全 文 ：第 24 卷　第 5 期
2004 年 10 月
赣　南　医　学　院　学　报
JOURNAL OF GANNAN MEDICAL COLLEGE
Vol.24 NO.5
OCT.2004
野苋菜花粉变应原组分分析
谢水祥1 ,刘志春1 ,曾祥凤2 ,江丽芳3
(1.赣南医学院病原室 , 江西 赣州　341000;2.暨南大学;3.中山大学微生物教研室 ,广东 中山　528400)
摘　要:目的:分析野苋菜花粉变应原提取液的蛋白组分。方法:应用 SDS-PSGE 及薄层扫描。结果:发现其有四
条蛋白条带:64.2KD、占 34.3%;34.0KD、占 49.1%;20.6KD、占 6.0%;13.0KD、占 10.4%。结论:野苋菜花粉变
应原提取液以 34.0KD、64.2KD的蛋白为主。
关键词:野苋菜花粉变应原;SDS-PSGE
中图分类号:R966.1　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-5779(2004)05-0503-02
　　野苋菜花粉是一种重要的花粉变应原 ,为对野
苋菜花粉变应原进行纯化及标准化 ,现对其蛋白含
量进行了分析 ,报告如下 。
1　材料与方法
1.1　野苋菜花粉变应原提取　将去脂野苋菜花粉
按 1∶20比例加入 CACO S液(氯化钠 5g ,碳酸氢钠
2.75g ,结晶酚 4g ,加蒸馏水至 1000ml ,pH8.2),4℃
冰箱搅拌 72h ,静止 2h ,取上清液滤过除菌 ,分装备
用 ,浓度为 5%。
1.2　电泳
1.2.1　试剂及仪器 　丙烯酰胺 、Tris(pH8.8 、pH
6.8)、SDS 、过硫酸胺 、TEMED(Bio-RAD公司);预
染Marker(Bio -RAD 公司);电泳仪 Model-3000
(Bio-RAD公司);薄层扫描仪(Shimadzu)。
1.2.2　SDS-PAGE　按《分子克隆实验指南》(第
二版)方法[ 1] ,制备 5%积层胶及 15%分离胶 ,恒压
180V 、90 分钟电泳 ,考马斯亮兰染色 10 分钟 ,脱色
液脱色。
1.2.3　薄层扫描仪扫描分析
2　结果
2.1 　SDS -PAGE 结果 　可见四条蛋白条带:
64.2KD 、34.0KD 、20.6KD 、13.0KD(如图 1)。
2.2 　薄层扫描结果 　第一条带为 64.2KD 占
34.3%、第二条带 34.0KD 占 491%、第三条带
20.6KD占 6.0%、第四条带 13.0KD 占 10.4%(如
图 2)。
M:低分子量标准蛋白;1:野苋
图 1　野苋菜花粉变应原 SDS-PAGE 分析菜花粉提取液(5%)
3　讨论
野苋菜花粉是一种比较重要的过敏原 。中国气
传花粉调查发现全国各地都有分布[ 2] 。Lew is[ 3]等
在美国西部海岸(The Western Gulf Coast)发现 ,苋
藜科花粉占总的气传花粉的 14.8%,是该地区最为
主要的变应原来源 。Cosentino[ 4] 等在意大利的
Cagliari地区 ,Gonzslez-M inero[ 5] 等在西班牙西北
部的地中海地区都发现苋藜科花粉为重要的致敏花
粉之一 。在我们的调查中发现在南昌地区过敏性病
人中野苋菜花粉提取液的皮试阳性率达 56.6%。
故对其提取液成份进行分析具有重要的意义。可以
看出 ,在野苋菜花粉的提取液中 , 34KD及 64.2KD
的蛋白条带含量最多 ,占总量的 83.4%,极有可能
是致敏条带 。本文可为野苋菜花粉的进一步纯化及
标准化提供相关理论依据。
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作者简介:谢水祥(1969-), 男 ,讲师 , 硕士。研究方向:医学微生物学及变态反应学。
参考文献:
[ 1] 　J.萨姆布鲁克 , E.F.弗里奇 , T.曼尼阿蒂斯.分子克隆
实验指南[ M] .科学出版社 , 1992(第二版), 880 ～ 887.
[ 2] 　叶世泰 , 张金谈 ,熊玲玲.中国气传致敏花粉调查[ M] .
北京:北京科学出版社(1991).210.
[ 3] 　Lewis WH , Dixit AB , Wedner H.Aero-pollen of the
western United States Gulf coast[ J] .Ann Allergy , 1991;
67(1):47 ～ 52.
[ 4] 　Cosentino S , Pisano PL , Fadda ME , et al.Pollen and mold
allergy:areobiologic survey in the atmosphere of Cag liati;
Italy(1986-1988)[ J] .Ann Allergy , 1990;65(5):393 ～
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[ 5] 　Gonzalez-Miner ro F J , Morale J , Candan-P , etc.Aerobi-
ological study of cheaopodraceae and amaranthaceae in the
mediater ranean area of southwestern Spain[ J] .J Invest-
ing Allergol Clin Immunol , 1998;8(6):370 ～ 375.
(收稿日期:2004-07-25)
图 2　野苋菜花粉变应原 SDS-PAGE 薄层扫描结果
Protein Analysis of Extract From Amaranthus Pollen
XIE Shui-xiang , LIU Zhi-chuang , ZHENG Xiang-fong ,et al
Abstract:Objective:The aim of this study is to analyze the protein of ex tract from amaranthus pollen Methods:SDS-PAGE and
Dual Waveleng th Tic Scanner w as used.Results:Four protein bands is identified , including 64.2KD(34.3%), 34.0KD (49.1%),
20.6KD(6.0%), 13.0KD(10.4%).Conclusion:64.2KD and 34.0KD is the majer protein of extract from amaranthus pollen.
Key word:Amaranthus pollen;SDS-PAGE
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　　　　　　　　　　　　　　　　　赣 南 医 学 院 学 报　　　　　　　　　　　　　　2004年