
科植物海金沙 L ygodium j apomicum ( T hunb. )
Sw . in 干燥成熟孢子, 药材留样存放于桂林三金药
业股份有限公司药物研究所标本室。
1 2 仪器: Waters 2695 高效液相色谱仪, DAD
996检测器, Empow er 化学工作站; Agilent 6890 N
气相色谱仪, HP 6890 自动进样器, SGD ! 300
( 500) 氮、氢、空气发生器, Agilent 6890 化学工
作站。
2092 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月