全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·213·
HPLC法测定蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素
黄海燕，丁安伟+，张 丽
(南京中医药大学，江苏南京210029)
蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲Typhaangustifolia
L．、东方香蒲T．orientalisPresl或同属植物的于燥
花粉。具有止血、化瘀、通淋等作用。蒲黄的用药记载
始于《神农本草经》，经炮制后用药首载于《日华子本
草》，《中国药典》2005年版仅对蒲黄生品作了定量限
定[1]。本课题组通过药效学实验筛选发现蒲黄炭的总
黄酮是其止血的主要活性部位。因此本实验采用
HPLC法对蒲黄炭酸水解后的3种黄酮苷元槲皮素、
异鼠李素、山柰素进行了测定[2’3]。
1仪器与材料
Waters515高效液相色谱仪，Waters2487双
波长紫外检测器，Empower色谱工作站；日本岛津
AY220电子天平，KQ一500型超声波清洗器；
蒲黄药材分别购自南京医药股份有限公司、安
徽省毫州市永刚饮片有限公司、上海华宇药业有限
公司，产地分别为江苏、内蒙、宁夏，经本院中药鉴定
教研室吴启南教授鉴定均为水烛香蒲丁．
angustifoliaL．的干燥花粉。药材210℃炒制8min
得到蒲黄炭。
异鼠李素(批号110860—200205)、槲皮素(批号
10081—9905)、山柰素(批号100861—200303)对照品
均购自中国药品生物制品检定所。甲醇、三氟乙酸为
色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：SymmetryC18色谱柱(150mm×
3．9mm，5_um)(美国Waters公司)；柱温：30℃；流
动相：甲醇一0．05％三氟乙酸水溶液一四氢呋喃(19：
61：20)；体积流量：0．8mL／min；检测波长：360nm。
2．2供试品溶液的制备：取蒲黄炭样品1．5g，精密
称定，置250mL烧瓶中，精密加入甲醇一25％盐酸
(4：1)100mL，密塞，称定质量，于沸水浴中回流1
h，取出，放冷，再称定质量，以甲醇补足损失的质
量，摇匀，滤过，取续滤液用0．45fzm滤膜滤过，作
为供试品溶液。
2．3对照品溶液的制备：取120℃减压干燥至恒重
的槲皮素、异鼠李素、山柰素对照品适量，精密称定，
置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得槲皮素、
异鼠李素、山柰素质量浓度分别为3．3、17．8、3．9
弘g／mL的混合对照品溶液。
2．4 线性关系的考察：取混合对照品溶液依次对半稀
释，得到5个质量浓度水平的混合对照品溶液，其中槲
皮素6．6、3．3、1．7、0．8、0．4pg／mL，异鼠李素35．6、
17．8、8．9、4．5、2．2>g／mL，山柰素7．8、3．9、2．0、
1．0、0．5弘g／mL，精密量取10肚I。进样测定峰面积。以
峰面积均值为纵坐标，质量浓度为横坐标绘制标准曲
线，其线性范围、回归方程和相关系数见表1。
表1 3种黄酮苷元的线性回归方程
Table1 Linearregressionequationforthree
flavonoidglycosides
组分线性范N／(pg·mL_1)回归方程 r
2．5精密度试验：取槲皮素、异鼠李素、山柰素质量
浓度分别为1．7、8．9、2．0弘g／mL的混合对照品溶
液重复进样5次，槲皮素、异鼠李素、山柰素峰面积
的积分值RSD分别为0．80％、1．93％、1．10％。
2．6稳定性试验：取室温贮存的内蒙产蒲黄炭供试
品溶液分别于0、4、8、12、16、24h测定槲皮素、异鼠
李素、山柰素的峰面积，计算质量分数。结果供试品
溶液在24h内基本稳定，3个成分质量分数的RSD
分别为2．81％、2．87％、1．88％。
2．7重现性试验：取同一样品粉末(内蒙产样品)，
精密称取5份，制备供试品溶液，进样测定槲皮素、
异鼠李素、山柰素的峰面积，计算质量分数。结果3
个成分质量分数的RSD分别为0．40％、0．43％、
1．85％。
2．8加样回收率试验：取内蒙产黄炭6份，每份各
0．75g，精密称定，两份1组，各组分别加入槲皮素、
收稿日期：2006—04—02
基金项目：“十五”国家科技攻关项目(2001BA701A55—27)
作者简介：黄海燕(1981一)，女，江苏南通人，2004级中药学硕士，主要从事中药炮制及复方研究。
Tel：(025)86060702E—mail：nzydahuang@yahoo．com．cn
*通讯作者 丁安伟Tel：(025)51997178E—mail：awding@hotmail．com
万方数据
·214· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
异鼠李素、山柰素质量浓度分别为44．8、353．2、94．
9tzg／mL的混合对照品溶液0．8、1．0、1．2mL，制备
供试品溶液，进样测定。结果槲皮素、异鼠李素、山柰
RSD分别为1．70％、2．50％、2．19％。
2．9样品的测定：分别精密吸取混合对照品溶液、
供试品溶液各10弘L，进样测定，以峰面积按外标法
素的平均回收率分别为98．0％、98．0％、100．9％，计算，结果见表2，色谱图见图1。
表2蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素的测定结果(n一2)
Table2 Quercetin．isorhamnetin。andkaempferolP llenTyphaeCarbonisatus(肛一2)
产地 批号
／(mgmL
产槲皮素批号异鼠李素分数山柰素。“L一1)
质量分数 · 1)
槲皮素 异鼠李素 山柰素
内蒙 nmll 0．0381 0．4083 0．0824 江苏 jSl0 0．1272 0．7152 0．1720
内蒙 nml2 0．0749 0．6457 0．0742 江苏 js20 0．133l 0．7190 0．1730
内蒙 nml3 0．0532 0．4168 0．0487 宁夏 nxl0 0．081 0．4741 0．1272
内蒙 nm20 0．0399 0．3594 0．1253 宁夏 nx20 0．0728 0．5023 0．1527
内蒙 nm30 0．0665 0．4145 0．0994 宁夏 nx30 0．1172 0．6648 0．171
A
0
j ／I i
L—————————一L——』古—<上}—
0 4 H 12 16 20 0 4 g 12 16 2(J
t／mIn
1槲皮素 2一异鼠李素 3一山柰素
1 quereetin2 sorhamnetin3-kaempferol
图1 混合对照品(A)和蒲黄炭样品nmll(B)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramofmixedreference
substances(A)andPollenTyphae
Carbonisatussamplenmll(B)
3讨论
3．1 对供试品溶液制备条件进行了考察。考察了取
样量1．0、1．5、2．0g，发现1．0、1．5g取样量下黄酮
水解都较完全，但1．0g取样量的峰面积较小，不在
线性范围内，故确定取样量为1．5g。同时比较了不
同加热温度(80、90、100℃)和不同水解时间(30、
60、90min)，结果表明100℃，60min条件下可将
蒲黄中黄酮水解完全，故选择100℃回流1h。另外
对水解酸度的考察时，对CH。oH一25％HCl比较了
(7：1)、(5：1)、(4：1)、(3：1)、(2：1)，结果发现
(4：1)、(3：1)、(2：1)对黄酮苷水解程度相当，但
高酸度对色谱柱和管路都有损害，故选择了
CH。0H一25％HCl(4：1)比例。
3．2本实验建立的3种黄酮苷元的HPLC测定方
法，可作为考察工艺的指标，同时可作为控制炒蒲黄
的内在质量。
3．3通过药效学实验筛选发现炒蒲黄的总黄酮是
其止血的主要活性部位，10批炒蒲黄的HPLC测定
结果表明，产自内蒙的黄酮苷元的量相对较高，因此
止血疗效较好。
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PollenTyphae[J]．ChinJPharmA al(药物分析杂志)，
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HPLC法测定舒筋活血片中杠柳毒苷
杨 虹，刘 虹，孙 巍 王 萌，何俊，高秀梅
(天津中医药大学中医药研究中心，天津300193)
舒筋活血片由红花、泽兰叶、香附、香加皮等10
味药组成，具有舒筋活络、活血散瘀之功效，用于筋
骨疼痛、肢体拘挛、腰背酸痛、跌打损伤。该药作为一
种治疗跌打损伤的内服药物，在临床上有一定应用
范围。本制剂中含有香加皮Periplocasepium
Bunge，又名北五加皮、杠柳皮，祛风湿、强筋骨，主
收稿日期：200604—03
基金项目：天津市高等学校科技发展基金项目(20050310)；天津市卫生局中医、中西医结合科研基金(2005072)；天津市科委应用基础研
究计划项目(05YFJZJC01102)
作者简介：杨虹(198l一)，女，天津人，天津中医药大学中医药研究中心硕士研究生，毕业于天津医科大学药物制剂专业，研究方向为
中药化学。Tel：(022)23051114Email：yangwawa811228@163．com
万方数据
HPLC法测定蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素
作者： 黄海燕， 丁安伟， 张丽
作者单位： 南京中医药大学,江苏,南京,210029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(2)
被引用次数： 5次

参考文献(4条)
1.中华人民共和国药典（一部） 2005
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4.Liu B;Lu Y R HPLC Determination of two flavonoids in Pollen Typhae[期刊论文]-药物分析杂志 1998(02)

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2. 李震.王慧娟.郭东贵 蒲黄药理活性的研究进展[期刊论文]-医药论坛杂志2008,29(9)
3. 张淑敏.曲桂武.解飞霞.邱鹰昆.王培培 蒲黄化学成分研究[期刊论文]-中草药2008,39(3)
4. 席先蓉.李寿星 蒲黄及不同炮制品中总黄酮和多糖含量分析[期刊论文]-中国中药杂志2000,25(1)
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6. 莫文电.覃忠于.黄月莉.覃丽郦 蒲黄的研究进展[期刊论文]-今日药学2009,19(8)
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8. 邓丽莉 中药蒲黄的药理研究进展[期刊论文]-科技与生活2010(4)
9. 陈才法.缪进.顾琪.郑维发.CHEN Cai-Fa.MIAO Jin.GU Qi.ZHENG Wei-Fa 蒲黄提取物对汞损伤SD大鼠原代培养
神经细胞抗氧化能力的影响[期刊论文]-解放军药学学报2006,22(5)
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引证文献(5条)
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4.王荣荣.顾佼佼.马跃平.刘瑀曦.陈芳芳.刘晓秋 对《中国药典》2005年版蒲黄薄层鉴别、检查项修订的研究[期
刊论文]-中国药品标准 2010(2)
5.莫文电.覃忠于.黄月莉.覃丽郦 蒲黄的研究进展[期刊论文]-今日药学 2009(8)


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