全 文 ：高效液相色谱法测定银杏叶制品中总黄酮
第三军医大学西蓖医院孔尧科 重庆 。。 刘 淞 青 雇先哲 马文秀 孔艳 丽二
摘婆 采用 法铡定了银杏叶浸 千粉及银杏叶胶囊中总黄酮含量。 采用 一 , 。柱 , 甲
醇一水一冰醋酸 , 为流动相 , 检铡波长 。样品中 种成分分离较好
以芦丁为对照外标法定量 , 线性范围 卜 , 。 , 加样回收率为 写 二
。
关键词 银杏叶制剂 黄酮类
银杏树为银杏科植物银杳 ‘ 夕。 盯 , 又名 公 孙 树 , 戈教匡跳书产植 物〔〕。
银杳主要药理作用的确效成分都是从银杏叶禾银杏的外科皮中提取而指到的 , 银孩叶中黄酮
类化合物含量较高 , 有黄酮 、 黄酮醇及其贰类 、 儿茶素类禾双黄酮类 , 此类化合物具防治心
血管疾病的功能〔幻 。 目前 国内已生产 了银杏叶浸膏制剂 , 其含量测定采用 比色法 〔〕。 而
国外则 以 ! 法测定银杳叶制剂中黄酮含量来控制其内在质量〔‘, “〕。
本文采用 ! 法 , 以芦丁为标准物 , 测定了银杏叶浸膏和银杏叶胶囊中总黄酮含量 ,
其结果与化学比色法 比较 , 重现性好 , 干扰因素少 , 更能反映其内在质 量 , 对于该药材制品
的质量评价及控制具有一定作用 。
仪器与试药
一 型紫外分光光度计 , 液相色谱系统 包括 泵 , 可
变波长紫外检侧器 , 计算机控制及处理系统 , 时进样器 。
芦丁 、棚皮素对照品中国药品生物制品检定所 , 银杏叶浸膏干粉 桂林思特新技术公
司天然植物制品厂 、 重庆中药研究所各 批 , 银杏叶胶囊 海南医药工业研 究 所 提 供 ,
批 。 甲醇 色谱纯 , 其它试剂均为分析纯 。
色谱条件及 色谱行为
。柱 卜 , , 大连化 物 所 流动相 甲醇一 水一 冰 乙 酸
魂。 , 流速 , 柱温 士 ℃ , 检测波长 , 灵 敏度
。
在该色谱条件下芦丁 、懈皮素标准品及样品色谱图见图。从图中可见银杏叶制剂在该色谱
条件下能 出现 个分离较好的峰 , 其中有 个峰与芦丁 、棚皮素峰相对应 。
供试品溶液的制备
取银杏叶浸膏干粉适量 相当总黄酮 , 于 容量瓶 中 , 加甲醇溶解 , 摇匀 ,
稀释至刻度 , 精密量取 于 容量瓶中 , 用流动相稀释至刻度 , 备用 。
取银杏叶胶囊 粒 , 取出内容物 , 混匀 , 精密称量约 , 加甲醇 , 加热回 流 ,
放冷 , 倾出上清液 , 残渣加甲醇 回流 , 放冷 , 倾出上清液 , 残渣再加甲醇适量洗涤
次 , 合并上清液和洗液 , 置 容量瓶中 , 加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 备用 。
标准曲线制备
法 准确称取芦丁对照品约 , 用甲醇溶解定容至 , 用微量进样器吸取
, 人 , , ,
, 贵阳 中医学院 中药系九。级实 习生
《 中草药 》 年第 卷第 期 , ,
时间 而
圈 色奋田
左 ·标准品
一芦丁
右 一样品
一拼皮索
对照品溶液 、 、 、 、 时注入色谱仪 , 记录色谱图 , 测定峰面积 。 用芦 丁 峰 面 积
对进样量 , 协 进行线性 回归 , 得回归方程 二 一 一
。 峰面积与进样量的线性范围为 卜
通 比色法〔〕 精密称取芦丁 , 置 容量瓶中 , 用 乙醇适量置水浴上加热溶解 ,
放冷 , 用 乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 准确吸取 、 、 、 、 、 分 别 置
于 容量瓶中 , 各加 乙醇使成 , 先加另亚硝酸钠溶液。 , 摇匀 放置 ,
再加 硝酸铝溶液 , 摇 匀 , 再放 , 加 , 用水稀释到 , 放置
一 , 在波长 处测定吸收度 , 以吸收度对浓度 , 卜 进行回归 , 其回归 方
程为 一 。
空白试验和回收率试验
按处方配比 , 取锭粉 、硬脂酸镁等辅料 , 经样品处理得空白液 , 经色谱分析未见有千扰峰。
精密称取 份批号为 的银杏叶胶囊中内容物。 , 然后分别加入精密称量的 芦丁
对照品约 , 按祥品处理项下操作 , 制得待测液 , 依法进行测定 , 计算回收率 , 结果 为
。
样品测定
。 法 取银杏叶浸膏干粉供试液和银杏叶胶囊 平均粒重为0.29 )供试液分 别进
样20 时 , 记录 色谱峰 , 测定所有峰 面 积 之
和 , 代入相应回归方程 , 计算含量结果见表 。
6
.
2 比色法: 精密量取银杏叶浸膏 千粉供
试液各。.s m l及银杏叶胶囊供试液 sm l , 分
别置于 IO m l容量瓶中 , 按标准曲线 法操作 ,
在波长510nm 处测吸收度 , 按标准曲线计算
含量 , 结果见表。
7 讨论
裹 样品侧定结果 ( n = 3 )
H P L C法样品名称 平均含量 R S D( % ) ( % )
比色法
平均含t R SD( % ) ( % )
银杏叶胶囊
(9 4010 8 )
银杏叶浸膏干粉(桂林产品)
银杏叶浸膏千粉(重庆产品)
5 。 5 7 2 3 。 3 0 1 。 3 5 8 6 。 4 ,
2 3
。
2 2 1
。
5 2 2 5
.
2 8 5
。
6 4
1
。
6 9 2 3
。
4 0 8
。
4 6 6
。
4 2
7
.
1 H P L C 法与比色法比较 , 后者结果较前者高 , 其原因可能是采用H P L C 法时 , 流 动相
极性较大 , 有一些极性小的双黄酮及贰元未被洗脱所至 。 但采用H P L C 法相对干扰少 , 重现
( 下转 第459页 )
·
4 6 2
、
上接 第462 页)
性好 , 更能反映其内在 质量 , 并 与国外方法相一致 。
7
.
2 从2批银杏叶浸膏干粉分析结果可见其含量相差甚远 , 其原因可能是两者采用不同工艺
所致 , 桂林产品采用喷雾干燥法 , 其含量较高 , 而重庆产品采用烘烤法 , 则含量较低 , 提示
在 高温烘烤过程中一些贰被破坏 。
7
.
3 文献 〔“〕报道采用H P L c 法测定水解后银杏制剂中黄酮贰元的含量来作制剂定量依据 ,
而本法不需水解 , 且能反映制剂中多个峰的大小及相对 比例 , 故更能反映制剂的内在质量。
7
.
4 银杏叶制剂除含主药银杏叶提取物外 , 还含有占较大 比例的辅料 ( 如: 淀粉 , 硬 脂 酸
镁 等 ) 。 采川两次甲醇加热回流法 , 可使黄酮类成分提取完全 。
7
.
5 采 川芦丁炸对照品定量听有峰不太科学 , 如能找到更多对照品 , 并分 别计算 , 该 法会
更完善。
参 考 文 献
中闰科 学院中国植物志编辑委员会. 中因植物志.
北京: 科学出版社 , 1 9 7 8 . 1 8
游 松 , 车. 沈阳药 学院学报 , 1 9 8 8 , 5 ‘2 ) :
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江苏省卫生局编 . 江苏省药品标准 ( 19 77 ) .
南京: 江苏科学技术 出版社 , l , 8了. 3 7通
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陶巧凤 , 等.
199 1 ,
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中成药 , 一9洲 , L s ( 1 2 ) : 1 4
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《 中草药 》 1 9 9 5年第26 卷第9期 4 8 9
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