全 文 ：趋势减小。进料速率为 90 mL öh, 蒸馏温度为 100
℃, 操作压力为 013 Pa 时进料温度对 Α2亚麻酸纯度
的影响见图 3。
酸纯度的影响见图 4。
图 4　刮膜器转速对 Α-亚麻酸纯度的影响
F ig. 4　Effects of rotating speed on pur ity
of Α- l inolen ic ac id
316　分离级数的影响: 为了得到高纯度的 Α2亚麻
酸产品, 单级操作无法满足要求, 这时就要进行多级
操作。研究发现经过 4 级操作, Α2亚麻酸含量可以从
7015% 上升到 8213% , 见表 1。
表 1　各级 Α-亚麻酸含量随蒸馏级数的变化
Table 1　Changes of var ious Α- l inolem ic ac id
a long with distilla tion frequency
蒸馏级数 温度ö℃ 压力öPa Α2亚麻酸含量ö% Α2亚麻酸收率ö%
1 90 2. 0～ 2. 3 70. 5 96. 7
413　应用短程蒸馏技术提纯亚麻酸比其他提纯方
法操作简便、步骤少、效率高, 容易实现产业化。
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科技) , 2000, 25 (6) : 462481
参麦冻干粉针剂中细菌内毒素检查干扰试验
苟　虹, 程一帆Ξ
(重庆市中医研究院, 重庆　400013)
摘　要: 目的　对参麦冻干粉针中细菌内毒素检查干扰试验进行研究, 证明使用细菌内毒素检查法 (BET ) 的可行
性。方法　用干扰初筛试验和干扰试验考察参麦冻干粉针对BET 有无干扰, 并寻求排除干扰的方法。结果　使用Κ为 015 EU ömL 的鲎试剂有抑制作用, 使用 Κ为 0125 EU ömL 的鲎试剂, 供试品溶液作适当稀释可消除干扰。结论
参麦冻干粉针的细菌内毒素检查应使用灵敏度为 0125 EU ömL 或更高灵敏度的鲎试剂。
关键词: 参麦冻干粉针; 细菌内毒素检查法; 干扰试验
中图分类号: R 2861012　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0266 03
·662· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003205230
基金项目: 国家新药基金开发项目 (92211210) ; 国家科技部科技型中心企业技术创新基金资助项目 (00C26215110425)
In terference test in bacter ia l endotox in s detection of Shenma i Freeze-dr ied Powder In jection
GOU Hong, CH EN G Y i2fan
(Chongqing Inst itu te of T radit ional Ch inese M edicine, Chongqing 400013, Ch ina)
Abstract: Object　To p rove the feasib ility of bacteria l endo tox in test (BET ) in Shenm ai F reeze2dried
Pow der In ject ion by in terference test. M ethods　 In terference p rim ary screen ing test and in terference test
w ere conducted in BET of Shenm ai F reeze2dried Pow der In ject ion to detect w hether the in terference ex isted
o r no t and to exp lo re the m ethod of removing the in terference. Results　T here w as inh ib it ion on BET w ith
015 EU ömL tachyp leu s am ebocyte lysa te (TAL ). In terference cou ld be excluded by u sing 0125 EU ömL
TAL d dil t i th l C l i 　 It i f ib l t 0 25 EU öL TAL TAL ith
成药的差距。为了验证参麦冻干粉针应用BET 法的
可行性, 本实验对参麦冻干粉针的BET 干扰试验进
行了研究。
1　材料与仪器
参麦冻干粉针, 规格 30 m gö瓶 (用 30 mL 注射
用糖水或盐水溶解) , 批号: 20020801, 20020802,
20020803, 20021017, 20021105, 20030121,
20030129, 由重庆市中医研究院研制。鲎试剂
(TAL ) (福州东方鲎试剂厂、湛江海洋生物制品厂
产品) , 灵敏度 Κ= 0125 EU ömL : 批号 20000808 (东
方 ) , 20000809 (东方) , 20021109 (海洋) , 20030610
(海洋) ; Κ= 015 EU ömL : 批号 20000815 (东方) ,
20010608 (东方) , 20021022 (海洋) , 20030403 (海
洋)。细菌内毒素工作标准品 (CSE, 湛江安度斯生物
有限公司) : 效价为 12 EU ö支, 批号: 0110222; 效价
为 10 EU ö支, 批号: 0304010。细菌内毒素检查用水
(BET 水) : 2 mL öAmp , 湛江海洋生物制品厂, 批
号: 010719, 标示的内毒素含量< 0103 EU ömL , pH
618～ 712。
　　检查用的刻度吸管及器皿经 250 ℃, 115 h 干
热灭菌。旋涡混合器XW —80A (上海医科大学仪器
厂) , HH S—112—5 电热恒温水浴锅 (上海医疗器械
五厂)。
2　方法与结果
211　TAL , CSE 标示值复核: 经重庆市药品检验所
复核, 符合规定。
212　TAL 灵敏度复核试验: 按《中华人民共和国药
(东方) 　　　
20002809 (东方) 　　　0. 25 0. 25
20021109 (海洋) 　　　0. 25 0. 30
20030610 (海洋) 　　　0. 25 0. 27
20000815 (东方) 　　　0. 5 0. 42
20010608 (海洋) 　　　0. 5 0. 50
20021022 (海洋) 　　　0. 5 0. 59
20030403 (海洋) 　　　0. 5 0. 42
213　参麦冻干粉针的干扰初筛试验
21311　参麦冻干粉针的细菌内毒素理论限值 (L ) :
参麦冻干粉针为静脉注射固体制剂, 成人最大剂量
(M ) 为 90 m gö60 kg= 115 m gö(kg·h) ; 细菌内毒
素阈值 (K ) 为 510 EU ö(kg·h) , 则L = K öM = 510
EU ö(kg·h)÷115 m gö(kg·h) = 3133 EU öm g。
21312 　参麦冻干粉针的最大有效稀释倍数
(M VD ) : 鲎试剂灵敏度的选择可以在 0103～ 015
EU ömL , 根据常用和方便选择了 Κ为 0125 EU ömL
和 015 EU ömL 的 TAL , 供试品的最大有效稀释倍
数按M VD = CL öΚ计算。用灵敏度为 0125 EU ömL
的 TAL :M VD = 13132; 用灵敏度为 015 EU ömL 的
TAL :M VD = 6166。
21313　供试品溶液的稀释: 采用二倍稀释系列, 用
BET 水把样品稀释至半最大有效稀释浓度附近, 配
制相同系列浓度的 S 液两组, 稀释倍数分别为 1, 2,
4, 8, S 液浓度分别为 015, 0125, 01125, 010625
m gömL。
21314　CSE 的稀释: 在上面一组系列浓度的 S 液
中均加入 2Κ浓度的内毒素, 即得。
21315　与 TAL 反应: 取 Κ为 0125 EU ömL 和 015
·762·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
EU ömL 的 TAL , 分别与 S 稀释系列反应为N PC 系
列; 与CSE 稀释系列反应为 PPC 系列, 每个浓度重
复 1 次, 结果见表 2。
表 2　参麦冻干粉针的干扰初筛试验结果
Table 2　In terference pr imary screen ing test results
of Shenma i Freeze-dr ied Powder In jection
鲎试剂 TAL 批号
S 稀释倍数
1 2 4 8
TAL N PC
　　表 2 表明, 供试品 1～ 4 倍稀释液对 TAL 与内
毒素的凝集反应有干扰。供试品的 8 倍稀释液对
BET 的干扰作用消失。为了进一步证实, 使用 Κ为
0125 EU ömL 的 TAL 与 8 倍稀释度的 S 液做BET
检查的干扰试验。
214　参麦冻干粉针的干扰试验: 干扰试验参照《中
华人民共和国药典》2000 年版二部附录Ó E BET
法和U SP23 BET 凝胶法 结果见表 3。
供
制
Table 3　In terference test results of Shenma i Freeze-dr ied Powder In jection
TAL 批号
BET 水
供试品
浓度ö(EU ·mL - 1)
015 0125 01125 01062 5 N C(w )　 ( s) E s E t
20000808
010719 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 23
020801 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 21
20000809
010719 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 25
020801 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 30
20021109
010719 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 30
020801 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 30
20021109
010719 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 25
020802 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 30
20000809
010719 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 25
020803 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 25
20030610
010719 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
021017 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
20030610
010719 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
021105 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 30
20030610
010719 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
030121 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
20030610
010719 + + + + + + + - - - - - - - - - - - 0. 27
030129 + + + + + + + + - - - - - - - - - - 0. 25
312　用灵敏度为 0125 EU ömL 的 TAL 检测参麦
冻干粉针, 最大有效稀释倍数为 13132。选用将 S 原
液稀释至 8 倍做干扰试验是基于干扰初筛试验的结
果和检测的方便。
313　做好参麦冻干粉针的BET 检查的干扰试验是鲎
法替代兔法的关键。因此在做干扰试验的研究时, 采用
了两个生产厂家 8 个批次的 TAL 对 7 个不同批号的
参麦冻干粉针进行了多次试验, 实验结果基本一致。
314　在进行干扰试验研究前, 对 7 个批号的参麦冻
干粉针用兔法进行了热原检查, 结果均符合规定。在
完成干扰试验后, 又对相同的 7 个批号的参麦冻干
粉针进行了BET 检查, 结果符合规定。说明参麦冻
干粉针不含有鲎试剂不能检出的其他致热物质。
　　综上所述, 参麦冻干粉针对BET 的干扰可通过
选用灵敏度≥0125 EU ömL 的 TAL 排除, 用BET
检测参麦冻干粉针的细菌内毒素是可行的。检测时
若选用 0125 EU ömL 的 TAL , 参麦冻干粉针的稀释
倍数只要在 8 至M VD 的范围内, 由检测人员视方
便而选定。
　　致谢: 朱祯禄主任药师的指导和帮助。
·862· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月