全 文 ：广 西 植 物 G u ih a运 1 1 ( 1 ) : 5 7一 59 . F e b . 1 9 9 1
护书户衬今场 ,匀 简 报 冬份外岭~ j 接骨木的茎尖培养和快速繁殖
张尔荣 刘 新
( 东北农学院 , 哈尔滨 1 5 0 0 30 ) ( 黑龙江省进出口商检局 , 哈尔滨 )
S T E M T fP C U L T UR E A N D R AP ID P RO P A G AT口ON
O F S AM BU C U S W IL L ! AMS I! H AN C E
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( H e i l o n g j i a n g P r o v i n e e理Im p o r t & E x p o r t C o m m o d i t y In 3 P e e t i o n B u r e a u 岌H a r b i n )
前 言
接骨木属忍冬科接骨木属植物 , 枝 、 叶入药 , 主治骨折 、 跌打损伤 、 风湿性关节炎等 ,
嫩叶可食 , 种子可榨油 , 供肥皂及工业用 , 髓部甚大可做生物学手切片的支持物 , 又是庭园
观赏树种 ( ` ] 。
现在生产上用种子繁殖 , 繁殖系数低 , 品种混杂 , 病害严重 。 为了加 快繁殖 , 采用组织
培养的方法 , 进行无性繁殖 , 是去病害 , 提高纯度的有效途径 。 植物的茎尖 , 有非常活跃的
顶端分生组织 , 易于发挥细胞的全能性而诱导再生植株。 同时茎尖很少病毒感染 ,可以从茎尖
诱导形成无病毒的种苗 [ 2 ] 。 多种植物茎尖培养获得成功已有报道 {名 ’ ` ’ “ ’ 。 ’ 7 〕 。 到目前为止
对接骨木茎尖的培养 , 还未见报道 。
材料与方法
材料于 1 9 8 8年春 、 秋两季 , 从东北农学院院内 , 取接骨木成年树 的枝条 , 剪取带顶芽或
侧芽的茎段 , 用清水洗净 , 用 70 % 乙醇消毒 1 分钟 , 。 . 2%升汞灭菌 1 分钟 , 无菌水洗 6 次 ,
用无菌的吸水纸吸干 , 在无菌条件下 , 切取 6 一 7 m m茎尖 , 剥除外围组织 , 茎 尖在 3 一 6
m m左右 , 茎尖向上接入附加不同植物激素的 M S 培养基中 , 培养在 25 士 1 ℃的培养室内 , 用
4 0瓦日光灯为光源 , 每 日光照 8 一 1 0小时 , 光照强度为 1 5 0 0一 20 0 勒克斯 。
结果与讨论
一 、 植物滋素对 . 官形成的影晌
接骨木的外植体茎尖 , 接种在不加任何植物激素的M S和低盐 W ih et 培养基中 , 茎尖不
伸长 , 不产生腋芽 , 也不形成愈伤组织 , 经过 30 天的培养最后死亡 。 这证明了植物激素的状
况 , 在诱导植物组织形成器官起着重要作用 〔“ 〕 。 在 M S 培养基 中 附 加 6 一 B A 、 K 七、 G A 、
N A A
、
2 , 4 一D不 同配比的植物激素 , 对芽的产生 、 幼苗的形成作用不同 ( 表 l ) 。 在 1 号
培养基中附加 K 七 1 十 N A A 0 . 2 , 接入外植体茎尖 , 两周后产生黄白色愈伤组织 , 培养 30 天未
8 8广 西 植 物 l卷
分化苗 , 又经两次继代培养也未分化苗 , 说明激素 K t不适合接骨木茎尖的 分 化 , 在 2 号培
养基中附加 6一 A B I + N A A 0 . 2 , 接入外植体茎尖 , 经过 30 天的培养茎尖伸长 ,形成独 苗 , 可
能是 6一 B A 浓度低原故 , 茎尖周围未产生腋芽 , 在 3 号培养基中附加-6 B A Z + N A A o . 2 ,接入
外植体茎尖 , 经过 3 0天的培养 , 在茎尖周围产生 1一 2 腋芽 , 生长缓慢 , 未形成芽丛 , 在 4
号培养基中附加 2 , 4一 D Z + N A A 0 . 2 , 接入外植体茎尖 , 培养两周后 , 在茎尖周围产生白色
愈伤组织 , 增殖较快 , 经过30 天的培养未分化苗 , 说 明2 , 4 一D的加入促进了愈伤组织的的形
成 , 对芽的分化不利 , 在 5 号培养基中 , 附加 6一 B A 3 + G A Z + N A A 0 . 2 , 接入茎尖 , 培养两
周后 , 在茎尖周围产生 表 1 植物激素对接骨木茎尖成苗的影响朴
多数腋芽 , 很快形成丛 T a b l e 1 E f兔e t o f p xa n t h o r m o n e o n s t e m t i p s e e d一i n g
生芽 , 并有 的 发 育 成 f o r m a t i o n o f S a o 6 , e 。 : 。 ` l t f a 。 : `i
苗 , 3 一 4 周后形成苗
丛 。 从 2 、 3 、 5 号培
养基中外植体的生长状
况 , 明显看出 , 细胞 分
裂素 6 一 B A 可促进 芽 的
形成及增殖 , 随着浓度
的增高 , 形成芽的数 目
也增多 , 最适宜的浓度
为 3 m g / L 。 但 6 一 B A 必须
与其它植物激 素配合使
)
.
:
, 最佳组合为 6 一B A 3
+ G A Z + N A A 0
.
2的
M S固体培养基 。
二 、 缝代培养扩大
, 斌率
将产生的芽苗丛 ,
切割成块 , 具有 1 一 2
个芽苗 , 接 入 M S + 6 -
B A 3 + G A Z + N A A 0
.
2
的增殖培养基中 , 2 周
后产生新的腋芽 , 3 周
后切割的每块可增殖到
6 一 8 个芽或形成更多
的芽苗丛 。 因细胞分裂
附加植物激素种类 、 浓度 ( m即 L ) 接 种 培养 分 化外植体 时间 状 况箱券基 ( 数 ) ( 天 )编 号 6一 B A K t G A 2 , 4 一 D N A A
M S一 1 0 l 0 0 0 . 2 3 0 3 0 产生愈伤组织 ,
不分化苗
M S一 2 1 0 0 0 0 . 2 3 0 3 0 茎尖生长延长 ,
形成独苗
M S公 2 0 0 0 0 . 2 3 0 3 0 茎尖周围产生 1 一
2个腋芽 ,生长缓慢
M S一4 0 0 0 2 0 。 2 3 0 3 0 产生愈伤组织 , 增
生快 , 不分化苗
M S一 5 3 0 2 0 0 。 2 3 0 3 0 茎尖周围产生很多
腋芽形成丛生芽苗
月
份 单位 : (毫克 / 升m创L )
表 2 植物激素对接骨木诱导生根的影响
T a b l e 2 E f f e e t o f p l a n t h o r m
o n e o n r o o t i n g o f
S a 优 b“ e “ s 份 111茸a 小 s ` f
培养基 激素浓度 无根苗数 生根数 生根率 根系生长状况
编 号 ( m g / L ) ( 株 ) ( 株 ) ( 男 )
1 改良M S 5 0 0 0 无 根
2 改良M S + N A A I 5 0 3 0 6 0 根短粗 , 生长慢
3 改良M S + I B A I 5 0 4 6 9 2 根粗壮 , 生长快
素 6 一 B A 的 影 响 , 使苗的节间缩短 , 密度增加 , 苗基部的腋芽发生增多 。 每个月一个腋芽增
殖 4 一 5 倍 , 每 35 天继代培养一次 , 全年可继代培养 10 次 , 年增殖率可达 4 ’ “ 。 比用种子繁
殖大大加快繁殖速度 。
三 、 壮苗与生根
1期 张尔荣等 :接骨木的茎尖培养和快速繁殖
将分化出的无根苗 , 转入生根培养基中 。 生根培养基为大量元素和微量元素减半的 M S
培养基 ,蔗糖为 2 % , 琼脂 8 克 , p H值为 5 . 8 , 分别 附加 N A A I , I B A I 。 结果 ( 表 2 ) , 无
根苗转入 l 号培养基中 , 培养 2 一 3 周都未有生根 , 说明改良的 M S培养基 , 未附加任 何植
物激素 , 不能诱导无根苗的生根 , 无根苗在 2 号生根培养基中 , 培养两周开始生根 , 根短粗
生长很慢 , 生根率为 60 % , 无根苗接入 3 号培养基中 , 一周后开始生根 , 2 一 3 周后都长有
2 一 3 条根 , 生根率为 90 % , 不仅生根率高 , 根系生根 良好 , 有利于移栽的成活 。
四 、 试 , 苗的移栽
当苗高 o3 二以上 , 根系发育 良好 , 进行移栽 。 移栽前 , 将三角瓶塞子去掉 , 小苗锻炼 2
一 3 天 , 移栽于花盆中 ( 草炭土 : 园田土为 1 : 1 ) , 用塑料薄膜覆盖保持一定 温 度 和 湿
度 , 20 一25 天去掉覆盖物即可存活 , 成活率为 95 % 。
本研 究证明 , 利用接骨木茎尖进行组织培养 , 是接骨木快速繁殖的良好途径 。
参 考 文 献
〔 1 〕周从良 , 1 9 8 6 : 黑龙江树木志 . 黑龙江科学技术出版社 。 5 39页 。
〔 2 〕崔 徽 、 桂耀林主编 , 1 9 8 5 : 经济植物的组织培养与快速繁殖 。 农业出版社 。 243 页。
〔 3 〕 王宝生 、 曹月华等 , 1 9 a o : 袖木茎尖培养 . 植物学报 , 2 2 ( 2 ) t 2 0 0一 2 0 1 .
〔 4 〕杨永青等 , 1 9 8 3 : 批把茎尖培养与增殖的研究 。 园艺学报 , 1 0 ( 2 ) , 79 一 86 。
〔 5 〕宋春华等 , 1 9 8 4 : 瑞香的茎尖培养 . 植物生理学通讯 . ( 5 ) . 39 。
〔 6 〕 S k i r v i n , R . M 。 a n d M · C · c h u , 1 9 7 8 a , T i s s u e c u l t u r e o f p e a c h s h o o t t i p , H o r t s -
e i e n e e 1 3 ( 3 )
: 2 9
.
〔 7 〕 B a r l a s 。 , M . a n d K . G S k e n e , 1 9 7 5 , I n v i t r o p r o p a邵 t i o n o f g r a p e v i n e ( V i t i s
v i n i f e r a L
.
) f r o m f
r a g m
e n t e d s h o o t a P i e e s
,
V i t i 1 7 ( 4 )
:
3 3 5一 3 4 0 .
〔 s 〕 S k o o g , F . a n d M i l l e r , C . 0 . , 1 9 5 7 : C h e m i e a l r e g u l a t io n o f g r o w t h a n d o r g a n
f o r m a t i o n i n P l a n t t i s s u e e n l t u r e d i n v i t r o
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