全 文 ：第 24 卷　第 4 期 四 川 林 业 科 技　 Vol.24 , 　No.4
2003 年　　12 月 Journal of Sichuan Forestry Science and Technology　 Dec., 　2003
　
　
　
　
　　收稿日期:2002-12-20
　　基金项目:中国真菌志—地星科 、鸟巢菌科志编研 国家自然科学基金资助项目。
　　作者简介:付　惠(1959-),女 ,教授 ,从事化学与植物化学教学科研工作。
鸟巢菌对四种病原菌抑制作用的初步筛选
付　惠 ,陈玉惠 ,朱云峰 ,刘爱华 ,周彤焱木
(西南林学院 ,云南昆明　650224)
摘　要:从已分离纯化的鸟巢菌 200 多个菌株中 , 选用黑蛋巢菌属(Cyathus Hall.:pers.)18 种 、1 变种 、1 变
型 、2 未知种共 31 个菌株与 4 种常见的病原菌进行平板两点对峙培养。结果表明 , 供试鸟巢菌对 4 种病原菌
均有一定的抑制作用;其中的 Cyathus triplex 、 C.luxiensis 、 C.olla f.anglicus 、 C.olla 、 C.striatus 、 C.
af ricanus 、C.pallidus 、C.hookeri 抑菌作用较强。
关键词:抑菌作用筛选;鸟巢菌;病原菌;枯草杆菌
中图分类号:S763　　　文献标识码:A
文章编号:1003—5508(2003)04—0055—03
An Initial of Fungistasis of Bird s-nest Fungus
to Four Pathogenic Fungi
FU Hui　CHEN Yu-hui　ZHU Yun-feng　LIU Ai-hua　ZHOU Tong-xing
(Southw est Forest ry College , Kunming 650224 ,C hina)
Abstract:From over 200 isolated and purified bacterial st rains of bird s-nest fungus , 34 st rains be-
longing to 18 species ,1 variety ,1 modif ication and 2 unknown species of Cyathus Hall.:pers.and
4 commonplace pathogenic fungi were chosen fo r dual culture ,whose results have shown that the
tested bird s-nest fungi have some fungistasis to 4 pathogenic fungi , and Cyathus triplex 、C.lux-
iensis 、C.ol la f.angl icus 、C.olla 、C.striatus 、C.africanus 、C.pall idus 、C.hookeri have rela-
tively stronger fungistasis.
Key words:Screening of fungistasis ,Bird′s-nest fungus ,Pathogehic fungus , Baci llus sabt ill is
鸟巢菌隶属担子菌亚门腹菌纲鸟巢菌目 。我国鸟巢菌资源丰富 ,已报道的鸟巢菌有 3属 38种与变
种。国外研究证明鸟巢菌的次生代谢产物 —鸟巢菌素 ,具有抑制部分放线菌 、细菌和真菌生长的效
用[ 1 、8 、9] 。国内也报道过粪生黑蛋巢与隆纹黑蛋巢可入药治胃痛 ,对金色葡萄球菌有明显的抑制作
用[ 2 ,5] 。由于鸟巢菌是一类腐生菌 ,易于人工培养 ,对许多病原菌的抑菌作用显示了其在生物防治方面
广阔的应用前景 ,可为生防农药的合成和开发提供原料。鸟巢菌拮抗作用的系统研究国内以往未见报
道。本试验利用已收集到涵盖全国 80%左右省区的鸟巢菌标本 ,从已分离纯化保存的 200多个菌株
中 ,选用了黑蛋巢菌属(Cyathus Hall.:pers.)18种 、1变种 、1变型 、2未知种共 34个鸟巢菌株 ,以 4种病
原菌作为研究对象 ,以期从中筛选出具有较强的抑菌作用的鸟巢菌。
1　材料与方法
1.1　供试鸟巢菌菌株由西南林学院“中国真菌志鸟巢菌科志编研”课题组分离纯化所得 。
病原菌为三七根腐菌(Pseudomonas sp.)、枯草杆菌(Baci llus subti llis)、人参链格孢(Alternaria
panax)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxyporum),菌种由西南林学院病理实验室提供和云南农业大学病理
实验室赠给。
1.2　平皿拮抗作用
1.2.1　PDA培养基[ 2]
1.2.2　两点对峙培养[ 6 、1 、7] :用记号笔在 100 mm 直径的 PDA 平板背面标记两点 ,使其分布在同一直
径上各距培养皿边缘 10 mm处;分别切取 25℃恒温培养 7日龄 、菌块直径均为 5 mm 的鸟巢菌和病原
菌的菌丝块 ,接种于标记的两个点在 28℃恒温箱中培养 ,逐日观察记测 。上述处理均设 3个重复 ,并以
只接病原菌 、不接鸟巢菌的 PDA平板作对照。每日测量鸟巢菌菌落指向病原菌的半径 R鸟 和病原菌菌
落指向鸟巢菌的半径 R病 、对照半径 R0 。当两菌落相交后 ,观察并记载两菌落间相互抑制 、侵入和占领
对方营养空间的过程 。
抑菌率=对照培养病菌菌落半径-试验病菌菌落半径对照培养菌菌落半径 ×100%
2　结果与分析
2.1.1　鸟巢菌与尖孢镰刀菌 、人参链格孢 、三七根腐菌的抑菌作用　在鸟巢菌与尖孢镰刀菌 、人参链格
孢 、三七根腐菌的对峙培养过程中 ,开始时 ,鸟巢菌 、病原菌菌落生长正常 ,大约 6天后 ,鸟巢菌与病原菌
开始相交 ,到第 8天鸟巢菌包围或覆盖病原菌菌落 ,病原菌菌落的生长半径明显低于对照半径 ,并逐渐
萎缩 ,鸟巢菌菌丝进一步扩展侵入病菌菌落 ,最终病原菌菌落全部萎缩 ,鸟巢菌菌丝占据了整个平皿。
2.1.2　鸟巢菌与枯草杆菌抑菌作用　鸟巢菌与枯草杆菌的对峙培养中 ,鸟巢菌 、病原菌菌落生长正常。
从第 3天开始 ,病原菌生长减缓 ,大约 6天后 ,病原菌菌落逐渐萎缩 ,鸟巢菌菌丝扩展 、包围病原菌菌落 ,
在两菌相交处有明显的抑菌带 。
两点对峙培养的结果如表1所示 。在所供试的 34个黑蛋巢菌菌株中 ,18种 1变种 1变型对 4种病
原菌有较强的抑制作用。
表1 显示:18 种 1 变种 1 变型黑蛋巢菌对 4 种病原菌有不同程度的抑菌作用 。其中 Cyathus
triplex 、C.lux iensis 、C.ol la 、C.olla 、f.anglicus 、C.stercoreus 、C.africanus 、C.pallidus 、C.hookeri 等
7种 1变型的抑菌作用明显。 Cyathus triplex 对尖孢镰刀菌 、人参链格孢 、三七根腐菌 、枯草杆菌抑菌
率分别为 80.65%、53.49%、68.18%、42.86%;C.luxiensis 为 76.61%、31.40%、54.55%、28.57%;
C.ol la 为 69.68%、53.49%、69.91%、42.86%;C.olla f.anglicus 为 60.48%、36.05%、43.18%、
42.86%;C.stercoreus 为 57.26%、51.16%、18.18%、42.86%;C.africanus 为 51.61%、33.72%、
22.73%、25.71%;C.pall idus 为 55.16%、53.49%、 11.36%、 60.00%;C.hookeri 为 55.65%、
52.33%、54.55%、42.86%。
2.2　对 4种病原菌有明显的抑菌作用的 8种(变型)鸟巢菌 ,均属腐生真菌 ,易分离培养 ,因而在农作物
及林果致病菌的生物防治中具有开发利用前景。
2.3　Cyathus tianshangensis 和C.nigro-albus 对尖孢镰刀菌 、人参链格孢 、三七根腐菌抑制作用较强 ,
Cyathus tianshangensis抑菌率分别为 72.58%、40.70%、47.73%;C.nigro-albus为 62.10%、46.51%、
40.91%,但对枯草杆菌的抑菌作用较弱 , Cyathus t ianshangensis 抑菌率为 0.00%;C.nigro-albus 为
56　　 四　川　林　业　科　技 24 卷
22.86%。 Cyathus striatus 、C.griseocarpus 、C.stercoreus 、C.pallidus 、C.berkeleyanus等对三七根腐菌
抑制作用弱 ,说明一种鸟巢菌对不同病原菌的抑菌作用不相同 ,在生物防治应用中应选择使用 。
表 1 乌巢菌对 4 种病原菌的抑菌作用
病原菌
鸟巢菌 尖孢镰刀菌 人参链格孢 三七根腐菌 枯草杆菌
趋向
半径
(cm)
对照
半径
(cm)
抑菌率
(%)
趋向
半径
(cm)
对照
半径
(cm)
抑菌率
(%)
趋向
半径
(cm)
对照
半径
(cm)
抑菌率
(%)
趋向
半径
(cm)
对照
半径
(cm)
抑菌率
(%)
C.afr icanus 3.00 6.20 51.61 2.85 4.30 33.72 1.70 2.20 22.73 1.30 1.75 25.71
C.afr icanusvar.Lat i
porus 2.75 6.20 55.64 3.45 4.30 19.76 1.35 2.20 38.63 1.25 1.75 28.57
C.berkeleyanus 3.28 6.20 47.10 2.85 4.30 33.72 1.85 2.20 15.91 1.30 1.75 25.71
C.colensoi — — — 2.00 4.30 53.49 1.00 2.20 54.55 1.00 1.75 42.86
C.griseocarp us 2.65 6.20 57.26 2.85 4.30 33.72 1.90 2.20 13.63 1.20 1.75 31.43
C.hookeri 2.75 6.20 55.65 2.05 4.30 52.33 1.00 2.20 54.55 1.00 1.75 42.86
C.intermedius — — — 2.75 4.30 36.05 1.00 2.20 54.55 1.25 1.75 28.57
C.j iayug uanensis 2.70 6.20 56.45 2.00 4.30 53.49 — — — 1.00
C.luxiensis 1.45 6.20 76.61 2.95 4.30 31.40 1.00 2.20 54.55 1.25 1.75 28.57
C.nigro-albus 2.35 6.20 62.10 2.30 4.30 46.51 1.30 2.20 40.91 1.35 1.75 22.86
C.nireo-zeelan diae 3.00 6.20 51.61 2.30 4.30 46.51 1.05 2.20 52.27 1.10 1.75 37.14
C.olla 1.88 6.20 69.68 2.00 4.30 53.49 0.75 2.20 65.91 1.00 1.75 42.86
C.olla f.ang licus 2.45 6.20 60.48 2.75 4.30 36.05 1.25 2.20 43.18 1.00 1.75 42.86
C.pal lidus 2.78 6.20 55.16 2.00 4.30 53.49 1.95 2.20 11.36 1.15 1.75 60.00
C.poepp igii 2.78 6.20 55.16 2.80 4.30 34.88 — — — 1.20 1.75 31.43
C.stercoreus 2.65 6.20 57.26 2.10 4.30 51.16 1.80 2.20 18.18 1.00 1.75 42.86
C.str iatus 5.48 6.20 11.61 3.45 4.30 19.77 2.20 2.20 0 1.75 1.75 0
C.t ianshangensis 1.70 6.20 72.58 2.55 4.30 40.70 1.15 2.20 47.73 1.75 1.75 0
C.t rip lex 1.20 6.20 80.65 2.00 4.30 53.49 0.70 2.20 68.18 1.00 1.75 42.86
C.xinlongshanensis 5.20 6.20 16.13 4.00 4.30 6.98 1.80 2.20 18.18 1.40 1.75 20.00
　　注:—被污染者
2.4　不同的鸟巢菌对同一种病原菌的抑制作用强弱不同 ,种内 、种间都存在差异 ,但种间的差异大于种
内。有的黑蛋巢菌则对 4种供试病原菌的抑菌作用均较弱或没有抑菌作用 ,如 C.x inlongshanensis和
C.striatus 。
2.5　试验中观察到 ,鸟巢菌与病原菌相交后 ,对病原菌菌落有抑制 、侵入 、占领对方营养空间的过程。
对峙培养中抑菌带的出现 ,说明鸟巢菌在代谢过程中产生了某种抗生物质 。若能从鸟巢菌菌丝体中提
取纯化对病原菌有抑菌作用的抗生物质 ,有望进一步提高鸟巢菌的抑菌能力 。鸟巢菌对病原菌的拮抗
机理及抗生物质的研究还有待进一步探索。
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