全 文 ：·1180· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月
及变化情况确定13个共有峰和8个特征指标指纹
峰。以8个指标成分峰作为评价指标，在精密度与稳
定性试验中，其相对保留时间RSD均小于0．05％，
峰面积比值的RSD均小于3％；在重现性试验中，
其相对保留时间RSD均小于0．05％，峰面积比值
的RSD均小于5％，方法的精密度、稳定性和重现
性良好。通过平均矢量法计算共有模式，相关系数法
与夹角余弦法进行相似度计算，10批川芎挥发油指
纹图谱与共有模式对照指纹图谱间相似性非常好。
目前，国内已有不少关于川芎中药材指纹图谱
的研究文章报道，但大多是采用高效液相色谱进行
指纹图谱的研究，同时也有采用GC—MS法进行川
芎挥发油成分指纹图谱研究的文章报道，如杨光明
等[63采用GC—MS和指纹图谱对川芎不同溶剂提取
物、川I芎与当归的石油醚提取物进行了比较；梁明金
等[73报道了川芎有效部位的GC—MS研究和指纹图
谱分析，实验对川芎有效部位共有峰进行了确定，并
进行了方法学考察，但仅给出了相对保留时间的
RSD，没有给出相对峰面积的RSD，也没有进行特
征指纹峰的确定，只能对川芎药材进行鉴别，并不能
评价川芎药材的内在质量。
在中药指纹图谱研究中，色谱一质谱法可以提供
化合物的结构信息，比单一的色谱法有更好的专属
性，能为中药的质量控制提供更为可靠的依据。本实
验通过GC—MS法对川芎挥发油特征指纹图谱的研
究，通过特征指纹峰的确定以及共有模式指纹图谱
的建立，不仅可以对川芎药材进行有效的鉴别，而且
能对川芎药材的内在质量进行评价，确认川芎药材
质量的优劣问题。
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蜜远志与生远志水煎液的HPLC指纹图谱对比研究
田 徽h2，王 建卜，夏厚林1，刘贤武1，吴晖晖1，赵海平1
(1．成都中医药大学药学院中药教研室，四川成都610075；2．绵阳师范学院生命科学与技术学院，四川绵阳621000)
摘要：目的对比蜜远志与生远志水煎液的指纹图谱，探索生远志的毒性物质基础。方法采用HPLC法测定了
蜜远志与生远志水煎液指纹图谱，运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版进行图谱分析。结果蜜远志与生
远志水煎液的指纹图谱出峰位置基本相同，但峰形高低具有一定差异。结论生远志在蜜制过程中，其大类成分并
无显著变化，但某些成分的量则存在差异。
关键词：蜜远志；生远志；指纹图谱；HPLC
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)08—1180—04
ComparisonofHPLCfingerprintsbetweenhoney-stir—roastedRadixPolygalae
andwater—decocteds lutionfromcrudeRadixPolygalae
TIANHuil2，WANGJianl，XIAHou—linl，LIUXian—wul，WUHui—huil，ZHA0Hai—pin91
(1．DepartmentofChineseMateriaMedica，CollegefPharmacy，ChengduUniversityofTraditionalChinese
Medicine，Chengdu610075，China；2．CollegeofLifeScienceandBiotechnology，Mianyang
NormalUniversity，Mianyang621000，China)
收稿日期：2006—10—10
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30371778)
作者简介：田徽(1980一)，男，四川绵竹人，绵阳师范学院生命科学与技术学院任教，成都中医药大学2003级硕士研究生，研究方向为
中药理论与应用。Tel：(0816)2200065E—mail：tianhuil009@yahoo．com。cn
*通讯作者王建E—mail：wangjian一81@sina．tom
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1181·
Keywords：honey—stir—roastedRadixPolygala；crudeRadixPolygala；fingerprint；HPLC
远志常规用量可引起轻度恶心，若大剂量服用 指纹图谱相似度评价系统计算整体相似度，其全谱
可引起恶心、呕吐、腹泻、溶血，并引起胃、十二指肠 图相似度结果为1．000、0．9900．986、0．977、0．957，
溃疡、胃炎、严重贫血或气血两虚等不良反应，而蜜 RSD为1．641％。结果表明主要共有色谱峰(归一化
制远志具有存效解毒的作用口]。为了临床更安全有 法峰面积>5％)的相对保留时问、相对峰面积RSD
效合理地应用远志，曾对远志的蜜制工艺进行了筛 均小于3％，符合指纹图谱要求乜]，其重复性试验结
选，筛选出了相对安全有效的最优蜜制品(另见报 果良好。
道)。本次实验即在前期研究基础上，考察蜜远志与
生远志的指纹图谱，拟从化学角度探索其解毒机制，
并为建立蜂蜜炮制远志的HPLC指纹图谱测定方
法以及质量控制标准提供科学依据。
1仪器与材料
Waters2995高效液相色谱仪，DAD检测器，
Waters—Empower工作站，SartoriusBP211D电子
分析天平。
生远志购自成都五块石中药材批发市场，经成
都中医药大学鉴定教研室卢先明鉴定为远志Poly—
galatenuifoliaWilld．的干燥根。蜜远志系生远志
按照最优蜜制条件炮制而成，由本校炮制教研室提
供(炮制方法另见报道)。乙腈为色谱纯，其他试剂为
分析纯，水为超纯水。中药色谱指纹图谱相似度评价
系统A版(国家药典委员会)，中药指纹图谱分析和
管理系统(中国药品生物制品检定所)。
2方法与结果
2．1 供试品溶液制备：精密称取各样品粉末2．0g
(过3号筛)，加入25mL水，称定质量，浸泡1h后
煎煮lh，放冷，补足质量，滤过，取续滤液适量，以
0．45gm微孑L滤膜滤过，即得。
2．2 色谱条件：色谱柱为Dikma公司Diamonsil
C18(250mmx4．6miil，5弘m)；流动相：乙腈(A)一
0．05％磷酸水溶液(B)梯度洗脱，0～45min，16％
A，45～50min，16％A，50～55min，33％A，55～
70min，44％A，70～90min，48％A，90min以后，
100％A；检测波长：350nm；柱温：30℃；体积流量：
1．0mL／min；进样量：10肛L；记录时间：100min。
2．3方法学考察
2．3．1 内参比峰的选择：采用保留时间在19min
左右对称性较好的峰作为内参比峰(S)。
2．3．2重复性试验：取同一批蜜远志5份，制备供
试品溶液，进样测定，考察主要共有色谱峰(归一化
法峰面积>5％)的相对保留时间和相对峰面积。相
对保留时间RSD分别为0．076％、0．195％、
0．107％、0．132％。相对峰面积RSD分别为
0．370％、2．023％、l。676％、1．i00％。使用中药色谱
2．3．3精密度试验：取同一蜜远志供试品，连续进
样5次，考察主要共有色谱峰(归一化法峰面积>
5％)的相对保留时间和相对峰面积。相对保留时间
RSD分别为0．086％、0．149％、0．0970A、 203％。
相对峰面积RSD分别为2．416％、1．572％、
2．242％、1．489％。使用中药色谱指纹图谱相似度评
价系统计算整体相似度，其全谱图相似度结果为
1．000、0．965、0．979、0．993、0．993，RSD为
1．413％。结果表明主要共有色谱峰(归一化法峰面
积>5Voo)的相对保留时间和相对峰面积RSD均小
于3％，符合指纹图谱要求皿]。
2．3．4稳定性试验：取同一蜜远志供试品，分别在
0、3、6、9、12、24h进样，考察主要共有色谱峰(归一
化法峰面积>5％)的相对保留时问和相对峰面积。
相对保留时间RSD分别为0．099％、0．085％、
0．032％、0．052％。相对峰面积RSD分别为
1。166％、1．934％、2．903％、1．779％。使用中药色谱
指纹图谱相似度评价系统计算整体相似度，其全谱
图相似度结果为1．000、0．955、0．954、0．954、
0．983、0．981，RSD为1．935％oo。结果表明主要共有
色谱峰(归一化法峰面积>5％)的相对保留时间和
相对峰面积RSD均小于3％，符合指纹图谱要
求[z]，说明常温下供试品溶液在24h内保持稳定。
2．4蜜远志水煎液HPLC指纹图谱的建立
2．4．1共有指纹峰的标定：取10批蜜远志，制备供
试品溶液，进样测定，指纹图谱见图1。中药指纹图
谱分析和管理系统生成色谱峰有21个，并生成蜜远
志水煎液对照图谱，见图2。
2．4．2共有指纹峰的相对保留时间：计算10批蜜
远志水煎液共有指纹峰的相对保留时间平均值，结
果见表1。
2．4．3共有指纹峰的相对峰面积：按照指纹图谱技
术要求瞳]，对单峰面积占总峰面积5％以上(保留时
间在30min以内)或10％以上(保留时间大于30
rain)的色谱峰计算了峰面积比值，结果见表2。
2．4．4非共有峰面积：供试品的图谱与指纹图谱比
较，非共有峰总面积均小于总峰面积的10％。
万方数据
·1182· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月
，、 表1 蜜远志水煎液共有指纹峰的相对保留时间
Table1’Relativeret ntionmeofcommonpeaksforfingerprintofwater—decocteds lution
fromhoney—。stir--roastedRadixPolygalae
批号
相对保留时间
1 2 3 4 5 6 S 7 8 9
均值0．076 0．245 0．336 0．479 0．557 0．698 1．000 1．066 1．283 1．606
批号
相对保留时间
10 ll 12 13 14 15 16 17 18 19 20
表2蜜远志水煎液共有指纹峰的相对峰面积
Table2 Relativeareasofcommonpeaksforfingerprintofwater—decocteds lutionfromhoney—stir—roastedRadixPobgalae
峰号保留时间 峰面积
相对峰面积
ml m2 m3 m4 m5 rn6 m7 m8 m9 m10均值
准许误差范围
O 34 67 84 lOO
t／min
图l 蜜远志水煎液的指纹图谱
Fig．1Fingerprintsofwa er—decocteds lution
fromhoney—-stir——roastedRadixPolygalae
C
2．4．5相似度的比较：使用中药色谱指纹图谱相似
度评价系统计算整体相似度，其全谱图相似度结果
11214I ．_18
敏． 越烈一．蕊。。．
O 67 84 100
￡／mlrl
图2蜜远志共有峰标定
Fig．2Commonpeaksofhoney—stir-roasted
RadixPolygalae
为0．965、0．985、0．979、0·970、0·966、0·956、
0．987、0．981、0．954、0．999，RSD为1．473％。测定
10批蜜远志样品的相似度均大于0．95，计算结果均
7
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叭眦(虿叫L謇砌町m
m枷
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1183·
符合指纹图谱研究的技术要求＆]，表明该蜜制方法
准确稳定，故将其作为蜜远志的指纹图谱测定方法。
2．5 蜜远志水煎液与生远志水煎液指纹图谱的比较：
取生远志药材5份，制备供试品溶液，测定其HPLC
指纹图谱，见图3；生成生远志水煎液对照图谱，见图
4。计算各样品与对照图谱相似度，结果为0．985、
0．953、0．988、0．959、0．952，RSD为1．813％。
以蜜远志水煎液对照图谱作为参照图谱，计算
各生远志水煎液图谱与其的相似度，结果为0．941、
0．930、0．938、0．917、0．914，RSD为1．287％。生远
志水煎液与蜜远志水煎液对照图谱比较见图5。可
见生远志各样品水煎液图谱与蜜远志水煎
t／rain
图3生远志水煎液的指纹图谱
Fig．3Fingerprintsofwa er—decocteds lution
fromcrudeRadixPolygalae
．I
J州 U．。姒。L以 托 L 。执她U札k
0 17 34 51 67 84 100
t／min
图4生远志水煎液的对照图谱
Fig。4Referencefingerprintofwater—decocted
solutionfromcrudeRadixPolygalae
液对照图谱的相似度均小于0．95，表明二者水煎液
具有一定的差异。解析二者图谱，其出峰位置基本相
同，而峰形高低有一定差异。提示生远志经蜜制，其
大类成分并无变化，其差异可能系各成分之间发生
了转化而使其量不同。
3讨论
远志系临床常用的安神化痰药，但又具有一定
不良反应。本课题组曾对远志不同炮制品的急性毒
耙扯幽 一2：二
34 51 67 84 100
t／mln
图5生远志(A)与霉远志(B)水煎液对照图谱比较
Fig．5Comparisonbetweenr ferencefingerprint
ofwater—decocteds lutionfromcrude
RadixPolygalae(A)andthatfrom
honey—stir—roastedRadixPolygalae(B)
性及对胃肠运动影响进行研究。其结果显示，蜜远志
的毒性和对胃肠道的不良反应最小，安全性能相对
高，且相关药效并未受到影响，表明蜜制远志的确达
到了存效解毒作用[3“]。在确定出了相对安全性与有
效性的最优蜜制工艺的基础上，为了更准确地探索
生远志的毒性物质基础，本实验对蜜远志与生远志
水煎液指纹图谱进行了对比研究。
通过解析生蜜远志水煎液指纹图谱提示：其中
2号峰与S峰的变化较大。那么蜜制过程是否是通
过影响2号峰与S峰相应物质的量变化进而降低远
志毒性的呢?尚待深入考察。
通过对10批蜜远志的测定，制定了该种炮制方
法的指纹图谱检测标准及相应的技术参数(10批平
均值)，亦符合指纹图谱要求。本实验检测的蜜远志
系用最优蜜制条件炮制而成的样品，故从化学角度
为蜜远志炮制方法的质量控制提供了科学依据。
在计算蜜远志水煎液共有指纹峰的相对峰面积
时，因为15～19号峰未能基线分离，故按指纹图谱
要求[2]，计算了组峰的总峰面积作为峰面积，同时标
定该组各峰的相对保留时间。
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万方数据
蜜远志与生远志水煎液的HPLC指纹图谱对比研究
作者： 田徽， 王建， 夏厚林， 刘贤武， 吴晖晖， 赵海平， TIAN Hui， WANG Jian， XIA
Hou-lin， LIU Xian-wu， WU Hui-hui， ZHAO Hai-ping
作者单位： 田徽,TIAN Hui(成都中医药大学药学院,中药教研室,四川,成都,610075;绵阳师范学院生命
科学与技术学院,四川,绵阳,621000)， 王建,夏厚林,刘贤武,吴晖晖,赵海平,WANG
Jian,XIA Hou-lin,LIU Xian-wu,WU Hui-hui,ZHAO Hai-ping(成都中医药大学药学院,中药
教研室,四川,成都,610075)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(8)
被引用次数： 1次

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