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大叶苦丁茶抗氧化成分及抗氧化性能研究(Ⅰ)



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 22(5):463— 466 2002年 9月
大叶苦丁茶抗氧化成分及抗氧化性能研究(I)
陈 薇 ,王恒山。,黄世稳。,邓彦兴 ,钟代信
(1.广西工学院轻化系 ,广西柳州 545006;2.广西师范大学化学系 ,广西桂林 541004;
3.右江民族 医学院 ,广西百色 533000)
摘 要 :对冬青科大 叶苦 丁茶 进行了初 步的成分分析 ,同时采用可见分光光 度计法测 定其活性部位 的 POV
值 ,并进行 抗氧化性 能分析 ,其 中所含多酚和黄酮部位 的抗氧化性能较强 ,具有进一步开发及应用 的价值 。
关键词 :大 叶苦丁茶 ;POV值 ;抗氧化性能分析
中图分类号 :R282.6;$571.1 文献标识码 :A 文章编号 :1000—3142(2002)05—0463—04
Anal ysis 0f antioxidant properties 0f components
from Ilex lati folia Thumb.
CHEN Wei ,WANG Heng—shan ,HUANG Shi—wen。,
DENG Yah—xing ,ZHONG Dai—xin
(1.Depfrt,lent oJ Light and Chemical Engineel‘ing,Guangxi University oJ Technolog>’,Liuzhou 54 5006,
China;2.Departmerit o,Chemistry Guangxi Normal University,Guilin 541004,China;
3.YouJkuig Medical College Jot Nationalities,Baisc 533000,China)
Abstract:Antioxidant activity of the components from Ilex latiJbha Thumb.was estimated by testing the effect
of main components to POV value using ultraviolet and visible spectrophotometry.Results showed that antioxi—
dant activity of polyphenol and flavonoides was rather strong and worth further developing and applying.
Key words:Ilex latiJblia Thumb.;POV value;antioxidant activity
抗氧剂在食品中使用 主要是为了防止食品氧
化变质 ,合 成抗氧剂存在着它本身是否会带来 毒
性 ,特别是慢性致癌、致突、致畸等 问题 ;因而随着
对食品安全的 日益关注及人类 回归 自然 的心理影
响 ,天然抗 氧化 剂的研究 和应 用成为 当今食 品行业
最活跃 的领 域 。大量 比较发现一些天然植物 和中药
材 的溶剂提 取物有 很强 的抗氧 活性 ,大部分 的天然
抗 氧 剂 的 化 学 成 分 与 化 学 合 成 的 抗 氧 化 剂 (如
BHA、BHT)结构 有相 似之处 ,在性能上 除 了有相 似
的抗氧性能以外 ,还可 以赋予食品在感官上特殊的
风味及生理保健功能,及抑菌防腐 、抗氧矫臭的作
用。据报道迷迭香醚、茶多酚等 ,其抗氧活性超过了
常用 的食 品使 用 的合 成抗 氧剂,BHT、BHA、PG、
TBGQ,同时它们还具有耐高温的特异性 ,可被选用
在烧烤油的添加剂中,也可以作为抗氧增效剂配合
使用,是新开发的高效植物抗氧剂“ 。
苦丁茶是民间一种传统优 良饮料,具有消炎镇
痛、清凉解毒、降脂、降压、抑菌、减肥之良效 ,国内
对苦丁茶的研究主要是其药理临床 应用及成分分
析“ ,而对其 具抗 氧 化性能 的研究 只有 对有 关广 西
收稿 日期 :2001—09—10
作者简 介:陈 薇(1962一),女 ,广西柳州人 ,讲师 ,有机化学专业 ,从事有机合成及天然产物 化学 的教学及 研究 。
基金项 目:广西 自然科学研究基金 资助项 目(桂科 自 0146008);广西工学院青年科学研究基金资助项 目(00219)

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苦丁 Vc及 Ve含量较高可以阻止人体 中脂质的过
氧化 过程 ,有 一 定 的抗 衰 老效 应 的简 单报 道 ,也 主
要是 观察 苦 丁茶 提 取物 对 体外 大 鼠肝组 织 脂 质过
氧化 的抑制作 用 ,以探讨其 治疗炎症可能依 据 ,而
没有其抗 氧有效物方面 的成分 及性能 的全分析 。本
研究 采用 系统 分 离 的方 法 ,结 合抗 氧 化性 能 测定 ,
初步分析大 叶苦丁茶 (Ilex latifolia Thumb.)中抗氧
有效 物的抗 氧化效果 。大 叶苦丁茶 主要 含有 多酚 、
多糖 、生物碱、甾体及三萜、皂甙及黄酮类等 ,在此
重点针对其 中的多酚类、多糖类、生物碱及黄酮这
四类 提取 物 ,采 用可见 分光光 度法 测定他们 的过 氧
化值 (POV 值 ),并进 行 抗 氧化性 能 分析 及评 价 ;测
定结 果 ,它们 均 具 有一 定 的抗 氧 化性 能 ,其 中所 含
多酚和黄酮类 提取 物的抗氧化性能较强 。本项研究
对筛选 出高效、低毒的天然抗氧剂的新品种,提高
大叶苦丁茶的综合开发利用有一定的意义。
1 实验部 分
1.1材料 、试剂 、药品及仪器设 备
材 料 :大 叶苦 丁 茶 (百 色 产 );95 乙 醇 ;石 油
醚 ;氯仿等 ,有机试剂 、溶剂均为分析纯 。
主要试剂及药 品:显色剂—— 碘化铋钾 (Dra—
gendorf)试 剂 ;苦 昧酸试剂 ;碱性酒 石酸铜 (Fehling)
试剂;双缩脲 (Biuret)试剂;茚三酮试剂;菲林 氏试
剂 ;10 KOH;1 A1C1。;醋酐 一浓硫 酸 ;香草 一醛硫
酸 ;5 FeC1。等 。
仪器设 备:SHA—C恒温振荡器;离心分离器,
722光 栅 分 光光 度计 ;YNG—OSM 远 红外 快 速恒 温
干燥箱 。
1.2大叶苦 丁茶成分分析预试验
按 天然植物 有 效成分 系统 预实验 的方法 ,分别
采 用 水、9j 乙醇 和石 油 醚 提取 大 叶苦 丁茶 ,喷洒
各类显色剂可初步判断该大叶苦丁茶 中所含主要
成分 。
通 过 预试 验 确 定 大叶 苦 丁茶 提取 液 中含 有机
酸、酚类 、甙 类或 多糖 、皂 甙 和生 物 碱 、甾体 或 三萜
类、挥发油等 ,与文献报道的所含成分类别基本一
致 。
1.3大 叶苦丁茶主要成 分提 取”
借鉴 植物有 效 成分 系统分 析方法 ,分 别对大 叶
苦 丁茶 中总 黄 酮 、茶 多 酚 、生物 碱 、多糖 类 进 行 提
取,所得各部分用分光光度计测定其抗氧化活性 ,
最终 由测定结 果对其抗氧化性 能进行评价 。
1.3.1黄 酮提 取 取 50 g粗 茶 粉末 用 70 ~80
乙醇 回流提取 ,提取 液放 置 过 夜 ,除 去 析 出 的蜡状
物后 ,减压浓缩除去乙醇加水溶解 ,用 乙醚萃取除
脂 ,再用 乙酸 乙酯萃取 ,浓缩蒸 干 ,得黄色 固体 1.43
g,为粗黄酮 。
1.3.2生物 碱 提 取 另 取 50 g粗 茶 末 加 j倍 量
95 乙醇 回流加热 提取 4 h,冷 滤 ,渣 再加 乙醇提取
4次 ,合并提取 液 ,减压 浓缩 ,得膏 。于膏 中加 水 ,加
浓盐酸调 pH一2,加氯仿震荡除油脂和脂性杂质共
3次 ,分离 ,氯仿用 量均 为水 的 1/3,加氨水 调 pH一
10,再加入其体积 1/3量的氯仿 ,振荡萃取游离生物
碱,分出氯仿层,水层同样萃取 ,共萃取 3次,合并萃
取液,回收氯仿 ,蒸干,得淡黄色固体 1.5 g,为粗生
物碱 。
1.3.3多酚提取 将氯仿萃取的水相 ,依次加入 6O
mI 乙酸乙酯萃取 3次,合并萃取液 ,用旋转蒸发器
在 4O~5O。C下浓缩 ,回收 乙酸 乙酯 ,放人 真空干燥
箱 中干燥 ,得 固体 2.4 g,为多酚粗 品。
1.3.4多糖提取 将多酚萃取的水相加入 100 mI
丙 酮 ,有 黄褐 色沉 淀生 成 ,抽 滤 ,分 离 ,放人 真 空 干
燥箱在 50。c下恒温干燥,得固体 1.2 g。
1.3.5有效成分提取结果 见表 1。
表 1 大叶苦丁茶有效成分提取结果
Table 1 Extraction result of main components
from Ilex lati/olia Thumb
品种 tems E
r

ac

tio

n E : i。
1.4提取物抗氧化 (POV)值 的测定
1.4.1猪 油、花 生 油 中抗 氧化 试验 分 别 在 油样 中
加入上述提取物多酚类、多糖类、生物碱及黄酮类,
加入量均为油样量的 0.1 ,将猪油、花生油试样放
于恒温振荡器中在 65±0.5。c、8 ±0.5。C下进行
强化 氧化 ,作 抗 氧化 试 验 ,以空 白为对 比每 隔两 天
取 出 ,用 紫外 可见 分 光 光 度 法 测 定 其 过 氧 化 值 、
(POV)。该法 主要是针对 油样 中的过氧 化物可把 KI
氧化成 I。,稀 释所生成的 I:,用 淀粉溶液直 接对 I、显
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5期 陈 薇等:大叶苦丁茶抗氧化成分及抗氧化性能研究(I) 465
色,在 585 nm处测其吸光度值,从而确定其过氧化
值 ,过 氧 化 值最 终 以 1。9/6表 示 ,故 与空 白 比较 1。越
小 ,其过 氧化 值越小 ,则样 品的抗 氧化性能越强 。测
定方法按 文献 进行 。
2 结果分析
2.1 POV—T变化 系列图
见 图 1、2、3、4。系列 1一多酚 ;系列 2一黄酮 ;系列
1.4.2试验 结果 分别见表 2和 表 3。 3一多糖 ;系列 4-生物碱 ;系列 5-参 比样 。
表 2 在 65~0.5。C、85±0.5。C下猪油的过氧化值 (1 )
Table 2 Effect of extracts to POV value of lard under 65_-t-0.5。C、85± 0.5。C
2.2表数据分析
2.2.1对表 2、表 3数据 分析 将大叶苦丁茶提取物
多酚 、多糖 、生 物 碱 及黄 酮添 加 至 油样 以后 与 参 比
相 比 ,无论从单项 的(POV)值 (均 以 1: 表示 ),还 是
从其平均值来看 ,各项都比同等条件下所测定的参
比值低 ,但程 度有所差别 ,说 明上述 4种提取物均有
一 定 的抗氧化性 能 。
花 生 油 中 ,多 糖 类、生 物 碱 、黄 酮 的过 氧 化 值
(POV)1:9/6差别 不大 ,但 均 比参 比值 低 ,都有一定 的
抗 氧 性 ;同 时 黄酮 类 的过 氧 化 值 在 同样 条 件 下 最
低 ,表 明黄酮 类提取 物在 花生油 中有较好 的抗 氧化
性 能 ,且 抗 氧化 值在第 十天 时仍 能保持 有较低 增长
值 ,也说明黄 酮类提 取物在 花 生油能有 相对 长效 的
抗 氧化性 能 ;而 多酚 的 POV 值 较高 ,说 明多酚 的抗
氧性 能在 花 生油 中效 果 不太 好 ,结 果 与 POV—T 性
能变化图 1、2的分析基本一致 。另外 ,在所测定 的时
间期限 内,它们 的变化随时问的改变不大,说明它
们可能具有较 长效的抗氧效 果 。
猪 油中,根据表 2、3中的各 提取物过 氧化 值
(POV)1 %的单项 值 以及平 均 值 的 比较 ,可 以得 出
大叶苦丁茶 的 4种提取物 在猪油 中的抗 氧化效果次
序 :8 d内 ,无论 在 65。C、还 是 85。C,其抗 氧化效果
次序 为 :多酚> 黄 酮> 多 糖 类> 生 物 碱 ;其 中多酚
类 提取 物 的过氧化 值 (POV 值 )与其 他 相应 的提 取
物 比 ,相 当 的低 ,表 明它在 猪 油 中有 很 好 的 抗氧 化
性 能 。
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466 广 西 植 物 22卷
10~12 d后 ,在强 化 条 件下 ,上述 4种提 取 物
的 POV 值有 一 突变性 的增 大 ,说 明 10 d后 它们 的
抗氧化效能降低。
2.2.2 POV—T 变化 图分 析 花生油 中 ,各提取物 的
抗 氧化性 能曲线 明显都 在参 比变化 线 的下 方 ,走势
平 缓 ,故它们 在花 生油 中都 有 不同程度 的的抗氧化
性能 ;随时间增长其过氧化值(POV)/i 升高 ,并
且有时问影响比温度影响大的趋势,但几条曲线之
间相距较近,还有一定 的交叉,若仅从曲线获得它
们 之间抗氧化效果 大小 比较结果相对 较难 。
40
35
3O
25
2O
15
10
5
— 系列l
0 2 4 6 8 l0 12 14 16
时间 f/d
图 l 在 65±0.5。C花生油 中的 POV变化
Fig.1 Changes of POV value in peanut
oil under 65士 0.5。C
图 3 在 65±0.5。C猪油 中的 POV变化
Fig.3 Changes of POV value of lard under 65± 0.5。C
3 结 论
据报 道 ,化合 物分 子 中的酚羟基 可能是 其抗 氧
化作 用 的功 能基 团 ,其 抗氧 活性与所 含酚 羟基数 目
有 关 ,大叶苦丁 茶 中所 含 的多酚类 物质 如苯丙素 苷
等,均为含有 多酚羟基 的化合物,这可能是其抗氧
化作用 的结构 基础 ,另外 大叶苦丁 茶 中黄酮 类化
合 物 含量较 高 ,为绿 茶 中含量 的 1.6~ 14.7倍“”,
使其具 有保健 作用 和药理 功效 ,是否 也是 由于其 中
猪油 中,各提取物抗氧化性能 曲线较其在花生
油中的曲线 有很大 的差异 ,它更加 明显 。由图 3、4可
以看出,多酚在猪油中,前 8 d有较强的抗氧化性 ,
在第 8 d达最大值 。
大叶 苦丁 茶 提 取物 在 猪 油 中抗 氧化 性能 次 序
为 65。C时 ,多酚>黄酮> 多糖 类> 总生 物碱 ;85。C
时在 10 d内它们 的大小 次序 也与上 相 同,而随时 间
及温度 的增加黄酮提取物的抗 氧化效果增强得更
趋 明显 ;另外 ,由图 1~4表明 ,除黄酮 以外各 提取物
受温度 的影响程度 不大 。
图 2 在 85±0.5。C花生油中的 POV 变化
Fig.2 Changes of POV value in peanut
oil under 85± 0.5。C
40
嘬 35
3O
25
2O
> 15
2 l0
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
时 间 tld
图 4 85士0.5。C猪油 中的 POV变化
Fig.4 Changes of POV value of under 85±0.5。C
黄酮 成分作 用还有 待进 一步证 实 。但 通 过该 实验 ,
可 以获 得 ,大 叶苦丁茶 中茶 多 酚、黄酮 、多糖 类及 生
物碱类提取物在不 同油脂 (猪油 、花生油)、不同温
度(65、85±0.5。c)下都具有明显的抗氧化性能;其
中多酚及黄酮 类的抗 氧化性 能较 强 ;特别 是实 验结
果 中表 明,多酚类提取物用于猪油 中抗 氧效果较
好 ,黄酮 类提 取 物则 用 于花 生 油 中抗 氧 效 果较 好 。
因此 ,可根据不 同的应用要求 ,分别利用各类 大叶
(下转第 44:3页 Continue on page 443)
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5期 魏 琴等:激素对樱桃番茄两种外植体诱导再生植株的影响 443
分化性 能不好 。
分化 (表 1)。
去 掉生长 素仅 存 6-BA 时利 于芽的 2100,(5):37—38·
2.3激素对试管 苗生根 的影 响
待芽 长至 2~3 cm 时切下 ,接种 到生根 培养 基
(1)、(2)上 ,1周后 (2)长 出少量 的根 ,10 d后 ,(1)也
长出根。20 d后观察 ,(1)根细长,诱导率 96 9,6,(2)
根粗壮,分枝多,诱导率 100 。可见 ,生长素 NAA
提高根的诱导率并使根健壮 。
2.4试 管苗的移栽
待 根 较 繁茂 ,试 管苗 长至 5~6 cm 时 ,打开 瓶
El,阴处放置 5 d,取 出,洗去根部残余的培养基 ,移
栽到装有 田园土和发酵过的锯木面各一半 的花钵
中,浇足水,阴湿处管理 3~4 d,1周后浇 0.1 9,6的尿
素 1次,以后正常生长。
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(上 接第 466页 Continue from page 466)
苦丁茶提取物所具有的长效、耐温等抗氧化特性,
将其 中多酚、黄酮类提取物作为有效 的油脂、食 品
及 日化产品的抗氧化剂,对其进行更进一步的研究
和开发是 富有 意义 的“ ”。
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