全 文 ：缺血缺氧时 ,可产生大量炎性因子 ,因此可诱导 NO
的合成来发挥抗心肌损伤的作用。
本研究发现在注射 ISO前预适应地给予 SQS
后 ,可明显对抗 ISO所造成的心肌损伤 ,表现在可
对抗 ISO所致的 S-T段抬高 ,减少 S-T段抬高次
数 ,减少心律失常的发生 ;可显著降低血清 CPK活
性 ,减少 FFA的含量 ;提高血清中腺苷的含量。组织
学上 , SQ S明显减轻了心肌细胞水肿、变性、坏死和
炎性细胞浸润 ,这表明 SQS可能有药理性预适应样
作用。 当使用了 NO释放阻断剂 N ET(作用在鸟苷
酸环化酶环节 )可减弱或取消 SQS的药理性预适应
作用 ,表明 SQS产生的药理性预适应作用至少部分
通过激活 NOS,诱导 NO和腺苷的形成而发挥作
用。但 SQS药理性预适应作用的确切机制有待于进
一步研究。
参考文献:
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左旋千金藤啶碱对 β肾上腺素受体的拮抗作用
王　蕾 1 ,汪明华2
⒇
( 1. 青岛大学医学院 药理教研室 ,山东 青岛　 266021;　 2. 上海医科大学药学院 药理教研室 ,上海　 200032)
摘　要: 目的　研究左旋千金藤啶碱 ( l-SPD)对 β肾上腺素受体的作用。 方法　应用放射配体结合实验 ,通过竞争
[3H ]双氢烯丙洛尔 ( [3 H]DHA)特异性结合 ,研究 l -SPD对 β肾上腺素受体的亲和力 ;在离体猪冠状动脉环实验中 ,
观察 l-SPD对 β肾上腺素受体的拮抗作用。 结果　 l -SPD能竞争 [3 H] DHA和兔肺细胞膜的结合部位 ,其 Ki值为
( 5. 75± 0. 56) μmol / L; l-SPD使去甲肾上腺素 ( NA )对数累加量效曲线 ( LCCRC)右移又压低 ,其 PA2和 PD′2值分
别为 7. 21± 0. 78, 5. 32± 0. 13,而普萘洛尔 ( Pro )使 N A的 LCCRC平行右移 , PA2值 9. 19± 0. 17。 结论　 l -SPD对
β受体有拮抗作用。 此外 ,对其它受体可能也有影响。
关键词: β肾上腺素受体 ;左旋千金藤啶碱 ;结合位点 ;冠状血管
中图分类号: R285; R971. 94　　　文献标识码: A　　　文章编号 : 0253 2670( 2001) 01 0046 03
Antagonism of l-stepholidine onβ-adrenoceptors
WAN G Lei1 , W ANG Ming-hua2
　　 ( 1. Depar tment of Pharmacolog y , Medical Co lleg e o f Qingdao Univ ersity , Qingdao Shandong 266021, China; 2.
Depar tment of Pha rmaco lo gy , College o f Pharmacy, Shanghai Univ ersity o f Medica l Sciences, Shanghai 200032, China )
Abstract: Object　 To study the effect of l -stepholidine ( l-SPD) on β-adrenoceptors. Methods　 The
af fini ty o f l-SPD to β-adrenoceptors was investig ated by radio lig and binding a ssay by means of competitiv e
[
3
H ] labelled Dihydro-Apreno lol ( [
3
H ] DHA ) specific binding. The antagonism of l-SPD on β-
·46· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-07-12作者简介:王　蕾 ( 1967-) ,女 ,山东烟台人 ,副教授 ,硕士学位。 1990年毕业于上海医科大学药学系药理专业 ,获学士学位 , 1990年至今于青岛医学院药理教研室任教 , 2000年获硕士学位。 主要研究神经药理。
adrenoceptors w as tested on pig co rona ry a rtery ring s in vit ro. Results　 [3 H] DHA binding assay showed
that l -SPD specifically displayed binding af fini ty to β -adrenocepto rs. The Ki value w as ( 5. 75± 0. 56)
μmo l /L; the log ari thmic cumulativ e concentra tion-response curv es ( LCCRC ) o f l-SPD fo r NA on the pig
cor onar y a rte ry ring s show ed that the position o f curv es shifted to the right and the crest depressed. The values of pA2 an
pD′2 w ere 7. 21± 0. 78 and 5. 32± 0. 13 respectively. As a cont ro l, propr anolol ( Pro ) could shift the curv es pa rallelly to
the righ t and the pA2 value of Pro wa s 9. 19± 0. 17. Conclusion　 The results suggested that l-SPD is aβ -
adrenoceptor antagonist and has a ffinities to mo re than one kind of receptor.
Key words: β -adrenergic recepto r; l -stepholidine; binding si te; co ronary vessels
　　四氢异喹啉类生物碱在植物界分布甚广 ,左旋
千金藤啶碱 ( l-SPD)存在于广西地不容等植物中 [1 ] ,
文献报道其有镇痛、镇静、催眠、降压和抗心律失常
等作用 [2～ 4 ]。 其镇痛、镇静、催眠作用与拮抗多巴胺
受体和 5-羟色胺受体有关 ,而降压和抗心律失常作
用除与 α1、α2受体拮抗作用及抑制 Ca2+ 进入细胞和
细胞内 Ca2+ 动员有关外 [ 5, 6] ,是否还与 β受体有关 ,
尚无报道。本实验用放射配体结合实验和离体猪冠
状动脉环实验 ,观察其对 β肾上腺素受体的作用。
1　实验材料
1. 1　动物:新西兰大白兔 ,♀、 兼备 ,体重 2～ 2. 5
kg ,上海医科大学实验动物中心提供 (合格证号:医
动字第 2-22-6号 )。
1. 2　试剂: [3 H]双氢烯丙洛尔 ( [3 H] DHA) ,英国
Amersham产品 ;普萘洛尔 ( Pro ) ,北京制药厂生产 ,
批号: 940322;酚苄明 , Singma公司产品 ;重酒石酸
去甲肾上腺素 ( N A ) ,武汉制药厂生产 ,批号:
960412; l-SPD由中科院上海药物所提供 ,分析纯 ,
先配成 0. 01 mo l /L溶液 ,再按所需浓度稀释。
2　方法
2. 1　兔肺细胞膜的分离与制备:新西兰大白兔空气
栓塞处死 ,迅速取兔肺组织 ,加磷酸缓冲液 ( p H7. 7)
制成匀浆 ,以 1 000× g离心 12 min,取上清液 ,再以
32 633× g离心 15 min,弃上清液 ,沉淀加磷酸缓冲
液 (每管 1 mL)制成膜混悬液。以上操作均在 4℃以
下进行 ,膜蛋白含量用 Low ry法测定 [7 ]。
2. 2　放射配体结合实验:在 β受体结合实验中 ,每
管含膜蛋白 500μg , 1 nmo l /L [3H]DHA,不同浓度
的 l -SPD,非特异性结合管内含 100μL Pro,终体积
为 400μL。每次实验均做复管 ,重复 3次 ,各反应管
混匀后于恒温水浴箱 ( 37℃ )振摇 10 min,在冰浴中
终止反应。然后在玻璃纤维滤膜上 (上海虹光纸厂
49型 )减压抽滤 ,滤膜干燥后用 γ-液闪计数器测其
放射活性 (cpm) ,制作竞争曲线 ,根据 Hill作图求得
Hill系数 (nH )和半效抑制浓度 ( IC50 ) ,按文献 [8 ]求出
其表观解离常数 K i。
2. 3　离体猪冠状动脉环实验:取刚屠杀猪的冠状动
脉 ,制成 3 mm的动脉环 ,置于 37℃ , 20 mL K-Hen
营养液中 ( p H 7. 2～ 7. 3) ,通入 95% O2+ 5% CO2 ,用
记录仪描记血管张力变化。 负荷 2. 5 g ,平衡 1 h,用
50μmol /L酚苄明 30 min阻断α受体。营养液冲洗 ,
稳定 2 h, 20 min换 1次营养液。加入 20 nmol KCl
产生收缩。在此张力基础上 ,用累积浓度法加入 NA产
生松弛 ,得到 NA的对数累加量效曲线 ( LCCRC)。用
K-Hen营养液冲洗标本并稳定 1 h ,分别加入 30
nmol /L Pro和 1, 3, 10μmol /L l -SPD,再按上述方
法加入 NA,得到在 Pro 和 l-SPD存在时 NA的
LCCRC,分别求出 PA2和 PD′2值 [9 ]。
3　结果
3. 1　 l-SPD对兔肺细胞膜 β肾上腺素受体的亲和
性: l-SPD能竞争 [3H]DHA与兔肺细胞膜 β受体结
合 ,与 β受体有一定的亲和力 ,经 Scatchard[10 ]分析
法计算 , [3H] DHA与兔肺细胞膜结合的 KD值为
1. 35 nmo l /L, l-SPD的 K i值为 ( 5. 75± 0. 56 )
μmol /L。
3. 2　 l -SPD对猪冠状动脉环的作用
3. 2. 1　 NA的松弛作用: 20 mmol /L KCl在猪冠状
动脉环上能产生持续性收缩 , 15 min达峰值 ,张力
增加到 ( 1. 7± 0. 4) g,用累积浓度法加入 NA产生
松弛作用 , N A的 PD2值为 6. 11± 0. 33(n= 8)。
3. 2. 2　 Pro和 l-SPD的拮抗作用: Pro 30 nmol /L
能竞争性拮抗 NA产生的松弛 ,并使其 LCCRC平
行右移 (图 1) , Pro对 NA的 PA2值为 9. 19± 0. 17,
l-SPD的作用同 Pro相似 ,使 NA的 LCCRC右移 ,
同时压低 (图 2) , l-SPD对 NA的 PA2和 PD′2值分
别为 7. 21± 0. 78和 5. 32± 0. 13(n= 6)。
4　讨论
采用兔肺细胞膜进行放射配体结合实验 ,结果
表明 l -SPD能竞争 [3 H] DHA与兔肺细胞膜的 β受
体结合 ,其 K i值为 ( 5. 75± 0. 56) μmo l /L ,说明 l-
SPD对 β受体有一定的亲和力。
放射配体结合实验虽有诸多优点 ,但不能揭示
·47·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
A-N A　 B-NA+ 30 nm ol Pro
图 1　 Pro对 NA松弛离体猪冠状动脉量效
曲线的影响 (x+ s ,n= 6)
A-N A　 B-N A+ 1μmol /L l -SPD　 C-NA+ 3μmol /L l-SPD　
D-N A+ 10μmol /L l-SPD
图 2　 l -SPD对 NA松弛离体猪冠状动脉量效曲线的
影响 (x+ s ,n= 6)
药物对受体的内在活性。本实验在放射配体结合实
验的基础上 ,用离体猪冠状动脉环实验进一步证实
l -SPD的生物效应。用 NA作激动剂 ,先用酚苄明阻
断 α受体 ,再加入不同浓度的 l -SPD,结果显示
l-SPD可使 NA的 LCCRC右移且抑制最大效应 ,其
PA2和 PD′2值分别为 7. 21± 0. 78和 5. 32± 0. 13。
作为对照 , Pro使 NA的 LCCRC平行右移 , PA2值
为 9. 19± 0. 17。以上结果表明: l -SPD有 β受体拮抗
作用 ,此外 ,还可能作用于其他受体。
β受体与心血管系统关系密切 ,β受体拮抗剂阻
断 β受体 ,使心率减慢、心肌收缩力减弱、心输出量
降低、冠脉流量下降、心肌耗氧量明显减少 ,血压下
降。由本实验结果可以推测 l -SPD的降压和抗心律
失常作用 [2, 4 ]除与 α1 ,α2受体拮抗作用及抑制 Ca2+
进入细胞和细胞内 Ca2+动员有关外 [5, 6 ] ,尚与阻断 β
肾上腺素受体有关。
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