全 文 ：分子植物育种，2015年，第13卷，第5期，第1033-1039页
MolecularPlantBreeding,2015,Vol.13,No.5,1033-1039
研究报告
ResearchReport
苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析
张丽杰 1 郭苏漫 2 董文轩 2*
1沈阳农业大学林学院,沈阳,110866;2沈阳农业大学园艺学院,沈阳,110866
*通讯作者,wxdong63@126.com
摘 要 本研究利用同源克隆法以苹果属平邑甜茶和杂种后代叶片为试验材料，克隆得到4个SERK基因
家族片段，并分析了SERKs家族基因在平邑甜茶和杂种后代不同器官和组织中的表达情况。研究结果表明：
分离获得的4个SERK基因家族片段的氨基酸序列与模式植物拟南芥、烟草等植物的同源性均在84%以
上，同时与其他物种的氨基酸序列进行 Blast比对都具有较高的同源性；RT-PCR定量分析结果表明
SERK1、SERK2、SERK3、SERK4基因主要在生殖器官中表达。因此，推测SERKs基因在平邑甜茶和杂种后
代生殖发育过程中起着重要的调控作用。本研究结果为进一步揭示无融合生殖的发生机理奠定了基础。
关键词 平邑甜茶和杂种后代,SERKs,基因克隆,RT-PCR
Cloninga dExpressionAnalysisofApomixisSERKsGeneFamilyinMalus
ZhangLijie1 GuoSuman2 DongWenxuan2*
1College of Forestry, Shenyang Agriculture University, Shenyang, 110866; 2 College of Horticulture, Shenyang Agriculture University, Shenyang,
110866
* Corresponding author, wxdong63@126.com
DOI:10.13271/j.mpb.013.001033
Abstract Inthisstudy,4fragmentsofSERKgenefamilywereclonedbyhomologycloningmethodfromMalus
Pingyi sweet tea and its hybrid progeny, and expression of SERKs gene family was analyzed in different organs
and tissues of Pingyi Tiancha and its hybrid progeny. The amino acid sequences of 4 fragments of SERK gene
family showed more than 84% identity with those of theArabidopsis thaliana and tobacco, and had higher
homologythanotherspeciesaminoacidsequenceswhenfurthercomparativeanalysisbyBlast.SERK1,SERK2,
SERK3andSERK4mainlyexpressed in reproductive organs accordingto reverse transcriptase polymerase chain
reaction (RT-PCR). Thus,weinferthatSERKsgenesplayanimportantroleinregulatingdevelopmentprocessof
Pingyi Tiancha and itshybrid progeny. This studylaies a foundation offurther studyon reveal the mechanism of
apomixis.
Keywords Pingyitianchaandhybridoffspring,SERKs,Genecloning,RT-PCR
收稿日期：2015-01-06接受日期：2015-03-02网络出版日期：2015-05-11
URL:http://www.biopublisher.cn/index.php/mpbopa/article/view/2875
基金项目：本研究由国家自然科学基金(30971975)资助
平邑甜茶(Malus hupenensisRehd.var.pingyiensis)
为蔷薇科(Rosaceae)苹果属(Malus)，是湖北海棠的一
个变种，也是具有兼性无融合生殖能力的野生资源，
属于典型的三倍体无融合生殖类型。为了进一步研
究平邑甜茶及其杂种后代无融合生殖特性的遗传与
发育机制，本课题组在前期研究过程中以平邑甜茶
作为母本植株，与普通扎矮山定子为父本进行杂交
试验，获得了杂种后代皱叶矮生株系，经过胚胎学研
究分析杂种后代的无融合生殖率显著下降。根据王
颖(2009)对平邑甜茶和杂种后代授粉及结实情况调
查数据表明，亲本平邑甜茶无论是否经过切柱头处
理，其坐果率都是最高的，达到90%以上；而杂种后
代皱叶矮生株系在自然授粉情况下的坐果率最高仅
为68.30%，经过切柱头处理1个月之后的坐果率仅
达到6.02%，明显的低于亲本平邑甜茶，说明亲本平
邑甜茶的无融合生殖能力较高，而杂种后代的无融
分子植物育种
MolecularPlantBreeding
图1平邑甜茶和杂种后代SERKs片段扩增
注:A:平邑甜茶SERKs片段扩增;B:杂种后代SERK基因家
族片段扩增;M:100bpDNAmarker;1,5:SERK1;2,6:SERK4;
3,7:SERK2;4,8:SERK3
Figure 1 Amplification of SERKs fragments of Pingyi Tiancha
andhybridoffspring
Note: A: Amplification of SERKs fragments of Pingyi Tiancha;
B: Amplification of SERK gene family fragments of hybrid off-
spring; M: 100 bp DNA marker; 1,5: SERK1; 2,6: SERK4; 3,7:
SERK2;4,8:SERK3
表1分离平邑甜茶和杂种后代SERK基因家族片段和RT-PCR所用引物序列
Table1IsolatedSERKofgenefamiliesfragmentandRT-PCRprimersusedinsequenceofPingyiTianchaandhybridoffspring
引物
Primers
S1
S2
S3
S4
SERK1
SERK2
SERK3
SERK4
18S
序列(5→3)
Sequence(5→3)
F:GAAGTTCATCTTGGGCAGC
R:CCCACAACAGCCTCAAAC
F:AGATGAT(ACT)AG(CT)ATGGC(AGC)GTTC
R:5CGCCCACCATGGC(CT)TC(AG)AA(CT)TC
F:AGATGAT(ACT)AG(CT)ATGGC(AGC)GTTC
R:CC(AG)TA(AGC)CCAAA(AG)ACATC(AG)GT(CT)TTC
F:TATCC(ACT)TA(CT)ATGGC(ACT)AATGGAAG
R:CC(AG)TA(AGC)CCAAA(AG)ACATC(AG)GT(CT)TTC
F:CGGTTACTTGTTTATCCTT
R:GGTGAATAATCTTCGGGTC
F:AGGGTATTGATGGTGATG
R:CGTAGAGATGGAAGAGGTAA
F:GTCACTGCCAAACCGAGAG
R:GAGAACAAACACAAACCTG
F:TCAGATAATGGTGGGGTC
R:TGCTGTTACTGTTGTGGTT
F:GTAGTCATATGCTTGTCT
R:GAATGATGCGTCGCCAGCACAAAGG
基因用途
Usegenes
SERK1片段扩增
AmplifiedfragmentsofSERK1
SERK2片段扩增
AmplifiedfragmentsofSERK2
SERK3片段扩增
AmplifiedfragmentsofSERK3
SERK4片段扩增
AmplifiedfragmentsofSERK4
SERK1实时定量
RealtimeRT-PCRofSERK1
SERK2实时定量
RealtimeRT-PCRofSERK2
SERK3实时定量
RealtimeRT-PCRofSERK3
SERK4实时定量
RealtimeRT-PCRofSERK4
18S实时定量
RealtimeRT-PCRof18S
合生殖能力显著下降。Albertini等(2005)在研究过程
中推测：SERK基因有可能是终止有性生殖的基因，
也就是说在植物生殖生长发育中，在一定的条件下，
SERK基因一旦开启，就有可能导致植物提前终止了
有性生殖的过程，被迫行使无融合生殖过程而完成
植物的整个生殖过程。据此，分析在苹果属平邑甜茶
和杂种后代中同样也有可能存在着控制无融合生殖
的SERK基因，使得该基因在杂种后代矮生株系中
控制无融合生殖的基因未能及时启动，而导致杂种
后代无融合生殖能力降低。
为探讨苹果属无融合生殖机理，本研究拟从苹
果属三倍性平邑甜茶和四倍性杂种后代株系中利用
同源克隆法分离SERK基因家族，并利用RT-PCR
荧光定量分析SERK基因家族在不同器官、组织中
的表达情况，分析SERK基因与无融合生殖发育过
程中的相互关系，旨在为深入研究苹果属无融合生
殖的分子机理奠定基础。
1结果与分析
1.1平邑甜茶和杂种后代 SERK基因家族片段的分离
以苹果属三倍性平邑甜茶和四倍体杂种后代叶
片总DNA为模板，利用4对SERK基因引物(表1)
分别进行 PCR扩增，分别得到 4条长度大约在
500~700bp的特异条带。测序结果表明，这四条片段
长度分别为：705bp、671bp、504bp、740bp(图1A)和
705bp、500bp、639bp、675bp(图1B)。在GenBank上
进行Blast搜索比对后，分别命名为SERK1、SERK4、
SERK2和SERK3，分别编码152、116、97、141和164、
89、89、142个氨基酸，其中包含1个内含子，长度分别
为208bp、322bp、212bp、311bp(图2~图5)，以及长
度分别为208bp、208bp、210bp、351bp(图6~图9)。
1034
图2平邑甜茶SERK1同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 2 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK1homologousgeneofPingyiTiancha
图3平邑甜茶SERK2同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 3 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK2homologousgeneofPingyiTiancha
图4平邑甜茶SERK3同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 4 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK3homologousgeneofPingyiTiancha
图5平邑甜茶SERK4同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 5 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK4homologousgeneofPingyiTiancha
图6杂种后代SERK1同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 6 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK1homologousgeneofhybridoffspring
1.2平邑甜茶和杂种后代 SERKs基因家族片段序列分析
将得到的三倍体平邑甜茶和杂种后代 SERKs
同源基因片段Blast比对，比对结果发现三倍体平邑
甜茶SERK1、SERK2、SERK3、SERK4核苷酸序列与
蔷薇科玫瑰(Rosa hybrid)(EF361968.1)的SERK同源
基因核苷酸序列同源性都在84%以上。将获得的平
邑甜茶SERKs基因家族的氨基酸序列与其他物种
的氨基酸序列进行同源性比对，结果表明：与模式植
物拟南芥的氨基酸序列同源性在96%以上，与烟草
的氨基酸序列同源性在84%以上，与玉米SERK基
因家族的氨基酸序列同源性在81%以上；同时，与其
他植物的氨基酸序列进行了同源性比对，都具有较
高的同源性。这说明已克隆到平邑甜茶和杂种后代
中无融合生殖相关SERKs基因片段。
苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析
CloningandExpressionAnalysisofApomixisSERKsGeneFamilyinMalus
1035
分子植物育种
MolecularPlantBreeding
图7杂种后代SERK2同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 7 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK2homologousgeneofhybridoffspring
图8杂种后代SERK3同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 8 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK3homologousgeneofhybridoffspring
图9杂种后代SERK4同源基因的核苷酸序列及推导的氨基
酸序列
Figure 9 Nucleotide and deduced amino acid sequences of
SERK4homologousgeneofhybridoffspring
图10平邑甜茶和杂种后代SERKs基因片段内含子分析
Figure 10 Intron analysis of SERKs gene fragment from Pingyi
Tianchaandhybridoffspring
1.3 SERKs基因片段内含子分析
通过选用不同引物对，以DNA为模板进行扩增
SERK基因家族，在苹果属平邑甜茶和杂交后代中获
得了SERK基因家族片段，经过序列比对，Blast分析
上述获得的 SERK基因家族片段，结果表明这些
SERK在结构上具有相似性，都含有1个内含子。平
邑甜茶 SERK1-SERK4内含子为 206 bp、322 bp、
311 bp、212 bp；杂种后代SERK1内含子为208 bp、
208bp、210bp、374bp(图10)。
1.4 SERKs在平邑甜茶和杂种后代不同组织、器官中
的表达
取定量后相同量(2μg)平邑甜茶和杂种后代的幼
嫩叶片及花蕾期(5月5日)发育时期的子房、雌蕊、雄
蕊、萼片、花瓣的总RNA进行反转录，利用实时定量
RT-PCR的方法分别检测了SERK在三倍体和四倍
体试材不同组织、器官中的表达情况。结果表明：
SERK1、SERK2、SERK3、SERK4在平邑甜茶的子房、
雌蕊、雄蕊、萼片中的表达量最高；SERK1、SERK2、
SERK3、SERK4在杂种后代的花瓣和叶片中的表达
量最高；而SERK3在不同器官和组织中的表达量都
是最高的；SERK1、SERK2、SERK3、SERK4在平邑甜
茶子房、雌蕊的表达量明显高于杂种后代，SERK1、
SERK2在平邑甜茶雄蕊中的表达量与杂种后代几乎
相等；SERK1、SERK2、SERK3、SERK4在平邑甜茶花
瓣、叶片中表达量非常小甚至不表达(图11)。上述表
达分析结果表明：SERK1、SERK2、SERK3、SERK4基
因主要在生殖生长组织内表达，在营养器官中表达量
很低甚至与不表达，而且SERK在生殖器官子房中的
表达量三倍性平邑甜茶明显高于四倍性杂种后代，推
测SERK基因是与无融合生殖相关的重要基因。
2讨论
在园艺植物中，很多果树都具有无融合生殖现
象，如核桃属植物(Tischler,1993)、柑橘属植物、蔷薇
1036
图11SERK基因在平邑甜茶和杂种后代33#不同器官组织中的表达
注:A:子房;B:雌蕊;C:雄蕊;D:萼片;E:花瓣;F:叶片
Figure11ExpressionofSERKgeneindifferentorgansandtissuesofPingyiTianchaandhybridoffspring33#
Note:A:Ovary;B:Pistil;C:Stamen;D:Sepal;E:Petal;F:Leaf
苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析
CloningandExpressionAnalysisofApomixisSERKsGeneFamilyinMalus
属、苹果属植物以及芒果属植物等。由于无融合生殖
现象在果树育种实践中具有重要的生产意义，因此
育种专家展开了许多相关方面的研究，并取得了可喜
的研究成果(Pessinoetal.,2001;Espinozaetal.,2006)。
蔷薇科苹果亚科(Maloideae)中约有 90种植物存在
无融合生殖特性(Catherineetal.,2005)。由于无融合
生殖是一种能代替有性生殖，不发生两性生殖细胞
的融合而产生种子，因此，在果树遗传育种和栽培应
用等方面具有诱人的前景，成为学术界研究的一个
热点(伏军,1990,作物研究,4(4):42-45;李平,1992)。
苹果属无融合生殖植物多为兼性无融合生殖
(刘丹丹,2012)，因此，一些研究人员利用这一特点选
择平邑甜茶作为母本，与苹果属植物M9、B9、M27、
舞美、二倍体苹果、扎矮山定子等普通二倍体植物作
父本进行有性杂交实验，研究平邑甜茶及杂种后代
的无融合生殖特性、多胚现象及后代相关性状是否
存在分离等遗传特点。研究发现，有些杂种后代在性
状上产生严重分离现象(杨峰等,2012;刘丹丹,2012)，
使其在生殖过程中不能进行正常的减数分裂，不能
形成正常的配子。因此，在生殖过程中只能以无融合
生殖方式进行，而且属于无孢子生殖类型，无性胚囊
可以单个发育，也可以多个发生而形成复合胚囊。木
本植物生长周期比较长，而且其遗传背景也比较复
杂，这无疑增加了对无融合生殖分子机理等方面的
研究难度。因此，在研究过程中我们也只能借鉴农作
物中的一些模式植物无融合生殖特性和遗传特点找
出关键基因。国外研究人员通过对草地早熟禾无融
合生殖过程的研究中找到了可能与植物无融合生殖
相关的两个基因，分别APOSTART基因和SERK基
因，APOSTART基因则是控制无融合生殖启动的基
因，而SERK基因是控制有性生殖终止的基因，也就
是说在植物生长发育过程中，无融合生殖相关的
SERK基因在某一特定条件下启动之后，该物种有性
生殖的过程可能就会被迫停止，这时 APOSTART
1037
分子植物育种
MolecularPlantBreeding
基因开始启动，顺利完成生殖过程(Albertini et al.,
2005)。研究证明 SERK基因家族在植物生殖过程
中参与了小孢子的发育过程，分析表明该基因在生
殖器官的表达量高于营养器官(Albrechtetal.,2005;
Colcombetetal.,2005)。在本研究中，为了进一步分
析SERK类基因在无融合生殖植物中的表达差异，
试验采用了实时定量RT-PCR技术分别对SERK基
因在平邑甜茶和杂种后代不同器官的组织以及不同
发育时期的子房等进行了定量表达分析。研究结果
表明：SERK1、SERK2、SERK3、SERK4在平邑甜茶
的子房、雌蕊、雄蕊、萼片中的表达量最高；而在杂种
后代的花瓣和叶片中的表达量最高；而SERK3在不
同器官和组织中的表达量都是最高的；SERK1、
SERK2、SERK3、SERK4在平邑甜茶子房、雌蕊的表
达量明显高于杂种后代，SERK1、SERK2、SERK3、
SERK4在平邑甜茶花瓣、叶片中表达量非常小甚至
不表达。研究结果表明：SERK1、SERK2、SERK3、
SERK4基因主要在生殖生长组织内表达，在营养器
官中表达量很低甚至与不表达，而且SERK在生殖
器官子房中的表达量三倍性平邑甜茶明显高于四倍
性杂种后代，推测SERK基因是与无融合生殖相关
的重要基因。我们可以推测在SERK基因家族起到
了一定的调控作用。
3材料与方法
3.1植物材料
15a苹果属三倍性平邑甜茶和杂种后代的成龄
树栽植于沈阳农业大学园艺学院果树试验基地，常
规栽培管理。2012年盛花期为5月7日，从5月2日
(小蕾期)开始取样，花后取样从5月8日至12日，每
天取1次；选择发育良好的花蕾及花采集100朵。采
集后横切取子房、雌蕊、雄蕊、花瓣、萼片等试材用液
氮速冻后保存备用。
3.2实验方法
3.2.1基因组DNA和RNA提取
植物材料DNA采用常规的CTAB方法提取(李
贺等,2009)。总RNA提取采用TIANGEN生物公司
生产的多糖多酚提取试剂盒获得。
3.2.2引物设计
基因家族片段分离所用引物根据NCBI数据库
中SERK同源基因CDS序列的保守区域设计引物
用于SERKs片段的扩增；实时定量引物设计根据已
获得的SERKs，按照实时定量PCR引物设计的原则
利用软件Primer Premier5.0进行PCR引物设计(引
物序列见表1)；选择18S为管家基因，引物序列由赛
百盛生物有限公司合成。
3.2.3PCR扩增
PCR扩增SERK基因片段，PCR体积25μL：取
100ng的DNA作为模板，2UExTaqDNA聚合酶，
ExTaq 10× Buffer (10 mmol/L Tris-HCl, 50 mmol/L
KCl, 1.5mmol/LMgCl2,pH8.3)，2.5mmol/LdNTPs，
100μmol/L上下游引物，不足体积用无菌水补足至
25μL。PCR反应程序为95℃5min，35个循环(94℃
40s,60℃1min,72℃2min)，72℃10min。
3.2.4序列测定与分析
PCR产物经凝胶电泳检测后采用上海生工胶回
收试剂盒纯化，并与T载体连接，经Top10进行转
化，获得单克隆后进行菌液PCR鉴定送华大生物公
司测序。将获得的序列在NCBI数据库(http://www.
ncbi.nlm.nih.gov/)中进行Blast检索分析，利用Clustal
X1.83、DNAMAN6.0软件进行多序列比对分析。
3.2.5实时定量RT-PCR
实时定量PCR反应体积为20μL，每个反应3
个重复，体系为：1μL cDNA (RNA为 2μg)，10μL
2.5×Mix，正反向引物各0.3μL(10μmol/L)，去离子
水8.4μL。荧光定量PCR使用TIANGEN生化有限
公司的RealMasterMix(SYBRGreen)试剂盒(FP202)，
Bio-RadiQ5(admin)实时定量PCR仪上完成。在PCR
反应的第2步收集荧光信号，采用2-△△CT法计算相对
表达量的高低。
实时定量 RT-PCR反应程序为：95℃10 min，
95℃15s，60℃1min，72℃30s，40个循环。
作者贡献
张丽杰是本研究的实验设计和实验研究的执行
人，完成数据分析，论文初稿的写作；郭苏漫参与实
验设计，试验结果分析；董文轩是项目的构思者及负
责人，指导实验设计，数据分析，论文写作与修改。全
体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由国家自然科学基金(30971975)资助。
参考文献
Albertini E., Marconi G., Reale L., Barcaccia G., Porceddu A.,
1038
FerrantiF.,andFalcinelliM.,2005,SERKandAPOSTART,
candidategenesforapomixisisinPoa pratensis,PlantPhysi-
ol.,138(4):2185-2199
AlbrechtC.,RussinovaE.,HechtV.,BaaijensE.,anddeVriesS.,
2005,TheArabidopsis thaliana SOMATICEMBRYOGEN-
ESIS RECEPTOR-LIKE KINASES1 and 2 control male
sporogenesis,PlantCell,17(12):3337-3349
CatherineA.,EugeniaR.,ValerieH.,anddeVriesS.C.,2005,The
Arabidopsis thaliana somatic embryogenesis receptor-kinas-
es1 and 2 control male sporogenesis, Plant Cell, 17(12):
3337-3349
Colcombet J., Boisson-Dernier A., Ros-Palau R., Vera C.E., and
SchroederJ.I.,2005,ArabidopsisSOMATICEMBRYOGE-
NESISRECEPTORKINASES1and2areessentialfortape-
tumdevelopmentand microspore maturation, Plant Cell, 17
(12):3350-3361
Espinoza F., Daurelio L.D., Pessino S.C., Valle E.M., and Quarin
C.L.,2006,GeneticcharacterizationofPaspalum notatumac-
cessions by AFLP markers, Plant Syst. Evol., 258 (3-4):
147-159
LiH.,YinD.S.,WangZ.G.,HuangF.F.,ChangL.L.,andZhangZ.
H.,2009,Studyonthedifferenceinexpressionprofilesofmi-
croRNAamongdifferentorgansofstrawberry,GuoshuXue-
bao(JournalofFruitScience),26(5):632-637(李贺,印东升,
王志刚,黄飞飞,常琳琳,张志宏,2009,草莓不同器官中
microRNA表达差异研究,果树学报,26(5):632-637)
LiP.,ChenF.,andZhouG.M.,1992,Theapplicationofapomixis
inplantbreedingandtechniqueforthestudyofembryology,
SichuanDaxueXuebao(JournalofSichuanUniversityNatu-
ral Science Edition), 29(2): 288-293 (李平,陈放,周桂梅,
1992,无融合在植物育种中的应用及细胞胚胎学研究方法,
苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析
CloningandExpressionAnalysisofApomixisSERKsGeneFamilyinMalus
四川大学学报(自然科学版),29(2):288-293)
LiuD.D.,2012,Developmentalandgeneticcharactersofapomixis
in tea crabapple as well as functional characterization of
apomixis-relatedgenes,DissertationforPh.D.,ShandongA-
griculturalUniversity,Supervisor:HaoY.J.,pp.17-19(刘丹
丹, 012,平邑甜茶无融合生殖发育与遗传特性分析及相
关基因的功能鉴定,博士学位论文,山东农业大学,导师:
郝玉金,pp.17-19)
Pe sino S.C., Espinoza F., Martínez E.J., Ortiz J.P., Valle E.M.,
andQuarínC.L.,2001,IsolationofcDNAclonesdifferential-
lyexpressedinflowersofapomicticandsexualpaspalumno-
tatum,Hereditas,134(1):35-42
Ti chler C.R., 1993, Physiological variation in tissute culture re-
generatedapomicticpaspalum dilatatum,J.PlantPhysiol.,14
(4):482-486
Wang Y., 2009, Study on reproductive characteristics of hy-
bridizedoffspringderivedfromPingyiTiancha(Malus h pe－
hensisvar.pingyiensis)andconstructionofsuppressionsub-
ractive library of its ovaries in florescence, Dissertation for
Ph.D., Shenyang Agricultural University, Supervisor: Dong
W.X.,pp.19-20(王颖,20 9,平邑甜茶(Malus hupehensivar.
pingyiensis)的杂交后代生殖特性研究和花期子房抑制性
消减文库构建,沈阳农业大学,博士学位论文,导师:董文
轩,pp.19- 0)
YangF., YiK., Wu Y.Q., Liu D.D., Liu Z., and Zhao L.L., 2012,
Analysis of apomictic genotypes and the developmental
mod offemale gametesof‘PingyiTiancha’(Malus hupe－
hensis var.pingyiensis), Guoshu Xuebao (Journal of Fruit
Sc ence),29(4):536-543(杨峰,伊凯,吴雅琴,刘丹丹,刘
志,赵玲玲,2012,平邑甜茶无融合生殖基因型分析及雌
配子发育模式研究,果树学报,29(4):536-543)
1039