全 文 ：3　讨论
　　槲皮素在体外实验中可抑制乳腺癌、卵巢癌、结
肠癌、肝癌、胃癌、白血病等多种恶性肿瘤的生长。机
制可能与下列因素有关: 阻滞细胞周期、抑制肿瘤细
胞信号传导、调节生长因子等导致细胞增殖抑制; 诱
导肿瘤细胞发生凋亡及分化等[6, 7 ]。
　　本研究M T T 实验显示: 槲皮素对 ER 阳性
M CF27 细胞的增殖有明显的抑制作用, 并呈时间及
浓度依赖性。实验测得槲皮素对M CF27 细胞的
IC 50为 15154 Λmo löL。PCNA 是反映细胞增殖的指
标, S 期合成最多, 免疫细胞化学检测结果表明用药
组 PCNA 指数明显低于对照组, 提示槲皮素可通过
降低 PCNA 蛋白质表达抑制癌细胞DNA 生长, 从
而抑制细胞增殖。槲皮素 25 和 50 Λmo löL 作用 48
h 后, G0öG1期细胞较对照组明显增高, 故认为槲皮
素可引起M CF27 乳腺癌细胞 G0öG1期阻滞。槲皮
素具有诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。倒置显微镜下
动态观察槲皮素诱导凋亡的作用, 25 Λmo löL 作用
48 h, 可见到典型的凋亡细胞, 随作用时间延长, 凋
亡细胞数量明显增多。100 Λmo löL 槲皮素作用 24 h
后可见大量的凋亡细胞及悬浮不透亮的死细胞, 随
作用时间延长, 悬浮死细胞明显增多。在光镜下, H E
染色显示同样的结果。提示随着槲皮素浓度增加或
作用时间延长, 可见凋亡细胞发生继发性坏死, 表明
凋亡在一定的条件下可转化为坏死。
通过流式细胞仪观察到: 槲皮素作用 48 h 后诱
导凋亡, 随药物浓度增加, 凋亡率也随之增加, 而对
照组均未检测到凋亡细胞。槲皮素可抑制乳腺癌细
胞增殖, 引起 G0öG1周期阻滞, S 期细胞数目下降,
并诱导其凋亡, 这为其应用于临床提供了依据。
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六味地黄颗粒剂与丸剂的药效学研究
高瑞峰1, 于永芳2, 李沈明3Ξ
(11 承德医学院附属医院, 河北 承德　067000; 21 承德医学院中药研究所,
河北 承德　067000; 31 承德中药厂, 河北 承德　067000)
　　六味地黄丸 (简称丸剂) 是传统的中成药, 由
熟地黄、山药、山茱萸、泽泻、茯苓、牡丹皮 6 味中药
材经粉碎后用蜂蜜配制而成。在临床上曾发挥了卓
越的效能, 但随着医药科技的进步, 发现其有作用
慢, 含糖不利于糖尿病患者服用, 水分高易于霉变、
不利于贮存等缺点。六味地黄颗粒剂 (简称颗粒剂)
取代了传统剂型, 既保留了原药成分含量高的优点,
又有用量小、口感好、起效快、疗效高等特点。本实验
就两种剂型在药效学上的差异进行了研究。
1　材料
　　地黄、山药 (购于河南省温县医药公司) , 山茱
萸、泽泻、茯苓、牡丹皮 (购于河北省承德市医药公
司) , 均由承德医学院中药研究所于永芳副主任药师
鉴定。山茱萸、牡丹皮用 95% 乙醇提取 2 次, 浓缩
到 300 mL 备用, 提取过的山茱萸、牡丹皮与其他 4
味中药用水煎煮 2 次, 浓缩到 150 mL 后, 加 2 倍量
95% 乙醇搅拌, 放置 24 h, 滤过。回收乙醇, 浓缩, 加
甜蜜素 110 g、糊精 300 g 混匀, 烘干, 粉碎成 80～
·37·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2003204225
作者简介: 高瑞峰 (1953—) , 男, 河北省承德市人, 副主任药师, 执业药师, 副主任, 学科带头人, 研究方向为临床药学及中药药理。
100 目细粉。加 176 g 糊精, 用山茱萸、牡丹皮提取
的浓缩液制成软材, 制粒, 70 ℃ 烘干, 整粒, 即得到
颗粒剂 (每克颗粒剂相当于原药材 2 g)。丸剂, 购于
焦作市第二中药厂, 批号 951012。
2　方法与结果
211　对小鼠游泳耐力的影响: 取昆明种小鼠 (购自
北京实验动物中心) , 体重 (20±2) g, 雌雄兼用, 随
机分为: 颗粒剂大、小剂量组 (20, 10 gökg) , 丸剂
大、小剂量组 (20, 10 gökg) , 对照组 (等体积生理盐
水) , 每组 20 只。各组每天 ig 给药 2 次, 连续 7 d,
实验前 1 h 再 ig 1 次。实验开始在小鼠尾根部负荷
(10% 体重) , 依次从各组取 2 只小鼠一同放入 28
℃ 水中, 观察小鼠游泳耐力, 以沉下不能浮起到水
面时, 为游泳时间, 结果用 t 检验统计 (下同)。实验
结果表明, 颗粒剂和丸剂大、小剂量组与对照组比
较, 均增加了游泳时间, 增强了耐力, 且颗粒剂比丸
剂作用强。
表 1　六味地黄颗粒剂与丸剂对小鼠
游泳耐力的影响 (x±s, n= 20)
Table 1　Effect of granula and p ill of L iuwe i-
dihuang on swimm ing endurance
capac ity of m ice (x±s, n= 20)
组　别 剂量ö(g·kg- 1) 游泳时间öm in
对照 - 　　　52130± 61853
颗粒剂 20 79130±121263 3 3
10 68175± 81193 3 3
丸剂 20 71105± 91133 3 3
10 59180± 8170
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 3 P < 01001
　　3 P < 0105　3 3 3 P < 01001 vs con tro l group
212　对小鼠自主活动的影响: 实验分组及给药方法
同 211 项。实验前给药 1 次后, 以 GL —1 光电记数
仪测定小鼠 5 m in 的自主活动次数, 每组小鼠均于
给药前 7 d 以同样方法测定药前的自主活动次数。
结果表明, 颗粒剂与丸剂有抑制小鼠自主活动的中
枢镇静作用。颗粒剂比丸剂作用显著, 丸剂小剂量组
作用不明显。见表 2。
213　对小鼠碳粒廓清率的影响: 取昆明种小鼠随机
分为: 颗粒剂大、小剂量组, 丸剂大剂量组, 对照组。
每组 15 只小鼠。给药方法同 211 项, 于实验前 1 h
给药 1 次, 各组小鼠分别由尾 iv 生理盐水稀释的印
表 2　六味地黄颗粒剂与丸剂对小鼠自主
活动的影响 (x±s, n= 20)
Table 2　Effect of granula and p ill of L iuwe id ihuang
on autonom ic activ ity of m ice (x±s, n= 20)
组别
剂　量ö(g·kg- 1) 活动次数ö(次·5 m in- 1)药前 药后 减少次数
对照 - 21712±3712 20018±3017 1615±1010
颗粒剂 20 20113±2711 14113±1516 6010±34133 3 3
10 20810±2511 17214±3414 3414±17143
丸剂 20 21019±1916 16816±1713 4013±19163 3
10 21919±2118 19015±1618 2917±1717
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101　3 3 3 P < 01001
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101　3 3 3 P < 01001 vs con tro l group
度墨汁 011 mL ö10 g, 分别于 iv 后 2, 20 m in 由眼
眶取血 012 mL , 用 011% 碳酸钠溶液稀释至 210
mL 摇匀后, 用 753 分光光度计测定吸光度 (A )
值, 按公式计算吞噬指数 K 值。结果见表 3。颗粒剂
与丸剂均能提高小鼠碳粒廓清率, 提示均能增强小
鼠网状内皮系统的吞噬能力, 且颗粒剂比丸剂作用
显著。
K = (lgA 1- lgA 2) ö( t1- t2)
式中A 1为 2 m in 时血样的吸光度; A 2为 20 m in 时血样
的吸光度; t1为 2 m in; t2为 20 m in。
表 3　六味地黄颗粒剂与丸剂对小鼠
碳粒廓清率的影响 (x±s, n= 15)
Table 3　Effect of granula and p ill of L iuwe id ihuang on
carbon clearance rate of m ice (x±s, n= 15)
组　别 剂量ö(g·kg- 1) 吞噬指数öK
对照 - 　　　0100254±0100140
颗粒剂 20 0100921±01003303 3 3
10 0100703±01001983 3 3
丸剂 20 0100594±01002533 3 3
　　与对照组比较: 3 3 3 P < 01001
　　3 3 3 P < 01001 vs con tro l group
3　讨论
　　本实验结果表明, 颗粒剂与丸剂均增强了小鼠游
泳耐力, 且颗粒剂比丸剂作用效果显著, 两者均有抑
制小鼠自主活动的中枢镇静作用, 颗粒剂大剂量组与
丸剂大剂量组比较差异显著 (P < 0105) , 表明颗粒
剂比丸剂作用显著, 丸剂小剂量组作用不明显。颗粒
剂与丸剂均能提高小鼠碳粒廓清率, 提示两者均能增
强小鼠网状内皮系统的吞噬能力, 而颗粒剂比丸剂作
用显著。实验结果表明颗粒剂比丸剂效果好。
保 护 植 被 　 造 福 人 类
·47· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月