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紫外分光光度法测定松果菊提取物中多酚



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 649·
紫外分光光度法测定松果菊提取物中多酚
杨雁芳,艾铁民
(北京大学药学院,北京100083)
松果菊Echinaceapu矽urga(L.)Moench为菊
科松果菊属药用植物,原产北美,是印第安人的传统
药材。由于其具有显著的抗感染与免疫促进作用.近
年来在西方应用广泛,成为闻名世界的“免疫”草药。
国内外有关松果菊的化学成分的研究报道较多,证
实其含有多糖、多酚、咖啡酸衍生物、挥发油、烷基酰
胺、类黄酮等成分““]。目前我国学者对松果菊的药
用研究和质量控制越来越重视,已有报道对松果菊
中的菊苣酸、松果菊苷和挥发油进行测定“”。。本实
验采用紫外分光光度法测定了松果菊提取物中的多
酚,进一步完善了松果菊的质量标准研究。
1材料与仪器
松果菊提取物由北京市怀柔区药用植物研究所
提供。LingGuanguV一752型分光光度计(上海精
密科学仪器有限公司)。试剂均为分析纯,没食子酸
对照品购自Sigma公司(质量分数为98.7%)。
2方法与结果
2.1对照品溶液的制备:精密称取没食子酸对照品
25mg于50mL量瓶中,丙酮一水(1t )溶解并加至
刻度,得到0.5rag/mL的对照品溶液。精密吸取该
溶液lmL于10mL量瓶中,加入丙酮一水(1t 1)至
刻度,配成50pg/mL对照品溶液。
2.2供试品溶液的制备:取松果菊提取物0.2g,精
密称量,加入80mL丙酮一水(1;1),置水浴中微沸
浸提30rain后,趁热抽滤。冷却后定容至100mL。
2.3标准曲线的制备:精密吸取上述对照品溶液
0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于25mL量瓶中,依次
加入0.100mol/L三氯化铁溶液0.5mL、0.008
mol/L铁氰化钾溶液0.5mL和0.10mol/L盐酸
溶液0.5mL,定容,得到不同浓度的对照品溶液。同
时在25mL量瓶中加入0.100mol/L三氯化铁溶
液0.5mL、0.008mol/L铁氰化钾溶液0.5mL和
0.10mol/L盐酸溶液0.5mL,定容后得到空白溶
液。随行空白,在695nm波长处测定吸光度。以对
照品的质量浓度为纵坐标,吸光度为横坐标,绘制标
准曲线,得线性回归方程c=2.1066A一0.0602,
r一0.9996,结果表明没食子酸在0.4~2.0pg/mL
时,质量浓度与吸光度呈良好的线性关系。
2.4精密度试验:取同一份供试品溶液测定吸光
度,共测5次,结果RSD为0.53%(n一5)。
2.5稳定性试验:取一份样品按上述方法制备成供
试品溶液,于0、0.5、1、1.5、2h分别测定,吸光度值
RsD为1.42%“一3)。
2.6重现性试验:取同一批样品,精密称取5份,测
定吸光度并计算多酚的质量分数,结果RSD为
2.01%“一5)。
2.7 回收率试验:采用加样回收法。精密称取第1
批松果菊提取物0.1g,加入0.5mg/mL对照品溶
液3mL,按上述样品制备和测定方法测定吸光度,
并计算多酚,结果平均加样回收率为96.7%,RSD
为2.83%(”一5)。
2.8样品测定:精密吸取供试品溶液0.5mL于25
mL量瓶中,依次加入0.100mol/L三氯化铁溶液
0.5raI一0008mol/L铁氰化钾溶液0.5mI。和
0.t0mol/L盐酸溶液0.5mL,定容。按标准曲线的
制备项下的方法制备空白溶液。随行空白,在695
/1m波长处测定吸光度,并根据标准曲线计算样品
中的多酚。按上述样品制备及测定方法测定了5批
样品中的多酚,结果见表I。
裹I松果菊提取鞠中多酚谢定结果(Ⅳ一3)
Table1 Determinationofoolyphenol
InEpurpureaextract(H=3)
批号 害酚/蛞
1.93
2.43
1.41
1.84
1.68
3讨论
3.1 植物多酚的定量方法中较为普遍使用的有
Folin一酚法、普鲁士蓝法、高锰酸钾法、酒石酸亚铁
器薯岳算:嚣篷善W昌5一),女,浙江诸暨人,讲师.硕jz.2000年毕业于北商中医药大学,主要从事中草药韵化学成分和质量研究
Tel:(010)82801559E—mail:yangyanfan901@yahoo·COrn·c“
万方数据
·1650· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
法等,其中普鲁士蓝法测定总多酚较其他方法灵
敏[⋯。本实验采用该方法测定总多酚时,溶液体系均
一,工作曲线线性良好,故选用普鲁士蓝法。
3.2不同的提取溶剂对多酚的提取能力有明显的
不同,进而会直接影响多酚含量的测定。文献报道有
机溶剂和水的复合体系比较适合多酚的提取,尤以
丙酮一水(1:1)最适合口’。]。本实验对水和丙酮一水
(1;1)的提取效果进行了比较,并进行了水浴和超
声提取方法比较以及提取时间的考察,最终确定以
丙酮一水溶液(1t 1)水浴浸提30min作为样品提取
的方法。
3.3松果菊中的多酚类成分研究较少,对照品的购
买和分离难度较大,无法用HPI。C等现代手段进行
定量分析。采用紫外分光光度法测定松果菊提取物
中的多酚是简单可行的好方法。
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紫外分光光度法测定丰城鸡血藤中总黄酮
余燕影1,彭志兵”,曹树稳2
(1.南昌大学化学系,江西南昌 330047,2.南昌大学食品科学教育部重点实验室t江西南昌330047)
丰城鸡血藤,又名香花崖豆藤Millettlanitida
Benth.var.hirsutissimaz.Wei,为江西特色中药
材,具有悠久的入药历史。丰城鸡血藤具有抗凝血
酶、促进纤维蛋白溶解,延长优球蛋白溶解时间等作
用,对凝血系统具有一定的影响;此外对肝细胞
DNA具有促进复制作用,从而促进肝细胞再生,恢
复肝功能“]。黄酮类化合物为丰城鸡血藤主要活性
成分之一口]。目前,天然产物中黄酮类化合物的测定
方法主要有高效液相色谱法[31和比色法“]。高效液
相色谱法主要用于测定单一黄酮类成分l比色法主
要用于测定总黄酮,而比色法大多以芦丁为对照品,
采用NaN0。一Al盐一Na0H显色体系在可见光区测
定。已有文献报道此方法测定总黄酮专属性差[5]。本
实验根据丰城鸡血藤中黄酮化合物主要成分的结构
特征和光谱特性,在上述方法的基础上进行改进,采
用紫外分光光度法测定,结果满意。
1仪器、试剂与材料
Tu一1800紫外可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司)。试剂均为分析纯,所用水均
为一次蒸馏水。芦丁对照品购白中国医药(集团)上海
化学试剂公司。丰城鸡血藤采自江西省丰城市罗山
乡,经南昌大学生物系植物教研室杨柏云教授鉴定。
2方法与结果
2.1测定波长的选择;将芦丁对照品和供试品溶液
按实验方法操作.在200~600am进行波长扫描。
结果表明,对照品和供试品的络合物在271Nm处
有最大吸收,且光谱形状极为相似,形成的络合物在
常温下稳定性较好,满足分光光度法测定的基本要
求,因此,选定271nm作为测定波长。
2.2 pH值的影响:试验了不同酸度条件下对络合
物吸光度的影响,见图1。结果表明,在pH2~11
时,溶液的吸光度最大且稳定。故选在中性条件下进
llil{lll祷善96学3--基)龛妻墨磊星鬟芰:留鐾袭写要蠹蕊嘉磊葬器磊丞磊器器譬棼碧爱鸯刍括性研究。作者筒介。泉燕髟(1 ,女t江西金溪人,副教授,主要从事天然产物活性成分分离分析及生物括性研究。
*南昌大学2004届毕业生
万方数据
紫外分光光度法测定松果菊提取物中多酚
作者: 杨雁芳, 艾铁民
作者单位: 北京大学药学院,北京,100083
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(11)
被引用次数: 11次

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