免费文献传递   相关文献

不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价



全 文 :果 树 学 报 2015,32(4): 672-680
Journal of Fruit Science
DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20140363
不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价
胡军华 1,刘荣萍 1,2,王雪莲 1,2,周 娜 1,洪棋斌 1,
姚廷山 1,李太盛 1,江 东 1,曹 立 1,李鸿筠 1
(1西南大学柑桔研究所·国家柑桔工程技术研究中心·西南果树科学观测实验站,重庆 400712;
2西南大学园艺园林学院,重庆 400715)
摘 要:【目的】探讨不同柑橘种质及‘梨橙2号’ב晚蜜2号’部分杂交种对柑橘褐斑病菌Alternaria alternata的感病程
度及抗性分级标准。【方法】采用室内果实去皮接种观察不同种质的感病程度并根据系统聚类分析法、病斑平均直径
法、病情指数法3种抗性评价方法对抗病性进行分级。【结果】大部分宽皮柑橘类种质易感病;甜橙类、柚类和柠檬类种
质较抗病。参试的54份种质划分为高抗、抗病、中抗、感病、高感5类,未发现免疫种质;‘胡柚’、‘强德勒’、‘华盛顿脐
橙’和‘梁平柚’4个品种为高抗品种。‘梨橙2号’ב晚蜜2号’杂交种抗病性出现分离,可以进行遗传分析。【结论】宽皮
柑橘种质及其杂交种和葡萄柚易感病。
关键词:柑橘属种质;柑橘褐斑病菌;抗性
中图分类号:S666 文献标志码:A 文章编号:1009-9980(2015)04-0672-09
Evaluation of Citrus germplasm resistance to Alternaria alternata
HU Junhua1,LIU Rongping1,2,WANG Xuelian1,2,ZHOU Na1,HONG Qibin1,YAO Tingshan1,LI Taish⁃
eng1,JIANG Dong1,CAO Li1,LI Hongjun1
(1Citrus Research Institute,Southwest University,National Engineering Research Center for Citrus,Scientific Observing and Experimental
Station of Fruit Tree Science(Southwest Region),Ministry of Agriculture,Chongqing 400712,China;2College of Horticulture and Landscape
Architecture,Southwest University,Chongqing 400715,China)
Abstract:【Objective】To identify the resistance of citrus germplam and some F1 hybrids of Citrus sinensis
‘Licheng No. 2’×C. reticulata‘Wanmi No. 2’to A. alternata and to evaluate different methods for assess⁃
ment of the resistance to Alternaria alternata.【Methods】The partially peeled fruits were inoculated with
A.alternata and kept in a humidified box at 25 ℃ for 3 days to survey the severity of the disease. The resis⁃
tance was evaluated with the methods of disease system clustering analysis,average diameter of the
speckle and disease index method.【Results】Most C. reticulata (tangerine) varieties and F1 hybrids were
susceptible. C. sinensis,C. grandis and C. limon were highly resistant. The fifty-four varieties could be
classified into five categories of highly resistant,resistant,moderately resistant,susceptible and highly
susceptible. None of the varieties was found to be immune. Huyou pomelo,Chandler pomelo,Washing⁃
ton navel orange and Liangping pomelo showed high resistance. The segregation on disease resistance was
observed among the F1 hybrids of C. sinensis‘Licheng No. 2’×C. reticulata‘Wanmi No. 2’.【Conclusion】
The results demonstrated that C. reticulata (tangerine) varieties and its hybrids as well as C. paradisi are
more susceptible to citrus brown spot disease compared to the C. sinensis,C. grandis and C. limon.
Key words: Citrus germplasm;Alternaria alternata;Resistance
收稿日期:2014-10-10 接受日期: 2015-04-09
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(201203034);重庆市科技攻关计划项目(CSTC2012GG-YYJS0475)
作者简介:胡军华,女,副研究员,博士,研究方向果树抗病性。Tel: 023-68349005,E-mail: hujunhua@cric.cn
4期
由交链格孢菌(Alternaria alternata)引起的柑橘
褐斑病(Citrus brown spot)是一种严重危害嫩梢、嫩
叶及果实的真菌病害[1]。1903年在澳大利亚柑橘品
种—‘皇帝柑’首次报道,此后,美国、以色列、南非、
古巴、哥伦比亚、土耳其、西班牙、意大利、阿根廷和
秘鲁都有发生,是西班牙‘福橘’、巴西‘丹西橘’产量
下降的最主要因素[2]。我国2010年开始相关的报道[3],
随后湖南湘西和云南瑞丽的椪柑、浙江的瓯柑、广西
的贡柑以及重庆万州的红橘都有发生,病情逐年加
重且发病面积不断扩大 [4-5]。刘弘等[6]2010年调查重
庆万州地区红橘发现,发病严重的果园病株率达
100%、病果率超过 80%,严重影响红橘的产量及品
质。
柑橘褐斑病菌可分为2个致病型:橘致病型(产
毒素HST)为害橘和橘柚杂种[7];‘粗柠檬’致病型(产
ACR-毒素或ACRL毒素)为害‘粗柠檬’。毒素主要
损害细胞膜使膜内电解质渗透,产生坏死斑[8]。该病
害的防治主要依赖异菌脲、代森锰锌和铜制剂的频
繁使用[9],在一个种植生长周期内有时喷施杀菌剂达
到 12次以上[10-11]。然而对于感病柑橘品种,即使增
加喷药次数,病害也得不到有效控制。因此,明确不
同柑橘品种的抗病性为栽培育种提供重要信息。部
分学者研究了不同柑橘品种的感病性发现 [12-15],宽
皮柑橘及其杂交种都易感病,甜橙、柠檬类、金橘等
为抗病品种[16]。Kohmoto等[17] 、Peever等[18]和Solel等[13]
发现不同地理种群的菌株毒力存在差异,接种相同
品种时表现出不同的抗性。目前国内对柑橘抗褐斑
病菌的研究未见相关报道。我们采用刘荣萍等[19]建
立的柑橘褐斑病菌致病力评价体系,对 4大类柑橘
种质中的 54份不同柑橘种质进行抗病性分析,对
‘梨橙 2号’ב晚蜜 2号’及其 F1材料进行抗病性分
析,采用不同评价方法进行抗性等级划分,明确不同
柑橘品种对褐斑病的抗性级别,挑选优良柑橘抗病
品种,在实验室已建立的柑橘分子标记遗传图谱的
基础上,从中挖掘抗褐斑病相关基因,为柑橘褐斑病
的防治和优良柑橘育种提供科学的理论依据。
1 材料和方法
1.1 材料
柑橘褐斑病菌HJX(A. alternata HJX)来自重庆
万州红橘褐斑病果。保存于西南大学柑橘研究所植
保室。菌种活化后在PDA培养基上 28 ℃光照培养
7 d,保存备用。
供试柑橘种质共 54份,均为柑橘属植物,采自
国家果树种质重庆柑橘圃(重庆市北碚区歇马镇中
国农业科学院柑橘研究所)。其中,宽皮柑橘类种质
23份,包括地中海橘(C. deliciosa)种质、乳橘(C. ki⁃
nokuni)种质、朱橘(C. erythrosa)种质、克里曼丁(C.
clementina)种质、桔橙种质(C.tangor)和温州蜜柑
(C. unshiu)种质等。枸橼柠檬类种质8份,包括粗柠
檬(C. jambhiri)、柠檬(C. limon)种质等。橙类种质
13份。柚类种质 10份,包括葡萄柚(C. paradis)种
质、柚(C. grandis)种质和柚杂种种质。具体品种见
表1。
供试杂交种:‘梨橙2号’甜橙(‘Licheng No. 2’,
C.sinensis(L.)Osb.)和‘晚蜜 2号’橘橙杂种(‘Wan⁃
mi No. 2’,C. unshiu(Mark.)Marc.× C. sinensis(L.)
Osb.)杂交的 F1代果实WL-2、WL-3、WL-4、WL-5、
WL-7、WL-8、WL-11、WL-17、WL-24、WL-29、WL-
32、WL-43、WL-44、WL-46、WL-47、WL-60、WL-
61、WL-69、WL-75、WL-81、WL-83、WL-89、WL-90
均采自西南大学柑橘研究所品种改良中心(重庆市
北碚区歇马镇)。
1.2 接菌方法
参照刘荣萍等[19]建立的柑橘褐斑病菌致病力评
价体系,采用果实去皮接种方法,每个果实接种1个
菌饼(菌饼直径 5 mm),每个处理设置 20次重复。
以接种 PDA 培养基为空白对照。接种后的果实放
入铺有脱脂棉的托盘中,覆上保鲜膜,25 ℃光照培
养箱中保湿培养,测量2~6 d时果实上的病斑直径。
1.3 抗性评价方法
病情指数法(简称指数法):按照《柑橘种质资源
描述规范和数据标准》中柑橘疮痂病抗性标准[20],根
据病斑占果实面积的比例分级,统计各个级别的病
斑数目,计算病情指数。根据病情指数,划分各柑橘
品种的抗性等级。
病斑平均直径法(简称AD法):按照李文杨等[21]
对尖孢炭疽菌抗性评价的方法,划分各柑橘品种的
抗性等级。
系统聚类分析法(简称聚类法):根据陈红梅等[22]
对镰刀菌干腐病抗性评价的分析方法,评价54份柑
橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性。依据接种后的平
均病斑直径,采用 SPSS14.0软件的不同数据处理方
法、聚类距离和聚类方法的组合进行数据分析,筛选
出最适合系统聚类分析方法。
2 结果与分析
2.1 宽皮柑橘类种质的抗病性分析
胡军华,等:不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价 673
果 树 学 报 32卷
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
系列1 系列2 系列3
接种致病菌株HJX于 21份宽皮柑橘类种质进
行抗病性检测(图 1,图版-B1~B5),其中‘大果南
丰’、‘岩溪晚芦’、‘台湾椪柑’、‘福橘’、‘春见’、‘硬
芦’、‘爱媛 38号’和‘早津温州’发病最快,2 d病斑
直径可达 0.5 cm左右。‘台湾椪柑’、‘兴义大红袍’、
‘硬芦’、‘福橘’、‘春见’、‘大果南丰’、‘CRIC32-
01’、‘爱媛38号’、‘岩溪晚芦’和‘早津温州’病斑扩
展速度较快,4 d病斑直径可达1.2 cm左右。‘兴义大
红袍’、‘硬芦’、‘福橘’、‘春见’、‘大果南丰’、‘早津
温州’在 6 d时病斑可超过 2.0 cm。‘甜橘’、‘朱红
橘’、W·默科特、CRIC32-01前期发病缓慢,病斑不
明显,2~4 d时病斑迅速扩大,其中‘兴义大红袍’和
CRIC32-01发病加剧,4~6 d时病斑迅速扩大,在6 d
时病斑达到最大;‘不知火’和‘十月橘’在 2~4 d时
发病轻微,在4~6 d时病斑迅速扩大。‘茶枝柑’、‘汉
源黄果柑’、‘克里曼丁’、‘日南 1号’、‘‘金诺橘’
01’、‘金诺橘’6个品种在整个观察期内发病较慢,
病斑直径较小。前期发病快的‘台湾椪柑’、‘福橘’、
‘春见’、‘大果南丰’、‘岩溪晚芦’和‘早津温州’6 d
时病斑几乎覆盖整个果实,其中‘大果南丰’发病最
迅速,后期病斑扩展速度最快,‘兴义大红袍’发病缓
慢,但后期扩展速度快。
1. 台湾椪柑;2. 茶枝柑;3. 汉源黄果柑;4. 甜橘;5. 兴义大红袍;6. 不知火;7. 克里曼丁;8. 十月橘;9. 朱红;10. W·默科特;11.硬芦;
12. 福橘;13. 春见;14. 大果南丰;15.日南1号温州;17. 金诺橘01;18. 金诺;19. 爱媛38号;20. 岩溪晚芦;21. 早津温州。实验中20个重复
平均直径,数据使用Dunncans Multiple Range Test进行分析。
1. Taiwan Ponkan;2. Chazhigan;3. Hanyuan huangguogan;4. Tianju;5. Xingyidahongpao;6. Shiranui;7. Clementine;8. Da Zhong Shiyue⁃
ju;9. Zhuhong;10. W·murcott;11. Yinglu;12. Fuju;13. Harumi;14. Daguonanfeng;15. Nichinan No.1;16. CRIC32-01;17. Kinnow Manda⁃
rin No.01;18 Kinnow Mandarin;19. Ehime Kashi No.38;20. Yanxiwanlu;21. Early Okitsu Satsuma. The data are means of twenty replicates. Differ⁃
ent letters represent significant difference ( P < 0. 05 ) using Duncanc′s Multiple Range Test.
图1 HJX菌株接种不同宽皮柑橘类种质2~6 d时的病斑直径
Fig. 1 Mean diameter of the lesions on friut of Citrus reticulata Blanco cultivars at 2-6 d
after inoculation with A. alternata HJX strain
2.2 枸橼柠檬类种质的抗病性分析
接种致病菌株HJX于8份枸橼柠檬类种质进行
抗病性检测(图 2,图版-A1~A5)。2~4 d时仅‘蒙纳
盖络’病斑直径可达0.5 cm,其余品种轻微发病;6 d
时仅‘蒙纳盖络’、‘维拉佛兰卡’、‘库脱狄肯’和‘粗
柠檬’病斑直径超过0.5 cm,其中‘粗柠檬’发病先慢
后快,6 d病斑直径达到最大0.67 cm。
2.3 橙类种质的抗病性分析
接种致病菌株HJX于 13份橙类种质进行抗病
性检测(图3,图版-D1~D5),2 d时13份种质发病轻
微;4 d时仅‘红江橙’、‘红肉暗柳橙’病斑直径超过
0.5 cm,并在4~6 d时持续扩展,6 d病斑直径0.8~1.0
cm;‘塔罗科血橙’在 4~6 d时发病迅速,6 d病斑直
径可达0.8 cm。其他甜橙病斑扩展缓慢,6 d病斑直
径在0.4~0.6 cm。
2.4 柚类种质的抗病性分析
接种致病菌株HJX于 10份柚类种质进行抗病
性测试(图 4,图版-C1~C5)。接种 2 d时 10个品种
发病轻微,差异不大。接种 4~6 d时,仅火焰葡萄
柚、汤普森葡萄柚病斑扩展迅速,6 d 病斑直径
0.67~1.0 cm;其他品种发病缓慢,6 d 病斑仅在
0.1~0.4 cm。
2.5 不同柑橘属种质抗病性评价
3种评价方法均可将54份柑橘属种质划分为高






Dia
met
er o
f the
lesi
on/c
m
2 d 4 d 6 d
品种 Cultivar
674
4期
抗、抗、中抗、感和高感5类(表1)。聚类分析法将病
斑直径原始数值不转换、聚类方法采用最长距离法,
聚类效果与接种结果吻合度最好。以欧式距离 7.0
作为最佳聚类分割点,将供试种质划分为5类,包括
1.费米耐劳;2.尤力克;3.蒙纳盖络;4.维拉佛兰卡;5.粗柠檬;6.库脱狄肯;7.费诺;8.佛拉
1. Femminello;2. Eureka;3. Mengnagailuo;4. Villafranca;5. Rough lemon;6. Kutuodiken;7. Fino;8. Foula
图2 HJX菌株接种不同枸橼柠檬类种质2~6 d时的病斑直径
Fig. 2 Mean diameter of the lesions on friut of Citrus limon(L.)Burm. f. cultivars at 2-6 d after inoculation
with A. alternata HJX strain
1.胡柚;2.火焰葡萄柚;3.汤姆逊葡萄柚;4.梁平柚;5.琯溪蜜柚;6.龙安柚;7.通贤柚;8.岭南沙田柚;9.强德勒柚;10.台湾晚白柚
1. Huyou;2. Flame grapefruit;3. Thompson grapefruit;4. Liangpingyou No.1;5. Guanximiyou;6. Longanyou;7. Tongxianyou;8. linnanshatiany⁃
ou;9. Chandler Pomelo;10. Taiwanwanbaiyou
图4 HJX菌株接种不同柚类种质2~6 d时的病斑直径
Fig. 4 Mean diameter of the lesions on fruit of Citrus grandis(L.)Osbeck cultivars at 2-6 d
after inoculation with A. alternata HJX strain
1. 塔罗科血橙;2. 刘金刚夏橙;3. 冰糖橙;4. 伦晚脐橙;5.新会橙;6. 伏令夏橙;7. 华盛顿脐橙;8. 哈姆林甜橙Hamlin;9.红江橙;10.红肉
暗柳橙;11.佩拉甜橙;12.奉节晚脐;13.新会甜橙
1. Tarocco;2. Liujingang Valencia;3. Bingtangcheng;4. Lane late Navel Orange;5. Yuan Jiang Sweet orange;6. Valencia Nucellar;7. Washington
navel orange;8. Hamlin;9. Hongjiangcheng;10. Pink flesh an liu cheng;11. Pera sweet orange;12. Fengjie 95-1 navel orange;13. Xinhuitiancheng
图3 HJX菌株接种不同橙类种质2~6 d时的病斑直径
Fig. 3 Mean diameter of the lesions on fruit of Citrus sinensis(L.)Osbeck cultivars at 2-6 d
after inoculation with A. alternata HJX strain






Dia
met
er o
f the
lesi
on/c
m
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
1 2 3 4 5 6 7 8
2d 4d 6d






Dia
met
er o
f the
lesi
on/c
m
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
系列1 系列2 系列3
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
系列1 系列2 系列3






Dia
met
er o
f the
lesi
on/c
m
2 d 4 d 6 d
2 d 4 d 6 d
d
品种 Cultivar
品种 Cultivar
品种 Cultivar
胡军华,等:不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价 675
果 树 学 报 32卷
表1 柑橘种质对柑橘褐斑病菌HJX菌株的抗病性反应
Table 1 Resistance response of citrus varieties to A. alternata HJX

Species
柚杂种
柚C. grandis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
柚C. grandis (L.) Osbeck
柚C. grandis (L.) Osbeck
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
柚C. grandis (L.) Osbeck
柚C. grandis (L.) Osbeck
柚C. grandis (L.) Osbeck
柚C. grandis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
克立曼丁
C. clementina hort. ex Tanaka
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
宽皮橘 C. reticulata Blanco
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
宽皮橘C. reticulata Blanco
地中海橘C. deliciosa Ten.
宽皮橘C. reticulata Blanco
橘橙C. tangor
温州蜜柑C. unshiu Macf.
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
柠檬C. limon (L.) Burm. f.
粗柠檬C. jambhiri Lush
葡萄柚C. paradis Macfad
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
宽皮橘C. reticulate Blanco
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
宽皮橘C. reticulata Blanco
葡萄柚C. paradis Macfad
甜橙C. sinensis (L.) Osbeck
宽皮橘C. reticulate Blanco
橘橙C. tangor
宽皮橘C. reticulate Blanco
甜橙/宽皮橘C. sinensis (L.)
Osbeck. or C. unshiu Macf.
宽皮橘C. reticulate Blanco
朱橘C. erythrosa Hort. ex Tan
宽皮橘C. reticulate Blanco
宽皮橘C. reticulata Blanco
温州蜜柑C. unshiu Macf.
宽皮橘C. reticulata Blanco
宽皮橘C. reticulate Blanco
宽皮橘C. reticulata Blanco
宽皮橘C. reticulata Blanco
乳橘C. kinokuniHort. ex Tanaka
胡柚Huyou
强德勒柚Chandler Pomelo
华盛顿脐橙Washington Navel Orange
梁平柚Liangpingyou
台湾晚白柚Taiwanwanbaiyou
费诺柠檬Fino Lemon
琯溪蜜柚Guanximiyou
龙安柚Longanyou
通贤柚Tongxianyou
岭南沙田柚 Lingnanshatianyou
晚棱脐橙Lane late Navel Orange
哈姆林甜橙Hamlin
弗娜柠檬Funaningmeng
尤力克柠檬 Eureka Lemon
刘金刚甜橙Liujingang Valencia
佩拉甜橙Pera Sweet Orange
费米耐劳柠檬Femminello
奉节晚脐Fengjie 95-1 Navel Orange
伏令夏橙Valencia Nucellar
克里迈丁Clementine
新会橙Yuangjiang sweet orange
金诺橘Kinnow Mandarin No.1
冰糖橙Bin tangcheng
梨橙2号Licheng No.2
新会甜橘Xinhuitianju
茶枝柑Chazhigan
金诺橘Kinnow Mandarin
汉源黄果柑Hanyuanhuangguogan
日南1号温州Nichinan No.1
维拉佛兰卡柠檬Villafranca Lemon
蒙纳盖洛柠檬Mengnagailuo Lemon
库脱狄肯柠檬Kutuodiken Lemon
粗柠檬Rough lemon
汤普森葡萄柚Thompson Grapefruit
塔罗科血橙Tarocco
不知火Shiranui
红肉暗柳橙Pink Flesh An LIU Chen
十月橘Da Zhong Shiyueju
火焰葡萄柚Flame Grapefruit
红江橙Hongjiangcheng
甜橘Tianju
W·默科特W·MurcottAfourer
岩溪晚芦Yanxiwanlu
晚蜜2号Wanmi No.2
爱媛38号Ehime Kashi No.38
朱红Zhuhong
台湾椪柑Taiwan Ponkan
CRIC32-01
早津温州Early Okitsu Satsuma
春见Harumi
硬芦Yinglu
福橘Fuju
兴义大红袍Xingyidahongpao
大果南丰Daguonanfeng
平均病
斑直径
Mean
lesion
/mm
1.2
1.8
2.3
2.4
3.0
3.0
3.0
3.0
3.3
3.3
3.5
3.5
3.9
3.9
3.9
4.0
4.1
4.2
4.4
4.5
4.5
4.5
4.6
4.8
4.9
5
5.2
5.2
5.3
5.4
6
6.1
6.7
6.7
8.3
8.7
8.8
9.3
10.4
11.5
12.4
12.6
12.8
13.6
15.7
16.9
17.5
18.2
20.7
20.8
21.6
21.9
22.2
26.4
病情
指数
Disease
index/%
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
14.29
19.05
19.73
21.43
22.62
25.71
38.10
39.13
36.05
42.86
42.86
45.24
45.71
50.00
45.58
60.44
60.44
64.94
63.98
71.43
74.15
抗病性反应
Resistance response
聚类分析
Clustering analysis
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
AD法
AD methods
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
病情指数
Disease index
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
感病 Susceptible
高感Highly susceptible
高感Highly susceptible
品种
Variety
676
粗柠檬Rough Lemon
汤普森葡萄柚Thompson Grapefruit
蒙纳盖洛柠檬Mengnagailuo Lemon
库脱狄肯柠檬Kutuodiken Lemon
金诺橘(对照)Kinnow Mandarin(CK)
汉源黄果柑Hanyuanhuangguogan
日南1号温州Nichinan No.1
维拉弗兰卡柠檬Villafranca Lemon
新会橙Yuanjiang Sweet Orange
金诺橘Kinnow Mandarin No.1
克里曼丁Clementine
冰糖橙Bingtangcheng
伏令夏橙Valencia Nucellar
新会甜橘Xinhuitianju
茶枝柑Chazhigan
梨橙2号Licheng No. 2
不知火Shiranui
红肉暗柳橙Pink Flesh An LIU Chen
塔罗科血橙Tarocco
十月橘Da Zhong Shiyueju
华盛顿脐橙Washington Navel Orange
梁平柚Liangpingyou
强德勒柚Candler Pomelo
胡柚Huyou
尤力克柠檬Eureka Lemon
刘金刚夏橙Liujingang Valencia
弗娜柠檬Funaningmeng
佩拉甜橙Pera Sweet Orange
费米耐劳柠檬Femminello
奉节95-1脐橙Fengjie95-1Navel Orange
弗诺柠檬Fino Lemon
龙安柚Long’anyou
台湾晚白柚Taiwanwanbaiyou
琯溪蜜柚Guanximiyou
晚棱脐橙Lane late Navel Orange
哈姆林甜橙Hamlin
通贤柚Tongxianyou
岭南沙田柚Lingnanshatianyou
早津温州Early Okitsu Satsuma
春见Harumi
硬芦Yinglu
福橘Fuju
兴义大红袍Xingyidahongpao
大果南丰Daguonanfeng
朱红Zhuhong
台湾椪柑Taiwan Ponkon
CRIC32-01
爱媛38号Ehime Kashi No.38
火焰葡萄柚Flame Grapefruit
红江橙Hongjiangcheng
甜橘Tianju
W·默科特W·Murcott Afourer
岩溪晚芦Yanxiwanlu
晚蜜2号Wanmi No.2
0 5 10 15 20 25
图5 54份柑橘属种质对柑橘褐斑病菌抗性的聚类分析
Fig. 5 Cluster analysis on the resistance of fifty-four citrus germplasm to A. alternata
6774期 胡军华,等:不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价
果 树 学 报 32卷
高抗品种18个,抗病品种20个、中抗品种6个、感病
品种 4个、高感品种 6个(图 5)。AD法将供试种质
划分为高抗品种 25个,抗病品种 13个、中抗品种 6
个、感病品种4个、高感品种6个。病情指数法将供
试种质划分为高抗品种34个,抗病品种5个、中抗品
种5个、感病品种8个、高感品种2个。
AD法和聚类分析法对高感、感病品种划分结果
相同,病情指数法将‘兴义大红袍’和‘大果南丰’划
为高感,其他相应品种均为感病品种;中抗品种仅
‘火焰葡萄柚’不同,病情指数法确定其为抗病;对于
抗病和高抗品种的划分结果不同;‘塔罗科血橙’、
‘不知火’、‘红肉暗柳橙’、‘十月橘’均为抗病品种,
其他34份种质按照病情指数全部划分为高抗品种,
按照AD法‘茶枝柑’、‘金诺’、‘汉源黄果柑’、‘日南
1号温州’、‘维拉佛兰卡’柠檬、‘蒙纳盖络’柠檬、
‘库脱狄肯’柠檬、‘粗柠檬’和‘汤普森’葡萄柚划为
抗性品种,其他25个为高抗品种;在AD法抗性品种
基础上,聚类分析法继续将‘伏令夏橙’、‘克里曼
丁’、‘新会橙’、‘金诺橘01’、‘冰糖橙’、‘梨橙2号’、
‘新会甜橙’划为抗性品种,高抗品种仅18个。
AD法与病情指数划分方法结果相似性较高。
AD法高抗品种约占46%,病情指数划分高抗品种约
占 63%;聚类分析划分高抗品种约占 33%。感病品
种与抗病品种约为 1∶4;而且高感和感病品种主要
为宽皮橘类种质。甜橙、枸橼柠檬类和柚类种质主
要为抗病和高抗品种。
2.6 WL杂交品系抗病性分析
参照 2.5的评价方法,对抗-高抗的‘梨橙 2号
和中抗的‘晚蜜 2号为亲本的部分杂交后代进行
抗病性评价,发现其杂交后代出现了感病、中抗、
抗病、高抗 4种不同反应,抗病性出现了分离现象
(表2)。
3 讨 论
对四大类柑橘种质进行感病性分析发现,宽皮
柑橘中‘兴义大红袍’、‘硬芦’、‘福橘’、‘春见’、‘大
果南丰’和’温州‘前期发病迅速,后期病斑扩展较
快,表现出高度感病。‘茶枝柑’、‘汉源黄果柑’、‘克
里曼丁’、‘日南 1号’、‘金诺橘 01’、‘金诺橘’等 6
个品种发病轻微,相对抗病。与 Peever等 [14]和Reis
表2 WL杂交品系对柑橘褐斑病菌HJX菌株的抗病性反应
Table 2 Resistance response of WL hybrids to A. alternata HJX
聚类分析图
Resistance
clustering tree
品种Variety
WL-83
WL-89
WL-60
WL-81
WL-8
WL-69
WL-7
WL-46
WL-32
WL-43
WL-11
WL-17
WL-61
WL-4
WL-47
WL-2
WL-90
WL-24
WL-5
WL-75
WL-3
WL-29
WL-44
病斑平均直径
Mean lesion
/mm
5.6
5.8
5.8
5.9
6.3
6.3
7.2
7.7
7.8
8.6
9.0
9.1
11.3
12.3
12.3
11.4
11.5
11.6
12.9
13.1
13.8
17.8
18.1
病情指数
Disease index
/%
14.29
17.86
14.29
14.29
28.00
14.29
34.29
14.29
14.29
22.86
25.00
28.57
33.33
42.86
40.00
26.98
42.86
42.86
46.67
42.86
40.26
45.24
42.86
抗病性反应 Resistance response
聚类分析
clustering tree
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
感病 Susceptible
AD法
AD methods
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
感病 Susceptible
病情指数
Disease index
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
高抗Highly resistant
中抗Moderately resistant
高抗Highly resistant
高抗Highly resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
抗病 Resistant
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
中抗Moderately resistant
中抗Moderately resistant
感病 Susceptible
中抗Moderately resistant
678
4期
等 [16]研究结果一致,W·默科特抗病。本研究中接种
重庆万州红橘分离菌株时‘克里曼丁’表现为抗病,
与Hutton等 [23],Kohmoto等 [17] 和 Solel等 [13]接种澳大
利亚、佛罗里达和以色列菌株时表现一致,但在温州
上表现出高度感病,与Reis等[16]和Kohmoto等[17]结果
不同。甜橙类种质除‘红江橙’发病明显外,其余病
斑较小。‘华盛顿脐橙’表现出抗病,与Kohmoto等[17]
接种佛罗里达菌株时结果一致,但是与 Solel[13]调查
结果不同。所有研究中柠檬发病均不明显,表现出
抗病性。‘火焰’葡萄柚和‘汤普森’葡萄柚表现出轻
微感病,其他柚类品种均抗病,与Solel等[13]人工接种
葡萄柚结果一致。Peever等[18]研究了全世界褐斑病
菌的亲缘性,揭示了不同地理起源的菌株具有不同
的致病力,这有利于解释本研究中出现的品种相同
但抗病性不同的现象。由于国内外柑橘品种存在较
大差异,关于品种抗褐斑病的研究可供借鉴的内容
较少,本研究中评价的品种的抗感性将为后续研究
提供参考。
综合 3种评价方法‘胡柚’、‘强德勒柚’、‘华盛
顿脐橙’、‘梁平柚’4个品种为高抗品种,‘兴义大红
袍’、‘大果南丰’为高感品种,在柑橘褐斑病高发地
区应尽可能避免种植高感及感病品种,优先考虑高
抗和抗病品种。
本试验采用室内人工接种方法进行柑橘品种抗
褐斑病菌评价,该方法操作性强,接菌量控制严格,
条件便于控制,数据容易采集,有利于提高抗性评价
的可靠性和准确性。本研究首次采用系统聚类和平
均直经分析柑橘品种对褐斑病菌的抗性,其结果与
病情指数评价结果大部分相同。聚类分析结果显示
测试品种中高抗、高感品种个数均衡,部分感病品种
与文献报道的相一致,因此抗性等级划分可优先选
用聚类分析法。平均直径法则是避免偶然因素、减
少误差采用的最普遍的数据统计方法,是病情指数
分析和系统聚类分析的基础,评价品种抗性较直观、
便捷。在室内人工接种条件下,可以直观地比较种
质资源的抗病性,加快抗病资源的筛选速度。
以抗病的‘梨橙 2号’和感病的‘晚蜜 2号’为亲
本,杂交后代出现了感病、抗病、中抗、高抗4种不同
类型杂交种,杂交后代的抗病性出现了分离,可以进
行QTL分析。由于反交后代WL系大部分未结果,
且未构建物理图谱,因此我们采用了‘梨橙 2号’×
‘晚蜜2号’及衍生的68个LW重组自交系的叶片进
行感病评价,应用已经构建的物理图谱寻找与病害
相关的染色体区段,为进一步开展柑橘抗病遗传规
律及分子育种研究奠定基础。(本文图版见封3)
参考文献 References:
[1] CANIHOS Y,PEEVER T L,TIMMER L W. Temperature,leaf
wetness,and isolate effects on infection of Minneola tangelo
leaves by Alternaria sp[J]. Plant Disease,1999,83(5): 429-433.
[2] CUENCA J,ALEZA P,VICENT A. Genetically based location
from triploid populations and gene ontology of a 3.3-Mb genome
region linked to alternaria brown spot resistance in citrus reveal
clusters of resistance genes[J]. Plos One,2013,8(10): 1-18.
[3] ZHANG Yujie,YANG Xuwang,ZHANG Zhixin,LI Hongchao,
TIAN Hong,ZHANG Tie. Isolation of citrus black patch pathogen
and comparison of the sensitivities to eleven kind fungicides[J].
Northern Horticulture,2010(14): 169-171.
张玉洁,杨续旺,张志信,李红超,田洪,张铁.柑橘褐斑病的
病原分离和药物筛选[J].北方园艺,2010(14): 169-171.
[4] CHEN Changsheng,HUANG Feng,CHENG Lan,FENG Chun⁃
gang,HUANG Taojiang,LI Hongye. Identification of the patho⁃
genic fungus causing brown spot on tangerine(Citrus reticulata
cv. Hongju)[J]. Acta Phytopathologica Sinica,2011,41(5): 449-
455.
陈昌胜,黄峰,程兰,冯春刚,黄涛江,李红叶.红橘褐斑病病
原鉴定[J].植物病理学报,2011,41(5): 449-455.
[5] HUANG Feng,ZHU Li,LI Hongye. Identification of the patho⁃
genic fungus causing brown spot on Citrus suavissima Hort[J].
Journal of Zhejiang Agricultural Sciences,2012(9): 1281-1282.
黄峰,朱丽,李红叶. 瓯柑褐斑病的病原鉴定[J]. 浙江农业科
学,2012(9): 1281-1282.
[6] LIU Hong,CHENG Lan,QING Li,WANG Dong,DUAN Yu
ping,WU Qiong. Isolation and identification of the pathogens for
brown spot diseases on wan zhou tangerine and screening for the
fungicides for their control[J]. Journal of Southwest University,
2011,33(12): 33-38.
刘弘,程兰,卿励,王东,段玉平,吴琼.重庆万州红橘褐斑类
病害病原菌的分离鉴定及抑菌药剂筛选[J]. 西南大学学报,
2011,33(12): 33-38.
[7] KOHMOTO K,SCHEFFER R P,WHITESIDE J O. Host-selec⁃
tive toxins from Alternaria citri[J]. Phytopatology,1979,69(6):
667-671.
[8] WANG N Y,YANG S,LIN C H,CHUNG K R. Gene inactiva⁃
tion in the citrus pathogenic fungus Alternaria alternata defect at
the ku70 locus associated with non- homologous end joining[J].
World J Microbiol Biotechnol,2011,27(8): 1817-1826.
[9] TIMMER L W,DARHOWER H M,ZITKO S E . Environmental
factors affecting the severity of Alternaria brown spot of citrus and
their potential use in timing fungicide applications[J]. Plant Dis⁃
ease,2000,84(6): 638-643.
[10] MARCELO CLARO DE SOUZA,EDUARDO SANCHES STU⁃
CHI,ANTONIO DE GOES. Evaluation of tangerine hybrid resis⁃
tance to Alternaria alternata[J]. Scientia Horticulturae,2009,
123: 1-4.
[11] VICENT A,ARMENGOl J,GARCÍA JIMÉNEZ J. Protectant ac⁃
tivity of reduced concentration copper sprays against Alternaria
胡军华,等:不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价 679
果 树 学 报 32卷
brown spot on‘fortune’mandarin fruit in Spain[J]. Crop Prot
2009,28: 1-6.
[12] Camilla de Andrade Pacheco,lvan Bortolato Martelli,Denis Au⁃
gusto Polydoro,Evandro Henrique Schinor,Rose Mary Pio,Ka⁃
tia Cristina Kupper,Fernando Alves de Azevedo. Resistance and
susceptibility of mandarins and their hybrids to Alternaria alterna⁃
ta[J]. Scientia Agricola,2012,69: 386-392.
[13] SOLEL Z,KIMCHI M. Susceptibility and resistance of citrus gen⁃
otypes to Alternaria alternata pv. citri[J]. Phytopathology,1997,
145: 389-391.
[14] PEEVER T L,OLSEN L,IBA′NIEZ A,TIMMER L W. Genetic
differentiation and host specificity among populations of Alternar⁃
ia spp. causing brown spot of grapefruit and tangerine grapefruit
hybrids in Florida[J]. Phytopathology,2000,90: 407-414.
[15] VICENT A,BADAL J,ASENSI M J,SANZ N,ARMENGPL J,
García- Jiménez J. Laboratory evaluation of citrus cultivars sus⁃
ceptibility and influence of fruit size on fortune mandarin to infec⁃
tion by Alternaria alternata pv. citri[J]. European Journal of Plant
Pathology,2004,110: 245-251.
[16] REIS R F,DE ALMEDIA T F,STUCHI E S. Susceptibility of cit⁃
rus species to Alternaria alternata,the causal agent of the Alter⁃
naria brown spot[J]. Scientia Horticulturae,2007,113: 336-342.
[17] KOHMOTO K,AKIMITSUK,OTANI H. Correlation of resis⁃
tance and susceptibility of citrus to Alternaria alternata with sensi⁃
tivity to host specific toxins[J]. Phytopathology,1991,81: 719-722.
[18] PEEVER T L,BANEZ A L,AKIMITSU K,TIMMER L W.World⁃
wide phylogeography of the citrus brownspot pathogen,Alternaria
alternata[J]. Phytopathology,2002,92: 794-802.
[19] LIU Rongping,HU Junhua,YAO Tingshan,WANG Xuelian,
ZUO Peipei,WANG Yanjie,LI Hongjun. Arapid laboratory eval⁃
uation method of citrus brown spot caused by Alternaria alternata
[J]. Journal of Fruit Science,2013,30(5): 889-892.
刘荣萍,胡军华,姚廷山,王雪莲,左佩佩,王延杰,李鸿筠. 柑
橘褐斑病室内快速评价方法的研究[J]. 果树学报,2013,30
(5): 889-892.
[20] JIANG Dong,GONG Guizhi. Descriptors and data standard for
Citrus(Citrus spp.)[M]. Beijing: China Agriculture Press,2006:
77-79.
江东,龚桂芝 . 柑橘种质资源描述规范和数据标准[M]. 北京:
中国农业出版社,2006: 77-79.
[21] LI Wenyang,ZHENG Chunyao,LI Chaoping,CAI Zhiying,LIN
Chunhua,HUANG Guixiu. Resistance identification of main rub⁃
ber cultivars and some rubber germplasm in china to colletotri⁃
chum acutatum in laboratory[J]. Tropical Agricultural Engineer⁃
ing,2009,33(5): 31-36.
李文杨,郑春耀,李超萍,蔡志英,林春花,黄贵修. 中国橡胶树
主栽品系和部分种质对尖孢炭疽病的室内抗性评价[J]. 热带
农业工程,2009,33(5): 31-36.
[22] CHEN Hongmei,LI Jinhua,CHAI Zhaoxiang. Resistance evalua⁃
tion of 35 potato varieties to the dominant pathogens of potato Fu⁃
sarium dry rot[J]. Acta Phytophylacica Sinica,2012,39(4):
308-314.
陈红梅,李金花,柴兆祥 . 35个马铃薯品种对镰刀菌干腐病优
势病原的抗性评价[J].植物保护学报,2012,39(4): 308-314.
[23] HUTTON D G,MAYERS P E. Brown spot of Murcott tangor
caused by Alternaria alternata in Queensland[J]. Australasian
Plant Pathology,1988,17: 69-73.
680
胡军华,等:不同柑橘属种质对柑橘褐斑病菌的抗性评价图版
(正文见672 — 680页)
HU Junhua, et al� Evaluation of Citrus germplasm resistance to Alternaria alternata Plates
e 參
% •
^•1

• •
• • _ •
图版说明
不同柑橘种质对柑橘褐斑病菌的抗性反应A.枸櫞柠檬类A1.维拉佛兰卡;A2.尤力克;A3.费诺;A4.费米耐
劳;A5.粗柠檬;B.宽皮橘类B1.兴义大红袍;B2.汉源黄果柑;B3.大果南丰;B4.茶枝柑;B5.不知火;C.柚类C1.
通贤柚;C2.汤姆逊葡萄柚;C3.火焰葡萄柚;C4.琯溪蜜柚;C5.胡柚;D.甜橙类D1.奉节晚脐;D2.刘金刚夏橙;
D3.华盛顿脐橙;D4.红肉暗柳橙;D5.佩拉甜橙
Explanation of plates
Resistance response of citrus varieties to A. alternate HJX A.Citrus limon(L.) Burm.f. Al.Villafranca; A2. Eureka;
A3. Fino; A4. Femminello; A5. Rough lemon; B. Citrus reticulata Blanco Bl. Xinyidahongpao; B2. Hanyuanhuangguo-
gan; B3. Daguonanfeng; B4. Chazhigan; B5. Shiranui; C. Citrus grandis (L.) Osbeck CI.Tongxianyou; C2.Thompson
grapefruit; C3. Flame grapefruit; C4. Guanximiyou ;C5. Huyou; D. Citrus sinensis (L.) Osbeck D1 • Fengjie 95-1 navel
orange; D2. LIujinggang Valencia; D3. Washington Navel Orange; D4. Pink flesh anliucheng; D5. Pera Sweet Orange
公开发行刊号:ISSN 1009-9980 国外代号:BM1107 国内邮发代号:36-93
CN41-1308/S 广告经营许可证=4101004000079
国内定价:20.00元