全 文 ：有机氯农药残留量的气相色谱检测方法研究
中 国 医学科 学 院
中国协和医科大学药用植物研究所 (北京
1 0 。。94) 王会 丽 . 陈建民 张曙明
摘 要 建立了西洋参中有机氯农药残留量的气相色谱的分析方法 。 样品以丙酮提取 , 在 N aCI 存
在下 , 以二氯甲烷进行液液分配 , 提取液以浓 H 多O ; 净化 , 采用 S E 一54 弹性石英 毛细管柱 , G C -
E C D 检测有机氯 (六六六 , D D T 异构体及七氯 , 艾氏剂 )农药的残留量 , 最低检测浓度为 3 . 2 x 1 0 一“
n g / g 一 1 . 4 n g / g , 添加回收率在 80 % ~ 13 . 18 % , 并对北京及东北产西洋参药材进行了实际残留
量测定 。
关键词 气相色谱 有机氯农药 残留量 西洋参
西洋参作为一种珍贵的药用植物 , 与其
它人工培植的药用植物一样要施以农药防治
病虫害 , 因此 , 农药的残留量是衡量西洋参的
很重要的指标 。 采用毛细管柱色谱法建立了
有机氯农药六 六六 、 D D T 、七氯及艾 氏剂在
西洋参中残留量的测定方法 , 为中药材中农
药残留量监测提供了可行的分析手段 。
1 仪器装置 、试剂
美 国 V a r ia n 6 0 0 0 气相色谱仪 (‘3 N i 电
子捕获检测器 ) ; V a ri a n 4 2 7 0 记录仪 。
美国迪马公司 SE 一 54 弹性石英毛细管
柱 (3 0 m x 0 . 3 2 m m 又 0 . 2 5“m ) 。
超声波清洗器 , 真空旋转浓缩器 , K 一D
浓缩器 。
标准品 : a 一BH C 、p一B H C 、 下一BH C 、a一BH C 、
七 氯 (he p ta e h lo r ) 、 艾 氏 剂 (A ld r in ) 、 p p ‘-
D D E
、
p p , 一D D D
、 o p ‘一D D T
、
p p ‘一D D T (由秦皇
岛商检局提供 ) 。 试剂均为分析纯 。
2 实验步骤
2
.
1 提取与净化 : 准确称取已充分粉碎过的
样品粉末 2 9 , 于 10 0 m L 具塞三角瓶中 , 加
入 40 m L 丙 酮 、 20 m L 水 , 超声波提取 60
m in
, 再加入约 6 9 N a CI及 3 0 m L 二氯甲烷 ,
超声 30 m in , 静置使水相与有机相完全分
层 。将有机相移入装有一定量的无水 N a ZS 0 4
的 1 0 0 m L 具塞三角瓶中 , 脱水 , 取 35 m L 干
燥过的有机相于 10 m L 旋转蒸发瓶中 , 于
4 0 ℃水浴减压浓缩至约 0 . 5 m L , 将浓缩物
移入 10 m L 具塞试管中 , 以 5 m L 正 己烷分
数次洗涤蒸发瓶 , 合并洗涤液于试管中 。向试
管 中小心 加入 约 l m L 浓 H Z SO 4 , 振摇 1
m in
, 离心 (3 o o o r / m in )1 0 m in 。 将上清液移
入 K 一D 瓶中 , 以正 己烷洗涤试管 2 次 , 合并
洗涤液 , 将溶液浓缩至 1 . 0 m L , 取 1 · o 拼L 进
行 G C 分析 。
2
.
2 测定条件 : S E 一 54 弹性石英毛细管柱
(3 0 m X O
.
3 2 m m X O
.
2 5 拌m ) 。
载气 : 高纯氮 , 柱前压 : 58 · 8 40 k Pa 。
补充气 : 高纯氮 , 流量 : 2 m L / m in 。
进样 口温度 : 18 0 ℃ , 检测 器温度 : 2 90
℃ 。
检测器 : 6 3N i一E C D 。
分流时间 : 从 0 . 1 0 m in 一 1 · 6 0 m in , 共
1
.
5 m in
。
分流比 : 15 , 1o
柱升温程序 : 初始 14 。 ℃ , 10 ℃ / m in 升
至 2 1 0 oC , 8 ℃ / m in 升至 2 5 0 ℃ , 保 持 4
n l ln ,
纸速 : 0 . 5 。m / m in , 衰减 : 8 。
进样量 : 1 . 0 拼L , 外标法定量 。
A d d r e s s
:
W
a n g H u ili
,
In s tit u te o f M ed iein al
M ed ie al U n iv e r s ity
,
Be iji
n g
Pla n t D e v elo p m e n t
,
Chin e s e A e a d em y o fM ed ie a l S e ie n e e s
,
C hin e s e X ielle
《中草药》1 9 9 8 年第 29 卷第 6 期 3 8 1
2
.
3 标准曲线绘制 : 农药标准品贮备液 : a -
B H C
:
8 0 拌g / m L , 件BH C : 4 6 0 拜g / m L , y-
B H C
:
2 7 5 拼g / m L , 台一B HC : 6 8 0 拜g / m L ,七氯 :
2 8 0 拜g / m L , 艾 氏剂 : 3 7 8 拜g / m L , p p , 一D D E :
4 9 0 拜g / m L , p p ‘一D D D : 1 2 1 拌g / m L , o p ‘-
D D T
: 3 3 0 拌g / m L , p p ‘一D D T : 2 7 0 拌g / m L 。 吸
取一定量标准贮备液 , 用正 己烷稀释至 5 . 0
m L
, 使混合溶液中各标准品浓度为 : a 一B H C :
8 又 1 0 一 “拌g / m L , 各B H C : 1 1 . 9 6 拌g / m L , y-
BH C
: 1
.
1 0 拼g / m L , a一BH C : 0 . 9 5 2 拌g / m L , 七
氯 : 1 . 4 0 拜g / m L , 艾 氏剂 : 2 . 2 7拌g / m L , p p ‘-
D D E
: 0
.
9 8 拌g / m L , p p ‘一D D D : 2 . 4 2 拌g / m L ,
o p ,
一
D D T
:
2
.
6 4 拼g / m L , p p ‘一D D T : O· 2 7 0 拌g /
m L
。 分别吸取一定体积的上述混合溶液于
5
.
0 m L 容量瓶中 , 用正 己烷进行一 系列稀
释 , 取 1 . 0 拜L 进样 ,得标准曲线 。 见表 1 。
3 结果与讨论
3
.
1 提取 、净化 : 在中药材以及其它植物样
品有机氯的残留分析中 , 常使用 的毛细管柱
多为非极性或弱极性的 , 长度为 25 m 一 30
m
, 口径 o · 2 5 m m ~ 0 . 3 2 m m , 固定液有 O V -
1 0 1 〔‘〕 , S E 一 5 4 〔, , , D B 一1 7 0 1 〔3 , 。 本实验选用 S E -
5 4 弹性石英毛细管柱 , 在上述实验条件下 ,
对 10 种有机氯分离较好 , 分离时 间在 16
m in 内 。 将农药标准品溶液稀释成不同浓度
进行测定 , 以 5 倍的噪声作为方法的最低检
出量 , 以 2 9 样品取样计算出最低检出浓度 ,
见表 1 。 本实验采用的提取方法 , 主要参考
S t e iw a n d t e r 〔‘〕提出的在线(o n 一Lin e )提取法 。
本实验以丙酮作为提取剂 , 在丙酮萃取液中
加入 固 体 N a CI 分 离 农 药的 同 时 , 加入
CH
Z
C I
: 进行液 一液分配 , 该方法 不需对样品
进行多次的提取和过滤 , 液一液分配也不需转
移到分液漏斗中进行 。 样品提取液中的水经
无水 N a ZS O 4 干燥后 , 不影响测定结果 , 同时
可减少农药的损失 。图 1 为西洋参经提取 、净
化后样品及有机氯农药标准品的色谱图 。
图 1 1 0 种农药标准品气相图谱
I 一标准品 l 一西洋参样品 l 一西洋参加标准品
有机氯农药的净化多采用磺化法 。 本实 H ZS O 楼磺化 1 次 , 即可达到净化的目的 。
验采用的磺化法去掉了分液漏斗的操作 。 直 3 . 2 回收实验 : 在西洋参样 品中 , 加入一定
接将浓 H ZSO 、加入提取浓缩液中 , 减少了操 量的混合标准品溶液进行加样回收实验 , 按
作步骤 , 提高了实验准确性 。样品提取液加浓 上述提取 、净化 、测定操作程序进行 。 标准品
·
3 8 2
·
的添加水平 、回收率及变异系数见表 2 。
3
.
3 样品测 定 : 准确称取 不 同产地的药材
(粉末 ) , 按上述方法处理 , 其结果见表 3 。 由
以上数据可以看出 , 六六六 、 D D T 在 不同产
地的药材中匀有检出 , 其中东北产西洋参中
六六六残留总量为 1 9 6 9 . 3 5 n g / g , D D T 残
留总量为 1 70 . 54 n g / g , 远远高于 国家有关
表 1 有机抓农药标准
人参中六六六及 D D T 的残留限量〔5 , (六六六
毛 0 . 1 陀/ g , D D T镇 0 . 01 陀 / g ) 。 在被检的药
材中 , 各BH C 的残留量最高 。 目前我国种植
和贮存中药材用来防治其病虫害所选用的农
药品种 、施用方法 、残留限量等诸问题尚无法
律性规定 , 是急待解决的一大问题 。
品的保留时间 、最低检测限
农药
a 一B H C
最低检测量 (g ) 最低检测浓度(n g / g ) 标准曲线 相关系数(r)
3
.
2 又 1 0 一 14 3 . 2 又 1 0 一 2 0 . 9 9 9 3
p
一
B H C 1
.
4 X 1 0 一 1 2 1 . 4 火 10 一 2 0 . 9 9 9 2
7 一BHC 4
.
4 火 1 0 一 1 3 0 . 4 4 又 1 0 一 2 0 . 9 9 8 9
己一13HC 5 . 4 X IO一 1 3 0 . 54 又 1 0 一 2 0 . 9 9 9 3
七氯 1 . 12 X 10 一 12 12 义 10 0 . 9 9 5 7
5
.
12 又 1 0 一 1 3 0 . 5 12 X 1 0 一 2 0 . 9 9 6 7
7
.
80 又 10 一 13 0 . 78 又 10 一 2 0 . 9 9 9 2
90 X IO 一 13 0
.
19 义 10 0 . 9 9 9 5
9
.
4 0 又 1 0 一 13 0 . 94 只 10 一 2 0 9 9 8 5
4
.
3又 1 0 一 13 0 . 4 3 又 10 一 2
Y = 9 95 8 丫 1 0 一 ‘
X 一 O , 1 0 8 1
Y = 2
.
0 3 7 X 1 0 一 3
X 一 0 . 1 3 6 5
Y = 1
.
32 6只 1 0 一 3
X 一 0 . 1 0 8 5
Y = 9
.
4 77 又 1 0 一 ‘
X 一 9 . 2 义 1 0 一 3
Y = 1
.
3 4 2 又 1 0 一 3
X 一 0 . 0 8 6 1
Y = 2
.
2 74 火 1 0 一 3
X 一 0 . 7 4 2 4
Y一 2 . 3 3 3 义 1 0 一 3
X 一 0 . 1 4 67
Y 一 5 . 0 1 3丫 1 0 一 3
X 一 0 . 2 1 8 6
Y 一 6 . 80 7义 1 0 一 3
X 一 1 . 1 2 1
Y 一 9 . 8 0 9又 1 0 一 4
X 一 0 . 0 1 1
0
.
9 9 8 6
线性范围 (严g )
8 又 1 0 一 5 ~
1
.
2 5 又 1 0 一 ‘
1
.
8 4 又 1 0 一 6 ~
2
.
94 X 10 一 5
1
.
1 X 10 一 6一
1
·
7 6只 10 一 5
1
·
3 6又 1 0 一 6 ~
2
.
7 2 又 1 0 一 5
5
,
6只 10 一 ‘一
2
.
9 X 1 0 一 5
2
.
5 6 X 1 0 一 6 ~
6
·
14 火 10 一 5
1
·
9 6 X 1 0 一 6 ~
4
.
7 火 1 0 一 5
4
·
8 4 X 1 0 一 7 ~
7
·
74 又 10 一 6
1
.
98 义 1 0 一 6一
8
.
4 义 10 一 5
1
·
0 8 义 1 0 一 6 ~
1
.
7 3只 10 一 5
其中 , X 为标准品的峰高 , Y 为标准品含量 (a 一B H C 及 p p ‘一D D T 为只 10 一 , g , 其余为 火 10 一 5拜g )
表 2 添加标准品回收率 (n 一 3)
农 药
a 一
B H C
日一B H C
7 一B H C
6
一
BH C
七氯
艾氏剂
PP‘一D D E
PP , 一D D D
o P‘一D D T
p P, 一D D T
添加浓度 (拜g / g ) 回收率 %
1
.
2 火 1 0 一 3
1
.
7 9 火 1 0 一 1
1
.
6 5 X 10 一 2
1
.
4 3 K 10 一 2
2
,
1 0 义 1 0 一 2
3
.
4 0义 1 0 一 2
1
.
4 7 丫 10 一 2
3
.
6 3丫 10 一 2
3
.
9 6义 10 一 2
4
.
0 5只 1 0 一 3
2
.
4 火 1 0 一 3
3
.
5 8 丫 1 0 一 1
3
.
3 0 又 1 0 一 2
2
.
8 6 X 1 0 艺
4
.
2 0 义 1 0 一 2
6
.
8 0 火 1 0 一 2
2
.
9 4 又 1 0 一 2
7
.
2 6 又 1 0 一 2
7
.
9 2 义 1 0 一 2
8
.
1 0 X 1 0 一 3
4
.
8 火 1 0 一 3
7
.
18 X IO 一 l
6
.
60 又 10 一 2
5 7 1又 10 一 2
8
.
4 0 丫 10 一 2
1
.
3 6火 10 一 l
5
.
8 8 又 10 一 2
1
.
4 5 X IO
一
1
1
.
5 8 X 10 一 工
1
.
6 2又 10 一 2
9 3
.
1
8 5
.
9
9 5
.
4
8 9
.
8
9 0
,
l
8 9
.
8
1 1 2
.
3
9 0
.
1
9 8
.
7
9 9
.
8
R SD %
6
.
2 8
8
.
2 7
7
.
9 9
7
.
0 6
7
.
4 1
5
.
12
7
.
2 6
1 0
.
4 5
5
.
6 5
10
.
6 6
表 3 不同产地西洋参中有机氯农药残留里 (ng / g )
农 药
北京
东北
a 一
BH C
0
.
6 5 7
1
.
1 5
件B H C
2 1 5
.
5
1 9 6 0
.
5
不BHC
6
.
8 5
2 6 7
占一BH C
3
,
1 6
七氯 艾氏剂 P , 一D D E PP‘一 D DD Op Pp ‘一 DD T
5
.
0 3
1 9 6
1 5 4
.
8
4
.
8 9
5
.
9 8 8
.
4 1
0
.
3 9 4
1
.
3 5
参 考 文 献
袁 兰 , 等 . 中草药 , 1 9 9 4 ; 2 5 (1 0 ) : 5 1 9
王元鸿 , 等 . 分析化学 , 2 9 9 4 ; 2 2 (9 ) : 9 3土
S t e v e n J L
.
J A O A C In t
,
1 9 9 5 ; 7 8 (3 )
:
8 2 1
S t e im w a n d te r
,
H
,
J A n al Ch em
,
1 9 8 5 ; 3 3 2
:
7 5 4
中华人 民共和 国 国家 标准 G B / T , 1 5 5 1 7 . 1 一15 5 17 . 6
(1 9 9 5 )
(1 9 9 7
一
0 7 一 2 1 收稿)
《中草药 》19 9 8 年第 29 卷第 6 期 · 3 8 3 ·
G C
一
E C D D e te rm in a tio n o f R esid u a l o r g a n o e hlo r in e Pe stic id es in
A m e r ie a n G in se n g (Pa
n a x q u in q u efo li
u m )
W
a n g H u ili
,
Ch e n Jia n m in
,
Z h a n g S h u m in g (C h in e s e A ea d e m y o f M
e diea lS e ie n e e
,
P e k in g U n io n M
e d ie a l
U n iv e rs it y
,
In st itu te o f M
e d ie in a l Pla n t D e v e lo pm e n t
,
Be ijin g 1 0 0 0 9 4 )
A bs t
ra c t A G C
一
E C D m e th o d fo r d e te r m in a t io n o f t h e re s id u a l o r g a n o e hlo rin e p e st ie id e s in P a n a x
口u in 叮u ejb liu m w a s d e s e r ib e d u sin g S E 一5 4 e o lu m n · T h e r e s id u e s w e r e e x t r a e te d fr o m sa m ple w it h a e e t o n e b y
s a tu r a tin g th e e x t r a e tio n s o lv e n t w ith N a C I a n d s im u lt a n e o u s ly liq u id
一
liq u id p a r t itio n in g b y
d ie h lo rm e th a n e
.
T he e x tr a e ts w e r e e le a n e d u p b y e o n ee n tr a te d H ZSO ‘
.
T h e d e t e et io n lim its w e r e 3
.
2 X 1 0 一 2
n g / g ~ 1
·
4 n g / g
·
R ee o v e rie s o f o r g a n o e hlo r in e p e s tie id e s w e r e 8 0 % ~ 1 3 3
.
1 8 %
.
K e y w o r d s G C o r R a n o e hlo r in e p e st ie id e s r e s id u e s P a n a x g u i, g uej blf
u m
牛黄清脑片中大黄酸 、大黄素含量测定
大连中药厂 (1 1 6 0 23) 姜 波 资 赵荣国 李明霞 真国挥
摘 要 采用薄层扫描法测定牛黄清脑片中大黄酸 、大黄素含量 。 其结果为 : 大黄酸含量 1. 03 m g
~ 2
.
2 2 m g 八。片 , 大黄素为 0 . 6 7 m g ~ i一 4 m g 八。片
关键词 牛黄清脑片 大黄素 大黄酸 含量测定 薄层扫描法
牛黄清脑片为我厂主要产品之一 , 具有
清脑安神 、清热解毒功能 。 对于高血压症 、神
经官能症 、神经性头痛等有清脑镇静作用 , 临
床应用效果良好 。 我们对其中主要成分大黄
酸 、大黄素作含量侧定 , 以期为质控标准提供
依据 (罗文毓 , 等 . 药物分析杂志 , 1 98 9 ; 9 :
2 5 9 )
。
1 实验仪器 、试剂及药品
仪器 : 日本岛津 C S 一93 0 型双波长薄层
扫描仪 。
标准品 : 大黄酸 、大黄素购自中国药品生
物制品检定所 。
试剂及药品 :所用试剂均为分析纯 , 牛黄
清脑片(大连中药厂) 。
2 方法与结果
2. 1 薄层及扫描条件
2
.
1
.
1 薄层制备 : 硅胶 G 与 0 . 5 %CM C 一N a
(1
:
3 )混合均匀 ,铺在 2 0 m m x 2 0 m m 玻璃
板上 (厚约 0 . 5 m m ) , 室温干燥后 , 1 0 5 ℃活
化 l h , 放干燥器中备用 。
2
.
1
.
2 展开条件 : 甲苯一二氯 甲烷 一冰醋酸 (6
: 3 : 1 )
2
.
1
.
3 扫描条件 : 锯齿型反射扫描 , 测定波
长为 4 4 0 n m , 参比波长为 5 5 0 n m , S x = 3 ,狭
缝 1 . 2 m m x l . Z m m , 灵敏度中 。
2
.
2 标准曲线绘制
2
.
2
.
1 标准液配制 :精密吸取大黄酸 5 m g ,
置 2 50 m IJ 量瓶中 , 加 C H CI 。溶解并至刻度 ,
使其浓度为 0 . 02 m g / m L 。 另精密吸取大黄
素对照品 4 . 5 m g , 置 25 m L 量瓶中 , 加甲醇
溶解至刻度 , 其浓度为 0. 18 m g / m L 。
2
.
2
.
2 标准曲线绘制 : 大黄酸 :精密吸取大
黄酸标准液 (0 . 0 2 m g / m L ) 5 、 1 0 、 1 5 、 2 0 、 2 5
拜L , 点于 同一块薄层板上 , 用 以上展开系统
展开 , 展距 1 5 c m , 取出 , 挥干溶剂 。 按扫描条
件在 C S 一93 0 薄层扫描仪上扫描 , 根据标准
落A d d r e s s :Jia n g Bo , Da lia n H e r b a lM e d ieine F a e t o r y , D a lia n波 女 , 1 9 9 2 年毕业于长春 学院中药系 学位 , 同年分配在大连中药厂工作 , 1 9 9 4 升为工程师责中药厂化验室工作。 自 1与编写《中国动物药志》(吉9 9 2 年以 在《现代 学》、《中国中药杂志》、《中成药》等杂志上 文 20 余篇 ,
现负并参林科学技术出版社) 。
·
3 8 4
·