全 文 ：·天然药物·
齐墩果酸的化学及药理研究
王立新1 , 韩广轩2 , 刘文庸3 , 张卫东3(1.深圳市药检所 , 深圳 518029;2.解放军第 534 医院 , 洛阳 471003;3.第二
军医大学药学院 , 上海 200433)
摘要:本文综述了国内近年来有关齐墩果酸的资源状况 、理化性质 、结构鉴定 、含量测定 、药理作用以及生产
工艺等方面的研究情况。
关键词:齐墩果酸;资源;化学;药理;生产工艺
中图分类号:R285.6 文献标识码:A 文章编号:1006-0111(2001)02-0104-04
齐墩果酸(oleanolic acid ,OA)是一种五环三萜类
化合物 ,广泛分布于自然界 ,如在青叶胆全草 、女贞
果实等植物中以游离形式存在或与糖结合成甙存
在 ,具有消炎 、增强免疫 、抑制血小板降集 、降糖等多
方面的临床药理作用 ,是治疗急性黄胆型肝炎和慢
性病毒性肝炎比较理想的药物 ,且毒性低副作用少 ,
近年来国内对OA作了进一步研究 ,现综述如下:
1 资源研究状况
OA在自然界分布十分广泛 ,据不完全统计 ,OA
以游离形式和与糖结合形式广泛于大约 60个科190
种植物[ 1] ,对调查了的 190种植物中 35种样品用薄
层扫描法测定了 OA的含量 ,分析结果表明以 木
根皮含量最高 ,达 8.3%, 35种植物样品中的 OA 含
量见下表。 木属(Aralia L.)隶属于五加科(Arali-
aceae),全世界有 30余种 ,其中我国有 30种[ 2] ,是提
取OA的重要原料 。
表 1 不同植物样品中齐墩果酸含量(%)
NO. 样品名称 含 量
1 木根皮 8.3
2 木果实 2.3
3 木叶片 1.2
4 木茎皮 3.5
5 木叶柄 0.14
6 木茎木质部 0.49
7 木根木质部 0.94
8 夏 枯 草 1.2
9 商 陆 0.031
10 木 瓜 0.095
11 关木通 0.24
12 人 参 0.44
13 西 洋 参 0.21
14 车 前 草 0.25
15 怀 牛 膝 0.73
16 连 翘 0.73
17 地 肤 子 0.038
18 槲 寄 生 0.40
19 山 楂 0.22
NO. 样品名称 含 量
20 山 茱 萸 0.18
21 威 灵 仙 0.038
22 柿 叶 0.22
23 柿 蒂 0.25
24 败 酱 0.16
25 夹 竹 桃 1.1
26 枇 杷 叶 0.68
27 枇杷叶幼芽 0.50
28 小叶女贞子 0.84
29 女 贞 子 0.70
30 青 叶 胆 0.31
31 石 见 穿 0.36
32 刺 老 鸦 0.94
33 红 木根皮 1.0
34 红 木茎皮 0.24
35 红 根木质部 0.10
2 理化性质和结构鉴定
OA(C30H48O3)为齐墩果酸烷型五环三萜类化合
物 ,化学名为(3β)-3-Hydroxyolean-12-en-28-
oic acid。为白色结晶性粉末 ,无臭 ,无味 ,不溶于水 ,
可溶于乙醇 、氯仿 、丙酮 。熔点310℃,比旋度[α] 12D +
79.5°(氯仿中)。
运用紫外光谱 、红外光谱 、质谱 、核磁共振谱等
技术深入地进行了 OA的含量测定 ,确定 OA的结构
如下:
OA的紫外光谱在 207nm处的微弱吸收 ,说明有
一个孤立双键 。红外光谱根据区域 A(1355 ～
104 The Journal of Pharmaceutical Practice Vol.19 2001 No.2
1392cm-1)和区域 B(1245 ～ 1330cm-1)的碳氢吸收
来区别骨架类型 ,齐墩果酸在 A区有两个峰 ,B区有
三个峰 ,而其异构体乌苏酸(ursolic acid)在 A区和 B
区各有三个峰 ,以此可区分两者 。1HNMR谱在 δ0.
88 ～ 1.12处有7个属于角甲基的单峰 ,δ3.7处为 3α
-H 和δ5.22处为 Cn-H 。
OA 属于不饱和三萜化合物 , 因此反 Diels -
Alder(RDA)裂解体是普遍存在的。其中碎片(a)是
齐墩果酸的特征碎片 , m/ z 248为基峰 ,其余强峰是
a ,b失去取代基形成的离子 。
13
CNMR可以解决OA的结构类型 、取代基位置及
构型等问题。齐墩果酸具有八个角甲基分别取代在
C4 ,C10 ,C8 , C14 ,C17和 C20六个季碳上 ,六个季碳化学
位移在 30 ～ 40ppm 范围 ,如果角甲基被含氧基团取
代 ,相连的季碳信号产生相应的位移。13CNMR亦可
以作为区别齐墩果酸和乌苏酸的工具。齐墩果酸:δ
(C12)122.1 , δ(C13)143.4;乌苏酸δ(C12)125.5 , δ
(C13)138.0。
齐墩果酸的结构确定为以后的临床应用 ,生产 ,
药品质量控制等方面提供了科学依据。
3 药理与临床
3.1 护肝降酶作用
在实验研究中发现 ,齐墩果酸可使变性坏死的
肝组织恢复正常来减轻丙氨酸(ALT)活力下降 ,肝
组织炎症反应减弱 ,血中丙种球蛋白下降 ,并能促进
肝细胞再生 ,使坏死区迅速修复 ,从而抑制发胶原纤
维增生 , 使肝硬变难以形成[ 3] 。通过给大鼠注射
CCl4造成实验性肝损伤 ,再用齐墩果酸予以治疗的
实验发现经OA治疗后的CCl4 中毒大鼠血清中 GPT
明显下降 ,肝内甘油三酯蓄积明显减少 ,组织学及组
织化学显示肝细胞变性 、坏死明显减轻 ,而且糖原蓄
积增加 ,胞浆内 RNA 颗粒恢复 ,电镜下观察线粒体
肿胀 ,粗面内质网囊泡化基本恢复正常 ,表明 OA 能
对CCl4 引起的急慢性肝炎损伤有明显保护作用 ,能
防止实验性肝硬化的发生。由 CCl4 的作用机制推
测齐墩果酸对损伤肝细胞的治疗作用可能在于保护
和稳定肝细胞膜及细胞器的生物膜系统 ,使其变动
通透及主动运输功能恢复正常 ,细胞内外离子和水
的移动及分布亦随之复原 ,于是胞质疏松及气球样
变的肝细胞转化为正常 ,再生能力相继恢复 ,促进肝
小叶中央区坏死肝细胞修复[ 4] 。
3.2 对免疫系统及变态反应的影响
动物实验表明OA能不同程度地除去肿瘤患者
TS 细胞在混合淋巴细胞培养中对正常人淋巴细胞
增值的抑制作用 ,同时可明显增强正常小鼠巨噬细
胞功能及T 淋巴细胞活性 ,但对体液免疫功能影响
不显著 ,对免疫小鼠抗原结合细胞也无明显影响[ 5] 。
这些作用与肾上腺皮质激素的药理作用相似 ,却没
有皮质激素的毒副作用 。
另据报道 ,OA对前列腺素及环核苷酸亦有明显
作用 。前列腺素 、环核苷酸和组胺参与人体大量细
胞活动 ,是炎症 、免疫 、过敏 、血凝以及生殖等病理和
生理过程重要的介质和调控因子 ,而 OA 对前列腺
素合成具有明显促进作用 ,同时它能够刺激 CAMP
水平的上升 ,对 CGMP 和组胺的释放有明显的抑制
作用 ,即证明了OA具有免疫抑制作用 ,这与其治疗
肝炎 、风湿性关节炎及其它自身免疫亢进的临床作
用一致[ 6] 。
由于病毒性肝炎的发病机理与变态反应有密切
关系 ,因此观察 OA对实验性变态反应的影响对探
索其治疗肝炎的机理有积极的意义 。OA 对抗可的
松所致的胸腺 、脾脏萎缩 ,升高抗体 IgG的含量对溶
血素抗体无明显影响 ,减慢网状内皮系统对炭粒的
廓清速率;降低豚鼠血清补体总量;抑制大小鼠同时
被动皮肤过敏反应及大鼠颅骨骨膜肥大细胞颗粒 ,
降低组胺所致大鼠皮肤毛细血管通透性增高 ,表明
OA抑制 I型变态反应[ 7] 。OA 50 ,100mg/kg sc显著
抑制大鼠反向皮肤过敏反应和反向被动 Arthus反
应;OA 100mg/kg 明显减轻豚鼠 Forssman 皮肤血管
炎及大鼠主动 Arthus 反应;OA 显著抑制 SRBC 或
DNCB所致小鼠迟发型超敏反应;这些结果说明 OA
对 II 、III、IV型变态反应具有明显抑制作用[ 8] 。
3.3 降血脂作用
OA对正常大鼠的血脂无明显影响 ,而对实验性
高血脂症大鼠和实验性高血脂症兔有明显的血脂降
低作用 ,可以极显著的降低血清胆固醇和甘油三酯
的含量 ,并能减少脂质在家兔主要脏器的沉积。另
据报道 ,OA可降低正常小鼠的血糖 ,明显对抗由肾
上腺素引起的小鼠血糖升高 ,OA 50 ,100mg/kg.day ,
7d ,使四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖显著降低 。另外 ,
OA还可对抗外源葡萄糖引起的小鼠血糖升高 ,与传
统降血脂药安妥明 、小檗碱的对照实验中 ,OA优于
小檗碱 ,与安妥明相似 ,但 OA毒副作用小 ,且能改
善肝功能。
3.4 抗血小板聚集作用
OA增加 30周龄小白鼠血小板电泳迁移速率 ,
加快了血小板细胞的流动性 ,减弱血小板间的碰撞
使之不易粘连和聚集 ,使不易在血管内膜沉积 ,从而
105药学实践杂志 2001 年第 19卷第 2 期
缓解或防止了血栓形成 ,又可降低脂质在内膜的沉
积 ,尤其是老年人血液粘度高 , 血小板流动速度缓
慢 ,血小板易聚集而诱发血栓形成 ,而 OA能提高老
龄小白鼠血小板的泳动速率 ,它将为改善老年人血
小板的流动性 ,降低血液粘度 ,防治老年人的血栓性
疾病和动脉粥样硬化提供部分实验依据 。
3.5 对染色体损伤的保护
OA 对环磷酰胺所致小鼠白细胞损伤有保护作
用 ,能明显抑制微核率升高[ 8] 。
3.6 毒性
动物实验证明 ,OA在剂量下未发现任何毒副作
用 ,大白鼠连续用药 50d ,尿中酮类固醇水平与对照
组无差异 ,OA急性中毒实验 ,测得小白鼠一次皮下
给药的 LD50为 340mg/kg ,大白鼠分别 po 1g/kg 及 sc
500mg/kg ,未见中毒和死亡 ,亚急性毒性试验中 ,大
白鼠每日按180mg/kg 剂量连续 po 10d及 100mg/kg
连服 50d ,停药后镜检结果与对照组相似 , 心 、肝 、
脾 、肾 、肾上腺 、睾 、胃 、十二脂肠 、小肠 、子宫 、膀胱等
脏器未发现明显病变 。齐墩果酸片治疗急慢性肝炎
共418例 ,慢性肝炎大部分服药半年以上 ,期间个别
患者诉上腹部不适 ,少数患者剂量达 300mg/d时 ,胃
有灼热感及食欲减退 ,7 例女性患者出现痤疮样皮
疹 ,减量后即消失。
3.7 临床应用
3.7.1 用于急性病毒性肝炎的治疗 急性黄疸性
肝炎 280例患者中的 196 例用齐墩果酸片治疗 ,60
～ 90mg/d ,辅以Vit B ,Vit C ,84例用西药治疗作对照
组进行对比观察 ,治疗组总有效率为 94.4%, 治愈
率为 64.8%,比对照组高 ,具有非常显著性差异(t
=3.2 , P<0.01)[ 9] 。
3.7.2 用于慢性肝炎的治疗 对 222例病程在2a左
右 ,年龄在 20 ～ 45a 患者 ,用齐墩果酸片(po 150 ～
360mg/d , tid)治疗 ,兼服Vit B ,Vit C ,3mo 为1疗程 ,有
效率为 69.81%,说明对慢性肝炎有较好疗效[ 9] 。
3.7.3 肝硬化治疗 用青叶胆煎剂治疗 3例 ,用齐
墩果酸片治疗 1例 ,3例为代偿期 ,1例为失代偿期 ,
4例中 3例有效 ,表现为黄疸消退 、牙龈出血停止 、
撤除激素 、腹水者停用利尿剂 ,白/球比值复常 、白蛋
白上升 、球蛋白下降 、谷丙酶复常 、麝浊下降 ,蜘蛛痣
无效 ,似乎说明 OA对肝硬化有一定疗效[ 9] 。
3.7.4 免疫治疗恶性肿瘤病人的临床 II期研究
前瞻性双盲法临床研究 ,可评价有恶性肿瘤病人 28
例 ,po OA40mg , tid , 1mo 后测定吞噬细胞百分比由
54.1%提高到 67.42%。吞噬指数由 0.69 提高至
0.81 。迟发超敏反应 1：1000浓度转阳性率 52.6%
(10/19)。E-玫瑰花结实验在本组实验前后无显著
变化。同期服用安慰剂的 9例对照病人则无明显变
化 。治疗后OA对骨髓 、肝 、肾功能均无影响 。故可
作为比较理想的生物反应调节剂应用于临床 ,以促
进病人免疫功能[ 10] 。
4 生产工艺
目前应用于 OA 的含量测定方法很多 ,早期应
用的比色法 、中和法由于操作复杂 ,显色误差较大 ,
所以近年来已少应用 ,而薄层扫描法则应用广泛。
随着HPLC 和 SFC 的逐渐应用 ,因其更加简便快速
的操作及更高的准确度的优势 ,应是将来 OA 含量
测定的主要方法 ,尤其是SFC ,具有HPLC 、GC及TLC
所不能取代的某些优越性[ 11] 。
由于OA结构复杂 ,难以用合成法获得 ,所以目
前大多采用植物提取法进行 OA 的精品制作 ,生产
OA的原料主要有辽东 木 、青叶胆 、女贞子 、雪胆
等 。以前国内主要有 3种生产工艺:(1)醇提-酸水
解法 ,(2)醇提-酸碱反复处理法 ,(3)发酵-酸碱处
理法。笔者通过研究改进提取工艺方法的相关文献
报道[ 12 ～ 14] ,认为:原料经预发酵处理选择适当的酸
度及浓度 ,能显著提高 OA的收率 ,并能减少乙醇的
消耗 ,经济简便 。具体方法是:原料自然发酵 48h
后 ,加水煎煮后适当浓缩 ,加 10%H2SO4水解5h。
我国自 70年代开发 OA成为保肝药物后 ,有大
量论文 、综述对其资源调查 、药理活性 、临床研究等
进行研究 ,但对于药物动力学过程研究甚少 ,值得注
意的是 OA 的强疏水性(25℃时水中溶解度为
4.61μg/ml ,37℃时为 17.59μg/ml)影响了其在胃肠
道的溶出和吸收 ,导致生物利用度低 ,大大影响其疗
效 。为了提高OA的亲水性和水溶性 ,根据OA的结
构和性质特点 ,将 OA制成其钠盐 ,使溶解度增大 27
倍 。虽然制成钠盐后水溶液 pH值有所增大(pH 8.5
左右),但经制剂和消化液稀释后 ,不会对机体造成
刺激或伤害[ 15] 。另外 ,剂型改变也可以有效提高生
物利用度。沈阳药学院的孙淑英等[ 16]研制了OA的
滴丸剂 ,并对滴丸的处方 、冷却剂制备工艺 、药物的
溶出速度 、稳定性及药物在滴丸载体中存在的状态
等进行了实验研究 ,体外溶出实验采用转篮法 ,溶出
介质为 40%乙醇液 ,温度(37±0.5)℃,转篮转速为
100rpm ,实验结果表明 2h溶出量滴丸剂为片剂的 4
倍 ,溶出速度明显高于片剂 ,对湿 、热稳定性实验表
明滴丸剂对湿热稳定性较好 。
用固体分散片也可提高齐墩果酸片溶出速
106 The Journal of Pharmaceutical Practice Vol.19 2001 No.2
率[ 17] ,例如以 PEG-6000为载体 ,用熔融法将其制
成固体分散物并压制成片 ,比较了共熔物和齐墩果
酸片的溶解度和片子的溶出速率 ,结果表明共熔物
体的溶出速率比原OA有很大提高。溶解度也提高
到162.87μg/ml ,大大提高了OA的生物利用度 。
5 展望
OA作为抗肝炎药物已上市多年 ,并取得一致好
评 ,根据OA的促免疫作用 ,在抗 HIV方面的研究也
已开展起来 ,OA 对 AIDS 的防治可能有一定作用 。
OA的降糖作用优于传统药物小檗碱 ,而且副作用
小 ,相信OA在降血脂的领域内将占据一席之地 ,OA
的研究开发具有非常大的潜力 ,相信在不久的将来 ,
OA将在药学领域大放异彩。
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铁刀木化学成分的研究进展
吕泰省 , 易杨华 , 周大铮(第二军医大学药学院海洋药物研究中心 , 上海 200433)
摘要:本文综述了铁刀木的化学成分研究近况 ,并对从中分得主要成分的化学结构进行了综述 。
关键词:豆科;铁刀木;化学成分
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1006-0111(2001)02-0107-04
铁刀木(Cassia siamea Lam.)为豆科决明属植
物 ,分布于我国的广东 、海南 、广西 、云南 、台湾等地 。
印度 、缅甸 、泰国等也有广泛分布。民间常用其治疗
风湿性关节炎 、痞满腹涨 、肠胃病 、脚扭伤等。国外
学者曾对其化学成分进行了研究 ,并从不同部分中
分离得到了 30 多个化合物 。为了合理开发铁刀木
的药用资源 ,本文将铁刀木的化学成分研究情况综
述如下。
1 三萜类化合物
1964年从铁刀木的根皮中分离得到了羽扇豆醇(lu-
peol)(1),1966年从铁刀木的茎皮中分离得到桦木酮(be-
tulin)(2)、白桦酸(betulic acid)(3)以及羽扇烯酮[1](lu-
penone)(4);1977年 ,Varshney I.P.等从铁刀木的茎皮中分
得了齐墩果酸(oleanolic acid)(5);1986年[ 4]从铁刀木的叶
子中分离得到了 cycloart-23-ene-3β ,25-diol(6)和
friedelin(7),1992年从铁刀木的茎皮中分离得到 lip-20
(29)-en-1β ,3β-diol(8)。1994年从铁刀木的茎皮中分
离得到一个三萜皂苷[8](9)。
2 蒽醌类化合物
1964年从铁刀木的根皮中分得了大黄酚(chryso-
phanol)(10)和 cassiamin(11),从铁刀木的茎皮中分离得
到两个双蒽醌[1] ,分别为 cassianin(12)和 siameanin(13);
从铁刀木的根皮和茎皮分得了2个双蒽醌 ,分别为 cas-
siamin B(14)和 cassiamin C(15);1991年从铁刀木的根中
分得了一个芸香糖苷(16):1992年从铁刀木的树干心材
中分得了大黄素(emodin)(17)及一个新的双蒽醌[5]
(18);在 1993年从铁刀木的根中分得 2个蒽醌的吡喃
半乳糖苷[7](19)(20);1994年[8]从铁刀木的茎皮中分得
107药学实践杂志 2001 年第 19卷第 2 期