全 文 ：内折香茶菜素和内折香茶菜素 D抗肿瘤作用的实验研究
李继成 1 ,林则田 2 ,张启堂 3 ,刘兰琦1 ,杨丽嘉1
⒇
( 1. 河南医科大学 医学实验中心 ,河南 郑州　 450052;　 2. 郑州市卫生局 ,河南 郑州　 450000;　 3. 河南医科大
学 药理教研室 ,河南 郑州　 450052)
摘　要: 目的　研究内折香茶菜素和内折香茶菜素 D(以下简称内折素和内折素 D)对动物移植性肿瘤的作用以及
对机体免疫状态的影响。方法　以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌 ( ECA )、肉瘤 180( S180 )、肝癌 ( HCA)和 Lewis肺癌为
模型 ,以 5-Fu为阳性对照组 ,以生理盐水为阴性对照组 ,观察 12. 5和 25 mg /kg内折素和内折素 D的抗肿瘤作用 ,
并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素和内折素 D对机体免疫状态的影响。结果　内折素
和内折素 D与阴性对照组相比在体外对 ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力 ,在体内对 S180实体型和腹水型肿瘤 , HCA
实体型和腹水型肿瘤以及 Lew is肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用 ,对机体免疫状态无明显影响。 结论　内折
素和内折素 D具有较强的抗肿瘤作用 ,且对机体免疫状态无明显影响。
关键词: 内折香茶菜素 ;内折香茶菜素 D;艾氏腹水癌 ;肉瘤 180;肝肿瘤 ; Lewis肺肿瘤 ;抗肿瘤作用
中图分类号: R285; R979. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0049 04
Studies on antitumor effect of inflexusin and inflexusin D
L I Ji-cheng1 , L IN Ze-tian2 , ZHANG Qi-tang3 , L IU Lan-qi1 , YANG Li-jia1
　　 ( 1. Labo ra tor y Centr e o f Medical Resea rch, Henan Univ ersity o f Medica l Sciences, Zheng zhou Henan 450052, China; 2.
Zheng zhou Municipal Public Health Bureau, Zheng zhou Henan 450000, China; 3. Depa rtment of Pharmaco lo gy , Henan
Univ ersity o f Medica l Sciences, Zhengahou Henan 450052, China)
Key words: inflexusin; inflexusin D; Ellrlich asci tes carcinoma; sarcoma 180; hepa toma carcinoma;
Lewis lung carcinoma; anti tumo r activ ity
　　内折香茶菜 Rabdosia inf lexus ( Thunb)为唇形
科香茶菜属植物。 已报道了内折香茶菜乙素的抗肿
瘤作用 [1 ]。内折香茶菜素 (简称内折素 , inf lexusinl)
经结构鉴定为新的二萜化合物 [2 ] ,内折香茶菜素 D
(简称内折素 D)为其黄酮苷 [ 3]。为了解内折素和内
折素 D的抗肿瘤作用 ,作者采用多种动物移植性肿
瘤模型 ,观察其对动物肿瘤的抑制作用 ,并对动物溶
血素水平和迟发性超敏反应进行了检测 ,观察其对
机体免疫功能的影响。
1　材料与方法
1. 1　材料: 内折素和内折素 D经薄层法鉴定其纯
度为 99% ,河南医科大学医学实验中心新药研究室
提供。 昆明种小鼠和 C57纯种小鼠 ,体重均为 ( 20±
2) g ,雌雄兼用 , 22℃～ 25℃常规饲料喂养 ,河南医科
大学实验动物中心提供。 瘤株艾氏腹水癌 ( ECA)、
肉瘤 ( S180 )实体型及腹水型、肝癌 ( HCA)实体型及
腹水型、肺癌 ( Lewis)实体型 ,各瘤株均由河南省医
学科学研究所药理室保种 ,按常规方法传代接种。
1. 2　方法
1. 2. 1　对体外培养的 ECA癌细胞生长的影响: 无
菌条件下 ,抽取荷 ECA肿瘤小鼠腹水混悬于 RPM I
1640培养液中 ,调细胞浓度为 5× 105 cfu /mL,接种
于培养瓶中 ,每瓶接种细胞悬液 1. 9 mL,按拟定剂
量加入药液 0. 1 mL,总体积 2 mL,置 5% CO2培养
箱中 37℃培养 24 h后取出 ,采用台盼蓝拒染法测
定细胞杀伤率。
1. 2. 2　体内抗肿瘤作用实验:方法同文献 [1 ]。腹水
型肿瘤以生命延长率为疗效指标 ,停药后继续观察
60 d,死亡的动物以实际存活时间为生存时间 ,长期
存活动物以 60 d为生存时间计算。实体型肿瘤以瘤
重抑制率作为疗效指标 ,于停药次日将肿瘤剖出精
确称重。 实验结果的统计学方法用 t检验。
1. 2. 3　对机体免疫功能的影响:采用小鼠溶血素实
验 ,测定本品对小鼠体液免疫状态的影响 ,本实验分
组同 1. 2. 2,用昆明种小鼠按文献 [1 ]法进行实验。 24
h处死动物 ,剪下小鼠左右两耳壳 ,用打孔器打下直
·49·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-04-30基金项目:国家人事部留学回国人员资助项目:人发 [1999 ]122号 ;河南省科技攻关资助项目 ,课题号: 991180121作者简介:李继成 ,男 , 48岁 ,北京医科大学药学院毕业 ,现任河南医科大学新药研究室主任 ,副研究员。 主要从事中药和天然药物的开发研究。 1997～ 1998年应日本摄南大学药学部的邀请作为客员研究员公派日本留学。承担国家、省重点科研项目 12项 ,发表论文
30余篇 ,出席国际会议 5次 ,著书 2部 ,获科技成果奖 7项。 Tel: ( 0371) 6941865　　 E-mail: lijich eng@ 371. net
径为 8 mm的耳片精确称重 ,以左右两耳重量之差
为肿胀度 ,同时取其胸腺、脾脏精确称重。 计算其脾
指数和胸腺指数 ,实验结果用 x± s表示 ,组间比较
用 t检验。
2　结果
2. 1　对体外培养的 ECA瘤细胞生长的影响:由表
1可以看出 ,内折素和内折素 D剂量为 2 mg /L时 ,
细胞杀伤率为 100% ,当减小到 0. 25 mg /L时则为
65%和 69% ,作用明显减弱 ,表明两种单体化合物
在体外对 ECA肿瘤细胞有较强的细胞毒作用 ,且
随剂量增大而作用增强。
2. 2　体内抗肿瘤作用:见表 2～ 7。
表 1　内折素和内折素 D对体外培养的 ECA
细胞生长的影响
组别 剂　量
( mg /L)
蓝染率
(% )
组别 剂　量
( mg /L)
蓝染率
(% )
对照 - 0～ 5
内折素 2. 000 100 内折素 D 2. 000 100
1. 000 100 1. 000 100
0. 500 93 0. 500 98
0. 250 65 0. 250 69
表 2　内折素和内折素 D对小鼠腹水瘤 S180的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
存活时间
( d )
生命延长率
(% )
对照组 - 10 0 19. 90± 1. 37 28. 00± 4. 88 11. 60± 2. 06 -
5-Fu 20 10 1 20. 00± 1. 05 24. 50± 3. 34 37. 80± 8. 75* 225. 86
内折素 12. 5 10 0 19. 80± 1. 03 29. 40± 1. 27 29. 00± 3. 53* 150. 00
25. 0 10 0 18. 90± 0. 87 26. 30± 2. 11 35. 40± 5. 841* 205. 17
内折素 D 12. 5 10 0 19. 30± 1. 49 30. 60± 2. 27 29. 50± 3. 44* 154. 31
25. 0 10 0 19. 60± 1. 26 29. 20± 2. 48 36. 20± 5. 53* 212. 07
　　　　与对照组比较: * P < 0. 05
表 3　内折素和内折素 D对小鼠腹水瘤 ECA的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
存活时间
( d )
生命延长率
(% )
对照组 - 8 0 19. 50± 1. 19 26. 25± 1. 83 13. 38± 2. 19 -
5-Fu 20 8 0 20. 63± 0. 74 24. 63± 1. 40 35. 13± 6. 99* 162. 56
内折素 12. 5 8 0 19. 88± 0. 84 34. 00± 16. 91 23. 38± 6. 61* 74. 74
25. 0 8 0 18. 87± 0. 83 33. 88± 7. 14 34. 00± 7. 39* 154. 11
内折素 D 12. 5 8 0 19. 50± 0. 92 24. 75± 1. 39 23. 75± 7. 03* 77. 50
25. 0 8 0 18. 87± 0. 64 23. 37± 1. 77 34. 25± 7. 24* 155. 98
　　　　与对照组比较: * P < 0. 01
表 4　内折素和内折素 D对小鼠腹水肝癌 HCA的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
存活时间
( d )
生命延长率
(% )
对照组 - 8 0 20. 88± 0. 83 27. 00± 2. 45 14. 75± 2. 49 -
5-Fu 20 8 0 20. 13± 0. 64 25. 00± 1. 85 33. 50± 6. 91* 127. 12
内折素 12. 5 8 0 21. 37± 0. 73 25. 25± 1. 75 28. 75± 6. 22* 94. 92
25. 0 8 0 21. 88± 0. 83 26. 13± 1. 46 30. 88± 5. 66* 109. 36
内折素 D 12. 5 8 0 22. 25± 0. 71 25. 38± 1. 41 29. 50± 5. 97* 100. 00
25. 0 8 0 20. 75± 0. 46 24. 38± 1. 39 32. 25± 5. 92* 118. 64
　　　　与对照组比较: * P < 0. 01
表 5　内折素和内折素 D对 C57小鼠实体瘤 Lewise肝癌的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
瘤重
( g )
抑瘤率
(% )
对照组 - 8 8 18. 38± 0. 74 24. 00± 2. 20 3. 00± 0. 37 -
5-Fu 20 8 8 21. 00± 0. 75 24. 62± 1. 30 1. 11± 0. 42* 63. 0
内折素 12. 5 8 8 18. 75± 0. 69 23. 87± 1. 81 1. 62± 0. 51* 46. 0
25. 0 8 8 21. 12± 0. 99 24. 75± 1. 16 1. 38± 0. 44* 54. 0
内折素 D 12. 5 8 8 21. 37± 0. 51 26. 00± 1. 30 1. 50± 0. 53* 50. 0
25. 0 8 8 22. 00± 0. 93 25. 75± 2. 05 1. 19± 0. 37* 60. 0
　　　　与对照组比较: * P < 0. 01
·50· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
表 6　内折素和内折素 D对 S180小鼠实体瘤的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
瘤重
( g )
抑瘤率
(% )
对照组 - 8 8 19. 13± 0. 99 23. 25± 1. 66 2. 69± 0. 46 -
5-Fu 20 8 8 20. 63± 0. 74 23. 00± 1. 41 1. 25± 0. 53* 53. 53
内折素 12. 5 8 8 20. 37± 0. 51 22. 88± 1. 55 2. 06± 0. 42* 23. 40
25. 0 8 8 20. 13± 0. 83 22. 25± 1. 00 1. 38± 0. 44* 48. 70
内折素 D 12. 5 8 8 18. 50± 0. 53 21. 50± 1. 77 1. 93± 0. 42* 28. 25
25. 0 8 8 19. 88± 0. 98 22. 50± 1. 19 1. 31± 0. 37* 51. 30
　　　　与对照组比较: * P < 0. 01
表 7　内折素和内折素 D对小鼠腹水瘤 HCA(肝瘤 )的作用
组别 剂　量
( mg /kg· d)
动物数
始 末
体重 ( g)
始 末
瘤重
( g )
抑瘤率
(% )
对照组 - 8 8 19. 37± 0. 74 24. 87± 1. 45 3. 19± 0. 37 -
5-Fu 20 8 8 19. 12± 0. 64 23. 75± 1. 83 1. 31± 0. 37* 58. 93
内折素 12. 5 8 8 21. 25± 0. 70 25. 62± 1. 42 1. 75± 0. 26* 45. 14
25. 0 8 8 19. 00± 0. 53 23. 50± 2. 13 1. 56± 0. 32* 51. 10
内折素 D 12. 5 8 8 20. 75± 0. 71 24. 00± 2. 16 1. 69± 0. 46* 47. 02
25. 0 8 8 18. 88± 0. 64 23. 25± 2. 25 1. 44± 0. 42* 54. 86
　　　　与对照组比较: * P < 0. 01
　　由表 2～ 7可以看出 ,内折素和内折素 D在剂
量为 12. 5 mg /kg时 ,对实体型及腹水型肿瘤表现
有一定抑制作用 ;而剂量为 25 mg /kg时 ,疗效提
高 ,表现出明显抗肿瘤作用 ,与对照组相比 P <
0. 01。
2. 3　内折素和内折素 D对小鼠溶血素的影响: 见
表 8。 结果表明 ,对照组的最大溶血稀释度为 1∶
512,内折素和内折素 D各两剂量组的最大稀释度
分别为 1∶ 512和 1∶ 256,表明内折素和内折素 D
在 25 mg /kg时对以溶血素反应为指标的体液免疫
可能有轻度抑制作用。
表 8　内折素和内折素 D对小鼠溶血素形成的影响
组别 剂量
( mg /kg· d ) 最大溶血稀释度
对照组 - 1∶ 512
5-Fu 15 1∶ 32*
内折素 12. 5 1∶ 512
25. 0 1∶ 256
内折素 D 12. 5 1∶ 512
25. 0 1∶ 256
　　与对照组比较: * P < 0. 05
2. 4　对 DNCB诱导的小鼠迟发性超敏反应的影
响: 由表 9可以看出 ,内折素和内折素 D与正常组
相比 ,两剂量组的耳肿胀度、脾指数和胸腺指数均无
表 9　内折素和内折素 D对 DNCB诱导的小鼠迟发性超敏反应的影响
组别 动物数 耳肿胀度 ( mg) 脾指数 ( mg /g ) 胸腺指数 ( mg /g)
对照组 8 1. 52± 0. 24 81. 11± 7. 85 42. 15± 4. 07
5-Fu 8 2. 03± 0. 28* 42. 06± 8. 86* 19. 03± 3. 09*
内折素 8 1. 68± 1. 32 74. 43± 8. 07 38. 88± 5. 31
8 1. 66± 1. 51 74. 62± 7. 43 40. 25± 3. 00
内折素 D 8 1. 65± 1. 44 75. 13± 7. 16 41. 38± 2. 24
8 1. 66± 1. 30 76. 20± 7. 32 41. 50± 2. 45
　　　　与对照组比较: * P < 0. 05
差异 (P> 0. 05) ,表明内折素和内折素 D对小鼠体
内细胞免疫无明显作用。
3　讨论
小鼠肝癌 ( HCA)、肉瘤 ( S180 )、 Lew is肺癌和艾
氏腹水癌 ( ECA)均为抗肿瘤药物筛选实验中常用
的动物移植性肿瘤模型 ,作者采用瘤株 ,进行了内折
素和内折素 D的抗肿瘤作用实验。用小鼠溶血素实
验和 DN CB诱导的小鼠迟发性超敏反应实验观察
内折素和内折素 D对小鼠的机体免疫状态的影响。
其抗肿瘤作用从体内、外实验结果来看 ,其具有较强
的抗肿瘤作用 ,且抗瘤谱较广 ,能抑制 Lewis肺癌、
肉瘤 S180实体型以及肝癌 HCA实体型等实体瘤的
增长 ,也能明显延长荷肉瘤 S180腹水型、荷肝癌
( HCA)腹水型和艾氏腹水瘤 ( ECA)小鼠的生命延
长率 ,其抗肿瘤作用的强弱呈现剂量依赖性。内折素
和内折素 D相比 ,抗肿瘤作用内折素 D比内折素
强。从对机体免疫机能影响的实验结果来看 ,内折素
和内折素 D对小鼠细胞免疫无影响 ,在 25 mg /kg
·51·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
剂量时 ,对小鼠溶血素水平有较轻微抑制 ,表明在该
剂量时 ,本品对小鼠的体液免疫有较轻微的影响。
从内折素和内折素 D体内和体外实验来看 ,显
示出较强的抗肿瘤作用 ,而免疫结果又表明 ,对机体
免疫机能没有明显影响 ,而由于内折素和内折素 D
是由内折香茶菜中提取分离而得 ,内折香茶菜资源
丰富 ,表明内折素和内折素 D具有较好的临床应用
价值 ,可作为一种有前途的抗肿瘤药物值得进一步
深入研究与开发。
参考文献:
[1 ]　李继成 ,叶启霞 ,杨丽嘉 ,等 . 内折香茶菜乙素抗肿瘤作用的研
究 [ J] . 中草药 , 2000, 31( 9): 681-683.
[ 2 ]　李继成 ,袁宝梅 ,沈晓羽 ,等 . 内折香茶菜素的化学结构 [ J ].
云南植物研究 , 1993, 15( 3): 291.
[ 3 ]　李继成 ,苏金玲 ,方桂远 ,等 . 21届国际天然产物化学论文集
[ C ]. 北京: 1998, 1-20.
红花抗衰老作用的实验研究
张明霞 1 ,李效忠 1 ,赵　磊 2 ,赵　惠1 ,许春香1
⒇
( 1. 河北医科大学 ,河北 石家庄　 050031;　 2. 邯郸市医学专科学校 药理教研室 ,河北 邯郸　 056029)
摘　要: 目的　研究红花的抗衰老作用。方法　采用小鼠游泳实验、耐常压缺氧实验和耐寒实验等方法观察了红花
对小鼠抗疲劳、抗缺氧和抗寒能力的影响 ,并采用 TBA显色法观察了红花对中老龄大鼠体内的过氧化脂质生成的
影响。 结果　红花可显著延长小鼠游泳时间 (ts )及在常压缺氧和寒冷条件下的存活时间 (t I ) ,增强小鼠在各种不利
环境下的生存能力 ,并明显抑制中老龄大鼠体内过氧化脂质 ( LPO )的生成。 结论　结果表明红花有抗衰老作用。
关键词　红花 ;生存能力 ;过氧化脂质 ;抗衰老
中图分类号: R285　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0052 02
Experimental studies on antisenility effect of Carthamus t inctorius
ZHAN G Ming-xia1 , L I X iao-zhong1 , ZHAO Lei2 , ZHAO Hui1 , XU Chun-xiang1
　　 ( 1. Hebei Univ er sity o f Medical Sciences, Shijiazh uang Hebei 050031, China; 2. Depar tment o f Pharmaco lo g y, Handan
Medical Special Colleg e, Handan Hebei 056029, China )
Key words: Carthamus tinctorius L. ; abi li ty of living; lipid peroxides ( LPO) ; antisenility
　　衰老不仅表现为生命活力的降低 ,而且还伴有
各组织器官退行性变化及许多病理过程的发生。祖
国医学认为 ,气虚血瘀是人体衰老的本质之一 ,从活
血祛瘀着手 ,改善机体微循环 ,消除各脏器的瘀血现
象 ,可有效地防治老年病和延缓衰老。 红花
Carthamus tinctorius L. 为菊科一年生草本植物 ,具
活血通络、改善微循环和抑制血小板聚集等多方面
药理作用 [1 ]。 《本草纲目拾遗》一书中记载红花曾被
用作活血化瘀和延年益寿的药茶 [ 2]。金鸣等报道红
花水提液有抗氧化作用 ,可清除羟自由基及抑制脂
质过氧化反应 [3 ] ,另有报道红花有免疫增强作用 [4 ] ,
但尚未见到有关其抗衰老作用的研究报道 ,我们对
此进行了初探。
1　实验材料
1. 1　动物: 昆明种小鼠 ,雄性 , 18～ 22 g,购自河北
医科大学实验动物中心 ; Wistar大鼠 , 12月龄 ,雄
性 , 280～ 320 g ,购自河北省医科院实验动物中心。
1. 2　药品:红花水煎液 (自制 ) ,每毫升相当于生药
0. 6 g。
2　方法与结果
2. 1　对小鼠耐常压缺氧能力的影响 (常压缺氧实验
法 [5 ] ): 小鼠 30只 ,随机分成 3组: ①生理盐水对照
组 ,②红花水煎液高剂量组 (生药量 12 g /kg ) ,③红
花水煎液低剂量组 (生药量 6 g /kg ) ,每组 10只。分
别 ig给药 ,每天 1次 ,连续 7 d,于末次给药后 1 h,
将小鼠放于盛有 10 g钠石灰的 125 m L广口瓶中 ,
密封。记录各鼠在缺氧条件下的存活时间 ( t I )。结果
给药组小鼠 t I明显延长 ,与对照组比较有显著性差
异 (见表 1)。
2. 2　对小鼠耐寒能力的影响 (耐寒实验法 [5 ] ):小鼠
30只 ,按 2. 1法随机分组、给药。于末次给药后 1 h,
将小鼠 (单只入笼 )放入 - ( 5± 1)℃低温冰箱内进
·52· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-03-15基金项目:河北医科大学青年教师科研基金资助项目作者简介:张明霞 ( 1964-) ,女 ,河北省献县人 ,讲师 ,学士学位 ,毕业于河北医科大学 (原河北医学院 )药学专业 ,现在河北医科大学基础医学院药理教研室工作。 Tel: ( 0311) 5888832