全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1831·
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归苓片改善动物学习记忆功能的研究
董文心1，阮克锋2，顾丰华1，沈平婊2，李朋云1，林志宏2
(1．上海医药工业研究院，上海200437；2．上海中药制药技术有限公司，上海201203)
摘 要：目的 研究归苓片(FBD)促进动物学习记忆功能的作用。方法小鼠ig给予35、70、140mg／kgFBD，连
续1周，观察FBD对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固不良和45％乙醇致小鼠记忆
再现障碍的影响，并观察FBD对大鼠双侧颈总动脉结扎所致的慢性脑部供血不足而产生的记忆障碍的改善作用。
结果FBD对由东莨菪碱所致的小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致的小鼠记忆巩固不良和45％乙醇所致的小鼠
记忆再现障碍均有明显的改善作用；并可改善大鼠双侧颈总动脉结扎所致的慢性脑部供血不足而产生的记忆障
碍。结论FBD可促进动物的学习记忆功能。
关键词：归苓片(FBD)；记忆障碍；学习记忆功能
中图分类号：R286．74 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)12—1831—05
FBDusedtoimprovelearninga dmemoryfunctionofa imals
DONGWen—xinl，RUANKe—fen92，GUFeng—hual，SHENPing—ran92，LIPeng—yunl，LINZhi—hon92
(1．ShanghaiInst tuteofPharmaceuticalIndustry，Shanghai200437，China；2．ShanghaiTraditional
ChineseMedicineTechnologyCo．，Ltd．，Shanghai201203，China)
Abstract：ObjectiveTostudyonFBD(composedwithPoriaCOCOS，Atractylodesmacrocephala，and
Angelicasinensis)usedtoimprovelearninga dmemoryfunctionofa imals．MethodsThemicewere
treatedbyigFBDwiththedosesof35，70and140mg／kgforoneweekcontinuously．EffectofFBDon
dysmnesiaofacquiredlearningofmiceinducedbyscopolamine，dysmnesiaofme oryretentionofmice
inducedbyNaN02，anddysmnesiaofre ppearanceofmemoryofmiceinducedby45％ethanolwere
studied．Improvementforthdysmnesiaofmemoryduetochronicblooddeficiencyinbrainofratsinduced
byligatingthecarotidarteriesoftwosideswereobserved．ResultsFBDcanimprovethedysmnesiaof
miceinducedbyscopolamine，NaN02，and45％eth 01significantly，alsodysmnesiaduetochronicblood
deficiencyinbrainofratsinducedbyligatingthecarotidarteries．ConclusionFBDhasthefunctionto
improvethlearningandmemoryfunctionofa imals．
Keywords：FBD；dysmnesia；learningandmemoryfunction
收稿日期：2006～04—13
作者简介：董文心(1956)，女，博士，研究员，在巴黎六大医学院获药理学硕士、博士学位，主要从事神经药理研究。
Tel：(021)55514666—362Fax：(021)65449361E—mail：dwxnn@sina．corn
万方数据
·1832· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
老年痴呆症可分为阿尔茨海默氏病
(Alzheimer’Sdisease，AD)、血管性痴呆(vascular
disease，VD)以及两者并存的混合型痴呆。VD的
病因是由于脑血管硬化、狭窄而导致脑部供血不足，
久而久之使海马、皮质等记忆相关脑区神经元功能
减退、乃至死亡，从而引起的记忆功能衰退、认知障
碍等。归苓片(FBD)由茯苓、自术、当归组成，该处
方具有健脾利湿、活血补血功效。实验发现FBD能
有效对抗脑反复缺血再灌注所致的小鼠与大鼠记忆
损伤，可能具有防治VD的功能。为此，本实验采用
不同的小鼠记忆障碍模型和大鼠慢性脑部供血不足
而产生的记忆障碍模型来研究FBD改善动物学习
记忆功能的作用。
1材料与方法
1．1 动物：昆明种小鼠，雄性，体重(19．6±1．5)
g，由上海医药工业研究院动物房提供；Wistar大
鼠，雄性，体重(200±25)g，由上海斯莱克实验动
物责任有限公司提供。
1．2药品：FBD是采用超临界工艺和传统提取工
艺相结合的方法，从茯苓、白术、当归中提得的提取
物，主要成分为挥发油和多糖，得率为10％，批号
040904，由上海中药制药技术有限公司提供。石杉碱
甲片(双益平)，批号040101，上海复旦复华药业有
限公司生产。氢溴酸东莨菪碱，批号4AL8002，上海
禾丰制药有限公司生产。亚硝酸钠，批号20040722，
国药集团化学试剂有限公司。尼莫地平，批号
20030106，郑州瑞康制药厂生产。
1．3仪器：YLS一2T型小鼠跳台记录仪，山东省医
学科学院设备站生产；YLS—lA型小鼠避暗仪，山
东省医学科学院设备站生产；JLBehv—MwMG
Morris水迷宫实验视频分析系统，上海吉量软件科
技有限公司生产。
1．4方法
1．4．1 FBD对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的
影响：60只小鼠按随机数字法分为6组。对照组及
模型组小鼠ig给予生理盐水(NS)，阳性药物组ig
给予石杉碱甲片66．7／-g／kg，给药组分别ig给予
FBD药液140、70、35mg／kg。每天1次，0．2mL／10
g，连续给药1周。末次给药后1h，ip东莨菪碱2
mg／kg，30min后将小鼠放入跳台仪内，训练5
min，记录每鼠受电击的次数。24h后重测，记录动
物第1次跳下平台的潜伏期和3min内的错误总
次数。
1．4．2FBD对亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固不良的
影响：动物分组及给药方法同1．4．1项。末次给药后
1h，将小鼠放入跳台仪内，训练5min，记录每鼠受
电击的次数。训练后立即se亚硝酸钠120mg／kg
(O．1mL／10g)。24h后重测，记录动物第1次跳下
平台的潜伏期和3min内的错误总次数。
1．4．3FBD对乙醇所致小鼠记忆再现障碍的影
响：动物分组及给药方法同1．4．1项。末次给药后1
h，以避暗法训练1次，记录每鼠从放入明室至进入
暗室遇到电击所需的时间，此即潜伏期。24h后进
行测试，测试前30min，ig给予45％乙醇溶液
(0．1mL／10g)。记录进入暗室动物的潜伏期和5
min内的电击次数。
1．4．4FBD对大鼠慢性脑部供血不足所致的记忆
障碍的影响n~3]：大鼠采用12％水合氯醛(0．3
mL／100g，ip)麻醉后剃除颈部毛发，消毒皮肤，颈
部皮肤正中切口，分离双侧颈总动脉后用丝线做永
久性结扎。假手术组除了不结扎双侧颈总动脉外，其
他处理方法相同。3个月后，将双侧颈总动脉结扎后
的大鼠按随机数字法分为5组，每组10只动物。分
别为模型组(NS)，阳性药尼奠地平(5mg／kg)组，
FBD140、70、35mg／kg组。各组按应给予的药液ig
给药，每天1次，每次0．5mL／100g，连续给药2
周。从第3周开始，于给药后1h进行大鼠Morris
水迷宫训练。训练方式：将大鼠于第1象限面朝壁投
入水中，使其寻找平台，游泳时间为60S。若在60S
内找不到平台，则将大鼠放到平台上，停留10S。休
息2min后，再次将大鼠放入第Ⅱ象限游泳以寻找
平台，其余过程同上。依次再将大鼠分别投入眶、Ⅳ
象限。如此给药、游泳训练过程每天重复1次，连续
训练6d。第7天将位于第1象限的平台撤除。给药
后1h将大鼠从水池的任意一点贴壁放入水中，使
其游泳寻找平台1min。Morris水迷宫统计软件将
记录每只大鼠穿越平台的次数、分别在4个象限的
活动路程、以及在平台中心区域及外围区域的活动
时间及路程，并进行统计处理。
1．4．5统计学处理：数据以z土5表示，数据差异统
计采用单因素方差分析(ANOVA)或秩和检验。
2结果
2．1 FBD对小鼠记忆获得障碍的影响：于训练前
给予东莨菪碱，使得动物24h后第1次跳下平台的
潜伏期显著缩短，动物在3rain内的错误次数均比
对照组明显增多，显示了记忆获得障碍。70、140
mg／kgFBD则明显延长了小鼠第1次跳下平台的
潜伏期，3min内的错误次数也明显减少。35mg／kg
万方数据
中草蔼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1833·
FBD也显示了延长动物第1次跳下平台的潜伏期
和减少3min内的错误次数的趋势，结果见表1。
表1 FBD对小鼠记忆获得障碍的影响。土s，n一10)
Table1 EffectofFBDondysmnesiaofacquired
learningofmice(i士s，n一10)
与对照组比较：44P
起缺氧性的记忆障碍，因此在训练后给予亚硝酸钠
使得模型组小鼠缩短了第1次跳下平台的潜伏期。
70、140rng／kgFBD均明显延长了小鼠第1次跳下
平台的潜伏期和减少3min内的错误次数，35rag／
kgFBD也显示了延长小鼠第1次跳下平台的潜伏
期和减少3rain内的错误次数的趋势，结果见表2。
表2 FBD对小鼠记忆巩固不良的影响(x-+-s，n一10)
Table2 EffectofFBDondysmnesiaofmemory
retentionofmice(；±s，n一10)
与对照组比较：4P
给予45％乙醇，破坏了动物的记忆再现功能，表现
为模型组的动物由明室进入暗室的潜伏期缩短，出
现的错误次数增多。140mg／kgFBD则延长了小鼠
由明室进入暗室的潜伏期，70mg／kgFBD也显示
了延长小鼠由明室进入暗室潜伏期的趋势。错误出
现的次数没有显著差异，结果见表3。
2．4 FBD对大鼠慢性脑部供血不足所致的记忆障
碍的影响：训练至第4天时，假手术组动物上台的潜
伏期缩短，中心活动的路程明显短于模型组，表明大
表3 FBD对小鼠记忆再现障碍的影响。士s，n一10)
Table3 EffectofFBDondysmnesiaofre ppearance
—
inmemoryofmice(工±S，辟一10)
与对照组比较：4“P
延长。70、140mg／kgFBD对大鼠上台的潜伏期呈
缩短倾向。训练至第5天时，假手术组动物上台的潜
伏期进一步缩短，中心活动路程和时间进一步缩短。
140mg／kgFBD明显缩短了大鼠上台的潜伏期，中
心活动路程短于模型组，表明大鼠较快找到并上了
平台，中心活动时间则长于模型组。70mg／kgFBD
也明显缩短了大鼠上台的潜伏期，中心活动的路程
长于模型组，表明大鼠在平台附近活动增多。中心活
动的时间明显长于模型组。训练至第6天时，假手术
组的动物入水后几乎都能直奔平台，因此上台的潜
伏期平均只有4．7S。中心活动路程进一步缩短，中
心活动时间更加延长。140mg／kgFBD使大鼠上平
台的潜伏期进一步缩短。中心活动的路程显示了与
模型组相差无几的现象，但表现形式则完全不同：模
型组的动物是由于在外周的活动较多而造成中心活
动路程较短，而140rng／kgFBD组的大鼠是由于较
快找到了平台而使得中心活动路程较短，中心活动
的时间长于模型组。70mg／kgFBD缩短了大鼠上
台的潜伏期，中心活动路程和中心活动时间均明显
延长，结果见表4。在第7天的撤台试验中，假手术
组在站台中心区域的活动路程、时间以及在站台周
围I区的活动路程和时间均为最长，表明记忆功能
良好，在原有位置寻找平台。模型组的动物这些数据
均明显减少，说明其记忆功能明显受损。140rng／kg
FBD组的动物上述指标均明显长于模型组，70、35
mg／kgFBD也显示了良好的改善大鼠学习记忆的
作用，结果见表5。
3讨论
FBD来源于处方茯苓、当归、白术。方中的当
归、白术具有扩张血管、降低外周阻力、增加心脑血
流量及抗凝作用。前期研究发现，FBD能对抗脑反
复缺血再灌注所致小鼠学习记忆障碍，升高小鼠脑
万方数据
·1834· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
表4 FBD对大鼠双侧颈总动脉结扎所致记忆功能降低的影响(第4～6夭)Q±s，聘一40)
Table4 EffectofFBDondysmnesiaofratsinducedbyligatingcarotidarteriesoftwosides(day4—6)(；±s，n=40)
与模型组比较：。P<0．05一P<0．01
+P
Table5 EffectofFBDondysmnesiaofratsinducedbyligatingcarotidarteriesoftwosides(day7)(i士s，一一10)
与模型组比较：。P
与Ca2+一ATPase活性[4]，并抑制No的异常升高。
这些作用可能与保护缺血脑区的脑细胞功能，进而
改善记忆有关。
M受体阻断剂东莨菪碱破坏胆碱能功能而导
致动物产生一时性的记忆障碍[5，6]。在此实验研究
中，FBD对由东莨菪碱诱发的小鼠记忆障碍有明显
改善作用，表明FBD可能有拟胆碱能作用。乙醇引
起学习能力的下降可能是通过海马中强啡肽A水
平的改变来介导的，并可影响脑中氧化一抗氧化系统
的平衡[7’8]。结合前期的研究结果，FBD可清除自由
基、抗脂质过氧化与抗衰老。因此，在对乙醇所致的
记忆再现障碍的试验中，FBD显示了良好的改善小
鼠记忆功能的作用。
亚硝酸钠可使血红蛋白转变为高铁血红蛋白，
后者与羟基结合失去携氧功能，造成小鼠急性缺氧，
可出现记忆巩固障碍。抗缺氧药物可对抗亚硝酸钠
致记忆损伤[9]。在本实验研究中，FBD明显地改善
了亚硝酸钠诱发的小鼠记忆巩固障碍，提示FBD可
能通过缓解脑缺氧发挥作用。在大鼠双侧颈总动脉
结扎所致的慢性脑部供血不足而诱发的记忆功能减
退的实验中，FBD明显增强大鼠定位航行的能力和
空间探索的能力，表明FBD有效地改善了由慢性脑
部供血不足而诱发的记忆功能减退，这与FBD扩张
血管、降低外周阻力、增加心脑血流量及抗凝作用有
关，从而改善了脑部供血、供氧不足，维持脑细胞的
正常代谢。
从本实验结果可以看出，FBD对老年痴呆病
人，尤其是以VD为主或混合性痴呆病人的记忆障
碍将会产生一定的预防和治疗作用。
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当归多糖对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究
胡 晶，吴 宏
(重庆医科大学基础医学院组胚教研室，重庆市生物化学与分子药理学重点实验室，
重庆医科大学基础医学研究所，重庆400016)
摘要：目的探讨当归多糖(APs)对小鼠外周m造血干细胞的动员作用。方法采用外周血自细胞(WBC)计
数、淋巴细胞(LC)计数、免疫细胞化学、流式细胞术、造血祖细胞体外培养等实验技术观察APS的动员作用。结果
APS动员后小鼠外周血的WBC、LC数明显高于生理盐水(Ns)组(P
周血造血干细胞有一定的动员作用，并且APS和rhG—CSF联合动员的效果好于单用APS或单用rhG—CSF的动
员效果。
关键词：当归多糖(APS)；外周血造血干细胞；动员
中圈分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)12—1835一04
Mobilizationofangelicapolysaccharidesonperipheralbloodhematopoieticst mcellinmice
HUJing．WUHong
(DepartmentofHis ologyandEmbryology，CollegeofBasicM dicalScience，KeyLaboratoryofChongqing
BiochemistryandMolecularPh macology，InstituteofBa icMedicalSciences，Chongqing
MedicalUniversity，Chongqing400016，China)
Abstract：ObjectiveTos udyangelicapoIysaccharides(APS)formobilizingperipheralblood
hematopoieticst mcellinBALB／emice．MethodsTechniquesofperipheralwhitebloodcell(WBC)and
lymphocyte(LC)count，immunocytochemistry，flowcytometry，andhem topoieticcellcultureinvitro
wereusedtoobservethAPSmobilization．ResultsThnumbersofWBCandI。CinAPSgroupwere
markedlyhigherthanthatinNSgroup(P<0．05)；thepercentageofCD34+cellsinperipheralbloodin
APSgroupwasmarkedlyhigherthanthatinNSgroup(P<0．05)；theyieldsofCFU—MixinAPSgroup
wasignificantlymorethanthatinNSgroup(P<0．01)；thecombinedusageofAPSandrhG—CSF
enhancedmoreeffects(P<0．05)thanthatineit ersi gleuseofAPSorrhG—CSFgroup．Conclusion
TheresultsindicatethatAPScouldmobilizehaernatopoieticstemcellsintoperipheralbloodandtheffect
ofAPSincombinationwithrhG—CSFcouldbebetterthansingleuseofAPSorrhG—CSF．
Keywords：angelicap01ys ccharides(APS)；peripheralbloodhemato oieticst mce l；mobilization
正常情况下外周血中的造血于细胞(PBHSC)
数量很少，因此需要进行动员才能获取足够数量的
PBHSC以保证移植成功。当归为中医补血、活血的
要药，当归多糖(angelicap01ysaccharides，APS)
是其主要有效成分之一。既往研究表明APS对正常
或贫血小鼠的髓系造血祖细胞(BFU—E、CFU—E、
CFU—GM和CFU—MK)的增殖、分化有显著的促
进作用Ⅲ。本研究以BAI．B／c小鼠为实验动物模
型，研究APS对小鼠PBHSC的动员作用，旨在从
祖国医学宝库中寻找简便、安全、高效的造血干细胞
收稿日期：2006—03—08
基金项目：重庆市科委资助课题[渝科计发字(2001)54号]
作者简介：胡 晶(1979一)，女，重庆市人，助教，硕士，主要研究方向为造血干细胞生物学。
Tel：(023)66313858E—mail：hujing一805@hotmail．com
万方数据
归苓片改善动物学习记忆功能的研究
作者： 董文心， 阮克锋， 顾丰华， 沈平孃， 李朋云， 林志宏， DONG Wen-xin， RUAN Ke-
feng， GU Feng-hua， SHEN Pin-grang， LI Peng-yun， LIN Zhi-hong
作者单位： 董文心,顾丰华,李朋云,DONG Wen-xin,GU Feng-hua,LI Peng-yun(上海医药工业研究院,上
海,200437)， 阮克锋,沈平孃,林志宏,RUAN Ke-feng,SHEN Pin-grang,LIN Zhi-hong(上海
中药制药技术有限公司,上海,201203)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
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