全 文 ：b
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.
肝酶谱测定对汉防己甲素
抗肝纤维化作用的价值分析
济南军区总医院化验科 ( 2 5 0 0 3 1) 张道杰 帝 彭立义 权启镇 ” 王要军 ”
摘 要 由 C 1C 4诱发的肝纤维化实验大 鼠 , 经汉防 己 甲素 ( t et ar nd ir ne , T et )治疗证明 : T et 有确实
可靠的抗肝纤维化作用 。 而 T et 抗肝纤维化的作用可通过由丙氨酸氨基转移酶 ( A L T ) 、 胆碱醋酶
(C h E )
、 单胺氧化酶 ( M A O ) 、 碱性磷酸酶 ( A K )P 、 卜谷氨酞转肤酶 (卜 G T )组成的肝酶谱的活性变化
规律加 以了解和掌握 , 因肝酶谱的检测 系非介入性检测 , 较介入性的病理肝组织穿刺检测具有简
便 、 准确 、 快速并可进行动态观察等优点 。
关键词 肝酶谱 汉防 己甲素 抗肝纤维化 生化指标
用四氯化碳 ( CCI ; )诱发大 鼠肝纤维化 ,
同 时给 予汉 防 己 甲素 ( t e t r a n d r i n e , T e t ) 治
疗 ,动态观察肝组织病理改变和丙氨酸氨基
转移酶 ( A L T ) 、 胆碱醋酶 (C h E ) 、 单胺氧化酶
( M A O )
、 碱性磷酸 酶 ( A K P )和 卜谷氨酞转
肤酶 (r 一 G T )的活性变化 ,并与对照组进行对
比分析 ,从而探讨 T e t 抗肝纤维化过程中血
清酶学的变化规律 , 为肝纤维化的诊断 ,药物
疗效观察及预后判断提供有价值的生化指
标 。
1 材料
动 物 : 雄性 W i s t a r 大 鼠 72 只 , 体重
23 8
.
0士 3 9 . 09 , 购 自山东医科院 。
2 方法
2
.
1 动物处理 : 将 72 只大 鼠随机分为 3 组
每组 24 只 。 T et 治疗组 ( A 组 ) : 皮 下注射
5 0 % C C 1
4 一花生油溶液 1 . Zm l /k g 体重 , 2 次 /
周 ,共 1 2 周 , 同时 T e t 3 o m g / k g 体重 , 灌胃 3
次 /周 , 共 1 4周 ; 中毒 对 照组 ( B 组 ) : 注射
C CI
; 同 A 组 ,等量生理盐水灌 胃 ; 正常对照
组 (C 组 ) : 注射等量花生油 ,等量生理盐水灌
胃 。 于实验第 4 、 s 、 1 2 、 1 4 周 (注射 C C 14 前 ) 每
组随机取 6 只大鼠分别空腹抽血后处死 ,进
行血清酶学检测及肝组织病理观察 。
2
.
2 酶谱检测 : M A O 用伊利康生物技术有
限公司提供的试剂盒 , C h E 试剂盒购于广州
越秀东方新科技研究所 , 严格按说 明书进行
操作 。 A L T 、 A K P 、 卜 G T 用美国 E n e o r e l 型
自动生化分析仪测定 。 A L T 试剂盒由北京中
生生物工 程高技术公司提供 ; A K P 和 r 一G T
试剂盒购自上海长征医学科学有限公司 。
3 结果
3
.
1 3 组酶谱测定 : 结果见表 。
3
.
2 病理观察 : 实验第 4 周 B 组可见肝细
胞浊肿变性 , 小叶中央区脂肪变性明显 ,个别
细胞可见核固缩 、 崩解现象 ,坏死灶周围有少
许炎细胞浸润 ,汇管区胶原增多 。 A 组肝细
胞脂肪变性明显减轻 , 不足 1 4/ 小叶 ,无肝细
寄
A dd
r e s s : Z h a n g D a o 一ie , Ji n a n M il i t a r y R e g i o n , G e n e r a l H o s P i t a l , Ji n a n
卜 哥 济南军 区总 医院消化科
《中草药 》 1 9 9 6 年第 27 卷第 2 期 · 9 3 .
表 A、 B、 3 C组血清酶测定结果比较 (二 士 S, u l/ )
时间 组 别 例数 A I T M A O A K P r 一G T
第 4 周
第 8 周
第 12 周
第 1 4 J司
0
.
8 6士 0 . 7 5 .
1
.
2 5士 0 . 1 9 . 甘
0
.
4 1士 0 . 0 3
3
.
8 5士 0 . 8 0 1 赞
6
.
4 8士 0 . 0 4 甘 ’
0
.
4 3士 0 . 0 3
0
.
5 8士 0 . 0 8 书 .
0
.
8 8士 0 . 1 4 登 .
0
.
4 2士 0 . 0 6
0
.
4 8士 0 . 0 8
0
.
5 2士 0 . 0 6 贾 分
0
.
4 3士 0 . 0 6
0
.
7 8士 0 . 0 1
0
.
76士 0 . 0 4 .
0
.
6 3士 0 . 0 5
0
.
74士 0 . 0 5 .
0
.
64士 0 . 0 9 . 竹
0
.
8 2士 0 . 0 6
0
.
8 1士 0 . 0 5
0
.
4 0士 0 . 0 6 ’ 衬
0 84士 0 0 4
0
.
82士 0 . 0 3
0
.
28士 0 . 0 8 , .
0
.
8 3士 0 . 0 4
0 4 5士 0 . 1 1
0
.
4 3士 0 . 0 8
0
.
4 3士 0 . 0 9
0
.
4 7士 0 . 0 9
0
.
4 8土 0 . 0 5
0
.
4 4士 0 . 0 9
0
.
4 6士 0 . 0 7
0
.
9 0士 0 . 1 8
0
.
4 4士 0 . 0 9
0
.
4 6士 0 . 0 8
0
.
8 9士 0 . 1 2
0
.
4 5士 0 . 1 1
0
.
6 3士 0 . 1 8
0
.
6 2士 0 . 2 8
0
,
6 7士 0 . 2 1
0
.
6 7士 0 . 18
1
.
12 士 0 . 1 5 “ .
0
.
6 6士 0 . 2 1
0
.
7 9士 0 . 12
1
.
52 士 0 . 2 6 赞 赞
0
.
6 7士 0 . 2 3
0
.
8 3 士 0 . 12
1
.
77士 0 . 15 , 份
0
.
6 9士 0 . 2 1
0
.
] 4士 0 . 16
0
.
2 5士 0 . 19
0
.
1 5士 0 . 13
0
.
1 6士 0 . 1 1
0
.
4 6士 0 . 2 1 昔 倪
0
.
14士 0 . 12
0
.
2 5士 0 . 16
0
.
68士 0 . 2 0 渭 井
0
.
2 0士 0 . 1 3
0
.
16士 0 . 1 3
0
.
7 6士 0 . 2 5 份 .
0
.
17士 0 . 2 3
ABC
A
一
T et 治疗组 ; B 一C CI , 中毒对照组 ; C 一正常对照组 与对照组相比 , ` P < 。 . 0 5 ” 尸< 0 . 01 (用两样本均数的 t 检验 )
胞点状坏死 。 第 8 周 B 组肝细胞变性进一步
加剧 ,达 2/ 3 小叶 ,胶 原沿肝 界板延伸 , 呈细
纤维 隔状 ,但无完整公隔形成 。 A 组肝细胞
变性开始好转 , 中央静脉壁及汇管 区少量胶
原纤维沉积 ,无纤维隔状延伸 。 第 12 周 B 组
纤维化继续加重 ,肝细胞再生旺盛 , 小叶间形
成完整纤维隔 ,个别小叶形成假小叶结构 。 A
组则与第 8 周无明显变化 。 14 周 B 组多数假
小叶形成 , 而 A 组可 见中央静脉及汇管区结
缔组织吸收 、 减少 。 C 组肝组织无明显变化 。
4 讨论
从病理变化可以看出 : 由 C C I , 诱 发肝纤
维化的实验大 鼠 ,经 T et 治疗 14 周后 、 可避
免 肝纤 维化 的发 生 , 其肝 细胞组 织结 构及
A I
J
T
、
C h E
、
M A ( )
、
A K P
、 r 一G T 活性 与 正常
对 照组 ( C 组 )基本一致 , 从而提示 : T et 确有
全面保护肝细 胞及抗肝纤维 化的作用 。 而
T e t 抗肝纤维化的机理可能是 : C CI ; 通过脂
质过氧化作用 ,破坏肝细胞的膜性结构 , 阻断
其蛋白质的合成 ,而逐渐导致肝纤维 化的发
生 〔` 〕 。 而 T et 是一种 C a “ 拮抗剂 〔别 , 具有抗
脂质过氧化的作用 。 通过调节细胞内外钙的
代谢 ,来维护细胞的稳定性 ,从而抑制细胞内
外酶的改变 ,阻止 M A O 等酶活性 的增加 ,而
使胶原纤维的合成受到抑制 , 从而起到抗肝
纤维化的作用 。
·
9 4
·
肝脏是全身含酶量最 丰富的器官 , 不 同
的酶在肝小叶不同区域和肝细胞亚结构 内浓
度不一样 ,其分子量和代谢率又各不相同 , 因
而在肝脏不同病理状况下 ,其升降的幅度也
各有差异 ,这 为酶学检测在临床应用提供 了
生化基础 〔 3 〕 。 而我们以 A L T (反映肝细胞损
伤 ) 、 (二h E (反映肝储存备功能 ) 、 M A O (反映
肝纤维化 ) 、 A K P 及 r 一 G T (反映胆汁郁 积和
肝内占位性病 变 ) 川 5 种酶的联合检测 , 可从
不同的侧面全面地反映肝脏的生理 、 病理变
化 。 如从第 4一 14 周 B 组 (C C I 、 中毒对照组 )
5 种血清酶的变化 , 就可间接地反映出 C CI ;
诱发的实验性大 鼠肝细胞 由炎症 、 坏死至肝
纤维化形成的过程 ;而以 A 组 ( T e t 治疗组 )5
种血清酶的变化 . 就可了解经 T e t 治疗后 ,肝
细胞由炎症到逐渐恢复的过程 ( 见表 ) 。
综上所述 , 从病理观察和肝酶谱两方面
分析 . T e t 具有抗肝纤维化作用 。 在临床应用
中 . 酶谱检测为非介入性检测 , 比介入性的病
理观察对病人无损害 , 简便易行 , 便于动态观
察 。 故肝酶谱可作为 T e t 抗肝纤维化疗效观
察及预后判断的重要生化指标 。
参 考 文 献
1 陈 l司兴 , 等 . 1隋床肝胆病杂志 , 1 9 94 , 10 ( 2 ) : 8 3
2 权启镇 , 等 . 临床 肝胆病杂志 , 1” 4 , 1。 (4 )增刊 : 48
3 吕 晴 , 等 . 临床 肝胆病杂志 , 19 94 , 10( 4) : 2 08
4 孟宪铺 , 等 . 1庙床肝胆病杂志 , 29 8 9 , 5 ( 2 ) : 6 3
( 1 9 9 5
一
0 1
一
1 2 收稿 )
An a y lsi o sf Te t ran d rin e An t i
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, a e e u r a t e a n d e o n v e n ie n t t h
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e p a t ie b i o p s y
.
I t p r o v id e s v a l
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e m i e a l i n d e x e s f o r d ia g n o s is
, e u r a t i v e e f f
e e t a n d p r o g n o s t ie J u d g
e m e n t o f h e p a t i e f ib r o s i s
.
理气药对荷瘤小鼠免疫功能的影响
北京医科大学生化和分子生物学系 ( 1 0 0 0 8 3) 叶 加 景 再益民 钱伯文 “ 于尔辛 ” ’
摘 要 实验中发现理气药有一定的抑 制小鼠肿瘤 (S 180 , L e w is 肺癌 ) 生长的作用 。 当小鼠接种
5 180 和 L e w 1 S 肺癌后 , 其免疫功能降低 , 白细胞介素 l (I I 一 2 )活性低下 , T 细胞亚群比例失调 , T h /
T S < 1
。 经理气药治疗 , 明显抑制了 -lI 一 2 活性的降低 , 与对 照组比较 , 差别有显著意 义 (尸 < 0 . 05 ) ,
并能提高 T 辅 助细胞 , 调整 T 细胞亚群的比例 , 使 T h / T S > 1 。 表 明理气药能提高荷瘤机体的免疫
功能 , 以达到抗肿瘤效应 。
关键词 理气病 白细胞介素 I T 细抱亚群 免疫功能
恶性肿瘤与人体气机关系密切 , 气机失
畅是导致肿瘤形成的重要 原因之一 , 而肿瘤
的生长又促进全 身气机的紊乱 〔` 〕 , 临床上常
配伍理气 药 治疗各种肿 瘤 , 获得较 好的疗
效 〔 2 ’ 3〕 。 本实验拟通过理气药对荷瘤小鼠 lL -
2 活性和 T 细胞亚群的观察 ,探讨理气药的
抗癌作用 。
1 材料与方法
1
.
1 动物与瘤源 : B A L B / c 小 鼠 , C 。 : lB , 小
鼠 , 雄性 ,体重 18 一 2 09 , 上海市计划生育研
究所实验动物中心提供 。小鼠腹水型 5 1 8 0 瘤
株 , L e w is 肺癌 , 由中科院上海药物研究所赠
送 。 接种 2 又 10 6 个瘤细胞于小 鼠右液部皮
下 。
1
.
2 药物及试剂 : 理气药 : 八月札 、 广木香 、
佛手购 自上海市医药公司 。 水煎沸后 30 m in ,
过滤浓缩至每 I O Om l 含生药 2 0 09 ,剂量 5 0 9 /
k只 · d 。 理气药的治疗剂量参照 《医学动物实
验 方法 })( 施 新酞 . 北京 : 人 民卫 生 出版社 .
19 80
,
10 4 )
, 并 以此 为 基 础 , 通 过 不 同 剂 量
( 2 0 0
、
1 0 0
、
5 0
、
2 5
、
1 2
.
5 9 / k g ) 的抗肿瘤实验 ,
确定 5 0 9 / k g · d 为最佳剂量 。 在接种肿瘤后
第 2 夭开始每天灌 胃治疗 , 用生理盐水作对
照 , 治疗 12 d 后 , 观察免疫 功 能指标 , 治 疗
Z ld 后 ,观察肿瘤生长情况 。 正常组未予任何
处理 。 C o n A : 美国 S i g m a 公司出品 ; ’ H 一 T d R :
中科院上海原子能研究所提供 ; I L 一 2 标准样
品 : B o e h r i n g e r M a n n h e i n G m b H . W 一 G e -
rn a n y l 0 0 0 u /m l
,
C T I
矛
I厂 Z ha 胞 : 浓 度 l x
1 0 5 / m l
,上海第二 医科大学免疫室提供 ;抗小
鼠 T 细胞 M e A b : T h y l , 2 , L 3 T ; , L y t Z 由北
京 医科 大 学 免疫 室 生产 ; 第二 荧 光抗体 ,
FI T c 标记羊抗小鼠 Ig G : 中国军事医学科学
院 生产 ; 淋 巴细 胞分 离液 : 上海 试剂二厂生
产 。
1
.
3 方法
朱
A d d r e s s
:
Y e J ia
,
D e p a r t m
e n t B io e h e m i
s t r y , B e i* . n g M e d ie a l U n i v e r s . t y
,
B e ie i i
n g
` 卜海中医药 大学 ! , , 上海氏科大学附属肿瘤民院
《中草药 》 1 9 9` 年第 2 7 卷第 2 期 · 9 5 .