全 文 ：lq乙八j11口匕ǎ了OOQón lqú1,
.1
1
,
11`0
产Jgéq山和重量有较 明显 降低作用 ( P < 0 . 0 5 ) , 患者
主观症状 : 头昏 、 肢体沉重 、 疲乏懒言 、 记忆减
退等均有明显好转卿〕 。
参 考 文 献
l 张 淑慎 , 等 . 重庆医 科大学学报 , 1 9 9 6 , 2 1 ( l ) : 6 3
2 华 琼 , 等 . 中医 研究 , 1 9 96 , 9( 5) : 28
3 刘一志 , 等 . 陕西 中医 , 1 99 0 , 1 1 ( 6 ) : 24 7 , 25 3
4 周清发 ,等 . 实用 中西 医结合杂志 , 1 9 9 7 , 1 0 ( 2 1 ) : 2 0 54
5 周岱翰 ,等 . 中国肿瘤临 床 , 1 9 9 6 , 2 3 ( 6 ) : 4 2 6
6 戴馨仪 ,等 . 中药新药 与临床药理 , 1 9 9 7 . 8( 3) : 巧 4
7 王维平 ,等 . 时珍 国药研究 , 1 9 9 1 . 2 ( l ) : 3 0
8 陈耀璋 ,等 . 中药 材 , 1 9 9斗 , 1 7 ( 3 ) : 3 7
9 陈耀璋 , 等 . 西南 国防医 药 , 19 9 3 , 3 ( 5 ) : 2 5 7
1 0 王 俏先 , 等 . 中成药 , 1 9 9 4 , 1 7 ( 3 ) : 3 7
回秀丽 , 等 . 中国中医药科技 , 1 9 97 , 4 ( 3 ) : 18 1
张景湖 , 等 . 安徽中医学 院学报 , 19 98 , 1 7 ( l ) : 57
成志荣 , 等 . 江苏中医 , 19 9 8 , 1 9 ( 1 ) : 4 2
陈作 良 , 等 . 中华 口 腔医 学杂志 , 1 9 9 8 , 3 3 ( l ) : 5 0
郑师碧 . 等 . L牛, 国中西 结合杂志 , 1 9 9 5 , 15 ( 7 ) : 4 3 1
徐秀珍 , 等 . 宁夏医 学院学报 , 19 9 7 , 19 (2 ) : 6
林 军 , 等 . 广西医 科大学学报 , 1 9 95 , l 2( 4 ) : 5 2 7
王 宇 . 药学 进展 , 1 9 9 6 , 2 0 ( 2 ) : 9 1
周广军 , 等 . 实用中西医 结合杂志 , 1 9 9 7 , 1。 ( 1 3) : 1 2 8 6
冯冰虹 , 等 . 广东药学院学报 , 19 95 , 1 1 (4 ) : 2 64
池淑君 , 等 . 癌变 一畸变 一突变 , 19 9 7 , 9 (6 ) : 3 7 2
徐宝析 . 辽宁 中医 杂志 , 19 95 , 2 2 ( 1 1 ) ; 5 1 0
( 1 9 9 9
一
0 3
一
1 2 收稿
1 9 9 9
一
0 5
一
10 修 回 )
获等三菇成分的最新研究进展
中国 医 学科学院
中国协和 医科大学
医药生物技术研 究所 (北京 1 0 0 0 5 0) 沈 竿 ` 许先栋
摘 要 综述 了有关获荃三菇成分 的分离 纯化 、 结构 测定和其结构特点等方 面最新 的研 究成果 ,
归纳 了获荃 三菇衍生物的制备方法及对其构 效关系的初探 。
关键词 获荃三菇 结构测定与特点 获荃 衍生物 构效关 系
自 7 0 年代以来 ,从获荃干燥菌核 中分离
纯化并 阐明结构 的四环三枯化合物 已有 20
多种 , 可分 为两种类型 : 即羊毛幽烷三菇烯型
( l a n o s t a n e t r i t e r p e n e ) 和 3 , 4一开环羊毛 角烷
三枯烯型 ( 3 , 4 一 s e e o l a n o s t a n e t r i t e r p e n e ) 。 近
年来 中外学者进一步对获荃及其三掂成分衍
生物进行了药理 、 生物活性的深人研究 , 现就
获荃 成分 的分离纯化 、 结构特征及其构效关
系的研究进展作一简 明综述 。
1 分离纯化
获荃 中的三菇成分主要为中等极性的同
系物 ,性质相 近 ,提取时多用极性强的有机溶
剂 甲醇 、 乙醇长时间冷浸或 回流提取 【`一 ’ 〕 ,亦
有用弱极性的 乙醚 s1[ 和正 己烷图 回流提取的
报道 ,提取液减压浓缩至干 , 即得棕黄色含多
种获荃三枯成分的混合物 。 由于其中含有大
量 p一获等 聚糖 , 因 此 T ia 等 〔 ,一 “ 〕通过将其悬
于水 中 , 然后 用 乙酸乙 醋再次提取的方法进 ’
行纯化 。
获荃三枯成分彼此 间的差异小 , 故其分
离多采 用层析法 , 首先将获荃三菇成分的混
合 物 加 到 iS h ca g el 柱 上 , 用 不 同 比例 的
M e O H
一
C H C 1
3
( 0 ~ 2 5% ) 溶剂 系统进行梯度
洗脱 ,分段收集洗脱液浓缩至干 ,再利用该柱
或制备 T L C 、 反相 H P L C 制备 柱进行分离 ,
得到的单一成分在甲醇中结晶纯化 。 有些获
荃三菇成分 由于彼此间只差一个双键或为差
向异构体 , 极难分离 , 为了提高分离效率 , 可
采用制备衍生物 的方法 , 扩大彼此 间理化性
质的差异达到分离 目的 。 近几年 T al 等 sj[ 采
用 N 一氯甲基 苯邻二 甲酞亚胺处理获荃三枯
成分的混合物得到相应的 N 一甲基苯邻二甲
A d d r e s s
:
S h e n Q i a n
,
In s t i t u t e o f M
e d i e i n a l B i o t e e h n o l o g y
,
C h i n e s e A e a d e m y o f M e d i e a l cS i e n e e s
,
P e k in g U n i o n
M e d i e a l C o l l e g e
,
eB iji
n g
《中草药 》 1 9 9 9 年第 30 卷第 1 1 期 附 l
酞亚胺基酷 , 然后用 T L C 法分离 确定 了 3件
经基羊毛 幽烷 8 , 2 4一二烯酸等获荃三枯成分
的结构 。
2 结构测定
K a n e m a t s u 赶9 ” 。〕等 在 7 0 年代 利用 u v ,
IR
,
M S
, ’
H N M R 四 大光谱技术先后鉴定了
获荃 酸 ( p a e h y m i。 a e id ) 、 吐 默 酸 ( t u m u l o s ie
a e id )及 3 p一经基羊毛 街烷 一 7 , 9 ( 1 1 ) , 2 4一三烯
酸的结构 。 近年来 , 获荃三菇成分的结构鉴定
进一步采用 ` ” C N M R , ZD 一N M R 及 X 一射线 晶
体衍射等手段 , 如运 用 ` 3 C N M R 谱有效地确
定 了羊 毛幽烷三菇 烯型 和 3 , 4一开环羊 毛菌
烷三菇烯型 获荃三菇成分的基本骨架 , 而且
由于三枯类化学成分的碳谱 中最易分辨的信
号是双键碳原子 , 当双键处于不同位置时 ,其
碳原子化学位移有很大差别 , 而且基 本上不
受取代基团的影响 。 羊毛街烷三枯烯型化合
物环上双键有 7 , 9 ( 1 1) 异环共扼双键和 8 ( 9 )
双键两种形式 , 不 同类型化合物在相 同位置
化 学位 移 值 不 同 , 而 环外 双键 24 ( 31 ) , 24
( 2 5 )和 3 , 4 开环后的 4 ( 2 8) 位碳亦有各 自的
化学位移值 。
又 如 1 9 9 1 年 T a i , 运 用 ’ H 一 ` H C O S Y ,
,
H
一 ` 3
C C O S Y
, `
H
一 ” C O S Y 确定了多孔菌酸 A
和 B ( p o r i e o ie a e id A 和 B ) 中每 个碳 原子在
碳谱中的信号 ,并用 D E P T 方法证 明了多孔
菌酸 A ( p o r ie o i e a e id A ) 中环外亚 甲基处在
C
Z ,和 C 1 3位置 。 此外 1 9 9 4 年许先栋等 〔4 ]利用
ZD
一
N M R 及 X 一射线晶体衍射确定了 3一酮基 -
6
,
1 6 a
一二 轻基羊 毛 幽烷 7 , 9 ( 1 1 ) , 2 4 ( 3 1 ) 三
烯 酸 ( 3一 o x o 一 6 , 1 6 a 一d ih y d r o x y l a n o s t a 一 7 , 9
( 1 1 )
,
2 4 ( 3 1升 t r ie n 一 2 1一 o i e a e id ) 的分 子结构
和晶体结构 。
在获荃三 菇成分 的结构测 定方 面 , I R ,
U V
,
M S 等光谱的作用也是不可 替代的 , I R
谱 主要根据区域 A ( 1 3 5 5一 1 6 9 2 e m 一 ’ ) 和区
域 B ( 1 2 4 5 ~ 1 3 3 0 。 m 一 ` ) 的碳氢吸收来区别
四 环三枯和其它类型的三枯 , 如 四环三菇的
A
,
B 区各有一个峰 , 而齐墩果烷型和乌索烷
型三 菇在 A 区 或 B 区 都 各 有两 个 或 三个
· 附 2 ·
峰 l1[ 」。 u v 光谱对于 区分环上 8 位双健与 7,
9 ( 1 1 )异环共扼双键化合物极为有用 ,质谱尤
其是高分辨质谱在确定化合物分子式及根据
碎 片离子推断 化合物结构上 亦具 有重要地
位 。
3 结构特点
3
.
1 羊毛 街烷三枯烯 型 : 目前发现 的 27 种
获等三菇成分中有 18 种属羊毛 街烷三枯烯
型 。 按照其结构中双键数 目及位置的不同有
4 种基本骨 架 , 而 同一类骨架 中各 化合 物的
结构差异主要在于 3 位 、 6 位 、 25 位碳的取代
情况不同 , 可见羊毛 街烷三菇烯型 的结构差
异是 : l) 环上 8 位双键或异环 7 , 9 ( 1 1) 共扼
双 键 , 外环 24 ( 2 5) 双键或 24 ( 3 1 )末端 双键 ;
2 )6 位 、 16 位碳上有无 Q 一轻基取代 ; 3 ) 3 位碳
上有不 同基 团取代 ,多为羚基亦有乙酞氧基 、
碳基 , 且有差 向异构 ; 4 ) 2 5 位是 否有 轻基取
代 。
3
.
2 3
,
4
一开环羊毛街烷三菇烯型 : 属 3 , 4一开
环羊毛 菌烷三菇型 的三菇成分共 9 个 , 按其
边链双键位置的不同可 分为两类基本骨架 ,
各化合物的结构差异除边链双键外 , 主 要在
于 3 位经基是否 成醋和 16 , 2 5 , 2 9 位碳上是
否有经基取代 。 与羊毛菌烷三菇烯型相 比较
可 以看 出 , 3 , 4 一开环羊毛 幽烷三菇型 化合物
的结 构特点是 1 ) 3 , 4 位碳链 断裂开 , 3 位成
为拨基 , 4 位 与 28 位形成双键 ; 2) 仅存在 7 , 9
( 1 1) 异环共扼双键 , 未见 8 位双键的报道 。
4 衍生物的制备及构效关系初探
制备获菩三枯成分 的衍生物 ,通常是采
用重氮 甲烷或 N 一氯甲基苯邻二甲酞亚胺将
获菩三掂成分 中的梭基醋化 , 从而扩大各成
分彼此 间理化性质的差异 , 以便达到分离纯
化的 目的 。 另外也有人通过制备衍生物进行
获 荃 三 菇 成 分 构 效 关 系 的研 究 。 1 9 8 0 年
C a l i s o l a l a o 等 [` 2 ]分离得到获菩酸 和 吐默 酸 ,
二 者的 7 , 9 ( 1 1 ) 脱氢衍生物及多孔菌酸 C ,
并制备 了它们的 甲酷 、 3 一酮基及 25 一或 26 一经
基衍生物 。 经体外肝癌细胞试验发现其甲醋
衍生 物 具 有 细胞 毒 作 用 , 而 3一酮 基 , 2 5一或
26
一经基衍 生物 则无细胞毒作用 。 9 17 9年仲
兆金等采用 卤代烷在碱性条件下 与 3日, 1 6 a -
二经基羊毛街烷 7 , 9 ( 1 1 ) , 2 4 ( 3 1卜二烯酸 、 3 -
酮基 一 1 6 a 经基羊毛幽烷 7 , 9 ( 1 1 ) , 2 4 ( 3 1卜三
烯酸及 3件乙酞氧基 一 1 6 a 一轻基羊毛街烷 8 , 24
( 3 1卜二烯 酸发生亲核取代反应的方法制得
9 种梭酸醋衍 生物并进 行了 生物 活性测定 ,
对人慢性髓样白血病 K 5 6 2细胞的抑制作用试
验 结 果表 明 : 3 位 为经基 , 环 上双键 为 7 , 9
( 1 1 )异环共扼双键的获荃三菇通过醋化增大
其脂溶性 ,有益于其抑制率 的提高 , 而 3 位为
乙酞氧基 , 环上为 8 ( 9) 双键型 的获荃三枯若
再增大其脂溶性 会降低其抑制率 ; 对小 鼠 T
淋 巴细 胞增殖影 响的生物活性测 定结果表
明 : 获荃三枯成分中 3 位为经基 ,环上双键为
7
,
9 ( 1 1 )异环共扼双键的获荃三枯对小 鼠 T
淋巴细胞有促进增殖作用 , 而其 醋化衍生物
主要体现为抑制增殖 ; 3 位为乙酞氧基 ,环上
双键为 8 ( 9 ) 双键的获荃三菇为抑制增殖作
用 , 而其酷化衍生物主要体现为促进增殖作
用 , 从而说 明获荃三枯成分结构上 的差异对
其生物活性的影响 。
5 结语
综上所述 , 获荃三枯成分的结构确定 ,衍
生物制备及其构效关系的研究 已取得新的进
展 , 但其构效关系尚限于实验研究阶段 。 关于
获荃三菇衍生物的药理 、 生物活性与结 构关
系还须进行深入的探索研究 。
参 考 文 献
1 T a i T
, 亡t a l
.
P h y t o e h e m i s t r y
,
19 9 1
,
3 0 ( 8 )
:
2 7 9 6
2 T a i T
,
e t a l
.
P h y t o e h e m i s t r y
, 19 9 2 , 3 1 ( 7 )
:
2 5 4 8
3 T a i T
,
e t a l
.
P h y toc h e m i
s t r y
,
1 9 9 3 , 3 2 ( 5 )
: 1 2 9 3
4 许先栋 , 等 . 中国药物化学杂志 . 1 9 9 4 , 1 1 4 ( l ) : 2 3
5 T a i T
, e t a l
.
P h y t oc h e m i s t r y
, 1 9 9 5 , 3 9 ( 5 )
: 1 16 5
6 T a i T
.
et a l
.
P h y t oc h e m i s t r y
, 1 9 9 5
,
4 0 ( l )
: 2 2 5
7 H a r u o N
, 亡 t a l
.
C h e m P h a r m B u ll
,
1 9 9 6
, 4 4 ( 4 )
: 7 1
s 王利 亚 ,等 . 现代应用药学 , 19 9 3 , 10 ( 2 ) : 8
9 兼松 明子 ,等 . Y a k u g a k u Z a s s h i l 9 7 o , 9 0 ( 4 ) : 4 7 5
1 0 A k一k o K , e t a l
.
C h e m P h a r m B u l l
,
1 9 7 0
,
8 ( 4 )
: 7 7 9
1 1 仲兆金 ,等 . 中国药物学杂志 , 19 9 7 , 7 ( l ) : 7 1
1 2 V a li s o la la o J
, e t a l
.
B u l l So c C h i m F r
, 1 98 0 , l : 4 73
( 1 9 9 9
一
0 4
一
2 1 收稿 )
关于编辑 、 出版以 “ 中药新剂型 、 新工艺 、 新技术 ”为主要内容的
《中草药 》杂志 2 0 0 0 年增刊的征文通知
在科技 日新月异发展的世纪之交 , 高新技术在 中药产业 中得到广泛的应 用 , 为 了加速 中药
产业的技术创新 , 本刊拟在 2 0 0 0 年下 半年编辑 、 出版 以 “ 中药新剂型 、 新工 艺 、 新技 术 ” 为主要
内容的增刊 ,现征文通知如下 :
征 文内容 : ①中草药现代生物工程技术的开发与应 用 如 : 基因工 程 、 细胞工程 、 酶 工程 、 代
谢工程 、发酵工程等现代生物技术对珍贵和濒危动 、 植物中药材种源的保护 、 鉴别 、 优化和可持
续利 用等技术 。 ②中草药有效成分提取 、 分 离新技术知 : 超临界萃取 、 膜分 离 、 超滤技术 、 大孔吸
附树脂 色语 、 逆流色谱 、 澄清技术等 。 ③中草药有效成分分析的新仪 器 、 新方法等 。 ④中草药现
代药理学研究方法如 : 血清药理学 、 细胞分子药理学和 中药药代动 力学等 。 ⑤中草药新剂型 的
研究如 : 透皮吸收制剂 ,靶 向药物制剂 ,缓释 、 控释制剂等 。
征文截止 时间 : 2 0 0 0 年 6 月 30 日 。 其他要求见 《 中草药 》杂志 20 0 年 第 1 期 “ 征稿简则 ” 。
欢迎广大读者踊 跃投稿 , 来稿请寄天津市鞍 山 西道 3 08 号《 中草药 》杂志编 样部 ,邮编 : 3 0 01 93 ,
稿件上请注 明 “ 增刊征文 ” 字样 。
《中草药 》杂志编辑部
《中草 药 》 19 9 9 年第 3 0 卷第 H 期 附 3