作 者 : 吴玉娟
期 刊 :扬州大学 2007年 06期 页码: 59
关键词:小球藻;糖蛋白;绿色荧光蛋白(GFP);TK启动子;抗氧化反应元件(ARE);化学预防剂;
摘 要 : 本文在国内首次报道了从小球藻中提取的一种糖蛋白具有预防肿瘤作用。首先通过热水浸提、脱蛋白、醇析等步骤从小球藻中分离出一种糖蛋白,并对提取工艺中的料水比、温度、提取时间、提取次数等单因素进行优化以达到最佳提取效果。其次机体内的Ⅱ相酶在防治肿瘤发生过程中起着非常重要的作用,Ⅱ相酶基因启动区有一保守的DNA基序被称为抗氧化反应元件(ARE),可调控下游相关基因表达。据此原理,以TK为基本启动子,将人工合成的ARE与绿色荧光蛋白(GFP)基因相串联,构建ARE调控的报告载体pARE-TK- GFP/neo和对照载体pTK-GFP/neo。分别转染HepG2细胞用G418筛选出阳性克隆...