全 文 ：光度 ,经回归得线性方程 A= 6. 344× 10- 3C -
1. 302× 10- 3 , r为 0. 998 9。
3. 6　多糖的含量测定: 精密称取约 0. 1～ 0. 15 g粗
多糖样品于小烧杯中 ,加水适量使溶解 ,定量转移至
100 mL容量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,混匀 ,得样品溶
液 ,分别吸取该溶液 10. 0, 7. 5, 9. 0 mL置于 100 mL
容量瓶中 ,加水至刻度 ,得 3组供试品浓液。分别吸取
该供试品溶液各 2 m L于具塞试管中 (每组 3份 ) ,按
标准曲线项下方法操作 ,以酚-硫酸溶液为空白 ,在
488 nm处进行比色测定 ,按回归方程求出供试品溶
液中多糖含量。 同样测定对照药材 ,结果见表 1。
表 1　多糖含量测定结果
组　数 吸光度 检出量
(μg /m L)
含　量
(% )
t检验
伊犁黄芪 1 　 0. 155 　 12. 3 　 0. 35
2 0. 115 9. 15 0. 34
3 0. 140 11. 14 0. 35 P < 0. 001
蒙古黄芪 4 0. 19 15. 17 6. 6
5 0. 225 17. 83 6. 3
6 0. 27 21. 38 6. 3
3. 7　回收率实验: 取样品液 10. 0 mL 6份置 100
mL容量瓶中 ,分别加入 0, 5. 0 mL 0. 1 mg /mL的
标准品溶液 ,加水稀释至刻度 ,每份取 2 mL,按样品
测定项下操作 ,以酚 -硫酸溶液为空白 ,在 488 nm
处进行比色测定 ,计算回收率 ,结果回收率为
94. 7% ,RSD= 0. 32% (n= 6)。
4　讨论
4. 1　我们通过反复实验 ,发现伊犁黄芪中含黄芪甲
苷极少 ,在薄层板上只能见到模糊斑点。
4. 2　从图 1-B, C中可以看出伊犁黄芪与蒙古黄芪
的区别 ,这可用于对伊犁黄芪的鉴别。
4. 3　从多糖含量测定结果可看出伊犁黄芪多糖含
量明显低于蒙古黄芪。
参考文献:
[1 ]　中国科学院新疆生物土壤沙漠研究所 . 新疆药物植物志 [ M ]
.第三册 . 乌鲁木齐:新疆人民出版社 , 1984: 58-59.
[2 ]　杨惠芝 ,谢红敏 . 用分光光度法测定金钱草粗提物中多糖的含
量 [ J] . 中草药 , 1996, 27(增刊 ): 97-98.
[3 ]　陈友仙 ,张中苏 . 黄芪多糖含量测定法中存在的问题及解决办
法 [ J] . 中医药研究 , 1993, 5: 56.
马齿苋中多糖的提取与含量测定
周　晶 ,刘景文 ,符敬伟 ,郝兰芳
(天津医科大学药学院 ,天津　 300203)
摘　要:目的　考察马齿苋中的多糖含量。 方法 :采用蒽酮 -硫酸比色法测试。 结果 : 3批马齿苋多糖含量分别是
8. 63% 、 10. 22% 和 11. 06%。 结论: 马齿苋中多糖的含量与其生长期有关。
关键词: 马齿苋 ;多糖 ;蒽酮 -硫酸比色法 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0124 02
Isolation and Assaying of polysaccharides in Portulaca oleracea
ZHOU Jing , LIU Jing-w en, FU Jing-w ei, HAO Lan-fang
　　 ( Co lleg e o f Pha rmacy , Tianjin Univ ersity of Medical Sciences, Tianjin 300203, China)
Key words: Portulaca oleracea L. ; po lysaccharides; anthrone-H2 SO4 co lorimetry; assa ying
　　马齿苋 Portulaca oleracea L. 为马齿苋科马齿
苋属植物 ,具有清热解毒 ,凉血止血的功效。现代药
理研究表明有降血脂、抗衰老、提高机体免疫功能的
作用。其化学成分含有 L -去甲肾上腺素、多巴胺 ,还
富含有机酸、氨基酸、蒽醌、香豆素等成分 [1 ]。马齿苋
多糖的研究尚未见报道 ,我们采用蒽酮-硫酸比色
法 [2 ] ,对不同生长期的马齿苋多糖进行了含量测定。
1　仪器与试药
UV-240型分光光度计 (日本岛津 )。 马齿苋药
材 1, 2, 3分别在 7, 8, 9月份采集于天津郊区。葡萄
·124· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-06-26作者简介:周　晶　 ( 1956. 06-) ,女 ,辽宁省人 , 1982年毕业沈阳药学院 ,现任天津医科大学药学院教授。研究方向 ;天然药物化学与中药制剂。 主要工作:主持三类新药“新脑安口服液”的研究 ;“降低卷烟焦油量的中药制剂研究”等工作 ,发表论文 20余篇。
* 天津医科大学药学院 2000届毕业生
糖、蒽酮等试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　多糖的提取与纯化: 取马齿苋干品 (水分 5%
～ 6% ) 2 g ,水煎煮 3次 ( 1. 5, 1. 0, 0. 5 h) ,过滤 ,提
取液静置 12 h后 ,取其上清液减压浓缩 ,浓缩液以
乙醇调至浓度 75% ,搅拌 ,静置 24 h ( 5℃～ 10
℃ ) ,沉淀物再分别以无水乙醇、丙酮、乙醚回流洗
涤 ,得灰白色粗多糖粉末 ,于 60℃ 烘干 ,密封备用。
2. 2　溶液的配制
2. 2. 1　葡萄糖标准液的配制: 精密称定 105℃ 干
燥至恒重的葡萄糖 0. 102 3 g ,以蒸馏水溶解 ,定容
至 100 mL容量瓶中 ,质量浓度为 1. 023 mg /mL。
2. 2. 2　马齿苋多糖液的制备:精密称定 60℃ 干燥
至恒重的马齿苋多糖各 50 mg ,加少量蒸馏水溶解 ,
定容至 100 mL容量瓶中。
2. 2. 3　蒽酮溶液的配制: 称取 0. 2 g蒽酮 ,加 100
m L浓硫酸 ,混合摇匀即得 (现配现用 )。
2. 2. 4　样品溶液的制备: 精密称取 3批马齿苋干
粉 (过 80目筛 )各 0. 5 g 分别置圆底烧瓶中 ,以
80% 乙醇 20 mL,回流提取 1 h ,趁热过滤 ,残渣用
80% 热乙醇洗涤 ( 8 mL× 3) ,残渣连同滤纸置于圆
底烧瓶中 ,以 40 mL蒸馏水 ,加热回流提取 1 h,趁
热过滤 ,残渣用热水洗涤 ( 8 mL× 3) ,洗液并入滤液
中 ,放冷后 ,定容至 100 mL容量瓶中。
2. 3　标准曲线的制备: 分别量取葡萄糖标准液
0. 1, 0. 2, 0. 3, 0. 4, 0. 5, 0. 6 mL于 10 mL容量瓶 ,
以蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀。分别取 2 mL上述溶液
于 10 mL具塞试管中 ,以 2 mL蒸馏水作空白 ,各
自加入 4 mL蒽酮试剂 ,立即摇匀 ,置沸水浴中加热
8 min,迅速冷至室温 ,于 620 nm 处测定吸光度
( A)。以 A对葡萄糖浓度 C做回归处理 ,得回归方
程 C= - 0. 802 3+ 26. 684 A, r= 0. 999 1。表明葡
萄糖在 3. 41～ 20. 46μg /mL范围内与吸光度呈较
好的线性关系。
2. 4　换算因子的测定:分别取 2 mL多糖供试液及
4 mL蒽酮试剂于具塞试管中 ,摇匀 ,以下按“标准曲
线”项下操作测定 A值 ,计算供试液中葡萄糖含量。
计算换算因子 f = 4. 823, RSD= 1. 63% (n= 3)。
2. 5　稳定性实验:取 2. 4项中供试液 ,每隔 1 h测
定 1次吸光度 ,连续 6 h内考察其稳定性 , A=
0. 536, RSD= 0. 83% (n= 7) ,样品反应液较稳定。
2. 6　加样回收率测定:精密称定样品 2粉末 0. 2 g
及一定量化的多糖溶液 ,按“样品液制备”项制备溶
液 ,定容至 100 mL。各取制备液 0. 5 mL,于具塞试
管中 ,加水 1. 5 mL,按“标准曲线”项下测吸光度 ,计
算回收率为 102. 21% , RSD= 1. 5% (n= 5)。
2. 7　样品测定:分别量取各样品液 1 mL,置具塞试
管中 ,加水 1 m L,以“标准曲线”项下操作测定吸光
度 ,求出供试液中葡萄糖的含量。 按下式计算样品
中多糖含量 (表 1)。 多糖% = ( C· D· f /W )×
100% 。
式中: C为供试液中葡萄糖含量 ( mg /mL ) , D为供试液的稀
释因素 , f 为换算因子 , W为样品重量 ( mg )。
　　表 1　不同生长期马齿苋的多糖含量 (n= 5) (% )
样品 采集期 多糖含量 R SD
1 07-05 8. 63 2. 92
2 08-10 10. 22 1. 86
3 09-08 11. 06 3. 76
3　讨论
不同生长期的马齿苋多糖含量差异较明显 ,目
前的研究表明多糖具有诸多的生理活性 ,考虑到充
分利用有限的中药资源 ,应当选择最佳的采集期 ,从
而提高中药的使用价值。
本实验首先以 80% 乙醇回流提取除去小分子
糖、苷类、生物碱等干扰 ,再用水提取多糖 ,以蒽酮-
硫酸比色法测定样品中的单糖 ,通过单糖和多糖的
换算因子计算药材中的多糖。蒽酮试剂较稳定 ,但在
应用过程中 ,反应时间、温度要严格控制 ,充分混匀 ,
否则影响实验结果。
致谢:自采药材由天津医科大学药学院生药教
研室张富娟副教授鉴定。
参考文献:
[ 1 ]　余传龙 ,赵守训 ,黄泰康 ,等 . 中药辞海 (第一卷 ) [M ] . 北京:
中国医药科技出版社 , 1993.
[2 ]　刘重芳 ,金若敏 ,金锦娣 ,等 . 猴头多糖提取工艺优选及药效学
初探 [ J] .中成药 , 1998, 20( 2): 6-8.
保护植被　保护环境　保护地球
·125·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期