全 文 ：表 4 　有效供试药液与常用止咳药效果比较 ( x ±s , n = 10)
Table 4 　Comparision between effective extract solution
and common cough remedy ( x ±s , n = 10)
组 　别 剂量/ (g ·kg - 1 ) 潜伏期/ s 3 mim 内咳嗽次数
对照 - 50120 ± 9107 25191 ±7157
枇杷花 95 %乙醇提取物 5 70118 ± 7170 3 3 12103 ±4136 3 3
215 69107 ± 8109 3 3 12100 ±3170 3 3
枇杷花 50 %乙醇提取物 5 68123 ± 8172 3 3 14177 ±5163 3 3
枇杷花水提取物 5 67122 ± 7136 3 3 12179 ±5156 3 3
枇杷花混合提取物 5 71127 ± 7196 3 3 11107 ±5118 3 3
215 70101 ± 8103 3 3 11155 ±4100 3 3
复方磷酸可待因口服溶液 512 mL ·kg - 1 68180 ± 8172 3 3 12110 ±4123 3 3
京都念慈菴蜜炼川贝枇杷膏 518 64177 ± 6127 3 13115 ±4169 3 3
蛇胆川贝枇杷膏 816 67171 ± 9171 3 3 14179 ±6161 3 3
枇杷止咳颗粒 112 62154 ±14196 14169 ±6133 3 3
急支糖浆 1117 mL ·kg - 165156 ± 9149 3 12122 ±4182 3 3
组在延长小鼠咳嗽潜伏期及减少小鼠 3 min 内咳嗽
次数方面均与对照组有显著性差异 ( P < 0101) ,且
与其他 5 种常用止咳药效果相当。
3 　讨论
　　文献报道[11 ] ,氨水引起的小鼠咳嗽模型及枸橼
酸引起的咳嗽模型均是由于吸入刺激性化学药物的
气雾后 ,刺激呼吸道感受器 ,引起支气管平滑肌收
缩 ,兴奋传入神经和传出神经 ,从而引发咳嗽。本实
验结果表明 3 次小鼠氨水引咳实验和 1 次枸橼酸豚
鼠引咳实验所示枇杷花提取物在延长咳嗽潜伏期及
减少咳嗽次数上结果趋于一致 ,即两种模型所示枇
杷花不同溶剂提取物止咳规律基本相同。
本实验通过小鼠氨水引咳实验和枸橼酸豚鼠引
咳实验得知枇杷花 95 % 乙醇提取物和混合提取物
具有明显止咳作用 ,50 % 乙醇提取物和水提取物具
有一定止咳作用 ,75 % 乙醇提取物无明显止咳作
用。枇杷花 95 % 乙醇提取物中三萜化合物及 50 %
乙醇提取物中总黄酮的量均明显高于其他各组。因
此 ,枇杷花提取物中三萜化合物可能起明显止咳作
用 ,总黄酮具有一定作用。由于混合提取物具有明
显止咳作用 ,其中三萜化合物的量少于 95 % 乙醇
提取物 ,且水提取物具有一定止咳作用 ,其中总黄酮
量少于 50 % 乙醇提取物 ,由此推断 ,除以上两类物
质外可能还有其他物质起止咳作用 ,这有待于进一
步研究。
参考文献 :
[ 1 ] 　张　玉 , 王建清1 枇杷的营养及功能成分研究进展 [J ]1 食
品科学 , 2005 , 26 (9) : 60226041
[ 2 ] 　邓晶晶 , 卢先明 , 蒋桂华 , 等1 枇杷花镇咳祛痰和抗炎的药
效学研究 [J ]1 时珍国医国药 , 2006 , 17 (12) : 2469224701
[ 3 ] 　成　丽 , 刘　燕 , 陈凌亚1 枇杷花三萜皂苷成分的研究 [J ]1
华西医科大学学报 , 2001 , 32 (2) : 28322851
[ 4 ] 　鞠建华 , 周　亮 , 林　耕 , 等1 枇杷叶中三萜酸类成分及其
抗炎、镇咳活性研究 [J ]1 中国药学杂志 , 2003 , 38 ( 10) :
75227571
[ 5 ] 　王立为 , 刘新民 , 余世春 , 等1 枇杷叶抗炎和止咳作用研究
[J ]1 中草药 , 2004 , 35 (2) : 17421761
[ 6 ] 　李时珍1 本草纲目 [ M ]1 , 北京 :宗教文化出版社 , 20031
[ 7 ] 　周　蓉 , 邹怀波 , 胡运兰1 虎刺中总黄酮的含量测定 [J ]1 安
徽农业科学 , 2007 , 3 (30) : 9556295591
[ 8 ] 　张晓喻 , 黄春萍 , 张　宏 , 等1 RP2HPLC 测定四川不同产地
枇杷花中的齐墩果酸和熊果酸的含量 [J ]1 药物分析杂志 ,
2007 , 27 (1) : 12921311
[ 9 ] 　陈　奇1 中药药理研究方法学 [ M ]1 北京 :人民卫生出版社 ,
19931
[ 10 ] 　徐叔云 , 卞如濂 , 陈　修1 药理实验方法学 [ M]1 第 3 版 1
北京 :人民卫生出版社 , 20021
[ 11 ] 　赵　晖1 地茶咳喘露治疗慢性喘息性支气管炎的实验研究
[J ]1 湖北民族学院学报 (医学版) , 2002 , 19 (2) : 312331
海洋真菌 Halorosellinia oceanicum 新化合物 JL2 对豚鼠离体心房肌的作用
王正濂1 ,许实波1 ,冯 　星2 3 ,姜广策1 ,林永成1
(11 中山大学化学与化学工程学院 ,广东 广州 　510275 ; 21 湖南师范大学医学院 ,湖南 长沙 　410006)
摘 　要 :目的 　以豚鼠离体心房肌为材料 ,研究海洋真菌 H alorosel l inia oceanicum 中分离得到的新化合物 JL2
(hypoxylin A) 对离体心房肌的作用。方法 　采用豚鼠离体心房肌 ,测定给药前后心房的心率、心肌收缩力、左心
房静息后增强作用 ( PRP) 及正性阶梯现象。结果 　JL2 (终浓度为 115 ×10 - 5 、115 ×10 - 6 mol/ L) 能明显降低豚
鼠离体右心房肌的收缩力 ,同时减慢其心率 ;显著抑制左心房肌的 PRP 作用 ;显著抑制豚鼠离体左心房肌的正性
阶梯作用。结论 　JL2 对豚鼠离体心房肌有负性肌力和负性频率作用。
关键词 : H alorosel l inia oceanicum ; hypoxylin A (JL2) ; 心房肌 ; 负性肌力 ; 正性阶梯
中图分类号 :R28612 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721109204
·9011·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008209211　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (20072058) ; 广东省自然科学重点基金资助项目 (021732) ; 国家科技攻关“863”资助项目
(2003AA624010)
作者简介 :王正濂 (1965 —) ,男 ,湖南道县人 ,博士 ,现于广州斯威森科技有限公司工作。3 通讯作者　冯　星　Tel : (0731) 8652216 　Fax : (0731) 8912417 　E2mail : fengxing01 @hot mail . com
　　海洋生物具有多种活性物质 ,近年来 ,开发海洋
药物、利用海洋生物资源已经成为研究热点之一。
已经发现有多种生理活性的化合物 ,如三丙酮胺、海
蛾提取物等。但是作为传统中药的海洋生物存在着
采集困难、分离复杂、收率低等问题。近年来 ,本课
题组开展了海洋微生物代谢产物的化学和药学研
究[1 ] 。本研究所采用的化合物 JL2 是从我国海南
岛海域的海洋真菌炭角菌科 ( Xylariaceae) 卤座坚
壳属海洋卤座坚壳 H alorosel l i ni a oceanicum 进行
人工发酵培养得到的 ,其中 JL1 ( hypoxylin B) 和
JL2 (hypoxylin A) 两个新结构化合物 ,为同分异构
体 ,其结构由苯乙胺与不规则取代二萜构成。分子
式 :C30 H37 NO6 ;相对分子质量 : 5071 62 ;熔点 :JL1 ,
274 ℃ (分解) ;JL2 ,280 ℃ (分解) 。结构式见图 1。
此结构为新化合物。通过药理作用初筛 ,发现其有
广泛的生理活性 ,本研究主要观察 JL2 对豚鼠离体
心房肌的影响。
图 1 　化合物 JL2 的结构式
Fig. 1 　Structure of compound JL2
1 　材料
111 　动物 :封闭群豚鼠 ,广州番禺威龙养殖场 ,合格
证号 :第 26298043 号。
112 　药品和试剂 :JL2 由中山大学化学与化学工程学
院林永成教授提供 ;维拉帕米 (Verapamil) ,江苏连云
港制药厂 ,批号 961104 ;其余试剂均为国产分析纯。
113 　仪器 :L MS —2B 二道生理记录仪 ,四川成都
仪器厂生产 ;CS501 型超级恒温水浴 ,南通科学仪器
厂生产。
2 　方法与结果
211 　统计学分析 :结果用 x ±s 表示 ,显著性检验
用 St udent s2t 检验。
212 　对离体豚鼠右心房肌的作用 :选取体质量
400～450 g 的白色封闭群豚鼠 30 只 ,随机分为 5
组 :对照组 ,JL2 高、中、低剂量组和阳性药维拉帕米
组。每组 6 只 ,雌雄各半 ,击头致昏 ,剖取心脏置于
预冷 4 ℃通氧的改良 Tyrode 液[ (mmol/ L) : NaCl
137. 00、KCl 3. 00、MgCl2 1. 07、CaCl2 1. 80、
Na H2 PO4 0. 60、Na HCO3 12. 02、C6 H12 O6 6. 11、
Tris 5. 00 , p H 7. 30 ±0. 05 ] ,剪下左右心房肌 ,置
于 20 mL 改良 Tyrode 液浴槽中 ,通入氧 (95 %
O2 + 5 % CO2 ) ,心房肌两端用蛙心夹夹住 ,一端固定
于浴槽底部 ,一端用小钩钩在二道生理记录仪的换能
器上 (小钩与蛙心夹间用线连接) ,温度 (36 ±0. 5)
℃,静息张力 015 g ,左心房给予 150 % 阈强度的电刺
激 (015 Hz , 1 ms) ,标本平衡 1 h 开始实验[2 ] 。
浴槽中 JL2 的终浓度为 : 115 ×10 - 5 、115 ×
10 - 6 、115 ×10 - 7 mol/ L ; 维拉帕米的终浓度为 :
511 ×10 - 7 mol/ L ;对照组加 012 % DMSO 生理盐
水溶液 ;记录加药后 0、10、20、40、60 min 心肌收缩
力及心率。
结果表明 ,高剂量和中剂量组的 JL2 在给药 20
min 后可以使豚鼠离体右心房肌收缩力明显下降 ,在
给药 40 min 后心率明显下降。而维拉帕米对心房肌
的作用迅速 ,在给药 10 min 后心房肌收缩力显著降
低 ,在给药 20 min 后使心率显著降低 ,结果见表 1。
表 1 　JL2 对豚鼠离体右心房肌收缩力和心率的作用 ( x ±s , n = 6)
Table 1 　Effect of JL2 on contractile force and heart rate in isolated atrium dextrum of guinea pig ( x ±s , n = 6)
组别
C/
(mol ·L - 1)
心肌收缩力/ mg
0 min 10 min 20 min 40 min 60 min
对照 　　- 463133 ±581 15 4661 67 ±66138 466167 ±511 20 4611 67 ±45153 451167 ±471 31
JL2 11 5 ×10 - 5 493133 ±511 47 4161 67 ±75143 313133 ±651 61 3 3 2131 33 ±68141 3 3 133133 ±461 18 3 3
11 5 ×10 - 6 475100 ±551 77 4101 00 ±58199 333133 ±621 82 3 3 2561 67 ±43133 3 3 193133 ±371 74 3 3
11 5 ×10 - 7 483133 ±571 16 4401 00 ±41195 400133 ±491 67 3631 33 ±52179 3 326167 ±581 88 3
维拉帕米 51 1 ×10 - 7 453133 ±451 61 3181 23 ±66101 3 3 233133 ±761 28 3 3 2131 33 ±56141 3 3 81167 ± 31 25 3 3
组别
C/
(mol ·L - 1)
心率/ (次·min - 1)
0 min 10 min 20 min 40 min 60 min
对照 　　- 220 ±21 220 ±21 218 ±21 216 ±24 219 ±27
JL2 11 5 ×10 - 5 217 ±22 210 ±22 205 ±21 196 ±16 3 3 187 ±14 3 3
11 5 ×10 - 6 217 ±22 215 ±20 3 210 ±20 192 ±19 3 3 181 ±26 3 3
11 5 ×10 - 7 222 ±20 218 ±23 210 ±22 201 ±21 190 ±20
维拉帕米 51 1 ×10 - 7 224 ±30 215 ±24 187 ±13 3 3 176 ±15 3 3 165 ±10 3 3
　　　与对照组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01
　　　3 P < 0105 　3 3 P < 0101 vs cont rol group
·0111· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
213 　对豚鼠离体左心房肌静息后增强效应 ( PRP)
的影响 :按 212 方法制备豚鼠左心房肌标本和分组。
电刺激左心房收缩 (波宽 3 ms ,频率 1 Hz ,150 %
域电压) ,平衡 45 min ,停止刺激 30 s ,然后恢复刺
激。此时第 1 个刺激脉冲的第 1 个收缩幅度最大 ,
称为静息后增强效应 ( PRP) , PRP 代表着 Ca2 + 从
心肌细胞 Ca2 + 库的释放情况[3 ] 。经研究其他文献
及结合在实验中碰到的问题 ,对本实验稍加改进 ;同
一标本在平衡 45 min ,停止刺激 30 s ,然后恢复刺
激 ,记录其最大收缩力 ,然后继续刺激 30 min ,加入
受试药后作用 15 min ,停止刺激 30 s ,记录最大收
缩力。计算加药后与加药前最大收缩力的比值 ,以
[ (对照组平均最大收缩力 - 给药组平均最大收缩
力) / 对照组平均最大收缩力 ×100 %]计算抑制率 ,
进行组间统计处理。
结果见表 2 ,JL2 (终浓度为 115 ×10 - 5 、115 ×
10 - 6 mol/ L) 作用 15 min 后使 PRP 显著降低 ,JL2
显著抑制左心房的静息后增强作用。
214 　对豚鼠离体左心房正性阶梯现象的影响 :按
212 方法制备豚鼠左心房肌标本和分组。当逐渐增
加刺激豚鼠左心房的刺激频率时 ,心房肌的收缩力
表 2 　JL2 对豚鼠离体左心房肌静息后增强作用的影响
( x ±s , n = 6)
Table 2 　Effect of JL2 on post2rest potentiation
of contraction in isolated atrium sinistrum
of guinea pig ( x ±s , n = 6)
组别 C/ (mol ·L - 1 ) 加药后与加药前最大收缩率比值/ % 抑制率/ %
对照 - 99135 ± 3147 -
JL2 115 ×10 - 5 16101 ± 3159 3 3 83188
115 ×10 - 6 33189 ± 8121 3 3 65189
115 ×10 - 7 86130 ±14182 13114
维拉帕米 511 ×10 - 7 29138 ± 4137 3 3 70143
　　与对照组比较 : 3 3 P < 01 01
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group
会逐渐增加 ,这种现象称为正性阶梯现象[4～6 ] 。先
用波宽 1 ms ,频率 015 Hz ,115 倍阈强度的刺激 ,然
后固定其他参数 ,逐渐增加刺激频率为 1～4 Hz ,记
录收缩力的变化 ,整个过程在 3 min 内完成 ,以 015
Hz 刺激引起的收缩力为 100 % ,给予相应药物作用
后 ,重复上述实验。结果见表 3 和图 2。JL2 显著抑
制豚鼠离体左心房肌正性阶梯现象 ,具明显的剂量依
赖关系。终浓度为 115 ×10 - 5 mol/ L 的 JL2 可以使
正阶梯变为负阶梯 ,与维拉帕米类似。结果提示 ,JL2
可能对细胞外钙的内流有很强的抑制作用。
表 3 　JL2 对豚鼠离体左心房正性阶梯现象的影响 ( x ±s , n = 6)
Table 3 　Effect of JL2 on positive staircase phenomena in isolated atrium sinistrum of guinea pig ( x ±s , n = 6)
组别
C/
(mol ·L - 1)
收缩力/ %
0. 5 Hz 1 Hz 2 Hz 3 Hz 4 Hz
对照 　　- 100 107165 ±171 92 1951 98 ±32158 314135 ±681 16 3831 34 ± 98151
JL2 11 5 ×10 - 5 100 83124 ± 81 76 3 651 46 ±15104 3 3 48192 ±121 98 3 3 351 05 ± 8162 3 3
11 5 ×10 - 6 100 109165 ± 71 25 1231 70 ±82149 3 3 120188 ±661 41 3 3 961 35 ± 49178 3 3
11 5 ×10 - 7 100 108174 ±311 25 1671 71 ±55107 228185 ±761 52 3 2481 33 ±107173 3 3
维拉帕米 51 1 ×10 - 7 100 62154 ±181 26 3 3 381 94 ±20106 3 3 27133 ±181 26 3 3 161 09 ± 12129 3 3
　　与对照组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 vs cont rol group
图 2 　JL2 对豚鼠离体左心房肌正性阶梯现象的影响
Fig. 2 　Effect of JL2 on positive staircase phenomena
in isolated atrium sinistrum of guinea pig
3 　讨论
　　通过对离体豚鼠心房肌实验结果证实 ,JL2 显
著抑制胞外钙进入细胞内 ,同时还抑制细胞内钙库
中钙的释放。
本研究结果表明 ,JL2 可能为一种新型的长效
钙拮抗剂 ,它是一种不同于维拉帕米的钙拮抗剂 ,其
主要特点是 JL2 在不同的浓度下对细胞膜上的钙
通道的作用不同 ,即低浓度 (115 ×10 - 7 mol/ L ) 时
仅作用于细胞膜上的电压依赖性钙通道 ,在高浓度
(115 ×10 - 5 ～115 ×10 - 6 mol/ L ) 作用于电压依赖
性和受体依赖性两种通道。目前缺乏膜片钳等相关
实验提供的钙离子通道阻断的直接证据 ,JL2 是否
为钙通道阻断剂 ,还需要进行进一步的研究。
·1111·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
参考文献 :
[ 1 ] 　乐长高 , 林永成 , 姜广策 , 等1 J ulella avicenniae 两个代谢产
物结构的测定 [J ]1 华东地质学院学报 , 1998 , 21 (12) : 3402
3951
[ 2 ] 　Levy J V1 Method in Pharmacology [ M ]1 New York : Ap2
pleton2Century2Croft s Educational Divition , 19711
[ 3 ] 　Shaffer J E1 Inot ropic and chronot ropic activity of berberine
on isolated guinea pig at ria [J ]1 J Cardiovasc Pharmcol , 1985 , 7 : 3071[ 4 ] 　Katz A M1 Physiology of t he Heart [ M]1 New York : Ra2ven Press , 19771[ 5 ] 　Fleckenstein A1 Ex perimental Facts and Therapeutic Pros2pects [ M]1 New York : Wiley2Interscience , 19831[ 6 ] 　Pu H L , Wang Z L , Huang Q J , et al . Effect s of biat rac2tylolide on isolated guinea pig myocardium [J ]1 Chin Phar2macol B ull , 2000 , 16 (1) : 602631
加味丹参饮对家兔应激性胃溃疡的影响
刘纳文 ,李志军 3
(天津市第一中心医院 ,天津 　300192)
摘　要 :目的 　研究加味丹参饮对家兔应激性胃溃疡的影响并探讨其作用机制。方法 　选用健康大耳白兔 24 只 ,
随机分为对照组、模型组及给药组 ,每组 8 只。以浸水法复制家兔应激性胃溃疡动物模型 ,分别于应激后 0、1、2、3
h 取血 ,检测血浆中内皮素 ( ET) 、一氧化氮合酶 (NOS) 活性 ,并对胃黏膜病变的情况进行观察。结果 　浸水应激
后家兔血浆 ET 及 NOS 活性均明显升高 ,加味丹参饮可抑制应激导致的 ET 水平及 NOS 活性的升高 ,并可抑制
浸水应激家兔胃液的过量分泌而对胃液的 p H 值无显著影响 ;加味丹参饮能抑制应激所致的胃溃疡的形成 ,其溃
疡抑制率达 49194 %。结论 　加味丹参饮有抗家兔浸水应激性胃溃疡的作用 ,其机制与抑制胃液的过量分泌及抑
制 ET 及 NOS 的异常升高有关 ,而对胃液的 p H 值无影响。
关键词 :加味丹参饮 ; 应激 ; 胃溃疡 ; 内皮素 ; 一氧化氮合酶
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721112204
　　随着社会的发展及各方面竞争压力的增加 ,环
境因素和心理因素作为两大常见应激因素对人体健
康的影响越来越强烈。应激可以引起胃溃疡或出血
性黏膜糜烂 ,被称为应激性溃疡 ,亦称“急性黏膜病
变”,是人和各种动物受创伤后所发生的最具特征的
应激表现。应激性胃溃疡也是临床上的常见病症 ,
多伴见于严重烧伤、重度感染、缺氧、大手术等 ,其临
床表现为大便潜血阳性、甚者呕血、便血 , 更为
严重者可导致胃穿孔 ,以致威胁患者生命 ,死亡率
很高。
丹参饮方出自《时方歌括》,由丹参、檀香、砂仁
3 味药组成 ,具有行气化瘀、止痛的功效 ,在临床上
被广泛用于心腹诸痛的治疗。应激性胃溃疡的中医
病理机制为气血郁滞 ,因此以丹参饮为基础 ,加以具
中和胃酸、保护溃疡面作用的乌贝散 (乌贼骨、浙贝
母)及具活血定痛作用的三七粉 ,而合为加味丹参
饮 ,观察其对家兔应激性胃溃疡的影响并探讨其作
用机制 ,以期为寻找临床治疗应激性胃溃疡的有效
方药提供参考。
1 　材料
111 　实验动物 :健康大耳白兔 24 只 ,均为雄性 ,体
质量 211～215 g ,4～5 月龄 ,单笼饲养 ,由天津中医
药大学动物室提供。
112 　实验用药 :加味丹参饮由丹参 30 g、檀香 5 g、
砂仁 5 g、乌贼骨 30 g、浙贝母 12 g、三七粉 3 g ,常
规水煎后 ,浓缩为 115 g/ mL 的药液 (含生药量为
85105 g/ L) ,以上所用生药由天津市第一中心医院
中药房提供。
113 　仪器与试剂 :高精度数字显示酸度计、721 分
光光度计、γ 计数仪、离心机。一氧化氮合酶
(NOS) 试剂盒 ,南京建成生物工程研究所产品 ;内
皮素 ( ET) 放射免疫分析药盒 ,北京北免东雅生物
技术研究所产品 ,以上药盒均购自天津市联星生物
技术有限公司。
2 　方法
211 　动物分组及应激前处理 :将 24 只家兔随机分
为 3 组 ,即对照组、模型组及给药组 ,每组各 8 只。
给药组于每日 ig 给药 2 次 ,每次 25 mL (根据丹参
·2111· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008212203　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :刘纳文 (1970 —) ,天津市人 ,副主任医师 ,硕士 ,博士在读。Tel : (020) 89938584 　E2mail : nn1747 @sina. com. cn3 通讯作者　李志军　Tel : (022) 23626600