全 文 ：人工种植与野生三叶青冻干粉增强免疫功能的比较
王志俊
浙江省义乌市中医医院　浙江 义乌 ３２２０００
关键词　人工种植三叶青冻干粉　野生三叶青冻干粉　增强免疫　比较研究
　　三叶青为葡萄科植物三叶爬藤Ｔｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｈｅｍｓ－
ｌｅｙａｎｕｍ　Ｄｉｅｌｓ　ｅｔ　Ｇｉｌｇ的干燥块根。三叶青的抗肿瘤作用
已得到广泛认识，成为浙江新的道地药材之一，越来越
受到人们的重视。由于野生三叶青资源日渐稀少，目前
人工种植已经展开，对人工种植和野生三叶青中有效成
分 （总黄酮）比较研究亦取得一定的成果［１］，但有关人
工种植和野生三叶青的药理比较尚未进行研究，为此，
我们对人工种植和野生三叶青冻干粉增强免疫功能进行
了比较研究，现将结果报道如下。
１　实验动物
实验动物用昆明种小鼠，雌性，体重２０±２ｇ。检
测环境条件：温度９１～９３℃，相对湿度６０～６５％。
动物于试验前在动物房环境中适应３天。
２　样品处理
人工种植和野生三叶青冻干粉用蒸馏水配制成各
剂量１６６．６７ｍｇ／ｋｇ　Ｂｗ／ｄ，相当于人体临床用量的５
倍，混匀供试。
３　实验方法
小鼠血清溶血素测定 （血凝法）、腹腔巨噬细胞
吞噬鸡红细胞试验 （半体内法）、二硝基氟苯诱导小
鼠迟发型变态反应试验 （耳肿胀法）、ＮＫ细胞活性
（ＬＤＨ测定法）、胸腺指数、脾指数、抗体生成及Ｃｏ－
ｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的测定方法参见安云
庆主编 《医学免疫学》［２］。
４　实验结果
４．１　对小鼠血清溶血素影响：结果见表１。与阴性对
照组 （蒸馏水）比较，人工种植和野生三叶青冻干粉
均能提高小鼠血清溶血素抗体积数水平，差异均有显
著性 （ｑ检验，Ｐ＜０．０５）。
表１　对小鼠血清溶血素影响 （ｘ±ｓ）
组别 动物数 （只） 抗体积数值
阴性对照 （蒸馏水） １０　 ８１．３±２１．４
人工种植三叶青冻干粉 １０　 １３２．８±２３．３＊
野生三叶青冻干粉 １０　 １４０．７±２２．５＊
　　注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５。
４．２　对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响：结
果见表２。与阴性对照组 （蒸馏水）比较，人工种植
和野生三叶青冻干粉均能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬
鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数，差异均有显著性。
表２　对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 （ｘ±ｓ）
组别 动物数 （只）吞噬率 （％） 吞噬指数
阴性对照 （蒸馏水） １０　 １２．５±２．２　０．１９±０．０３
人工种植三叶青冻干粉 １０　 １６．４±２．１＊０．２７±０．０３＊
野生三叶青冻干粉 １０　 １７．１±２．３＊０．２８±０．０３＊
　　注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５。
４．３　对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应的影响：
结果见表３。人工种植和野生三叶青冻干粉二组小鼠
右耳重及肿胀度与阴性对照组 （蒸馏水）比较，差异
均有显著性。
表３　对二硝基氟苯诱导小鼠ＤＴＨ的影响 （ｘ±ｓ）
组别
动物数
（只）
耳重 （ｍｇ）
右　　　　　　　　　左
肿胀度
（ｍｇ）
阴性对照 （蒸馏水） １０　 ３５．３±４．４　 １５．５±２．１　 １８．６±４．１
人工种植三叶青冻干粉 １０　 ４０．８±４．３　 １５．８±２．１　 ２６．３±４．３＊
野生三叶青冻干粉 １０　 ４１．１±４．２＊ １５．７±２．２　 ２７．０±４．２＊
　　注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５。
４．４　对小鼠 ＮＫ细胞活性的影响：结果见表４。与
阴性对照组 （蒸馏水）比较，人工种植和野生三叶
青冻干粉均能提高小鼠 ＮＫ细胞活性，差异均有显
著性。
·２２９· 浙江中医杂志２０１２年１２月第４７卷第１２期
表４　对小鼠ＮＫ细胞活性的影响 （ｘ±ｓ）
组别 动物数 （只） ＮＫ细胞活性 （％）
阴性对照 （蒸馏水） １０　 ２８．８５±５．３８
人工种植三叶青冻干粉 １０　 ３７．２４±５．５７＊
野生三叶青冻干粉 １０　 ４０．３６±５．３４＊
　　注：与对照组比较，＊Ｐ＜０．０５。
４．５　对小鼠胸腺指数、脾指数的影响：结果见表５。
人工种植和野生三叶青冻干粉二组小鼠胸腺指数、脾
指数和阴性对照组 （蒸馏水）比较，差异均无显著性
（方差分析，Ｐ＞０．０５）。
表５　对小鼠脏器／体重比值的影响 （ｘ±ｓ）
组别 动物数 （只）胸腺指数 （％）脾指数 （％）
阴性对照 （蒸馏水） １０　 ０．２７±０．１５　０．６８±０．１２
人工种植三叶青冻干粉 １０　 ０．２８±０．１７　０．７０±０．１４
野生三叶青冻干粉 １０　 ０．２９±０．１３　０．７４±０．１３
４．６　对小鼠抗体生成的影响：结果见表６。人工种植
和野生三叶青冻干粉均能提高小鼠抗体生成，与阴性
对照组 （蒸馏水）比较，差异均有显著性。
表６　对小鼠抗体生成的影响 （ｘ±ｓ）
组别 动物数 （只）
溶血空斑数
（×１０３ 个／全脾）
阴性对照 （蒸馏水） １０　 １２．６±２．８７
人工种植三叶青冻干粉 １０　 １８．８±２．６２＊
野生三叶青冻干粉 １０　 ２２．４±２．７３＊
　　注：与对照组相比，＊Ｐ＜０．０５。
４．７　对 ＣｏｎＡ 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响：
结果见表７。人工种植和野生三叶青冻干粉二组ＣｏｎＡ
诱导的小鼠脾淋巴细胞转化和阴性对照组 （蒸馏水）
比较，差异均有显著性。
表７　对ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响 （ｘ±ｓ，ｎｍ）
组别 动物数 （只） 加ＣｏｎＡ的ＯＤ值 不加ＣｏｎＡ的ＯＤ值 差值
阴性对照 （蒸馏水） １０　 １．５５４±０．０３７　 １．４３０±０．０１７　 ０．０９６±０．０１２
人工种植三叶青冻干粉 １０　 １．７１４±０．０３６＊ １．５１２±０．０２１　 ０．２１２±０．０１４＊
野生三叶青冻干粉 １０　 １．７８１±０．０３７＊ １．４９８±０．０２１　 ０．２２３±０．０１８＊
　　注：与对照组相比，＊Ｐ＜０．０５。
５　讨论
三叶青，历代本草未见，仅在 《植物名实图考》
记载： “蔓生，茎如初生小竹，有节，一枝三叶，叶
长，有尖圆齿，疏纹，对叶生须，须就地生根，大如
麦冬”。 《植物名实图考》谓三叶青应 “取浆冲服”，
说明三叶青应用鲜品，但现在大都采用切片后烘烤干
燥，在烘烤过程因高温可使其中的有效物质流失或遭
到破坏，从而明显降低了药效。运用低温真空冷冻干
燥技术生产的三叶青冻干粉，可以最大限度地保存原
药的药效成份。现代药理研究已经表明，三叶青具有
良好的增强免疫功能和抗肿瘤作用。三叶青主要作用
于Ｔ淋巴细胞的活化、增殖、分化及效应细胞形成的
过程等，而对抗原特异性Ｔ细胞的效应过程及其以后
炎症过程影响较小［３］。三叶青提取物能明显提高小鼠
免疫功能和ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ指标［４］。由于三叶青野生
资源被狂采滥挖，现已濒临灭绝。因此，开展对人工
种植和野生三叶青的比较研究具有十分重要的意义。
本研究结果表明，人工种植和野生三叶青冻干粉均具
有增强免疫功能的作用，这为人工种植三叶青在临床
上的推广使用提供了依据。
６　参考文献
［１］吉庆勇，华金渭，程文亮，等．人工种植和野生三叶青中总黄
酮含量的比较［Ｊ］．浙江农业科学，２０１２（１）：３７－３８．
［２］安云庆．医学免疫学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００７．
［３］徐彩菊，丁钢强，孟佳，等．中药三叶青提取物抗肿瘤机制初
探［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００６，１６（１）：１４－１６．
［４］丁钢强，徐彩菊，孟佳，等．三叶青对小鼠细胞因子及免疫功
能影响研究［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００８，１８（９）：１７２４－１７２６．
收稿日期　２０１２－０９－０５
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·３２９·浙江中医杂志２０１２年１２月第４７卷第１２期