全 文 ：第 4卷　第 8期 环 境 工程 学报 Vol.4 , No.8
2 0 1 0 年 8月 ChineseJournalofEnvironmentalEngineering Aug.2 0 1 0
沼液培养小球藻生产油脂的研究
王　翠　李　环　韦　萍
(南京工业大学生物与制药工程学院 , 南京 210009)
摘　要　为了节约微藻生物柴油的生产成本 , 用沼液作为小球藻生长的培养基 , 可以得到微藻油脂 , 还可以净化沼液 ,
从而起到了防治环境污染的作用。研究小球藻在不同浓度沼液(25%、 50%、75%和 100%沼液浓度)中生长和油脂积累情
况 ,结果表明小球藻在各低浓度沼液(25%、50%沼液浓度)中能很好地生长 , 延滞期较短 , 而在高浓度沼液(75%、 100%沼
液浓度)中 , 延滞期较长 ,并且 50%浓度沼液培养的小球藻总油脂含量最高。因此选取 50%浓度沼液作为小球藻的基本培
养基 ,研究了在 50%浓度沼液中 ,小球藻在不同接种量 、光照强度 、光暗周期 、初始 pH条件下的生长和油脂积累情况。得
出最适小球藻生长和油脂积累的条件是接种 OD值 1.023左右 、光强 4 000 lx、光暗周期 20∶4、初始 pH值为 7.0。
关键词　沼液　小球藻　油脂
中图分类号　Q949.21　　文献标识码　A　　文章编号　1673-9108(2010)08-1753-06
StudyonmicrobialoilproductionwithChlorelaculturedinbiogasslurry
WangCui　LiHuan　WeiPing
(ColegeofLifeScienceandPharmaceuticalEngineering, NanjingUniversityofTechnology, Nanjing210009, China)
Abstract　Tosavethecostofmicroalgaebio-diesel, biogasslurrywasusedasChlorelagrowthmedium,
whichcouldabtainbio-dieselandpurifybiogasslury.Efectsofdiferentbiogasslurryconcentrations(25%,
50%, 75% and100%)oncelgrowthaswelaslipidaccumulationofChlorelawereinvestigated, andthere-
sultsshowedthatthelowconcentrationofthebiogasslurry(25%, 50%)wasbeterforChlorelatogrowthan
thehighconcentrationsofbiogasslury(75%, 100%)whichhadlongerlagphase.WhenChlorelawascul-
turedin50% concentrationofbiogasslurry, themaximumtotallipidyieldwasabtained, so50%concentration
ofbiogasslurywasselectedasthebasicmedium.Thentheefectsofinoculationdensity, lightintensity, light-
darkcycle, initialpHoncelgrowthandlipidaccumulationofChlorelawereinvestigatedandtheresultsshowed
thattheoptimumcultureconditionswereinoculationODvalueof1.023, lightof4 000 lx, light-darkcycleof
20∶4, andtheinitialpHvalueof7.0.
Keywords　biogasslury;Chlorela;microbialoil
基金 项 目:国 家 重 点 基 础 研 究 发 展 计 划 (973 计 划 )
(2009CB724702);南京工业大学学科基金资助
(39708010)
收稿日期:2009-08-04;修订日期:2009-10-12
作者简介:王翠(1982 ～ ),女 , 硕士研究生 ,主要从事微藻生物柴油
方向的研究。 E-mail:kaolacui@yahoo.com.cn
　　生物柴油是一种可替代化石柴油的绿色新能
源。通常采用动植物油脂来生产生物柴油 ,然而 ,以
动植物油脂为原料导致生物柴油生产成本过高(原
料成本占总成本的 75%左右),并且大量使用植物
油会引起食用油价格上涨 ,此外培育油料作物要占
用大量的耕地 。微藻是一类单细胞藻类 ,其具有细
胞增殖快 ,生产周期短 、不受季节和土地的限制 、所
需的培养基来源丰富 ,以及所产的油脂成分与植物
油类似等优点 ,因此 ,利用微藻开发油脂资源已日益
受到人们的青睐 ,微藻被认为是一种极具潜力的生
物柴油原料。小球藻作为常见藻种具有环境适应能
力强 、生长周期短 、生长快 、油脂含量高 ,并且其养殖
过程可以实现规模化培养等特点 ,被广泛用于生产
微藻生物柴油 。然而在微藻培养过程中 ,培养基成
本占其总成本的 60%,因此如何降低培养基成本是
降低微藻柴油生产成本的关键 [ 1 ～ 3] 。厌氧发酵池的
建立给我国村民生活带来了便利和清洁的生物质能
源 ,但是同时也产生了大量的厌氧发酵残留物沼液
和沼渣 ,只经过厌氧处理的沼液其中仍含有大量的
氮 、磷等营养成分 ,如直接排入水体易引起水体富营
养化 ,造成二次污染 。据了解 ,目前大中型沼气工程
多数修建在城镇或市郊 ,沼液就地消纳有一定难度 ,
环 境 工 程 学 报 第 4卷
若远距离输送 ,能耗大 ,成本高 ,建设单位难以承受。
因此 ,如何对沼液进行低成本深度处理 ,是沼气界亟
待解决的主要问题之一 [ 4, 5] 。藻类作为一种分布
广 、适应性强的自养生物很早就被人们用以处理污
水 ,净化环境[ 6 ～ 12] 。迄今为止 ,国内外在利用藻类
处理生活污水已经各种工业废水方面进行了大量的
研究 ,而直接利用沼液培养微藻生产微藻生物柴油
的研究鲜有报道。本实验目的是将沼气发酵的沼液
和小球藻培养有机结合起来 ,即以沼气发酵的废液
为培养基营养源培养小球藻 ,不但可以产生清洁的
可再生能源沼气和微藻生物柴油 ,还可以处理沼液
中含有的大量的氮 、磷 ,防治水环境污染 ,达到改善
环境 、增加经济 、社会和生态效益的目的 ,起到节能
减排的作用。
本文以小球藻作为生产藻种 ,利用沼液作为培
养基 ,通入空气以空气中的二氧化碳作为小球藻生
长的主要碳源 。研究了沼液浓度对小球藻生长和油
脂积累的影响 ,并考察了在不同光照强度 、光暗周
期 、pH条件下 ,对小球藻生长和油脂积累的影响。
1　材料与方法
1.1　材　料
1.1.1　沼液及预处理
实验中所用的培养基为南京工业大学沼气厌氧
发酵罐发酵后的废液———沼液。沼气发酵后的废液
经过沉降池 ,去除大量固体颗粒 ,再经过板框压滤机
过滤后 ,去除小的悬浮颗粒 ,储存在废液池中备用。
预处理后的沼液用自来水分别稀释至 25%、50%、
75%和 100%浓度 ,经高压蒸汽灭菌后使用 。测定
沼液中的总氮 TN含量 279.37 mg/L,总磷 TP含量
31.41 mg/L。
1.1.2　藻　种
本实验培养用的小球藻为普通小球藻 (Chlo-
relavulgaris),由暨南大学张成武教授提供 。
1.1.3　培养装置
实验中所采用的光生物反应器是自行设计 ,内
管径为 3cm,管长度为 55 cm,厚度为 0.3 cm,装液
量 300 mL的长玻璃管。经高压蒸汽灭菌后使用。
光源采用日光灯。
1.2　实验方法
1.2.1　培养方法
取新鲜活化的藻种接种到沼液培养基中 ,通入
空气 ,光照培养 。分批培养中每天取样测定 680 nm
下的 OD值的变化 。培养 14 d后收集藻液 250 mL,
10 000 r/min离心 、洗涤 ,再离心后收取的藻泥放在
烘箱中 60℃烘至恒重 ,称重 ,研磨得干藻粉。
1.2.2　生物量的测定
浊度法。取小球藻藻液 ,测定其在 680nm下的
光密度 OD680 nm以此衡量小球藻生长过程中的相对
生长量。
干重法。取一定量的小球藻藻液 , 10 000 r/min
离心 、洗涤 ,再离心后收取的藻泥放在烘箱中 60℃
烘至恒重 ,称重 。
1.2.3　氮磷含量的测定
总氮的测定采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光
度法 ,参照 GB11894-89。总磷的测定采用钼酸铵分
光光度法 ,参照 GB11893-89。
1.2.4　油脂的提取方法
称取 0.1g干藻粉 ,加入含有 10%二甲基亚砜
的甲醇溶液在 40 ～ 70℃水浴提取 30 min,然后吸去
上清 ,下层的藻泥中加入乙醚和正己烷(1∶1, v/v)
提取 1 h。按照上述步骤反复提取直至藻粉完全变
白 ,合并各步上清 ,使得上清液中甲醇∶乙醚∶正己
烷∶水的体积比为 1∶1∶1∶1 ,放入分液漏斗中静置分
层 ,吸取上层 ,氮气吹干 ,剩余为油脂[ 13] 。
2　结果与讨论
2.1　不同浓度沼液中小球藻的生长及油脂积累
将浓度为 25%、50%、75%和 100%的沼液作为
小球藻生长的全营养培养基 ,用盐酸调节各浓度沼
液培养基初始 pH为 7.0, 初始接种量相同 。培养
14 d后 ,小球藻在各浓度沼液中生长情况见图 1。
从图 1(a)中可以看到培养初期 25%浓度沼液
中小球藻生长最快 , 50%浓度沼液其次 , 延滞期较
短;75%、100%沼液浓度培养的小球藻均要经过一
段较长的延滞期。小球藻在高浓度沼液中生长的延
滞期较长 ,这可能与沼液本身具有一定浊度有关 ,
75%和 100%浓度沼液浊度较高 ,光透过率低 ,导致
小球藻的光合利用率低 ,所以延滞期较长。培养一
段时间后 , 25%浓度沼液中氮磷营养元素最少最先
耗尽 ,导致小球藻生长缓慢 ,最先进入稳定期;50%
浓度沼液中氮磷等营养元素含量较丰富 ,在培养第
8d后生长的 OD值超过 25%浓度的沼液;75%和
100%浓度沼液虽然营养元素相对充足 ,但是延滞期
太长至培养结束还未进入到稳定期。
从图 1(b)中可以看到 ,小球藻的生物量 (干
1754
第 8期 王　翠等:沼液培养小球藻生产油脂的研究
重)与图 1(a)中的生长规律相一致 , 50%浓度沼液
的 OD680最高 ,所以其生物量也最多为 2.242 g/L。
各浓度沼液培养的小球藻油脂积累情况则表现为 ,
25%浓度沼液中最高 ,占干重的 28.3%, 50%其次
为 25.1%, 75%为 18.1%, 100%沼液中最低为
17.4%。这与小球藻油脂的积累情况有关 ,当培养
基中氮源耗尽 ,表现为氮限制时 ,小球藻的代谢向着
油脂积累的方向进行。而低浓度沼液中的氮源最先
耗尽 , 小球藻在氮限制的情况下进行油脂积
累[ 14, 15] ,所以 25%浓度沼液中小球藻油脂含量
最高 。
图 1　浓度沼液对小球藻生长和油脂含量的影响
Fig.1　Effectofbiogasslurryconcentrationon
growthandlipidcontentofChlorela
通过不同浓度沼液培养小球藻实验 ,发现实验
藻种小球藻的适应性很强 ,在 25% ～ 100%浓度沼
液中都能很好的生长 , 但是高浓度沼液中小球藻要
经过一段较长的延滞期 ,导致培养周期过长。综合
生物量和油脂积累情况 ,下面选取 50%浓度沼液作
为小球藻生长的全营养培养基 ,研究光照强度 、光暗
周期 、pH值对小球藻生长及油脂积累的影响 。
2.2　接种量对沼液培养小球藻生长及油脂积累的
影响
接种量的大小直接影响藻体的生物量和培养周
期 ,并且影响延滞期的长短。接种量太小 ,藻体延滞
期较长不利于藻细胞的快速繁殖 ,容易使藻体老化 ,
使培养周期延长;接种量太大 ,虽然可以缩短延滞
期 ,但藻细胞的过快生长 ,会使培养基中的代谢废物
过快积累并且导致培养后期营养供应不足 ,从而不
利于培养后期代谢产物的积累。
图 2　接种量对小球藻生长和油脂积累的影响
Fig.2　Effectofinoculationdensityon
growthandlipidcontentofChlorela
本文以接种后新鲜藻液在 680 nm处的吸光值
为标准来衡量接种密度 ,分别选取了初始 OD680为
0.501、1.023、1.56来进行研究 ,结果如图 2所示。
从图 2(a)中可以看到 ,接种量低的藻细胞生长情况
低于接种量高的 , 并且延滞期较长 ,所以接种初始
OD为 0.501的小球藻生长的 OD值最低 ,初始接种
OD为 1.023的小球藻开始 2 d生长速率低于初始
接种 OD为 1.56的小球藻 ,但是 2 d后其生长情况
相差不大 。从图 2(b)中得到 ,随着接种量的增大 ,
小球藻的生物量随之增多 ,然而油脂含量却随之减
少。这说明接种量大 ,小球藻细胞生长快 ,培养基中
营养过快消耗 ,代谢废物积累过快 ,虽然最终生物量
高 ,但是不利于油脂的积累。
2.3　光照强度对沼液培养小球藻生长及油脂积累
的影响
光照是影响藻类生长繁殖的最重要生态因子之
一 ,也是其生长的主要能量来源 。设置光照强度为
2 000、3 000、4 000和 5 000 lx共 4个梯度组 ,在每
1755
环 境 工 程 学 报 第 4卷
一光照强度下设置 2个平行 ,在室温 、光照周期 18∶6
的条件下进行通气培养 ,通入的气体为空气 ,通气时
间与光照时间相同为 18∶6。在不同光照强度条件
下 ,小球藻的生长情况及干重和油脂含量分别见图
3(a)和图 3(b)。
图 3　光照强度对小球藻生长和油脂含量的影响
Fig.3　Effectoflightintensityongrowth
andlipidcontentofChlorela
从图 3(a)中可以看到 ,随着光照强度的增强 ,
小球藻的生长越好 。光强为 5 000 lx照射下小球藻
在培养初期生长最快 ,但是到第 7 d后 ,小球藻的生
长开始变缓慢 ,至培养结束光强 5 000 lx条件下小
球藻的 OD680最低 ,而光强为 4 000 lx条件下培养的
小球藻 OD680在第 7 d开始超过 5 000 lx条件下培养
的小球藻 ,生长最好 。从图 3(b)中可以看到 ,在光
强 4 000lx条件下小球藻的生物量和油脂含量均为
最高分别为 30.3%和 2.622g/L。
在一定的光照范围内 ,藻的光合作用效率都会
随光照强度的增加而增加 ,但是当光照强度达到一
定值时 ,光合作用效率几乎保持在一定水平不再增
加 ,这种现象称为光饱和效应。如果光强超过光饱
和点一定限度后 ,藻的光合作用效率将会下降 ,导致
藻细胞生长缓慢甚至死亡 ,出现光抑制现象 。
2.4　光暗周期对小球藻生长和油脂积累的影响
光合作用由光反应和暗反应 2个阶段组成 ,当
光反应形成了大量中间产物 ,而暗反应速率已配合
不上光反应速率时 ,光合作用的整体速率将取决于
暗反应的速率 。在一定的光照强度下 ,光照时间是
影响光合作用的限制因素 。设置光照时间分别为
14、16、18、20、22和 24 h,考察在不同的光照时间条
件下小球藻的生长和油脂积累情况。
从图 4(a)中可以看到 ,在光照 20 h内 ,小球藻
的生长 OD值随着光照时间的增长而增加。当培养
光照时间超过 20 h后 ,小球藻生长的 OD值开始随
着光照时间的延长而下降。从图 4(b)中可以看到 ,
在光照 14 ～ 20 h之间小球藻的生物量和油脂含量
均随着光照时间的延长而增加;当光照时间超过
20 h后小球藻的生物量和油脂含量均下降 。说明在
光暗周期为 20∶4条件下最有利于小球藻生物量和
油脂的积累 ,当光照 20h时小球藻的油脂含量和生
物量分别为 33.3%和 2.658 g/L。因此在一定的光
照时间内 ,增加光照时间对小球藻的生长和油脂积
累均有利 。
光强和光暗实验也证实了光强 、光照时间对藻
的生长速率及油脂合成的影响 ,并非光强越强 、光照
时间越长就越有利于藻的生长和油脂积累 ,而是有
一个限度 ,超越这个限度藻的生长和油脂合成受到
抑制 ,这一结果与严美姣等[ 16] 、李荷芳等[ 17]的研究
一致 。
图 4　不同光暗循环对小球藻生长和油脂含量的影响
Fig.4　Efectofdiferentlight-darkcycleson
growthandlipidcontentofChlorela
1756
第 8期 王　翠等:沼液培养小球藻生产油脂的研究
2.5　不同 pH对小球藻生长及油脂积累的影响
培养基中的 pH值是影响藻类生长代谢等许多
生理过程的一个重要因子 ,它会影响光合作用中二
氧化碳的可用性 ,在呼吸作用中影响微藻对有机碳
源的利用效率 。同时由于 pH直接影响细胞膜的渗
透性 ,从而影响微藻细胞对培养基中离子的吸收和
利用 ,以及代谢产物的再利用和毒性 ,故 pH值是影
响藻类生长代谢的重要因子 。实验用稀盐酸将培养
基的初始 pH分别调为 6.0、6.5、7.0、7.5、8.0和
8.5,接种后每天取样测定藻的 OD值及 pH值。实
验结果见图 5。
从图 5(a)中可以看到 ,培养基初始 pH为 6.0
的小球藻直接进入对数生长期 ,初始生长速率最快 ,
但是培养到第 4 d后 ,小球藻的 OD值大幅下降 ,培
养基中颜色由绿色变为较澄清的黄色 ,小球藻大部
分死亡 ,镜检观察仍有少量的小球藻存活。到了第
11 d培养液的颜色逐步变绿 ,小球藻的生物量也开
始增加 ,但是很快又进入了停滞状态 。另外可以看
出 ,小球藻对生长环境的 pH要求较为宽松 ,在 6.5
～ 8.5的宽 pH范围内皆可良好生长 ,其中小球藻在
出始 pH为 6.5时生长最好 。培养过程中测定了培
养基 pH值的变化 ,发现初始 pH为 6.0的培养液在
第 4 dpH降到 4.8,培养液的酸化对小球藻产生了
毒害 ,导致其黄化死亡 ,此后经过 6 d的适应性驯化
后少量藻细胞存活下来并开始生长 ,到第 10 d时
pH回升为 5.5 ,并最终稳定在 5.5。初始 pH为 6.5
的培养液的 pH最终降到 6.0左右 ,其他不同初始
pH的培养液最终 pH降到 7.0左右并保持稳定。
从图 5(b)中得知 ,培养基初始 pH6.0时生物
量和油脂含量均最低 ,而 pH6.5的生物量最高 ,达
到 2.6935 g/L。从 pH6.5到 pH8.5藻细胞的生物
量呈下降趋势 ,而油脂含量则称上升趋势 ,油脂含量
分别为 33.2%、37%、39.3%、39.9%和 38.8%,这
表明弱碱性条件有利于油脂的积累这与 JamesB.
Guckert等 [ 18]研究的结果一致。
2.6　培养结束后沼液中氮磷的吸收情况
经过小球藻利用后 ,沼液中的氮磷含量大幅下
降 ,见表 1。小球藻对 25%、50%、75%和 100%沼液
中氮的利用率均达到了 90%以上 ,小球藻对各浓度
沼液中总磷的利用率均达到了 97%以上 。经小球
藻利用后的沼液中的最终总氮浓度小于 15 mg/L,
总磷浓度小于 1 mg/L,均已达到水污染物排放国家
一级标准的 B标准 。
图 5　不同初始 pH对小球藻的生长和油脂含量的影响
Fig.5　EffectofdiferentinitialpHongrowth
andlipidcontentofChlorela
表 1　不同浓度沼液中氮磷的去除
Table1　Removalofnitrogen, phosphatefrom
differentconcentrationsofbiogasslurry
沼液
浓度
(%)
初含
氮量
(mg/L)
终含
氮量
(mg/L)
除氮率
(%)
初含
磷量
(mg/L)
终含
磷量
(mg/L)
除磷率
(%)
总油脂
(g/L)
25 88.16 8.45 90.42 8.08 0.228 97.18 0.534
50 134.81 10.87 91.94 16.95 0.321 98.11 0.563
75 230.23 12.11 94.74 26.64 0.480 98.2 0.288
100 279.37 18.14 93.51 31.41 0.652 97.92 0.237
3　结　论
实验研究表明 ,小球藻在 25% ～ 100%浓度的
沼液中均能很好地生长 ,其中 50%浓度沼液培养基
培养小球藻得到的总油脂含量最高为 0.563g/L。
通过接种量 、光照强度 、光暗周期及初始 pH等
外部条件对小球藻生长和油脂积累的实验 ,小球藻
的生物量和油脂含量已经较初始培养时有了一定程
度的提高 , 50%浓度沼液中小球藻的生物量从最初
的 2.242 g/L提高到 2.694 g/L;油脂百分含量初始
为 25.1%,在 pH8.0的条件下油脂百分含量达到
1757
环 境 工 程 学 报 第 4卷
了 39.9%。结果同时也表明 ,小球藻了最适小球藻
生长的环境条件与最佳油脂积累的条件并不完全一
致 ,综合最适小球藻生物量和油脂积累的条件为:接
种 OD值 1.023左右 、光强 4 000 lx、光暗周期20∶4、
初始 pH为 7.0。
参 考 文 献
[ 1] 缪晓玲 ,吴庆余.微藻生物质可再生能源的开发利用.可
再生能源 , 2003, 21(3):13 ～ 17
[ 2] YusufChisti.Biodiesefrommicroalgae.BiotechnologyAd-
vances, 2007, 25(3):294 ～ 306
[ 3] 张薇 ,吴虹 , 宗敏华.蛋白核小球藻发酵产油脂的研究.
微生物学通报 , 2008, 35(6):855 ～ 860
[ 4] 张国治 ,姚爱莉 , 顾蕴璇 ,等.藻类对沼液中氮 、磷去除作
用的初步研究.中国沼气 , 1997, 15(4):11 ～ 15
[ 5] 黎良新 , 周丛钜.沼液分层综合利用技术.生态农业 ,
2007, 24(1):45 ～ 46
[ 6] SánchezS., MartínezM.E., EspejoM.T., etal.Mixotro-
phic culture ofChlorella pyrenoidosa with olive-mill
wastewaterasthenutrientmedium.J.Appl.Phycol.,
2001, 13(5):443 ～ 449
[ 7] BilyAguilar-May, MaríadelPilarSánchez-Saavedra.Growth
andremovalofnitrogenandphosphorusbyfree-livingand
chitosan-immobilizedcelsofthemarinecyanobacterium
Synechococcuselongates.J.Appl.Phycol., 2009, 21(3):
353 ～ 360
[ 8] Jin-YoungAn, Sang-JunSim, JinSukLee, etal.Hydrocar-
bonproductionfromsecondarilytreatedpiggerywastewater
bythegreenalgaBotryococcusbrauni.J.Appl.Phycol,
2003, 15(2 ～ 3):185 ～ 191
[ 9] YangCongfa, DingZhongyang, ZhangKechang.Growthof
Chlorellapyrenoidosainwastewaterfrom cassavaethanol
fermentation.WorldJ.Microbiol.Biotechnol., 2008, 24
(12):2919 ～ 2925
[ 10] ClementinaBarreraBernal, GabrielaVázquez, Icela
Barceló Quintal, etal.Microalgaldynamicsinbatchreac-
torsformunicipalwastewatertreatmentcontainingdairy
sewagewater.WaterAirSoilPolut., 2008, 190(1 ～ 4):
259 ～ 270
[ 11] CristinaGonzález, JudithMarciniak, SantiagoVilaverde, et
al.Microalgae-basedprocessesforthebiodegradationof
pretreatedpiggerywastewaters.Appl.Microbiol.Biotech-
nol., 2008, 80(5):891 ～ 898
[ 12] SanuelaLaconi, GiovanniMolle, AntonioCabiddu, etal.
Bioremediationofoliveoilmilwastewaterandproduction
ofmicrobialbiomass.Biodegradation, 2007, 18(5):559 ～
566
[ 13] ChiaraBigono, InnaKhozin-Goldberg, SammyBoussiba,
AvigadVonshak, ZviCohen.Lipidandfattycompositionof
thegreenoleaginousalgaParietochlorisincise, therichest
plantsourceofarachidonicacid.Phytochemistry, 2002, 60
(5):497 ～ 503
[ 14] 陈悦 , 姜峰主编.微藻生物技术.北京:中国轻工业出版
社 , 1999.225 ～ 226
[ 15] TakagiM., WatanabrK., YamaberiK., etal.Limited
feedingofpotassiumnitrateforintracelularlipidandtri-
glyceride accumulation ofNannochloris sp.UTEX
LB1999.Appl.Microbiol.Biotechnol., 2000, 54(1):112
～ 117
[ 16] 严美姣 , 王银东 ,胡贤江.光照对小球藻 、斜生栅藻生长
速率及叶绿素含量的影响.安徽农学通报 , 2007, 13
(23):27 ～ 29
[ 17] 李荷芳 , 周汉秋.光照强度对海洋微藻脂肪酸含量及脂
肪酸组成影响的研究.海洋科学集刊 , 2001, 43(10):
178 ～ 183
[ 18] JamesB.Guckert, KeithE.Cooksey.Triglycerideaccumu-
lationandfattyacidprofilechangesinChlorela(Chloro-
phyta)duringhighpH-inducedcelcycleinhibition.Jour-
nalofPhycology, 1990, 26(1):72 ～ 79
1758