全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·695·
表1蓝萼甲素在大鼠血浆中的蛋白结合率(一一3)
Table1 Proteinb dingratesofglaucocalyxinA
inplasmaofrat(咒一3)
苎!!壅竺垦墨鎏垦!!竖：竺兰：：! 蛋白结合率／％
透析前血浆透析后袋内溶液透析后袋外溶液
蛋白结合率一(袋内溶液中蓝萼甲素的质量浓度一袋
外溶液中蓝萼甲素的质量浓度)／袋内溶液中蓝萼甲素的质
量浓度×100％
3讨论
目前测定药物血浆蛋白结合率的方法有平衡透
析法、超滤法、凝胶过滤法、超速离心法和白蛋白微
球测定法等[5~8]，其中平衡透析法是一种最常用的
方法。本试验采用平衡透析法测定了不同质量浓度
下蓝萼甲素的蛋白结合率，可为合理给药方案的设
计提供参考。
平衡透析法的平衡温度一般可选在37℃，也可
采用4℃恒温条件下测定。实验中发现在37℃下样
本达到平衡时间较短，但是血浆被细菌污染，所以选
择在4℃下进行。
比较了各种有机溶剂对血浆中蓝萼甲素的提取
率，发现氯仿和乙醚的提取率相同，但是氯仿位于水
下层，不方便吸取，所以采用了乙醚处理，方法简便，
且测定无干扰。
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通栓救心pH依赖型缓释胶囊在犬体内的药动学和药效学研究
于叶玲，郑 昕，唐 星
(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016)
摘要：目的制备通栓救心pH依赖型缓释胶囊，并进行犬体内药动学和药效学的研究。方法以牡丹皮、川I芎、
香附的超临界CO：萃取物及冰片为原料，经pCD包合固化后用粉末层积法制备含药微丸，分别用HPMC、
EudragitL一30D一55、EudragitL100一$100(1：5)包衣制备pH依赖型延迟释药微丸，将延迟类型不同的包衣微丸按
预设剂量分别混合填充胶囊，制得通栓救心pH依赖型缓释胶囊。采用血药浓度法测定方剂中指标性成分丹皮酚的
血药浓度，研究其药动学；采用血清药理学方法研究其药效学。结果血药浓度测定法表明通栓救心pH依赖型缓
释胶囊和通栓救心片的体内平均滞留时间分别为8．04、2．89h，相对生物利用度为126．3％。药效学研究结果表明
两者的平均效应维持时间分别为儿．27、5．94h，相对生物利用度为129．1％。结论通栓救心片在体内具有吸收
快、消除快和作用维持时间较短的特点，而通栓救心pH依赖型缓释胶囊在体内有起效迅速、药效持久、缓释的特
点。
关键词：pH依赖型缓释胶囊；通栓救心片；药动学；药效学；丹皮酚
中图分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)05—0695—05
收稿日期：2006—09—09
基金项目：国家高技术研究发展计划(863计划)课题(2002AA223t08)
作者简介：唐星(1964一)，男，陕西商县人，博士，教授，博士生导师，主要从事药剂学研究。
Tel：(024)23986343Fax：(024)23911736E—mail：tangpharm@sina．com
万方数据
·696· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
PharmacokineticsandpharmacodynamicsofTongshuanJiuxinpH—Dependent
Delayed—releaseCapsulaindogsinvivo
YUYe—ling，ZHENGXin，TANGXing
(SchoolfPharmacy，ShenyangPharm ceuticalUniversity，Shenyang110016，China)
Abstract：ObjectiveToprepareTongshuanJiuxinpH—DependentDelayed—releaseCapsulaandstudy
itspharmacokineticsandpharmacodynamicsindogsinvivo．MethodsBorneolandthextractsofCortex
Moutan，RhizomaChuanxiong，andRhizomaCyperipreparedbyC02supercriticalfluidextractionmethod
weresolidifiedor ncludedwithp—cyclodextrin．Pelletswerpreparedbymeansofpowderlayeringwiththe
solidifiedextractsandborne01．ThepH—d pendentdelayed—releasepelletsystemwaspreparedbycoating
withHPMC，EudragitL一30D一55，andEudragitL100一S100(1：5)combinations，respectively．Tongshuan
JiuxinpH—DependentDelayed—releaseCapsulawaspreparedbymixingthethreekindofpelletsa theratio
of1：1：1．TheconcentrationofpaeonolinplasmawasdeterminedbyHPLCandthePharmacodynamic
parameterswereevaluatedbyserumpharmacologymethod．ResultsTheresuitsfromthepaeonalconcen—
trationnplasmashowedthathemeanresidencetime(MRT)invivowere8．04hforTongshuanJiuxin
pH—DependentDelayed—releaseCapsulaand2．89hforTongshuanJiuxinT抽let，andtherelativebioavail—
abilitywas126．3％．Meanwhile，theresul sfromthepharmcodynamicpar etersevaluatedbyserum
pharmacologymethodshowedthatheMRTware11．27hforTongshuanJiuxinpH—DependentDelayed—
releaseCapsulaand5．94hforTongshuanJiuxinTablet，andtherelativebioavailabilitywas129．1％．
ConclusionTongshuanJiuxinTablethasthecharacteristicsofrapidabsorption，．qucikelimination，and
shorteraction—maintainingtime．WhereasTongshuanJiuxinpH—DependentDelayed—releaseCapsulahas
thecharacteristicsofrapidabsorption，prolongedandrelaxedeffectiveactioncomparedwithTongshuan
JiuxinTablet．
Keywords：TongshuanJiuxinpH—DependentDelayed—releaseCapsula；TongshuanJiuxinTablet；
pharmacokinetics；pharmacodynamics；paeonol
通栓救心pH依赖型缓释胶囊为研制方，由牡
丹皮、川芎、香附和冰片组成。本品可增加冠脉血流
量，用于心绞痛和冠心病的防治。本实验采用粉末层
积技术和pH依赖性包衣技术，制备了3种分别于
胃、十二指肠、小肠中下部释药的pH依赖型包衣微
丸，按预设剂量混合填充胶囊，制成pH依赖型缓释
胶囊，期望在胃肠道转运过程中于不同的生理部位
释药，以达到速释和缓释目的。中药药动学的研究是
中药制剂现代化研究的一个重要组成部分，目前，中
药药动学研究的基本方法分为体内药物浓度法和生
物效应法[1]。本实验以丹皮酚为指标，进行犬体内的
药动学研究，并分取部分血浆，采用血清药理学方
法[2]，以离体豚鼠心脏冠脉流量变化率为指标，进行
药效学研究。中药复方成分复杂，本实验采用在体与
离体实验相结合及有效成分药动学一药效学同步分
析的方法对其进行药学的研究评价更具合理性。
1材料与仪器
牡丹皮、川芎、香附和冰片药材均购自辽宁省药
材公司，符合《中国药典32005年版标准；通栓救心
pH依赖型缓释胶囊，自制；通栓救心片，自制；Eu—
dragitL一30D一55、EudragitL100，Eudragit$100型
甲基丙烯酸树脂，德国RShm公司；p环糊精(p—
CD)，陕西志丹生物化工厂；GS—H型药用RT包
衣剂(主成分：羟丙基甲基纤维素HPMC)，肥城瑞
泰精细化工有限公司；柠檬酸三乙酯(TEC)，英国
Lancaster公司；低取代羟丙基纤维素，湖州展望化
学药业有限公司；丹皮酚对照品，中国药品生物制品
检定所；肝素注射液，上海第一生化药业公司；高氯
酸、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
豚鼠，雌雄兼用，300。350g，沈阳药科大学动
物中心提供；家犬，沈阳药科大学动物中心提供。
日本日立高效液相色谱仪；80一2离心机，上海
手术器械厂；BCFCO长风电热恒温水浴锅，余姚电
讯仪表实业有限公司；Langendorff灌流装置，沈阳
药科大学生理教研室。
2方法与结果
2．1通栓救心pH依赖型缓释胶囊的制备：将牡丹
皮、川I芎、香附超临界CO。萃取物和冰片用／]-CD包
合固化后粉碎成细粉，加入适宜辅料，采用粉末层积
法制备通栓救心微丸，分别用5％RT包衣剂乙醇
溶液，15％EudragitL一30D55水分散体(增塑剂为
TEC，用量为EudragitL一30D一55的20％)和8％的
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·697·
EudragitL100一Eudragit$100(I：5)乙醇溶液(增
塑剂为TEC，用量为EudragitL100一Eudragit$100
的40％)进行包衣，包衣增重分别为5％、12％、
10％，将3种pH依赖型包衣微丸按预设剂量比例
1：1：1混合填充胶囊。
2．2通栓救心片的制备：取处方量的牡丹皮、川芎、
香附超临界CO。萃取物和冰片用p—CD包合固化后
粉碎成细粉，加入微晶纤维素、可压性淀粉、氢氧化
铝、低取代羟丙基纤维素混合均匀，以10％淀粉浆
为黏合剂，高速搅拌制粒，晾干、整粒后，加入硬脂酸
镁混匀，压制成片，包薄膜衣即得。该薄膜衣片在
37℃水中可在20min内崩解。
2．3 释放度的测定：采用《中国药典}2005年版二
部附录第二法装置，转速为75r／min，测定开始时溶
出介质为0．1mol／L盐酸(pH1．2)800mL，2h后
加入磷酸盐缓冲液(取K2HPO。·3H2010g、NaOH
4g，加水100mL溶解，即得)60～75mL使pH值
为5．8；2h后再加入磷酸盐缓冲液10～20mL，使
溶出介质的pH值为7．0。分别于设定时间取样，
HPLC法测定丹皮酚的质量浓度，计算累计释放量。
通栓救心pH依赖型缓释胶囊在模拟人体胃肠道顺
序变化pH环境的介质中2、4、8h的溶出量分别为
样品实测量的36．8％、67．2％、91．6％。
2．4犬体内药动学研究
2．4．1试验方案：雄性健康家犬6只，体重(20土
5)kg。随机分为2组，于实验前12h禁食，不禁水，
过夜，早晨空腹口服单剂量药物，分别灌服通栓救心
pH依赖型缓释胶囊和通栓救心片，服用剂量均相
当于丹皮酚500mg，一周后，2组交叉服药。给药后
不同时间取后肢静脉血5mL，置肝素化离心管中，
离心(3000r／min)15min，分离取血浆，置冰箱中保
存备用。
2．4．2血中丹皮酚的HPLC法测定
色谱条件：色谱柱：DiamonsilC18柱(200mm×
4．6min，5肛m)，流动相为甲醇一水(55：45)，体积流
量为1．0mL／min，检测波长为274nm。
血浆样品的处理：取血浆1．0mL，加入20％高
氯酸溶液1mL，涡旋混合5min，离心(3000r／
min)15min，取上清液20肛L，即得进样液。
标准曲线的制备：取空白血浆1．0mL，加入丹
皮酚系列对照品溶液20牡L，按血浆样品的处理项
下方法处理，进样20肛L测定。结果丹皮酚峰面积与
其在血浆中质量浓度在0．05～1．0pg／mL呈良好
的线性关系，回归方程为A一39．267C一423．2，r=
O．9969，最低检测限为10ng／mL。
方法回收率与精密度试验：取空白血浆1．0
mL，按标准曲线的制备项下方法配制低、中、高质量
浓度(25．375、101．5、203ng／mL)的血浆样品并处
理(，z一3)，连续测定3d，随行标准曲线，计算回收率
和精密度。结果3种不同质量浓度的回收率分别为
(102．0±3．9)％、(103．1土4．2)％、(100．8±
5．2)％，日内RSD≤5．2oA，日间RSD≤5．5％。
2．4．3药动学参数：犬单次口服通栓救心片和pH
依赖型缓释胶囊的丹皮酚平均血药浓度一时间曲线
见图1，应用统计矩方法计算的两种制剂的药动学
参数见表1。
J
g300
∞
S200
篓loo
糯
目0
0 2 4 6 8 10 12
t／h
图1犬单次口服通栓救心片(A)和通栓救心pH依
赖型缓释胶囊(B)后丹皮酚的平均血药浓度一时
闻曲线(n--6)
Fig．1Meanplasmaconcentration-timecurve
ofpaeonolindogsaftersingleig
TongshuanJiuxinTablet(A)and
TongshuanJluxinpH—DependentDelayed—
releaseCapsula(B)，(一一6)
表1犬单次口服通栓救心片和通栓救心pH依赖型缓释
胶囊后丹皮酚的药动学参数@一6)
Table1 Pharmacokineticparametersof】paeonoli ．dogs
aftersingleigTongshuanJiuxinTaMetand
TongshuanJiuxinpH—DependentDelayed—
releaseCapsula(万一6)
2．5生物效应法的药动学‘3~5]
2．5．1离体豚鼠心脏冠脉流量实验：取豚鼠，击头处
死后迅速取出心脏，按Langendorff法制备离体心
脏，以氧饱合的任一洛氏液(取氯化钠9g，氯化钾
万方数据
·698· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
0．42g，氯化钙0．24g，碳酸氢钠0．5g，葡萄糖1g，
加蒸馏水至1L)恒温，恒压灌流，待稳定后，向灌流
系统中注入各组血浆1mL，测定给药后5min内每
分钟冠脉流量(mL)，计算给药后流量的最大增加率。
流量最大增加率=(给药后灌流均值一给药前灌流均
值)／给药前灌流均值×100％
2．5．2 剂量一效应曲线的确立：取豚鼠，随机分成7
组，每组3只，分别为生理盐水对照组，通栓救心原料
药粉灌胃给药6个剂量组。给药剂量分别为人临床口
服日拟用量等效剂量的0．33倍(20mg／kg)、1倍(65
mg／kg)、5倍(325mg／kg)、15倍(975mg／kg)、30
倍(1950mg／kg)、45倍(2925mg／kg)，每天2次，
连续3d。于末次给药后1h颈静脉采血，3000r／min
离心15min。合并同等剂量组豚鼠血浆，作用于离体
豚鼠心脏，测定其冠脉流量，绘制剂量一效应曲线。
不同剂量的含药血浆对离体豚鼠冠脉流量增大
率(y)与剂量对数(X)呈线性正相关，回归方程为
y一25．659X一24．949，r一0．9968，线性范围22～
2925mg／kg(以提取物计)。
2．5．3时间一效应数据：取犬服药前后的不同时间
点的空白血浆和含药血浆进行离体豚鼠心脏冠脉流
量实验，以(给药后流量的最大增加率一空白组流量
的最大增加率)的均值所得比率作为药效指标绘制
效应一时间曲线(图2)。用统计矩计算药动学参数，
并与通栓救心片组药动学参数进行比较(表2)。结
果显示与通栓救心片相比，通栓救心pH依赖型缓
释胶囊的峰浓度显著降低，体内平均滞留时间显著
延长。
80
60
孚
衰40
糯
20
0
o 4 8 12 16 20 24
t／h
图2犬单次口服通栓救心片(A)和通栓救心pH依赖
型缓释胶囊(B)后的时间一效应曲线(一一8)
Fig．2Time—effectcurveindogsaftersingleig
TongshuanJiuxinTablet(A)andTongshuan
JiuxinpH-DependentDelayed—release
Capsula(B)白一8)
3讨论
中药药动学对指导中药的安全、有效、合理应用
有重大意义。其中以某种药效成分为观测指标测定
表2犬单次口服通栓救心片和通栓救心pH依赖型缓释
胶囊后的药动学参数Q一8)
Table2 PharmacodynamicparametersofTongshuan
JiuxinTabletandTongshuanJluxinpH—
DependentDelayed—releaseCapsulaindogs
aftersingleig(咒=8)
其在血液或其他组织中浓度是一种成熟的方法[6]。
但因中药复方成分复杂，检测成分的药动学不一定
能代表其他成分的体内过程，中药复方疗效的物质
基础应为复方中化学成分的总和。为使研究结果具
有代表性，本实验选择丹皮酚为药效成分进行血药
浓度测定，同时采用生物效应法同步进行复方中药
的药动学研究。
通栓救心pH依赖型缓释胶囊具有开窍豁痰，
理气宽胸，活血止痛之功效，临床用于心肌缺血引起
的心绞痛、胸闷和心肌梗死。动物实验研究表明其具
有扩张蔻状动脉、增加冠脉血流量等作用。因此，本
实验选用给药后5min内每分钟冠脉流量为指标反
映该制剂的主要作用，并且与临床用药目的相一致，
实验进一步证明，该指标与剂量之间有显著相关性。
血药浓度法体内药动学实验结果表明，用
HPMC包衣的微丸在胃内迅速崩解释药，因此口服
后在血浆中很快检测到丹皮酚，且具有较高的血药
浓度，随着微丸在胃肠道转运和生理pH值变化，不
同pH依赖型微丸分别在十二指肠，小肠中、末端释
药，因此，丹皮酚的药时曲线有时候出现双峰现象。
由结果可知，缓释制剂相对于参比制剂，t。。延
迟，C。；降低，通栓救心pH依赖型缓释胶囊中丹皮
酚的MRT为8．04h，远远大于通栓救心片(2．89
h)，说明缓释胶囊体内的停留时间远远大于片剂。
从药时曲线中也可看出，其c。。；明显降低，在服药后
3～8h尚能维持较高的血药浓度，整个药时曲线相
当于分剂量多次给药，达到了缓释效果。
本实验以犬服药后不同时问取血浆作为含药血
浆，测定其对豚鼠冠脉流量的影响，并作出时间一效
应曲线，进行药动学参数的计算。时一效曲线显示，该
万方数据
中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·699
缓释制剂在体内具有起效迅速、药效缓和而持久的
特征，时间效应过程的统计矩结果表明，其体内平均
滞留时间为11．27h，大于通栓救心片(5．94h)。相
对生物利用度为129．1％，与血药浓度法测得的数
据(126．3％)基本一致。
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HPLC法研究泻心汤中大黄和黄芩配伍的活性成分变化
何毓敏1，张 艺”，盂宪丽2，王 平2，王毓杰1，熊玉霞2
(1．成都中医药大学民族医药研究所，四川成都611730；2．成都中医药大学药理研究室，四川成都611730)
摘 要：目的 研究泻心汤中大黄和黄芩配伍前后的活性成分变化。方法 采用HPLC法对两药合煎液和单煎混
合液的各峰进行检测和分析，并对两药合煎液和单煎混合液中黄芩苷、大黄素等活性成分进行测定和动态分析。结
果大黄与黄芩配伍合煎后产生了活性成分的动态变化。结论 中药复方配伍并非是单味药的简单加合，本实验
结果有助于阐明泻心汤的化学成分基础。
关键词：泻心汤；大黄；黄芩；配伍
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)05—0699—04
EffectivecomponentchangesincompatibilityofRadixetRhizomaRhei
withRadixScutellariaeinX exinDecoction
HEYu—minl，ZHANGYil，MENGXian—li2，WANGPin92，WANGYu—jiel，XIONGYu—xia2
(1．InstituteofE hnomedicine，ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine，Chengdu611730，China；2．Research
LaboratoryofPharmacology，ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine，Chengdu611730，China)
Abstract：ObjectiveToexplorethchemicalcomponentschangesincompatibilityofRadixetRhi—
zomaRheiwithRadixScutellariaeinX exinDecoction．MethodsHPLCChromatogramswe eusedto
studythepeakchangesofsingleandco—decoctionofRadixetRhizomaRheiwithRadixScutellariae，as
wellastheffectivecomponentsweredeterminedandanalysed．ResultsThesignificantchangesofbaica—
clin，rhein，emodin，chrysophanol，andphyscionhadbeenfou ．ConclusionCompatibilityofChinese
herbalmedicinesdo n7tmeanaddingsingleherbsimplyandthistestisjustanattempttoelucidatethe
chemicalfoundationofXiexinDecoction．
Keywords：XiexinD coction；RadixetRhizomaRhei；RadixScutellariae；compatibility
泻心汤由大黄、黄连和黄芩3味药组成，是经典
的清热解毒方剂，临床治疗急性感染性疾病的疗效
确切。拆方研究表明，泻心汤中大黄与黄芩配伍的抗
内毒素作用大于全方及大黄和黄芩单用时的情
况叫。因此，本实验采用HPLC法研究大黄与黄芩
配伍前后化学成分的变化，为后期的药效学研究提
供依据。
1仪器与试药
HP1100高效液相色谱系统：四元梯度泵、柱恒
温系统、自动进样器、二极管阵列检测器，ChemSta一
收稿日期：2006—08—16
基金项目：国家自然科学基金项目(30371765)
作者简介：何毓敏(1980一)，男，浙江湖州人，现工作于兰峡大学医学院。Tel：(0717)6396818E—mail：hym0811@163．com
*通讯作者张艺Tel：(028)88849811E—mail：9006zmyr@cdutcm．edu．ca
万方数据
通栓救心pH依赖型缓释胶囊在犬体内的药动学和药效学研究
作者： 于叶玲， 郑昕， 唐星， YU Ye-ling， ZHENG Xin， TANG Xing
作者单位： 沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(5)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200705021.aspx