全 文 ：大理学院学报
JOURNAL OF DALI UNIVERSITY
第13卷 第2期 2014年2月
Vol.13 No.2 Feb.2014
［DOI］10. 3969 / j. issn. 1672-2345. 2014. 02. 015
随着肿瘤发病率的上升，肿瘤的预防和治疗一
直是国内外专家学者的重要课题。松塔，又称松塔
球，系松科（Pinaceae）松属（Pinus）植物红松、马尾
松、华山松、油松等的球果，可入药，具有很大的开
发潜力〔1〕。现代研究表明，松塔中还含有抑菌消炎、
抗病毒及抗肿瘤等作用的化学成分〔2〕。微核（micro⁃
nuclei，MN）是真核类生物细胞中的一种异常结构，
往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的〔3〕。
微核的形成与肿瘤的发生有一定的联系。微核是
恶变的先兆，在癌细胞和临床症状之前出现〔4〕。目
前，用于检测外源物质致突变效应的方法较多，本
文利用蚕豆根尖细胞对致癌物和抗癌物都很敏感
的特性，使用蚕豆微核试验来探讨松塔球提取物对
环磷酰胺诱发微核的影响，进一步研究松塔球提取
物的抑突变作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 蚕豆（Vicia faba L.） 大理市邓川镇和湾桥
蚕豆根尖微核试验研究云南松松塔球提取物抑突变性
林 牧 1，刘光明 3，蒋锡超 4，李云静 5，马志敏 2*
（1.大理学院基础医学院，云南大理 671000；2.大理学院农学与生物科学学院，云南大理 671003；3.大理
学院药学与化学学院，云南大理 671000；4.大理学院公共卫生学院，云南大理 671000；5.南华大学公共
卫生学院，湖南衡阳 421001）
［摘要］目的：探讨云南松松塔球提取物的抑突变作用。方法：分别将大理邓川和湾桥产的蚕豆随机分为4组，经实验处理后，
采用蚕豆根尖微核技术对蚕豆根尖细胞微核数进行检测，考察松塔球提取物对蚕豆根尖细胞微核率的影响情况。结果：松塔
球提取物 I对邓川产蚕豆根尖细胞微核的产生有抑制作用，抑制率达50%，且对环磷酰胺诱导的蚕豆根尖微核有明显的抑制作
用，抑制率为62.5%。松塔球提取物 I对湾桥产蚕豆根尖细胞微核的产生有抑制作用，抑制率达50%，且对环磷酰胺诱导的蚕
豆根尖细胞微核有明显的抑制作用，抑制率为50%。结论：松塔球提取物可有效抑制环磷酰胺诱导的蚕豆根尖微核的产生，具
有抑突变性，从而说明松塔球提取物对肿瘤的防治可能具有积极的作用。
［关键词］松塔球提取物；抑突变性；蚕豆根尖微核技术
［中图分类号］B849 ［文献标志码］A ［文章编号］1672-2345（2014）02-0055-03
Anti mutagenicity of Extracts of the Yunnan Pinecones by Vicia-Micronucleus Test
LIN Mu1, LIU Guangming3, JIANG Xichao4,LI Yunjing5, MA Zhimin2*
（1. Pre-clinical College, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China；2. College of Agriculture and Biology Science, Dali University,
Dali, Yunnan 671003, China；3. College of Pharmacy and Chemistry, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China；4. College of Public
Health, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China；5. School of Public Health, University of South China, Hengyang, Hunan
421001, China）
〔Abstract〕Objective: To investigate the anti- mutagenicity of the extracts of Yunnan pincones. Methods: Horsebeans from
Dengchuan village and Wanqiao village were divided into 4 groups randomly. After the pretreatment, vicia-micronucleus test was
applied to explore the anti- mutagenicity of the extracts of pinecones. Results: The extract I of Yunnan pinecone showed 50%
inhibition on the Dengchuan fava beans- induced micronucleus, 62.5% inhibition on cyclophosphamide- induced micronucleus and
50% inhibition on Wanqiao fava beans root-induced micronucleus. Conclusion: Yunnan pinecone extract effectively inhibited vicia-
micronucleus induced by cyclophosphamide solution and showed anti-mutagenicity. Thus the extracts of pinecones may have positive
effect on tumor prevention.
〔Key words〕pinecones extract; anti-mutagenicity; Vica-micronucleus test
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大理学院学报总第122期 医学
镇两地生产的蚕豆。
1.1.2 试剂 云南松（P. yunanensis Fr.）的松塔球碱
性提取物 I（黑色膏状物，含木脂素、二萜类等混合
物，由大理学院药学与化学学院刘光明教授提供），
经研磨后，称取 5 mg溶于 500 mL的 3%乙醇溶液
中，配制成1%的云南松提取物 I溶液，于4 ℃保存备
用。20 mg/mL环磷酰胺（CP）；5N HCl溶液；卡诺氏
液；Schiff试剂；SO2洗涤液。
1.1.3 仪器 电热恒温培养箱；显微镜；恒温水浴
箱等。
1.2 实验方法
1.2.1 分组 将蚕豆随机分成 4组：1组为阳性对
照组（环磷酰胺处理组），2组为阴性对照组（蒸馏水
处理组），3组为松塔球提取物 I处理组，4组为松塔
球提取物 I+CP处理组。
1.2.2 实验步骤 对蚕豆进行浸泡24 h，25 ℃温箱
内催芽20 h，在初生根长至2~3 mm时，选取发芽良好
的种子继续催芽40 h，至种子大部分初生根长至2~3
cm，选择根毛发育良好的种子进行给药处理。分别
在 1组中加入 10 mL的环磷酰胺、2组中加入 10 mL
的蒸馏水、3组中加入1%松塔球提取物 I液10 mL、4
组中加入1%的松塔球提取物 I液和20 mg/mL的环磷
酰胺各10 mL的混合液，各处理蚕豆根尖20 h。然后
按常规方法对处理过的蚕豆根尖细胞进行固定、染
色、制片、镜检。每组分别观察4个根尖，每个根尖观
察4 000个细胞，得出微核数，计算微核率（MCN‰）
和微核抑制率（IR%）。IR1%为云南松松塔球提取物
对蚕豆根尖微核产生抑制率，IR2%为云南松松塔球
提取物对CP诱发的蚕豆根尖微核产生抑制率。
MCN‰=（测试样品观察到的微核细胞数/测试
样品观察到的细胞数）×1000‰
IR1%=［（阴性对照组微核细胞数－提取物 I组
微核细胞数）/阴性对照组微核细胞数］×100%
IR2%=［（阳性对照组微核细胞数－提取物 I+CP
组微核细胞数）/阳性对照组微核细胞数］×100%
1.2.3 统 计 学 处 理 实验数据使用统计软件
SPSS16.0进行统计处理。
2 结果
云南松松塔球提取物 I对CP诱发的蚕豆根尖
微核率的影响。见表1。
由表 1可见，不论是邓川产蚕豆，还是湾桥产
蚕豆，环磷酰胺阳性对照组的微核率与阴性对照
组微核率比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。提
取物 I组和提取物 I+CP组分别与阴性对照组和阳
性对照组之间的微核率比较，差异具有统计学意
义（P<0.05）。松塔球提取物 I对邓川和湾桥产的
蚕豆根尖细胞微核的产生抑制率均为 50%，对 CP
诱导的两地产的蚕豆根尖细胞微核产生抑制率分
别为62.5%和50%。
3 讨论
松塔中含有萜类、木质素类、多糖等多种化学
成分，其中一些化学组分具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌
等重要生物活性，可以作为一种新型抗肿瘤药
物〔5〕。云南松松塔中含有某些抗HIV的活性成分，
这些成分的提取物可以研制成价格低廉的抗HIV
药物〔6〕；另外的成分如木质素、木质素-糖复合物、草
组别
阴性对照组
阳性对照组
提取物 I组
提取物 I+CP组
n
4
4
4
4
邓川镇蚕豆
观察细胞数
4 000
4 000
4 000
4 000
微核数
32±1.63
64±1.83*
16±2.12*
24±2.45**
微核抑制率/%
—
—
IR1=50
IR2=62.5
湾桥镇蚕豆
观察细胞数
4 000
4 000
4 000
4 000
微核数
28±1.15
60±3.37*
14±0.81*
30±2.94**
微核抑制率/%
—
—
IR1=50
IR2=50
表1 云南松松塔球提取物对CP诱发的蚕豆根尖微核率的影响
注：与阴性对照组比较*P<0.05；与阳性对照组比较**P<0.05。
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总第122期 第13卷林 牧，刘光明，蒋锡超，等 蚕豆根尖微核试验研究云南松松塔球提取物抑突变性
莽酸及黄酮等均可以作为一种新的资源加以开发
利用〔7-9〕；其碱性提取物D对肿瘤的防治可能具有积
极的作用〔10〕。张志琴等〔11〕通过对云南松松塔中活
性成分采用TLC及HPLC进行了定性、定量研究，建
立了松塔药材的质量控制标准，为制定松塔的质量
控制标准、开发新药提供参考。目前云南松松塔球
提取物制成高效的抗肿瘤药物制剂还在进一步研
究中。
本实验结果说明云南松松塔球提取物对环磷
酰胺诱发的蚕豆根尖细胞微核率有显著抑制作用，
提示云南松松塔球提取物可能具有抗肿瘤作用，但
尚需进行动物实验。
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［收稿日期］2013-09-26 ［修回日期］2013-12-19
［作者简介］林牧，硕士研究生，主要从事病毒感染与免疫研究.
*通信作者：马志敏，教授.
（责任编辑 毛本勇）
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