全 文 :参 考 文 献
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不同产地木瓜药材中齐墩果酸和熊果酸的比较研究
张 玲 ,谢晓梅 ,彭华胜* ,左艳红
(安徽中医学院药学院 /安徽省高校现代中药重点实验室 ,安徽 合肥 230031)
摘要 目的:为中药木瓜的品质评价提供依据。方法:运用 TLC法 、HPLC法 ,对安徽宣城 、湖北长阳 、重庆綦江
三大木瓜产区所产的贴梗海棠 、毛叶木瓜等 8个样品以及榠楂的齐墩果酸与熊果酸进行定性定量比较。结果:木
瓜属 3种植物果实中齐墩果酸与熊果酸总含量以贴梗海棠最高 ,平均值为 0.62%,其次为毛叶木瓜 ,而榠楂最低;3
类药材中 , 宣木瓜齐墩果酸与熊果酸总含量最高 , 资丘木瓜次之 ,而川木瓜最低。结论:本实验数据为宣木瓜 、资丘
木瓜与川木瓜间的质量评价提供了一定的参考依据。
关键词 贴梗海棠;毛叶木瓜;榠楂;齐墩果酸;熊果酸
中图分类号:R282.6 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2009)05-0673-04
收稿日期:2008-11-19基金项目:安徽省自然科学基金(070413126)作者简介:张玲(1975-),女 ,硕士 ,讲师 ,主要从事中药分析。*通讯作者:彭华胜 , Tel:0551-5165884, Fax:0551-5169044。
木瓜为常用中药 ,具有舒筋活络 、化湿和胃之功
效 。 2005年版中国药典规定木瓜为蔷薇科植物贴
梗海棠 Chaenomelesspeciosa(Sweet)Nakai的干燥近
成熟果实〔1〕。全国药用木瓜有安徽宣城 、重庆綦江
及湖北资丘 3大产区 ,所产木瓜分别习称为宣木瓜 、
川木瓜与资丘木瓜 ,其中以宣木瓜为地道药材 。宣
木瓜在长期栽培中分化出罗汉脐 、苹果型 、药木瓜 3
个农家品种 。果实按干燥后性状分为光皮木瓜和皱
皮木瓜 ,光皮木瓜来源于榠楂 ,皱皮木瓜来源于贴梗
海棠与毛叶木瓜 。木瓜主要含有有机酸 、皂苷 、挥发
油等化学成分〔2〕 ,其中有机酸多具有抗肿瘤 、抑菌 、
抗血栓 、抗艾滋病毒等生物活性 〔2, 3〕 ,齐墩果酸和熊
果酸是木瓜有机酸中的主要化学成分 〔4〕。本文采
用 TLC法 、HPLC法对不同产地木瓜类药材中的齐
墩果酸和熊果酸进行了定性定量分析 ,以期为木瓜
的品质评价提供依据 。
1 材料
不同木瓜样品的来源见表 1 ,样品均经安徽中
医学院药学院彭华胜副教授鉴定 。新鲜木瓜置沸水
中烫至外皮灰白色 ,对半纵剖 ,晒干 ,用粉碎机粉碎。
齐墩果酸和熊果酸对照品购自中国药品生物制
品检定所 (供含量测定用),批号分别为 110709-
200304和 110742-200516。所用试剂均为分析纯或
色谱纯。
2 方法
2.1 TLC鉴别 取木瓜样品粉末约 6 g,精密称
定 ,置 100 mL圆底烧瓶中 ,用三氯甲烷加热回流提
取 3次 ,每次 1 h,过滤 ,合并滤液 ,得澄清的提取液。
将过滤后的提取液置于 100mL烧瓶中 ,在沸腾的水
浴上常压蒸馏 ,回收三氯甲烷 ,将提取液浓缩至膏
状。用甲醇将膏状浓缩物溶解 ,并移至 10 mL量瓶
中 ,用甲醇定容至刻度 ,摇匀 ,得供试品溶液备用〔5〕。
·673·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 5期 2009年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.05.030
表 1 木瓜样品来源
样品名称 产地 植物名 采集时间
药木瓜 安徽宣城新田镇袁村 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-07
苹果型 安徽宣城新田镇袁村 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-07
罗汉脐 安徽宣城新田镇袁村 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-07
宣木瓜 安徽宣城新田镇 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-08
山东引种 安徽宣城新田镇赵村 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-07
贵州引种 安徽宣城新田镇赵村 毛叶木瓜 C.cathayensis(Hemsl.)Schneid 2007-08
川木瓜 重庆綦江县打通镇 毛叶木瓜 C.cathayensis(Hemsl.)Schneid 2007-07
资丘木瓜 湖北长阳县榔坪镇 贴梗海棠 C.speciosa(Sweet)Nakai 2007-07
光皮木瓜 安徽合肥 榠楂 C.sinensis(Thouin)Koehne 2007-09
取齐墩果酸对照品 ,加甲醇溶解配成 0.2 mg/
mL溶液。将供试品溶液 、对照品溶液分别用定量毛
细管点样于 0.5%CMC-Na硅胶 G薄层板上 ,点样量
为 10μL。用二次展开法展开 ,先用环己烷-丙酮 -乙
酸乙酯 -甲酸(5∶2∶0.5∶0.1)展开约 9 cm,取出 ,挥
干溶剂 ,再用环己烷 -丙酮 -乙酸乙酯-甲酸(7∶0.5∶
2∶0.1)展开约 17 cm,取出 ,挥干溶剂 。用 5%硫酸
乙醇液显色 ,加热至斑点清晰。
2.2 齐墩果酸 、熊果酸的含量测定
2.2.1 色谱条件:岛津 LC-20AB型高效液相色谱
仪 , SPD-M20A检测器 , LC-solution色谱工作站 。
KromasilC18色谱柱(4.6mm×250 mm, 5 μm);流动
相:甲醇-水 -磷酸(90∶10∶0.05);流速 0.6 mL/min;
柱温:25℃;检测波长 210nm,进样量 20μL。
2.2.2 标准曲线的制备:精密称定齐墩果酸对照
品 2.73 mg和熊果酸对照品 1.77 mg,甲醇定容于同
一 25mL量瓶中 ,每 1mL中含齐墩果酸 0.1 092mg
和熊果酸 0.0708 mg。精密吸取该液 0.25、 0.5、
1.0、1.5、2.0 mL,分别置 2 mL量瓶中 ,加甲醇至刻
度 ,摇匀。吸取上述溶液 , 20 μL进样 ,以浓度(μg/
mL)为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线。回
归方程为:齐墩果酸 A=37859+1.38297×107C, r=
0.9999,线性范围 0.27 ~ 2.18μg;熊果酸 A=35364+
1.38486×107C, r=0.9995,线性范围 0.18 ~ 1.42 μg。
2.2.3 供试品溶液的制备:取样品 1 g,精密称定 ,
置于 100mL具塞三角瓶中 ,加入甲醇 30 mL,称定
重量 ,超声处理 30 min,放冷 ,用甲醇补足减失的重
量 ,再加入甲醇 20 mL,摇匀 , 过滤 ,取续滤液 , 过
0.45 μm微孔滤膜 ,得供试品溶液。
2.2.4 精密度试验:以同一混合对照品溶液进样 ,
每次 20μL,重复进样 5次 。测得齐墩果酸峰面积
积分平均值 406478, RSD为 0.46%;熊果酸峰面积
积分平均值 271687 , RSD为 0.63%。表明仪器的精
密度良好 。
图 1 不同木瓜药材的 TLC图
a.不同产地的皱皮木瓜 b.宣木瓜的 3个农家品种 c.宣木瓜和光皮木瓜
资:资丘木瓜;川:川木瓜;宣:宣木瓜;山:山东引种;贵:贵州引种;药:药木瓜;罗:罗汉脐;苹:苹果型;光:光皮木瓜;对:齐墩果
酸对照品
·674· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 5期 2009年 5月
2.2.5 重复性试验:精密称定同一批药材 (宣木
瓜),按 “2.2.3”项下方法制备 5份供试品溶液 。结
果齐墩果酸平均含量为 0.29%, RSD为 2.0%;熊果
酸平均含量为 0.45%, RSD为 1.8%。方法的重复
性良好 。
2.2.6 加样回收率试验:取已知含量(齐墩果酸
0.29%、熊果酸 0.45%)的宣木瓜药材粉末 0.5 g,
精密加入对照品齐墩果酸 1.40 mg、熊果酸 2.25
mg,同 “2.2.3”项下方法制备供试品溶液 ,按上述色
谱条件测定 ,回收率分别为 98.7%和 98.0%, RSD
分别为 1.2%、1.4%(n=7)。
2.2.7 样品测定:取不同的供试品溶液各 20 μL,
分别进样 ,测定齐墩果酸 、熊果酸峰面积积分值 ,用
外标法计算含量 。
3 结果与分析
3.1 TLC比较 不同品种木瓜类药材的 TLC结果
见图 1。从图 1中可以看出:①皱皮木瓜与光皮木
瓜的主斑点数目明显不同 ,皱皮木瓜主斑点为 9个 ,
光皮木瓜主斑点为 7个;②皱皮木瓜中齐墩果酸的
斑点很浓 ,光皮木瓜中齐墩果酸的面积和颜色强度
都明显小于皱皮木瓜;③皱皮木瓜中含量较高的斑
点 7在光皮木瓜中不存在;④不同品种的皱皮木瓜
中斑点数目相同 ,仅强度不同。
3.2 齐墩果酸 、熊果酸含量比较 测定结果见图 2
和表 2。
图 2 齐墩果酸 、熊果酸对照品(A)与
木瓜样品(B)的 HPLC图
1.齐墩果酸 2.熊果酸
表 2 木瓜样品中齐墩果酸及熊果酸
的含量(g/g, 以干品计 , n=3)
样品名称 齐墩果酸含量 /% RSD/% 熊果酸含量 /% RSD/%
药木瓜 0.156 1.5 0.369 1.4
苹果型 0.302 0.8 0.427 0.8
罗汉脐 0.261 1.9 0.284 0.7
宣木瓜统货 0.287 2.0 0.454 1.8
山东引种 0.477 1.6 0.204 1.3
贵州引种 0.164 0.7 0.402 0.9
川木瓜 0.154 0.3 0.240 1.1
资丘木瓜 0.383 1.1 0.115 0.9
光皮木瓜 0.008 0.7 0.087 1.7
从表 2可以看出:①不同来源的皱皮木瓜中齐
墩果酸含量的平均值为 0.273%,是光皮木瓜中齐
墩果酸含量的 34倍 ,不同来源的皱皮木瓜中熊果酸
的平均值为 0.312%,是光皮木瓜中熊果酸含量的
3.6倍。 ②皱皮木瓜中 ,齐墩果酸和熊果酸的总含
量由高到低依次为:宣木瓜统货 >苹果型 >山东引
种木瓜 >贵州引种木瓜 >罗汉脐 >药木瓜 >资丘木
瓜 >川木瓜。 ③宣木瓜 3个农家品种药木瓜 、罗汉
脐 、苹果型中 ,齐墩果酸与熊果酸含量的比值分别
为:0.423∶1、0.919∶1和 0.707∶1,均小于 1。而从山
东引种的木瓜中齐墩果酸与熊果酸含量的比值为
2.34∶1。
4 讨论
齐墩果酸 、熊果酸为同分异构体 ,极性非常相
似 ,不易分离。实验过程中 ,选用了乙腈 -甲醇-水-乙
酸胺(70∶16∶14∶0.5)、甲醇-水-冰醋酸 (260∶40∶
0.5)、甲醇 -水 -冰醋酸 -三乙胺(260∶40∶0.15∶0.08)
等流动相 ,分离度均小于 1.5;采用甲醇 -水 -磷酸
(90∶10∶0.05)作为流动相 ,基线平稳 ,且两者的分
离度为 1.52,达到基线分离 。
以齐墩果酸 、熊果酸总含量为指标 ,对贴梗海棠
C.speciosa(Sweet)Nakai、毛叶木瓜 C.cathayensis
(Hemsl.)Schneid、榠楂 C.sinensis(Thouin)Koehne
果实的品质比较 ,以贴梗海棠果实中齐墩果酸与熊
果酸总含量最高 ,平均值为 0.62%,其次为毛叶木
瓜 ,平均值为 0.48%,而榠楂最低 ,仅为 0.09%。榠
楂入药始载于 《本草经集注》 ,至明代《本草纲目》将
榠楂与木瓜分条论述 , 《增订伪药条辨》中已明确视
榠楂为木瓜混伪品 。榠楂果实虽称为 “光皮木瓜 ”,
本文研究表明光皮木瓜与皱皮木瓜在齐墩果酸 、熊
果酸含量方面差异均悬殊 ,故其不宜于作木瓜类药
材流通。
·675·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 5期 2009年 5月
以齐墩果酸 、熊果酸的含量为指标 ,对宣木瓜 、
资丘木瓜与川木瓜的品质进行比较 ,其中宣木瓜齐
墩果酸与熊果酸总含量最高 ,资丘木瓜次之 ,而川木
瓜最低 。与 《增订伪药条辨 》〔6〕对 3大产区木瓜质
量评价一致 。在齐墩果酸与熊果酸含量比值方面 ,
宣木瓜与川木瓜的熊果酸含量均高于齐墩果酸 ,而
资丘木瓜则为齐墩果酸含量明显高于熊果酸。宣木
瓜经过长期栽培选育 ,已经分化出苹果型 、药木瓜与
罗汉脐 3个农家品种 〔7〕。 3个农家品种的熊果酸含
量均高于齐墩果酸 ,呈现一致性 ,两者总含量以苹果
型为高 。此外 ,自山东引种的果品加工型种质的宣
木瓜齐墩果酸含量明显高于熊果酸。
宣木瓜产区以 “小暑 ”前后采收作为药用 ,而
“大暑”前后作为食品加工 。本文分别于 2007年 7
月 4日(小暑)和 2007年 8月 23日(大暑)对宣木
瓜采样 ,研究结果表明大暑采收的统货中熊果酸含
量 、齐墩果酸与熊果酸总含量均高于小暑时 3个农
家品种的相应含量。表明随着木瓜果实在 7月上旬
至下旬中的进一步成熟 ,果实内熊果酸含量呈现明
显的增加趋势。提示木瓜果实的发育与有机酸成分
含量变化值得有关 ,进一步研究。
本文所建立的薄层色谱条件可以明显区别光皮
木瓜与皱皮木瓜。齐墩果酸的含量可以作为区别皱
皮木瓜与光皮木瓜的指标。
参 考 文 献
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收稿日期:2008-09-27作者简介:李丹平(1959-),男,副主任药师 ,在读博士生 ,研究方向:中药资源与质量研究;E-mail:lidanping1918@126.com。
鄂西土家族常用百合科植物药
李丹平1, 2 ,陈雨洁 3 ,万定荣 3 ,李敏伦 4
(1.华中农业大学食品科学学院 ,湖北 武汉 430070;2.湖北省食品药品监督管理局 ,湖北 武汉 430071;
3.中南民族大学药学院 ,湖北 武汉 430074;4.湖北中医学院生物医药工程学院 ,湖北 武汉 430065)
摘要 目的:调查掌握鄂西土家族常用百合科植物药的种类 、资源与民族医疗应用。 方法:采用走访民族医
生 、野外实地调查 、标本鉴定及资料整理等方法。结果:鄂西土家族常用的百合科植物药有 21种 ,来源于 39种植
物(含变种),其中狭瓣粉条儿菜 、卵叶韭 、大花万寿竹 、金佛山鹿药 、尖叶牛尾菜 、疏花开口箭等 6种植物作药用在
国内药物专著中未见记载。结论:本研究为上述百合科植物药资源的开发利用提供了实地调查研究资料。
关键词 鄂西;土家族;百合科;植物药
中图分类号:R281.4 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2009)05-0676-03
上世纪 80年代中后期 ,笔者曾在湖北省恩施土
家族苗族自治州及宜昌市的长阳 、五峰土家族自治
县共 8县 2市的范围内 ,组织 30余人次进行了为期
约 3年的民族医药调查 ,此期间广泛走访民族医生 ,
实地收集药用经验与单验方 ,采集凭证标本 。通过
对采集制作的数千份腊叶标本进行系统鉴定 ,掌握
了鄂西土家族常用的植物药种类 、资源及主要药用
经验 。以此次调查研究结果为基础 ,笔者又陆续开
展了更为深入的土家族药材资源 、鉴定等研究工作。
现对鄂西土家族常用的百合科植物药品种进行整理
研究及予以报道 ,以供深入研究和开发利用参考 。
1 品种及民族药用经验
1.1 肺经草 又称蛆儿草 、一窝蛆 ,为百合科植物
粉条儿菜 Aletrisspicata(Thunb.)Franch.、狭瓣粉条
·676· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 5期 2009年 5月