全 文 ：第 四 卷
2《又 ) 1年 6 月
分析化学 ( F E瓦粗 H X UA UE )研究报告
h C i
~
」面n 司 J 儿回州l ca C掩而吕甸
第 6 期
仅抖 . 6良 i
超临界流体萃取 一硅胶柱收集联用
提取蓬获术中有效成分
陈淑莲 游 静 王 国俊 `
( 中国科学院兰州化学物理研究所 , 兰 州 73〕 I X) )
摘 要 采用超临界流体 Cq 萃取和硅胶柱收集在线联用 ,提取蓬我术中的挥发油 ,随后分别用正己
烷 、 乙醉和乙醚对硅胶柱进行选择性洗脱 ,从而使蓬狡术挥发油中有效成分获术二酮的相对含量由原来
单一萃取的 10 . 7 %提高到 34 . 7% 。
关健词 超临界流体萃取一硅胶柱收集联用 ,选择性洗脱 ,蓬获术
1 引 言
为了满足中药产品现代化要求 : 小量 、有效 ,必须提高有效成分的相对含量来增强药效 。 蓬羲术挥
发油中抗肿瘤的有效成分为羲术二酮 〔’ 〕 ,选择性提取羲术二酮提高其相对含量是减小剂量 、增强药效的
有效途径 。 近年来 , 国内外超临界流体技术的研究与应用正方兴未艾 , 超临界流体萃取 ( s u ep 比 irt c al
n in d ex lact it 二
,
SF E )也广泛应用于天然产物的萃取与分离 ,如香精香料 、食物成分 、 中草药化学成分及生
理活性物质的萃取分离 。 由于天然原料中含有多类化合物 ,非极性的 COZ 常会将某些不希望提取的成
分随目标组分一起萃取出来图 ,要用单一 的 S FE 方法对其中某些成分进行选择性萃取并非容易之举 。
所以 s FE 与其它分离技术的联用势在必行 .t3 ,1 。 本文采用 SFE与硅胶柱收集联用 ,利用硅胶柱的净化作
用 ,将荻术二酮的相对含量提高到原来的 3倍以上 。
2 实验部分
2
.
1 仪册与试剂
s几 仪阁 (中国科学院兰州化学物理研究所研制 ;) V a ir an 3粼刃 气相色谱仪 (美国 v如 an 公司 ) ;
H玛 39 5 型积分仪 (惠普公司 ) ; C仇 (纯度为 9 . 卯7% , 山东龙口侨丰化工厂 ) ;乙醇 、 乙醚 、正己烷均为分
析纯 (天津化学试剂二厂 ) ;蓬获术药品购自和平大药房 (重庆 ) 。
.2 2 硅胶柱的制备
在内径 0 . 8 c m 、长 20 c m 的玻璃管内湿法装人处理过的硅胶 , 硅胶柱长度为 巧 Cm , 两端用棉花堵
塞 。
2
.
3 5冈公硅胶柱收集
将购回的样品研细 , 过筛 ,称取 1 . 6 9样品放人萃取池中 ,在 20 . o Mr a 、 5 ℃ 、 0 . s mL 乙醇作改性剂条
件下萃取 , C q 用量为 12 . o mIJ ,动态萃取 40 而 n ,用硅胶柱收集或用乙醇收集 。 乙醇收集液定容至 1 . 0
rnL
,供分析用 。
2
.
4 硅胶柱的洗脱
将收集了溶质的硅胶柱依次用 1 . o mL 的正己烷 、 乙醚和乙醇洗脱 ,各洗脱液供分析用 。
2
.
5 气相色谱分析条件
23 m
x 0
.
32 ~ SE
一
54 石英毛细管柱 , 初温 印℃ , 以 or ℃ /而 n 的速率升至 10 ℃ , 再以 5℃ /而 n 升至
18 5℃ ,最后以 20 ℃ /而 n 升至 30 ℃ ;进样 口温度 280 ℃ ;进样量 1 . 0 匹 ;检测器 ( n D )温度 350 ℃ 。
五刃压0 7一 14 收稿 ;加印 . 1 1一 接受
第 6期 陈淑莲等 :超临界流体萃取一硅胶柱收集联用提取蓬我术中有效成分 65
3 结果与讨论
3
.
1 乙趁洗脱液和乙醉收集液的分离和测定
分析表明 , 正己烷洗脱液并未洗出任何组分 。
乙醚洗脱出含量较多的 4 种轻组分 (巧 、 16 、 17 、 18 号
峰 ) , 乙醇洗脱的棕黄色色带包括获术二酮在内的其
余多数组分 ,还有少数组分被硅胶柱不可逆吸附 ,不
被溶剂洗脱 。 乙醚洗脱液色谱图见图 1。 洗脱液及
乙醇收集液的定性和定量结果见表 1。 气相色谱 /质
谱定性结果由北京中日友好环境保护中心和中国进
出口商品检验技术研究所提供 ;定量方法采用 “ 相对
碳重量响应因子归一法 ” 呱 7〕 。
3
.
2 结束语
超临界流体萃取 ,通过硅胶柱收集 ,然后用溶剂
分别洗脱 ,可以将多种物质除去 ,使药理有效成分羲 下
z J 刀 J 以 u `份 . , 刁 ~ ” , ~ ” ’月一 ` “ , 一 ’ ~ 户 J ~ ’ 毋 ~ , ~ / J , 司 -J术二酮的相对含量由乙醇收集的 or . 7% 提高到硅 2()
胶柱收集的 34 . 7 % 。
图 1
iF g
.
1
el ue nt
l,t 卜, 51 ’ ! l t , 16
l 3
,`
0
.刃`厅口.
加
! 9
! 5
{只1. 1
乙醚洗脱液色谱图
叨 l e c l斌a)m t o罗 an 】 成 e lu a t e iw ht id et 甲 et her as
表 1 样品的定性定量结果
毛山】e l 为司 yt i司 心』t of e se int al io l fr阅 I c二~ p h a概 a司 i s v al e t o n 相对含量
R e】at i v e 二 ten t (% )
峰号
B , k oN
.
化合物
C“ 111双 l闭 乙醇收集液
T例叩 ign 诫 ht e ht an ol
硅胶柱收集
T alr ,
,
i n g 衍ht s i l ica 脚
仔旅烯 件R o en营烯 U n , 甘比们 e
按树脑 iC n即 le
樟脑 伪啊而 r
异龙脑 I即挂~ l龙脑 压肋翻
今甲基 4 乙烯基一【卜甲基乙烯基〕。卜〔 1。甲基乙
0
.
35 ( 2
. 肠 )
0
.
79 ( 4
.
23 )
0
.
24 ( 5
.
54 )
1
.
2 1 ( 1
.
36 )
0
.
46 ( 3
. 印 )
0
.
16 ( 3
.
74 )
乙醚洗脱液
E lu at e 袱ht
id d hlr
e ht er
0
.
4() ( 3
.
5 8 )
N
.
D
N
.
D
N
.
D
N
.
D
N
.
D
乙醇洗脱液
lE u a te 诚 ht
het 由诵
N
,
D
0
.
48 ( 2
.
84 )
N
.
D
l
,
47 ( 3
.
3 1 )
0
.
7 6 ( 1
.
7 5 )
N
.
D
l,ó飞à4弓ùǐO
基 〕环 己烯
n州h yl d ll o l尹 舟het
. 外4 m d hyl 3 0 . 19 ( 4 . 67 ) N . D N . D
榄香烯 曰
~卜甲基一2 ,本二〔1。甲基乙烯基 ]一卜乙基环己烷
N
.
D N
.
D N
.
D
9 Ccrl 月-1e x an 今 1一 d腼-rl 1
t遥曰 . y l」, 15一 [ l , a , 2 ,日, 4 :卿“ , 4一ibs[ ’ 一` , 98 ( 1 . 62 ) 3 . 98 ( 1 . 5 2 ) N . D
异石竹烯 I, 心叮 (袖刃en e
a一香柠檬烯 Q 一浅粤川减即 e
Q一石竹烯 。 一。 叮哪角 y lo e
-Q金合欢烯 Q . F一吉马烯 D C滋~ , e D甲基 一卜仁l , 5 一二 甲基本己 烯基 ]苯 .k ” , e , 卜
,
5
一击溉山刃丰hex 恻 I] 本 n犯dl y l
2
一甲基 一5一〔1 , 5一二 甲基斗己烯基 〕一1 , 3一环己二烯
1
.
3
一
Ccyj oh 咫ad ien e , 5一【l , 5一 id me ht 尹斗hxe eny l] 一2 -
印旧 ty l · s 一 Lr , s J
1
一甲基斗〔5一甲基 一 1一亚甲基 4 己烯 基 ]环 己烯
cy 油 e笋e , e , 】. n祀 ht y l书一【5门祀 dl y】小。 ylt en e 4 -阮义即 y】」一 [ , ]
0
.
39 ( 2
.
63 )
0
.
29 ( 2
.
98 )
0
.
2 1 ( 3
.
3 1 )
0
.
65 ( 2
.
85 )
0
.
07 ( 2
.
0 )
23
.
18 ( 4
.的 )
0
.
75 ( 1
.
4 8 )
N
.
D
0
.
7 1( 3
.
95 )
4
.
5 7 ( 4
.
97 )
N
.
D
27
.
4 3 ( 3
.
29 )
N
.
D
N
.
D
N
.
D
N D
N
.
D
N
.
D
10二12345
l 6 10
.
5 1 ( 0
.
36 ) 2 8
.
24 ( 5
.
1 1 ) N
.
D
l 7 4
.
27 ( 4
.
7 3 ) 7
.
0 ( 4
.
50 ) N
.
D
肠6 分 析 化 学 第 器 卷
续表 l (, it n仪月 T曲】e l )
相对含量
Rd at ive c们 n t. r (% )
峰号只 . k oN ,
化合物
C口叫阵川司 乙醇收集液
硅胶柱收集
.伟卿 i” g 初ht , i lica 倒
1坷甲 i gn 汕 het ` 飞黑黯 飞黯黯
id d hlr d由e r e小助d
3
一亚甲墓 一7 , “ 一二甲基十二一1 , 6 , 1压三烯 1 , 6 , 1压庆曦朋州 , , 7 , 11一山 n姆ht 尹一 3」仪油 1~
a 一金合欢烯 , F山” 巴曰阴
吉马烯 B C七~ c咖 e B裁术酮 C~ 朋 e
l (
一乙酸基按叶 4 ( 15 ) , 7 ( 1 1 )一二烯一8 , 12 一交酷 l ( -
^ C et o甲泪~ 礴 ( 15 )
,
7 ( 1 1 )
一
d i。 一a8 , 12一ol ide
巴豆酸肉桂酷 iC , am尹 it砂aet
3
,
7
,
1 1
一三 甲基一2 , 6 , 10一十二三烯 一 l一醇 2 , 6 , I压
众应朋州 , 小 Ol , 3 , 7 , 11一示吮 t卜y l
17
.
27 ( 3 二 54 )
0
.
14 ( 1
.
28 )
1
.
27 ( 5
.
13 )
3
.
84 ( 3
.
6 1 )
1
.肠 ( 1 .兑 )
1
.
0 ( 3
.
% )
7
.
89 (0
.
84 )
25
.
0 ( 4
.
32 )
N
.
D
1
.仍 ( 2 . 79 )
N
.
D
N
.
D
N
,
D
N
。
D
N
.
D
N
.
D
N
.
D
,
.
26 ( 2
.
34 )
5
.
2一( 5
.
9 1 )
3
.泥 ( 5 . 75 )
1 1
.
43 ( 1
.
37 )
,
7
一二甲基 一 1压【1一甲基亚 乙基 ] 一3 , 7一环十二二烯
, 小 . e , 3 , 7一d in犯ht 尹一 l压 [ 一 0 . 42 ( 6 .盯 ) N . D 2 .仍 ( 4 . 3 3 )
1奋飞ú
198加2345
羲术二酮 uC 心二
长叶烯醛 b 扣ig d 。妞 ld e h州e
V el le闹
10
.
67 ( 3
.
54 )
3
.
0 1( 3
.
83 )
N
.
D
N
.
D
N
.
D
N
.
D
34
.
67 ( 4
.解)
9
.
50 ( 2
.
29 )
N
.
D
2环 己 基 苯 氧 基一-2 丙 醇 -2 R , 脚 ol , ( -2
c v e】山e划】曲e n以 y ) 0
.
93 ( 2
.
89 ) N
.
D 1 98 《5 . 93 )
丁基 , 2 一甲基丙基一 1 , 2一苯二甲酸醋 l , 2一 (价 n洲 e
id 以日沁材 l诬e 画d )bu yt l , 2 一耐hy l p找 p y l ge t er
3
,
7
,
11
一三甲基一 l , 6 , 1乐十二三烯一3一醇 x , 6 , 1-0【狱laeC 州价 3 一Ol , 3 , 7 , 1 1一示 n l et h y l
邻苯二甲酸二丁醋 肠加 tyl 户闹 ate土荆芥素 人n山舰 i n
4
.
4 ( 5
.
10 ) N
.
D 15
.
67 ( 3
.
23 )
0
.
36 ( 2
.
42 )
0
.
58 ( 1
.
6 2 )
0
.
34 ( 2
.
39 )
N
.
D
N
.
D
N
.
D
1
`
25 ( 1
.
1 1 )
2
.沙 ( 1 . 47 )
0
.
98 ( 1
.
47 )
267893031
N
.
D :未检出 ( n伏 d d eC t曰 )
R州re m 侧茂写
I R
~
h g旧几l p of p陀 v e int on adn
c二 of ~
in Iv ds 城禅回 ofr g ” 健兄 J呵侧 成t面cs( 旅大市妇产科医院肿瘤防治研究小组 ) . 伪~ 月沙八业肠~ ( 中草药通讯 )
,
1叨2 , 2 ( l ) : 1 5 一 28
2 Che
n
aB
o il agn (陈宝良 ) , H朋 iJ nyu (韩金玉 )
. 。 翻初以 知适以尽 & E i l召i~ 咭肠鳍心
,
(化工进展 ) , 1臾” , 2 : 10 ~ 14
3 Maer
n t i
s R T
.
in C I口几祀 n t ie : B A 曰 . 5娜陀心泛d对月碑心 E江阳以勿 n 山以以御曰峋卯叩丙了. w as 场n多o n : A CS , 】贝如 : 1刀
4 cM h
u
gh M A
, 枪公。苗s V J . 及尹m心必吐乃喇 艺过力 , 吮如凡 : 服配申如 《即以 尸由以说 . B阅 ton : B t lt e附hrt , 1贝拓
5 山 w e 15阮飞 (林伟生 ) , w an g G t loj un (王国俊 ) , uY W e ile( 俞惟乐 ) . ch i~ J , A耐 。公栩 , ( 分析化学) , 1望巧 , 23 : 765 -
7的
6 H t洲唱 Y e n l (黄业茹 ) , Ou 场 n肥 (欧庆瑜 ) . Aan 如必以 乃” 扔“ 阳叮法吐沁n( 分析仪器 ) , 1卯1 , ( l) : 59 一 62
7 uH
a gn y
e ru
,
Ou 华刊岁 t l , uY we ile . A耐 以柳 二 】望月 , 62 : 2肠3 一 2肠 5
E次tar e it on of cA it v e C O训卯u n d in C u rL ’c u . al P h a 侧吠习ul i s V自l e ot n by
S u pe cr ir it cal R ul d E
x tar c t i o n a n d T ar P P ign 衬 t h S n ica eG l C o l u m n
c hen 51
1浦an , y b u iJ gn , w an g Guoj un `
乙功动洲 石” 翻她沈 of hC 翻该过 月砚” 如 , 以泛肥 e A。山呵 of 及泌~ , 几切动。 “ , 73( 刃以 )
A饭由 , tC 仆 e
esn
it al 01 1 Of e二aum 灿~ a u li s va le ont e an 玩 e翩 e tde 场 su 伴二 ir t ie al n u id Cq . 记 iif de 初 ht
e ht an o l
. 仆 e
~
可 of ac tive c o m op mt d , e u ld i o n e , e ou ld be im p or v ed hw e n s u伴二 ir ti e al if u id e xt 晓吮 it on iw ht
加p pi n g 饰 s i li e a sel e o l u mn was u以刃 叨 d ht en e l u t ed ht e an alyt e s iw ht h e x朋 e , e ht er an d e ht an o l
. 仆 e er l iat ve
~ eyr
of cu dr ion ie cn er ase d if
D n l or
.
7% ot 34
.
7%
.
为护阳找殆 uS ep 二 ir t ie al fl u id ex it 妞 c it on , s i l ie a ge l e ol umn
,
se lec t ive e lu tion
, e u o
uma
Ph
~ aul
is val
e咖
( R毗 i耐 14 ulJ y Z仪” ; 创 c甲司 2 N vo 娜阮 r 么冗。 )