全 文 ：· 药理实验与临床观察 ·
利脑心胶囊对大鼠实验性脑梗塞
及小鼠脑缺血后能量代谢的改善作用
国家医药管理局天津药物研究院 (3 0 0 1 9 3) 周庆宇 朱 徐为人 魏月芳
摘 要 口服给予利脑心 0 . 25 和 0 . 59 生药 /k g , 能明显改善实验性脑梗大鼠的神经症状 , 使脑梗
塞面积显著减小 , 延长断头后小鼠喘气时间 , 并能增加其脑内 A T P 和磷酸肌酸 (P cr )含量 , 降低其
乳酸含量 。 将 l 只 10 5和 l x lo 一 49 / m l浓度的利脑心液进行大鼠脑在位灌流对大鼠血管无明显影
响 。 试验结果表明 , 利脑心的脑保护作用可能与改变能量代谢有关 , 而与 脑血管阻力无关 。
关键词 利脑心 大鼠实验性脑梗塞 A T P 磷酸肌酸 乳酸 大鼠脑血管在位灌流
利脑心胶囊 由葛根 、川芍 、丹参 、鹿心 、首
乌等组成 , 临床上应 用利脑心防治某些心脑
血管疾病 已有 多年 , 且疗效显著 。本文研究了
利脑心对大鼠实验性脑梗塞模型及小 鼠脑缺
血后能量代谢的影响 , 从而观察其作用特点 。
1 材料
药物 : 利 脑心 , 淡棕色粉末 , 由吉林敖 东
制药厂提供 , 批号 9 4 0 70 8 , 每克相 当于原 生
药 6. 馆 , 以蒸馏水配成混悬液给予动物 口服
灌胃 。通脉冲剂 阳性对照药 , 由吉林敖东制药
厂提供 , 批 一号 9 4 0 7 1 0 , 每克相 当 于原 生 药
4
·
59
, 配制方法同上 。 盐酸婴粟碱阳性对照
药 , 青海制药厂产品 , 批号 8 0 09 03 。 用于大 鼠
脑灌流的药液 , 以 K 一H 液配制 , 在应 用浓度
没有沉淀 . 灌流前 l。。o or 离 心 Zn li n 除去各
种微粒 。
试剂 : 红四氮哩为北京化 工厂产品 :磷酸
肌 酸 激 酶 和 辅酶 I 为 Si g m a 公 司 产 品 ;
A D P
,
A T P 和磷酸肌酸钠为中科院上海生化
所提供 。
仪器 : 高频电刀 (上海医疗仪器厂 ) ; U V -
1 9 0 型紫外分光光度计 (日本岛津公司 ) ; 恒
速注射器 (德国 H S E 公司 ) ; 医用张丝压力传
感器 (国营 长城科学仪器厂 ) ; 台式 自动平衡
记录仪 (_上海大华仪表厂 ) 。
动物 : 健康成年 W is ta r 大 鼠和昆明种小
鼠 , 雌雄兼用 , 均 由国家医药管理局天津药物
研究院实验动物室提供 。
2 方法与结果
2
.
1 对大 鼠实验性脑梗 塞的影响〔1〕 : 大 鼠
60 只 , 体重 2 2 0 一 2 8 09 , 随机均分为 6 组 , 每
组 10 只 ,雌雄各半 。 利脑心 3 个剂量组分别
口服灌胃给药 0 . 1 2 5 、 0 . 2 5 和 0 . 5 9 /k g (相 当
于 原 生 药 0 . 7 5 、 1 . 5 和 3 . 0 9 /k g ) , 容 量 为
lm l/ 1 0 09 体重 , 阳性对照组 给予通 脉冲剂
。. 59 / k g (相当于原 生药 2 . 2 59 /k g ) , 空白组
和模型组给予同容量水 。 每天一次 , 连续 6d 。
于第 6 天给药后 1h , 用 乙醚麻醉大鼠 , 取仰
卧位固定 , 在眼眶后作垂直 切口 , 分离并剪断
颖肌以暴露颖骨 ;在颖骨根 上方人工钻一骨
孔 , 再用咬式血 .管钳向下咬至颗顶 , 形成 3 x
4 m m
“ 的骨孔 。 轻抬脑叶 , 除空白组进行假手
术外 , 用高频 电刀双极电凝阻断其他组动物
大脑中动脉 , 使之凝闭 ; 以止血棉局部轻压止
住可能产生的动脉出血 。术后缝合 , 第 2 天进
行动物行为观察 。按文献标准分级 〔, 〕, 用等级
指数法进行生物统计学处理 。
结果 , 模型组大鼠手术后全部出现异常
神经症状 , 利脑心 。. 25 和 。. 59 /k g 具有明显
减轻大鼠大脑中动脉阻断导致缺血性脑梗塞
、
A d d r e s 、 : 2 1、o u Q in g y t,
,
T ia n ji
n
tio n o f C h 一n a , T ia n jin
In 凡t it u te o f P ha r n 飞a e e u tie a l R e s e a r e h
,
S t a t e P ha rm a e e u t ie a l A d m in is t r a
《中 l功“芍妇 9 9 6 年第 2 7 卷第 3 期 · 1 5 7 ·
而引起的异常神经症状 , 与模型组相 比具有
明显 旅异(P 值分别< 0 . ()5 和 0 . ()1 ) ‘表 ) 。
表 利脑心对实验性脑梗塞大鼠神经症状分
级的影响
组别 齐J量 动物 数
(g / k g ) (只 )
o 级 l 级 l 级 P 值
藻裂
通脉冲齐J
利脑心
0 5
0
.
1 2 5
0
.
2 5
0
.
5
1 0 10 0 0
1 0 0 4 几 < 0
,
0 1
关
10 5 5 0 灯 0 . 0 1 △
1 0 0 7 3 > 0
.
0 5△
1 0 4 5 1 < 0
.
0 5△
10 6 3 1 〔〔). 0 1△
与 ‘ 空自组相 比 , △与模型组 相比
观察之后将大鼠断头处死 . 分离大脑 , 用
o C生理 盐 水 冲 洗 , 放 入 一 20 毛冰 箱 冷 冻
sm in 后取出 , 人工切片 , 片厚 l m m , l % T T C
染色(用 p H 7 . 4 一 7 . 8 的 0 . Zm ol /’l 才 磷酸缓冲
液配制 ) , 37 C 温育 5一 7 m in , 用生理盐水洗
去染料 , 脑片取出置于座标纸上 , 描画脑片和
梗塞区域轮廓 , 计算梗塞 区域所占脑片的百
分 比 . 用 t 检验法进行生物统计学 处理 。
结果 , 利脑心具有剂量依赖性降低脑梗
塞面积的作用 , 与模型组相 比均 有统计学差
异(p < 0 . 01 ) , 且作 用强度 明显大于 同等剂
量的通脉冲齐‘1(P < 0 . 0 5 ) (图 1 ) 。
2
.
2 对小鼠脑缺血后能量代谢的作用 比 了 : 小
鼠 SQ 只 , 体重 20 一 23 9 , 随机均分为 5 组 , 每
组 10 只 , 雌雄各半 , 利脑心 3 个剂量组分别
口服灌胃给药 0 . 1 2 5 、 o理 5 和 。. 59 /k g (相当
于原 生 药 0 . 75 、 1 . 5 和 3 . 馆 /k g ) , 容 量 为
0
.
Zm l/ 1 09 体重 , 阳性对 照组给 以通脉 冲剂
0
.
5 9 / k g
, 空 白组给 以同容量水 , 每夭一次 ,
连续 6d , 于第 6 天给药后 1h , 在小鼠耳后部
位迅速断头 , 同时记录喘息延续时间 ;然后迅
速将大脑取 出 , 称重 , 立 即置于 一 20 ℃冰箱
内 。 于冷冻脑组织中加入 0 . l m ol / L H C I一
9 % 乙 醇 溶 液 0 . 5 m l , 制 成 匀 浆 , 再 加
0
.
3 m o l/ L H C IO
;
(含 lrn m o l/ L E D T A )溶液
2
.
sm l
, 混匀后 , 以 3 0 0 o r , 4 C 离心 l om in , 上
清液中加入 一 srn o l/ L K O H , 0 . 4 m o l/ L 咪哇
和 0 . 3 m o l/ I矛 K C I的混 合液 0 . 4 5 n ll , l 0 0 0 Or
离心 10 m in , 上清液置于 20 C , 用酶学法测定
脑组织 中的 A T P 、Pc r 和乳酸 (l J A )含量 , 按
脑重换算后 以 t 检验法进行 生物统计学 处
理 , 结果见图 2 、 3 。
2 2
.
5 1
、 ,
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2 2 }
o 灰 r i。, 1
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空白
1
通脉冲剂 利脑心
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扣续图邂模型 通脉冲剂1 二 利脑心眨
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!
图 l 利脑心对实验性脑梗塞面积占脑片面积
百分比的影响
与空 自组相 比 ’ P < 。 . 0 5 “ P < 0 . 01
与阳性药通脉 冲剂组相 卜匕 △尸< 。. 05 卜
模型组 卜通 脉冲剂 。 . 5 9 / k g 组 皿 一利脑
毛· 0 . 1 25 9 / k g 组 伪 一利脑心 0 . 25 9 / k g 组
、 一利 脑 心 0 . 5 9 / k g 组 s e r , e s l一平均数
s e
r le s Z 一标准差
·
1 5 8
·
利脑心对断头后小鼠喘气的维持时间的
影响
1 一空 自组 1 一通脉冲剂 。. 5 9 / k g 组 卜利
脑心 。. 1 2 5 9 / k g 组 W 一利 脑心 。. 2 5 9 /k g 组
V 一利 脑 心 0 . 59 / k g 组 S e r ie s l 一平均数
Se ri
e S Z一标准 差 与空 自组 相 比 ‘ “ P <
0
.
0 1
利脑心 口服给 药 0 . 25 和 0. 59 /k g · d,
6d
, 可使小鼠断头后继续喘气时间显著
延长 , 还 可使小鼠脑组织中 A T P 和 Pc r 含量
明显增加 , L A 含量明显降低 , 且均具有剂量
依赖性关系 。 表明利脑心能降低小鼠脑缺血
后能量消耗 , 保护脑组织 , 从而延长小 鼠断头
后继续喘气的时间 。
图 3 利脑心对断头小鼠脑内 A T P 、 Per 和 L A
含量的影响
S
e r ie s l一空白组 S e r ie s Z一利脑冲剂 0 . 59 / k g
组 S e r ie s 3 一利脑心 0 . 1 2 5 9 / k g 组 S e r ie s 4 -
利脑心 。 , 25 9 / k g 组 Ser ie s s 一利脑 心 。. 5 9 /
k g 组 与空 白组相 比 ’ p < 0 . 0 -
2
.
3 对大 鼠脑血 管 阻力 的影 响〔3〕 : 大鼠 8
只 , 体重 25 0 一 3 0 0 9 , 雌雄各半 , 用 1 . 59 / k g
乌拉坦腹腔注射麻醉 ,俯卧固定 , 并分离头背
尾部的皮肤和骨膜 , 在头颅正中线的枕骨缝
尾侧处钻一 个 1 一 Zm m 小孔并暴露出窦汇 ,
将大鼠翻身仰卧固定 , 一切开颈部正中皮肤 , 分
离左右颈 内动脉和静脉 , 左右颈外动脉和静
脉 . 以及翼颗动脉 ;从右颈总动脉插入一尼龙
套管至右侧颈内动脉 , 并将插管固定 , 与灌流
系统的体外循环管道相连 , 迅速打开胸腔 , 于
主动脉根部结扎升主动脉 , 同时结扎除插管
外的所有已分离的血管 , 将动物翻身背 向上 ,
在窦汇上作一小切 口作 为灌流液的外排出
口 ; 动脉 插管 中缓 慢 注入 soou 肝素 (溶 于
lm l 充氧温生理盐水中)清洗脑循环 中残存
的大部分血液 , 用恒速注射器灌流改 良 K 一H
液 〔3 7 土 0 . 5 ‘C ) , p H 7 . 3 , 充以 9 5 % 0 2 和 5 %
C O
。 混 合 气 体 , 速 度 为 0 . 5 3 m l/ m in , 稳 定
10 m in 后通过张丝压力传感器和 自动平衡记
录仪描记灌流液对脑血管床产生的后压力 ;
《中草药》1 9 9 6 年第 2 7 卷第 3 期
然后分别换以含盐酸婴粟碱 1 0 一 ‘g / m l、利胭
心 1 0 一 5和 10 一‘g / m l或通脉冲剂 1J ‘g / m l的
灌流液 , 观察药物对该压力变化的影响 。结果
显示 , 阳性对照药盐酸婴粟碱 (1 0 一 ‘g / m l) 具
有明显降低后压力的作用 , 与试验 初期相比 ,
压力降低 24 . 1 士 1 3 . 5 % , 而 利脑 心 1 0 一 5和
1 0 一 ‘g / ml 以及通脉冲剂 1 0 一‘g / m l灌流对大
鼠在位脑血管阻力无明显影响 。
3 讨论
在临床上 , 脑梗塞多发生在大脑动脉的
某一支 , 尤以大脑中动脉最为常 见 , 以阻断大
鼠大脑中动脉形成的局灶性脑缺血模型 , 比
较接近于临床 , 重现性好 ,便于观察以 〕。
大脑所需血量占心输出量的比例并不与
其重量占体重的比例相对应 , 脑的氧耗量占
全身氧耗量 的五分之一左右 , 且脑组织本身
几乎没有贮氧和贮能的能力 , 完全依赖血流
供给氧气和葡萄糖 , 因此小鼠断头后 , 脑供血
中断 , 能量代 谢发 生紊 乱 , 脑 内的 A T P 和
Pc
r 迅速耗竭 , 葡萄糖水平迅速下降 。 而乳酸
和多种脂肪 酸特别是花生四烯酸明显升高 ,
并出现脑细胞功能障碍〔5〕。
利用中药治疗脑梗塞的基本原则是活血
化癖 。 利脑心方剂中的葛根 、川芍 、丹参都具
有改善心脑血液循环的作用 , 首乌则有降血
脂的作用 。在小 鼠断头实验 中 , 利脑心能使脑
A T P 和 Pc r 含量 明显高于模型组 , L A 含量
明显低于模型组 , 提示其脑保护作用可能与
改变能量代谢有关 , 而与脑血管阻力无关 。
参 考 文 献
l 严徽瑾 , 等 . 中华神经精神科杂志 , 1 9 8 , 2 1 (1 ) : 3
2 冯亦璞 , 等. 药学学报 , 1 9 8 9 , 2 4 (2 ) : 8 9
3 徐叔云 , 等 . 药理实验方法学. 北京 : 人民卫生出版社 ,
1 9 91
.
9 3 4
4 尚镇祥 , 等. 脑血管疾病 , 北京 : 人民卫生出版社 , 19 7 9.
3 5 3
5 江苏新 医学院 . 中药大辞典 . 上海 : 人民 出版社 , 1 9 7 7.
1 1 36
、
2 3 0 8
(1 9 9 5
一
0 7
一
1 9 收稿 )
·
1 5 9
.
B e n e fie ia l E ffe c t o f L in a o x in C a Ps u le o n E x Pe r im e n ta l C e r eb r a l In fa r e tio n in R a ts
a n d B r a in E n e r g y M e ta b o lis m in C e r e b r a l Is e h em ie M ie e
Z圣、o L: Q in g y :, , X : 1 W e ir o n , W e i Y t, e翻 n g
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一
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, a l、e r ha l p r e p a r a t l o n e o m p o s e d o f S a l:
, i a zn ilz沂口月五iz a , L , g u s ti〔一u m wa ll
, 〔h ii , P u era
r ia l门乙d la ,
a n d p o ly g
o o u m m u lt斌fZo r u m e t e . , a t d o s e s o f 0 . 2 5 a n d () . 59 / kg (;g ) s ig n ifie a n tly im p r o v e d th e n e 、lr a l sy m p -
t o m s o f e x p e r im e n t a l e e r e b r a l in fa r c t io zl a n d r e d u e e d th e s iz e o f in fa r e te d a r e a in r a ts
.
A t th e s a m e d o s e s it a l
-
5 0 s ig n ifie a n tly p r o lo n g e d th e b r e a th in g t im e o f m l ee a ft e r d e e a p z t a t lo n a n d s h o w e d e ffe e t s o n b r a in e n e r g y
r n e t a b o lis m in e l: , d in g th e in e r e a s e o f b r a in A T P a n d p h o s p ho e r e a tin e (Pe r ) le v e ls a n d d e e r e a s e o f b r a in lae t ie
a e id (I A )le v e l
.
I in a o x in s u s p e n s io n a t e o n e e n t r a t io n s o f l 火 1 0 一 5 a n d l 又 1 0 一 4 9 / m l fo r in s it u p e r ftls io n o f
b r a in v e s s e ls in r a t s s h o w e d lit t le e ffe e t o n v e ss e l r e s is t a n e e
.
T h e a b o v e r e s u lt s s u g g e s te d t ha t th e p r o t e e tiv e
e ffe e t s o f L in a o x : n o n b r ain m ig h t l)e r e la te d t o th e a lt e r a tio n o f b r a in e n e r g y m e t a b o lism r a the r th a n it s a s s o
-
e ia t io n w it h b r a in v e s s e l r e sis ra n e e
.
清喉利咽冲剂的药理作用
天津市医药科学研究所 ( 3 0 0 0 7 0)
天津市乐仁堂制药厂
赵树仪 辛 常思勤 周连发 田 秀英 蒋燮荣
马祖强
摘 要 清喉利咽冲剂能明显抑制二甲苯诱发的小鼠耳壳肿胀及蛋清性大鼠足肿胀 , 降低大鼠棉
球肉芽肿重量 , 还能 显著减少小鼠扭体反应次数 、提高小鼠痛闭 。 此外 , 它也具有抑菌作用 。
关键词 清喉利咽冲剂 抗炎 抑菌 镇痛
清喉利咽方剂来源于中国第一历史档案
馆 , 清太 医院御药房配方药档 , 为清宫“ 巳妃 ”
所用者 。 清喉利咽冲剂 (以下简称冲剂 )系天
津乐仁堂制药厂根据药剂学及 中医理论 , 采
用现代的科学 方法提取精制而成 。 经多年临
床验证 , 对急慢性咽炎均有一定的疗效 。本文
着重对该方剂的药理作用进行了初步探讨 。
1 实验材料
清喉利咽浸膏 , 每克浸膏含 1 . 5 59 生药 ,
由天津乐仁堂制药厂提供 。 醋酸可的松系上
海第九制药厂产品 。 阿斯 匹林片由沈阳医学
院制药厂生产 。
实验所需菌种由中国药品生物制品检定
所供给 。
W is ta r 大 鼠由北京医科大学 动物室供
给 , 昆明种小 鼠购 自北京生物制品检定所动
物室 。
2 方法与结果
2
.
1 对二 甲苯诱发正常小鼠耳壳炎症 的影
响〔, 〕 : 体重 2 2 一 2 4 9 小 鼠 5 0 只 , 均分 5 组 ,
雌雄各半 。 每 日灌胃给 予冲剂 8 、 12 、 1 6 9 / kg,
连续 3d , 对照组给予等体积水 。 醋酸可的松
3 o m g / k g 皮下 l 次给予 。 末次灌 胃给 药后
lh
, 皮下给药后 30 m in , 于小 鼠右耳部均匀涂
抹二 甲苯 40 川 致炎 。 致炎后 Zom in , 齐耳根
部剪下小 鼠左右两耳 , 在 同一 部位用 sm m
角膜环钻取下两耳园片 , 扭力天平称重 , 以左
右两耳重量差值表示耳部炎症肿胀程度 。 结
果见表 1 , 冲剂 1 2 、 1 69 /k g 灌胃给药 , 对二 甲
苯诱发小鼠耳壳炎症有 明显的抑制作用 , 但
A d d r e s s
:
Z ha o 5 11 、, y l , 1
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, a n j, n In s tit u t e o f M
e d ie a l a n d Ph a r m a e e 、: t ie a l S e ie n e e s
,
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1 6 0
·