全 文 ：·1670· 中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
表2染料木苷不确定度分■
Table2 Uncertaintyitemofgenistin
法，由于配制的样品与对照品的质量浓度相近，其峰
面积响应中可能的非线性引入的不确定度可忽略。
环境温度、环境湿度的随机变化对质量、峰面积会带
来影响，其不确定度纳入称量重复性、进样重复性
中，因样品和对照品几乎为同时操作，故环境温度湿
度的系统影响而可忽略。
由于本实验中使用的天平和量瓶的精密度较
高，不确定度均参考检定和实验的数据，未采用最大
允差，且称量接近、操作简单，不包括人为过失误差，
故不确定度较小。由于HPLC仪本身对测定结果的
影响因素很多，难以一一评估。又因为在实际测定
中，HPLC仪误差引起的不确定度已体现在色谱峰
面积的测量结果中，所以对HPLC仪的体积流量、流
量精度和进样精密度等各因素的不确定度分量不作
另行细化讨论。实验未进行回收率的不确定度评定，
并以回收率对检测结果进行修正，因为回收率测得
值的离散度是包含在测量结果离散度内的，且用回
收率修正结果，不仅会重复评定，而且会脱离实
际‘2J。
分析评估不确定度时，应尽量考虑到产生不确
定度的所有来源，因为合成不确定度的数值几乎完
全取决于重要的不确定度分量。根据上述评定可得，
本方法测量大豆苷结果的各分量不确定度均较小，
测量染料木苷结果的不确定度主要来自于对照品和
样品的峰面积的不确定度、稀释对照品带来的不确
定度。比较大豆苷和染料木苷的不确定度，染料木苷
的扩展不确定度(土0．79％)为大豆苷的扩展不确定
度(土0．51％)的1．5倍。这是由于染料木苷对照品
的质量浓度较低，约为大豆苷对照品的1／5倍，故染
料木苷在高效液相色谱上的响应不稳定而造成其峰
面积不确定度较大。且染料木苷对照品稀释次数较
多，稀释过程中带来了较大的不确定度。在分析了以
上影响测量不确定度的原因后，如果采取了相应的
措施，完全可以将测量结果的不确定度进一步减小。
参考文献：
[1]测量不确定度评定与表示ES]．JF1059—1999，1999．
[2]冯家力，潘振球，曾栋。等．气相色谱一质谱法测定马吲哚的
测量不确定度评定及防止重复评定的探讨l-J]．中国卫生检验
杂志，2006，16(8)：1011．
毛知母的减压加温润制工艺研究
宋坤，陆兔林，季德。
(南京中医药大学药学院，江苏南京210029)
摘要：目的探讨毛知母的最佳减压加温润制工艺。方法 以菝葜皂苷元、芒果苷为指标选择润制时间、润制温
度、润制压力3个因素，用L。(3·)正交设计表，采用方差分析法，对毛知母进行减压加温润制工艺的优选。结果润
收稿日期：2008—05—07
作者简介：宋坤(1973～)，江苏省南京人，讲师，从事中药饮片质量标准方面的研究工作．
．．．Tel：(025)85811513E—mail：songseng@yeah．net
*南京中医药大学02届硕士研究生
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月。 671。
制温度、润制压力对菝葜皂苷元、芒果苷有显著影响。毛知母润制最佳工艺为：润制时间5h，润制温度60℃，润制压
力0．07MPa。结论减压加温润制适合于毛知母的处理。
关键词：毛知母l润制；菝葜皂苷元；芒果苷}高效液相色谱
中圈分类号：R286．1 文献标识码：A 文章绩号：0253—2670(2008)11—1670—04
知母为百合科植物知母Anemarrhena
asphodeloidesBung 的干燥根茎，味苦、甘，性寒，归
肺、胃、肾经，是传统的滋阴降火药，为历版《中国药
典》所收载，具有清热泻火、生津润燥的功效，临床用
于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消
渴，肠燥便秘等症状[1]。知母中含知母皂苷、芒果苷
等成分。芒果苷是知母清热作用的有效成分[2]。菝葜
皂苷元是知母的指标性成分[3]。目前市场上知母药
材有光知母和毛知母两种，其中毛知母外表面密被
绒毛。知母在应用于临床前必须经水处理软化以利
于切片，大多数饮片企业在水处理知母时使用在常
温、常压下进行的普通润制方法，但毛知母外被绒
毛，水分难以被药材吸收，常温、常压下普通润制通
常需要半天甚至一天的润制时间。为节省生产时间、
减少水溶性成分的损失从而保证临床用药的质量，
本实验采用减压加温润制法对毛知母的润制工艺进
行了研究。本实验通过高效液相法对毛知母中的菝
葜皂苷元和芒果苷进行测定，为筛选最佳水处理工
艺提供科学依据。
1仪器与材料
LC一10ATvp型高效液相色谱仪(日本岛津)；
千谱色谱软件系统；Alhech500型蒸发光散射检测
器；MettlerAG285型电子天平(瑞士梅特勒一托利
多集团)；DZY一6050型真空干燥箱(上海精宏实验
设备有限公司)。
菝葜皂苷元(批号110744—20040)、芒果苷(批号
111607—200301)对照品由中国药品生物制品检定所
提供；知母药材购自河北省，经我校中药鉴定教研室
陈建伟教授鉴定为百合科植物知母A．asphodeloides
Bunge的干燥根茎；甲醇、乙腈为色谱纯，水为重蒸
水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 因素水平的确定：将毛知母用湿纱布包裹，放
入真空干燥箱中，减压、加温进行润制。结合生产实
际选择润制时间(A)、润制温度(B)、润制压力(C)
进行减压加温润制工艺考察，其中润制时的温度、压
力用真空干燥箱控制。因素水平见表1。
2．2芒果苷的测定
2．2．1色谱条件：Kromasil柱(250mm×4．6ram)，
水一乙腈一0．85％磷酸(100t 25。5)为流动相；体积
裹1因素与水平
TaBle1 Factorsandlevels
流量为0．6mL／min；柱温30℃；检测波长为258rim。
2．2．2对照品溶液的制备：精密称取芒果苷对照品
适量，加甲醇制成0．354mg／mL的溶液，即得。
2．2．3供试品溶液的制备：取知母各水处理品，打
粉过50目筛，干燥，取知母各水处理品粉末0．4g，精
密称定，置离心管中，加入70％乙醇15mL，超声30
min，离,L,20min，用吸管吸取置蒸发皿中，如此操作
3次，挥干溶剂，用50％甲醇定容于25mL量瓶中。
以0．45弘m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2．2．4标准曲线的制备：精密吸取芒果苷对照品溶
液0．25、0．5、0．75、1．0、1．25mL，加甲醇定容至5
mL，在上述色谱条件下重复进样2次，每次10肛L，
测定峰面积值。以峰面积平均值对质量浓度进行回
归处理，得回归方程Y=6764005．65X一
69421．2，r=0．9999。结果表明芒果苷在17．7～
88．5弘g与峰面积线性良好。
2．2．5精密度试验：取同一芒果苷对照品溶液，进
样10．0肛L，连续进样5次，测定，计算芒果苷的质量
分数，结果其RSD为0．34％。
2．2．6重现性试验：取同一批知母粉末0．1g，5
份，制备供试品溶液，进样10．0严L，测定，计算芒果
苷的质量分数，结果其RSD为2．9％。
2．2．7稳定性试验：取同一供试品溶液，每次进样
10弘L，分别在0、2、4、6、8h进样测定芒果苷峰面
积，结果其RSD为2．92％。表明供试品溶液在8h内
稳定。
2．2．8回收率试验：精密称取同一药材粉末约0．05
g，分别精密加入芒果苷对照品0．308、0．3841、
0．4602mg，制备供试品溶液，进样测定，计算得芒
果苷的平均回收率为97．9oA，RSD为1．05％(行=9)。
2．2．9样品测定：取不同减压加温润制方法制备的
知母样品粉末约0．1g，制备供试品溶液，进样10
弘L，测定芒果苷峰面积，计算得率。
万方数据
·1672· 中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
2．3菝葜皂苷元的测定
2．3．1 色谱条件：Kromacil柱(250mlTl×4．6
mm)；甲醇一水(95t 5)为流动相；体积流量为1．0
mL／min；柱温30℃；用蒸发光散色检测器检测，漂
移管温度85℃，载气压力：0．20MPa。理论板数按
菝葜皂苷元峰计算应不低于4000。
2．3．2对照品溶液的制备：精密称取菝葜皂苷元对
照品适量，加甲醇制成1．96mg／mL的溶液，即得。
2．3．3供试品溶液的制备：取知母各水处理品，打
粉过50目筛，干燥，取知母粉末0．5g，置具塞锥形瓶
中，精密加入乙醇25mL，称定质量，浸泡过夜，超声
处理(功率200W，频率30kHz)40rain，放冷，再称
定质量，用乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量
取续滤液10mL，蒸干，加水10mL，加热回流2h，取
出，冷至室温，边振摇边滴加40％氢氧化钠溶液至溶
液颜色由橙黄变为橙红，用三氯甲烷振摇提取2次，
每次30mL，合并三氯甲烷液，蒸于，残渣加甲醇溶
解，转移至10mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，
即得。
2．3．4标准曲线及线性范围：精密吸取菝葜皂苷元
对照品溶液0．25、0．5、1．0、1．5、2．0mL加甲醇定容
至5mL，在上述色谱条件下重复进样2次，每次10
弘L，测定峰面积值。以峰面积平均值对质量浓度的
对数值进行回归处理，回归方程为y=1．60492551
X+2．52818，，．=0．9995，线性范围为0．98～
7．84H-g。
2．3．5精密度试验：取同一菝葜皂苷元对照品溶液
进样10弘L，连续进样5次，测定菝葜皂苷元峰面积
值，计算菝葜皂苷元的质量分数，结果其RSD为
1．32％。
2．3．6稳定性试验：取供试品溶液，分别放置0、2、
4、6、8h，各精密进样10弘L，测定菝葜皂苷元峰面
积，计算菝葜皂苷元的质量分数，结果其RSD为
2．92％。
2．3．7重现性试验：精密称取同批样品5份，制备
供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算菝葜皂苷元
的质量分数，结果其RSD为2．95％。
2．3．8 回收率试验：精密称取同一药材粉末约0．25
g(以=6)，分别精密加入菝葜皂苷元对照品2．67、
3．33、4．00mg，制备供试品溶液，按上述色谱条件
测定，采用外标两点法计算得菝葜皂苷元的平均回
收率为96．46％，RSD为1．46％。
2．3．9样品测定：取不同减压加温润制方法制备的
知母样品粉末(过50目筛)约0．5g，按制备供试品溶
液，以上述色谱分离条件，进样10肛L，测定菝葜皂苷
元峰面积，计算质量分数，计算得率。
2．4试验设计与结果分析：采用L。(34)正交表进行
试验，以综合加权评分的方法对各炮制品菝葜皂苷
元和芒果苷得率2项指标按照1：1进行综合评价，
结果见表2，方差分析结果见表3。
结果表明，因素B、C对毛知母中芒果苷、菝葜皂
苷元的量有显著的影响，因素A无显著性影响。毛知
母水处理的最佳工艺组合应为A。B。C，，即润制时间5
h，润制温度60℃，润制压力0．07MPa，润制温度及
润制压力对菝葜皂苷元、芒果苷的量有显著影响。
2．5验证试验：重复最佳工艺，得到样品中菝葜皂
苷元、芒果苷平均得率分别为1．6798％、1．2302％
(行一3)，可知最佳工艺选择合理。
表2正交设计试验结果
Table2 Resultsoforthogonaltest
序号 A B C D 菝葜皂苷元／％ 芒果苷／％ 综合加权
1
1
1
2
2
2
3
3
3
8．0131
7．8485
7．9127
0．1646
1
2
3
l
2
3
l
2
3
7．6824
7．4310
8．6611
1．230I
1
2
3
2
3
1
3
1
2
8．6888
7．5733
7．5122
1．1766
1
2
3
3
1
2
2
3
1
8．1940
7．544
8．0360
0．6495
1．0190
1．060I
1．1703
1．048I
1．1118
I．2572
0．9370
1．2648
1．2701
2．9346
2．2625
2．816O
2．4553
2．4037
2．9895
2．2924
2．7647
2．8556
6
4
7
2
9
3
5
0
5
5
Z
5
7
1
2
5
O
5”趵“∞约站∞娼
1
1
1
1
1
1
1
1
l
1
2
3
4
5
6
7
8
9
I
I
I
R
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 673·
裹3方差分析
Table3 Varianceofanalysis
Fo．05(2，2)=19．00Fo ol(2，2)=99．00
3讨论
知母为临床常用药，其有效成分为知母皂苷、芒
果苷等。该药物的活性成分研究已进行得较为深入，
但研究其炮制方法的文献尚未见报道。本实验选择
了知母中的代表性成分菝葜皂苷元、芒果苷为指标，
以减压加温润制的关键指标：润制时间、润制温度、
润制压力3个因素，采用正交试验法研究毛知母的
减压加温润制工艺，采用多指标综合分析方法对毛
知母的减压加温润制工艺进行优选，筛选出毛知母
的最佳减压加温润制工艺参数。本实验结果也为进
一步制定知母的饮片质量标准提供了参考依据。
参考文献：
[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草[M]．上海：
上海科学技术出版社．1998．
[2]邓家刚，郑作文，曾春晖．芒果苷的药效学实验研究[J]．中医
药学刊．2002．20(6)：802—803．
HPLC法测定抗纤丸中黄芩苷
魏智勇，王俊华，孙岳枫
(天津市传染病医院，天滓市肝病研究所，天津300192)
抗纤丸是天津市传染病医院研制的中药蜜丸
剂，由当归、川芎、赤芍、黄芩等12味中药制成，具有
活血化瘀、扶正祛邪，抗纤维化之功效，在临床应用
近30年，主要用于治疗慢性肝炎、肝硬化。目前该制
剂尚没有专属性的质量控制方法。黄芩具有抗氧化
活性，具有广谱的抗菌和抗病毒作用，有效成分主要
有黄芩苷、黄芩苷元和汉黄芩素等。因此本实验采用
HPLC法检测抗纤丸中黄芩苷，为制定该制剂专属
性的质量控制标准提供实验依据。
1仪器与试药
LabAlliance高效液相色谱仪，Model5000紫
外一可见光检测器，Anastar色谱工作站，KQ一250E
医用超声波清洗器。
黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号
110715—200212)，抗纤丸(本院制剂室提供)，甲醇为
色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2方法和结果
2．1色谱条件：PhenomenexC18色谱柱(250mm×
4．6mm，5肛m)，流动相：甲醇一水一磷酸(47l 53。
0．2)，体积流量为1．0mL／min，检测波长为280llm，
柱温25℃，进样量20肛L。
2．z供试品溶液的制备：取本品5g剪碎，混匀，精
密称取1．5g，置50mL量瓶中，加70％乙醇50mL，
超声提取30min，放冷后加70％乙醇至刻度，摇匀，
滤过。精密量取续滤液2mL于10mL量瓶中，用
70％乙醇定容，摇匀，用0．45弘m滤膜滤过，即得。
2．3对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适
量，用甲醇配制成20／zg／mL的溶液，用0．45弘m滤
膜滤过，即得。
2．4线性关系考察：精密称取黄芩苷对照品5mg，
置50mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇
匀，作为储备液。精密量取储备液0．5、1．0、2．0、3．0、
4．0、5．0mL，分别置10mL量瓶中，用甲醇稀释至
刻度，摇匀。按上述色谱条件分别进样20肛L，测定。
以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，得直线方程为
Y=4．226×10可X+7．297×10一，r一0．9995，结果
表明黄芩苷在0．1～1．0P-g与峰面积呈良好的线性
关系。
2．5专属性试验：按抗纤丸生产工艺处方比例，制
得缺黄芩药材的阴性样品，按供试品溶液的制备方
法制备阴性样品溶液。取供试品溶液、对照品溶液和
阴性样品溶液适量，进样测定，结果阴性样品溶液对
测定结果无干扰，见图1。
2．6稳定性试验：取批号20050712样品制备的供试
品溶液，每隔1h进样1次，连续进样5次，计算得黄
芩苷峰面积的RSD为1．52％。
收稿日期：2008—03—08
作者简介：魏智勇(1954一)，男，副主任药师，主要从事药品调荆、制剂及药刺科管理工作。
Tel；(022)27468130E-mail：weizhiyon91954@126．COl21
万方数据
毛知母的减压加温润制工艺研究
作者： 宋坤， 陆兔林， 季德
作者单位： 南京中医药大学药学院,江苏,南京,210029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(11)
被引用次数： 2次

参考文献(2条)
1.国家中医药管理局<中华本草>编委会 中华本草 1998
2.邓家刚;郑作文;曾春晖 芒果苷的药效学实验研究[期刊论文]-中华中医药学刊 2002(06)

引证文献(2条)
1.马月光 真空加温润药技术在中药材润药工艺中的应用[期刊论文]-中国药业 2012(20)
2.冯倩茹.高妮 知母常用炮制工艺的比较研究[期刊论文]-临床医学工程 2012(5)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200811024.aspx