全 文 ：·1654· 中革焉ChineseTraditionalndHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月
经皮给药系统中的体外释放度测定，是基质释
放性能的主要参数。药物首先要从骨架材料中释放
出来，达到皮肤表面，进而经皮渗透进入体内发挥作
用。本实验采用透皮吸收的方法进行体外释放试验，
只是将经皮渗透变成药物直接释放，结果表明正交
试验优选出的巴布剂基质配方具有良好的俸外释放
性能，对黄芩苷药物持续释放可达12h以上。
体外透皮吸收试验结果表明正交试验优选出的
基质配方可稳定持续释放黄芩苷并促进其经过皮肤
吸收，且随着时问的延长黄芩苷的透皮速率略有增
大。经皮给药系统中，药物透过皮肤的主要屏障是角
质层o]。角质层厚约i0～15pm，其中角质细胞的胞
浆、胞膜及细胞间隙的脂质分子都对药物有屏障作
用。形成了主要屏障区，限制了药物透皮的传输，所
以12h体外透皮累积透过量比体外释放累积释放
量要小的多。
综上所述，本实验通过正交试验优选出一个生
物相容性良好的黄芩苷巴布剂的基质配方，其黏接
性能良好且载药量大、释放性好，是具有较好前景的
新型巴布剂基质。
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HPLC法从瘤果紫玉盘叶中分离制备紫玉盘醇和大花紫玉盘醇G
许琼明“。，剜午邑丽1，赵葆华2，徐丽珍。，杨世辣2。’，王少军3
(1．苏州大学药学院．江苏苏州215123}2．中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，北京100094
3．国家中药固体材剂工程技术研究中心。江西南昌 330006)
瘤果紫玉盘为番荔枝辩紫玉盘属植物。该属植
物主要分布于我国的西南地区，在民间广泛应用于
癌症、贫血和炎症的治疗“。]。紫玉盘属植物中主要
含有多氧取代环己烯、番荔枝内酯、黄酮、生物碱等
类成分o]。本课题组研究表明多氧取代环己烯类化
合物具有较强的抗肿瘤活性，如能抑制核苷的转移，
对胸腺嘧啶脱氧核苷和尿嘧啶核苷抑制作用强，能
显著抑制人结肠癌细胞、乳腺癌、肝癌细胞等的增
殖，同时对多药耐药瘤株同样有效“]。为合理利用植
物资源，创制新型癌症治疗药物，笔者对瘤果紫玉盘
叶进行了化学成分研究，发现紫玉盘醇和大花紫玉
盘醇G的量共约0．5％，且具有较强的抗肿瘤活
性E“。目前，市场上无紫玉盘醇和大花紫玉盘醇G
对照品出售。因此为了控制紫玉盘属植物药材质量，
开发该属植物资源，本实验采用常规色谱和高效液
相结合的方法制备这两种多氧取代环己烯对照品紫
玉盘醇和大花紫玉盘醇G。结构见图1。该法简便易
行，产品质量分数可达98％以上，满足了常规定量
分析检测的需求。
l仪器、材料与试剂
Waters2690分析型高教液相色谱仪，996PDA
检测器(美国Waters公司)。R200型旋转蒸发器。
Fisher—Johns熔点测定仪。Peikin—Elmer983G红外
仪(美国PE公司)fVarianInova600spectrometer
核磁共振仪(美国Varian公司)；MieromassZabspec
spectrometer质谱测定仪(美国Micromass公司)}
JAscO一715CDspectrometer(日本Jaseo公司)。
瘤果紫玉盘叶采集于贵州省黔西南地区。由中
国医学科学院药用植物研究所李国强副教授鉴定为
瘤果紫玉盘UvaHakweichowensisP．T．Li。分析所
用正已烷和异丙醇均为HPLC级，其他试剂均为分
析纯，水为双蒸水。SephadexLH一20(英国Pharma—
eia公司)，色谱用(100t200目与200300目，柱
色谱用)购于青岛海洋化工厂。
2条件与方法
2．1色谱条件：半制备色谱柱：Zorbax苯基柱(250
鏊銎是昔：留紧省蒙喜学基金资助项目。。。。，。。8。)。
作者简介：许琼明(1975--)．男，湖北蕲春人，讲师．博士．主要从事天然药物活性成分研究及中药新药开发。
．通讯作者T虬杨：(0世5林12M5T8。810：3(0。1l。)E6-2m8a9i9h7xou591鼍粥穷掣嚣；盘。鬯基毗”。g曲jlj。97。5@h毗。。mcom
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月·1655·
猡杼
圈1囊果紫玉盘中紫玉盘醇(I)和大花紫玉盘醇
G(I)的结构
Fig-1Structuresofz ylenol(I)anduvarigranol
G(I)fromU．kweichowensi$
mm×9．4mm，7pm)；柱温：室温；检测波长：230
nm；流动相：甲醇一水(70：30)；体积流量：2．0mL／
min。
分析色谱柱：Altech正相硅胶柱(250mmX9．4
mm，5pm)}柱温；室温；DAD检测器，检测波长：
230nin；流动相：正己烷一异丙醇(98，2)；体积流量：
2．0mL／min。
2．2样品预处理：瘤果紫玉盘叶5kg，粉碎，90％
乙醇回流提取3次，每次2h，台并提取液，减压浓缩
挥去乙醇，以氯仿萃取5次，萃取液浓缩，得提取物
150g，拌硅胶上100～200目，石油醚(30～60℃)一
醋酸乙酯梯度洗脱，收集石油醚一醋酸乙酯(8：2)
洗脱部分，得到黑色胶状物35g。将此黑色胶状物再
经过200～300目硅胶柱色谱分离，收集石油醚一醋
酸乙酯(8：z)洗脱部分，经第二次硅胶柱色谱分离
得到的产品上SphadexLH一20柱，以氯仿一甲醇(1t
1)洗脱除去色素得白色胶状物28g。
2．3半制备色谱分离：取1g白色胶状物溶于乙腈
溶液，配制成lg／mL的溶液，超声30min，用半制
备高效液相色谱法纯化，进样量为50止，分别收集
保留时间为46．2和53．4min的两个组分，见图2。
将其减压浓缩(100℃以下)后置恒温干燥箱内干燥
24h(40℃)，最后得到两个白色针状结晶，各600
和320mg。
2．4单体质量分数分析：由于至今国内尚无多氧取
代环己烯类成分的法定对照品，本实验采用半制备
型高效液相色谱分离出紫玉盘醇和大花紫玉盘醇
G，依照上述正相分析条件，经HPLC归一化法检测
2个单体质量分数均达到98．0％以上(图3)，符台
要求。
3鉴定
紫玉盘醇：白色针晶，mp126～127℃，
■]舫=一99．39，(c一0．07，CHCl3)，uVx～”“
nm：230，274，280；IR(KBr)cm～：3480，1709，1
605，1455，1280，120，712lFAB—MSm／z：385．2
(EM+H3+)；1H—NMR(CDCl3，600MHz)d：4．22
0 10 20 30 柏 50 60 70
t／mitt
l一荤玉盘醇2一大花紫玉盘醇G
1一托ylenol2-uvarigranolG
图2瘤果紫玉盘中多氧取代环己烯类化学成分的
制备液相色谱围
Fig·2preparativechromatogramofpolyoxygenated
cyclohexenesfromU．1【1laeichowensis
矿——百——1F飞i一。一。l石1’ 矗 南
t／nfin
1一紫玉盘醇2一大花紫玉盘醇G
1-zeylenol2-uvafigranolG
圈3觜玉盘醇和大花紫玉盘醇G的裔效液相色谱圈
Fig·3HPLCchromatogramsfzeylenol
anduvarigranolG
(1H，d，J一6．6Hz，H一2)，5．69(1H，ddt，J=6．6，
2．6，1．8Hz，H一3)，5．81(1H，ddd，J=11．2，2．6，
0．6Hz，H-4)，5．94(1H，ddd，J—11．2，3．6，1．8
Hz，H一5)，4．36(1H，d，J一3．6Hz，H一6)，4．60和
4．68(各1H，d，J一12．0Hz，H一7)．7．30～8．10
(10H，m，H—Ar)，3．05(3H，s，一OH)。”C—NMR(CD—
C13，150MHz)a：76．0(C一1)，70．9(C—Z)，74．4(C．
3)．127．0(C一4)，128．5(C一5)，68．6(C-6)．66．8(C一
7)。以上数据与文献报道啪基本一致。
大花紫玉盘醇G：白色针晶，mp68～69℃，
[q]口=--44．0。，(c=0．05，CHCI3)，UVX_。⋯“Flm：
230。274，280；IR(KBr)cm一1：3480，1709。1605，l
455，l280，120，712；FAB—MSm／z：385．2(rM+
H3+)；1H—NMR(CDCl3，600MHz)d：3．98(1H，d，
J=7．8Hz，H一2)，5．82(1H，m，H一3)，5．82(1H，m，
H一4)，5．77(1H，ddd，J一10．8，1．8，2．4Hz，H一5)，
4．39(1H，d，t，一2．4Hz，H一6)，4．56和4．63(各1H，
d，J=12．0Hz，H一7)，d：7．30～8．10(10H，m，H—
Ar)，3．25(3H，s，一OH)，”C—NMR(CDCl，，150
MHz)d：76．5(C一1)，71．4(C一2)，75．0(C一3)，126．2
万方数据
·1656· 中草菊c帖Ⅱ馏eTraditionalandHerl衄lDrags第38卷第11期2007年11月
(C一4)，128．1(C一5)，67．0(C一6)，65．8(c一7)。以上数
据与文献报道01基本一致。
4讨论
色谱分离方法的选择：紫玉盘醇和大花紫玉盘
醇G为一对同分异构体，仅C一6的绝对构型不同，
极性十分相近，普通方法很难将它们分离开。由于紫
玉盘醇和大花紫玉盘醇G的极性较小，适合用正相
HPLC分离．但正相色谱试剂要求较高，价格昂贵，
故采用反相HPLC分离制备单体，正相HPLC鉴定
质量分数。
制备条件的选择：紫玉盘醇和大花紫玉盘醇G
的极性小，性质相近，实验起初采用ODS柱，甲醇一
水(75l 25)为流动相，流量2mL／min，120rain出
峰，未分离开。根据它们的性质，考虑改用苯基柱分
离制备单体，经摸索采用甲醇一水(70t 30)为流动
相，可将它们基本分开，时间虽J然稍长，但每次制备
量较大，基本达到半制备目的。
致谢：感谢贵州省林业研究所邓朝义研究员采集植
物材料，军事医学科学院陈舍兵和薛燕等同志代洲
NMR和MS谱。
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象皮与拟替代品黄牛皮、水牛皮中蛋白的研究
李蓥1，李秀兰3，张燕玲1。石森2，王昊1，李惠芬”
(1．天津医科大学，天津300070；2．天津市天津医院。天津300210；3．天津市安定医院，天津300052)
象皮屑象科动物亚洲象Elephasm acimusLin-
naeus．的皮，具有止血敛疮、祛腐生肌作用。其主要
成分为蛋白质、氨基酸及微量元素“]。以象皮为君药
的生肌象皮膏可以促进表皮细胞的增生、分化，对巨
噬细胞膜Fc及C。b受体有明显的增强作用，还可以
使伤口的pH值变化过程加快，促进伤口愈合o]。但
是《中华人民共和国野生动物保护法》已将大象列为
国家一级保护动物。为寻找替代品，本实验选择与象
皮具有相似药效作用的黄牛皮和水牛皮作为比较对
象，将3种样品提取液中蛋白质的量及组成进行对
比分析。
1仪器与材料
日本日立U一3310分光光度计，DYY—I型电
泳仪(北京六一仪器厂)。
象皮由天津医院骨研所组织工程室李秀兰研究
员提供，经天津医科大学药学院周晔副教授鉴定。黄
牛皮、水牛皮采自河北省承德市郊区，属于壮年期4
岁的牛，该年龄的牛其后背皮中的蛋白质的量较高，
宰杀放血直至放尽后取该部位的皮。对照品人胎盘
血蛋白由天津医科大学检验系生化教研室张燕玲教
授提供。丙烯酰胺(Act，电泳级)、甲叉丙烯酰胺
(Bis)、葡聚糖凝胶树脂(中国医药集团上海化学试
剂公司)，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1双缩脲法口“3测定蛋白质
2．1．1供试品溶液的提取[．．5]：精密称取象皮、黄牛
皮、水牛皮粉末各1g，加聚山梨酯80与少许石英砂
于研钵中冰浴研磨10min，加0．01tool／LTris—HCI
缓冲液300mL，于冰浴条件下超声混匀2h，0～4
℃冰箱中放置过夜使之充分溶胀。次日冰浴超声提
取6h后，4000r／min离心15min，转移上清液，下
层沉淀加缓冲液300mL，重复操作4次，弃去沉淀，
合并上清液，加固体(NH。)。SO．至100％饱和度，
4000r／min离心15rain，沉淀以Tris—Hcl缓冲液
溶解定容50mL量瓶，得初提液，0～4℃冰箱中短
期保存。
警銎是首：笑鼙等1畜；科学基金蕈点资助项目(。338。2911)
*通讯作者李亳芬Tell(022)23529243E—maillihuiien@tijmu．edu．c11
万方数据
HPLC法从瘤果紫玉盘叶中分离制备紫玉盘醇和大花紫玉盘醇G
作者： 许琼明， 刘艳丽， 赵葆华， 徐丽珍， 杨世林， 王少军
作者单位： 许琼明(苏州大学药学院,江苏,苏州,215123;中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物研
究所,北京,100094)， 刘艳丽(苏州大学药学院,江苏,苏州,215123)， 赵葆华,徐丽珍(中国
医学科学院,中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094)， 杨世林(中国医学科学院
,中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094;国家中药固体制剂工程技术研究中心,江
西,南昌,330006)， 王少军(国家中药固体制剂工程技术研究中心,江西,南昌,330006)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(11)
被引用次数： 1次

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引证文献(1条)
1.杨向楠.陈海生 紫玉盘属植物的化学成分和药理研究进展[期刊论文]-药学实践杂志 2009(2)


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