全 文 ：由表 6 可见，秋梨润肺含片及秋梨润肺膏均可显著抑制
由猪鬃机械刺激引起的豚鼠咳嗽反应，能降低咳嗽反应峰
值，并呈现出较好的量效关系(P < 0. 05-0. 001)。高剂量组
给药后 15 min即可降低咳嗽峰值，对咳嗽反射有显著抑制作
用，时间可持续 2 h以上。结果还表明，中低剂量组从给药后
30 min出现效应，咳嗽抑制作用也可持续 2 h 左右。阳性对
照药磷酸可待因组和秋梨润肺膏组给药后 15 min 均可降低
咳嗽峰值，其抑制作用维持在 2 h 以内。在抑制豚鼠咳嗽反
应作用的强度和持续时间上，秋梨润肺含片 4. 2 g /kg组略强
于秋梨润肺膏 16 g /kg组。结果显示秋梨润肺对猪鬃机械刺
激所致豚鼠咳嗽反射峰值均具有明显抑制作用，在作用的强
度和持续时间上，秋梨润肺含片 4. 2 g /kg组略强于秋梨润肺
膏 16 g /kg组。
3 讨论
秋梨润肺膏具有“润肺止咳，生津利咽”的功效，临床用
于阴虚肺热引起的咳嗽气短，痰少质腻，口燥咽干，喉痛声哑
等症。本文比较了将古方改成片剂后的部分药理工作，实验
结果表明，秋梨润肺含片高、中剂量均能显著地增加小鼠气
管酚红排量，并能显著地增加大鼠呼吸道痰液分泌量，以 4. 2
g /kg、2. 1 g /kg祛痰作用最强 P < 0. 001。在家兔离体气管纤
毛黏液流运动实验中，秋梨润肺含片能增加墨汁运行速率，
增加离体气管纤毛黏液流的运动，各组与正常对照组比较，P
< 0. 01。两次氨水引咳实验结果表明，高剂量组与中剂量组
口腔黏膜单次和多次给药，均能明显延长小鼠因氨水刺激引
发咳嗽的潜伏期并能减少咳嗽次数。另外在豚鼠机械刺激
的止咳试验中该药可显著抑制由猪鬃刺激引起的豚鼠咳嗽
反应，降低咳嗽反应峰值，并呈现出较好的量效关系 P <
0. 05 ～ 0. 001。含片高剂量组给药后 15 min即可降低咳嗽峰
值，对咳嗽反射有显著抑制作用，时间可持续 2 h以上。而中
低剂量组从给药后 30 min出现效应，咳嗽抑制作用也可持续
2 h。在抑制豚鼠咳嗽反应作用的强度和持续时间上，含片
4. 2 g /kg组作用较强。上述实验表明，秋梨润肺含片具有较
好的祛痰、止咳作用，说明秋梨润肺含片具有类似秋梨润肺
膏的祛痰、止咳功效，亦从药理上证实了该药的传统药用价
值。另外，我们通过研究发现，秋梨润肺含片尚具有一定的
抗炎、镇痛、抑菌作用，并且急性毒性试验显示，含片喂饲的
小鼠给药量相当于小鼠药效试验最大剂量的 40 倍，表明其
毒性较小，安全剂量范围较大。因此，秋梨润肺含片有望被
开发成一种制剂工艺比较简单、疗效确切、毒副作用小的祛
痰止咳中药新药。
参考文献:
［1］ 潘华新，梁瑞燕，曹柳英，等. 柚总黄酮祛痰、止咳作用研究
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［2］ 李仪奎.中药药理实验方法学［M］. 上海:上海科学技术出版
社，1991.
［3］ 徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.第 3 版. 北京:
人民卫生出版社，2002.
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免疫调节作用研究［J］. 中药杂志，2007，32(10):963-9650.
山楂中熊果酸和齐墩果酸的高效液相色谱分析
周巧霞1，2， 顾振纶2
(1.苏州九龙医院 药剂科，江苏 苏州 215021;2.苏州中药研究所，江苏 苏州 215007)
收稿日期:2009-06-15
作者简介:周巧霞(1977 －)，女，主管药师，药理学硕士，研究方向:心血管药理。
关键词:山楂;熊果酸;齐墩果酸;高效液相
摘要:目的:建立山楂提取物中熊果酸和齐墩果酸的反相高效液相色谱分析法。方法:固定相为 μBandapakTM C18柱，流动
相为 pH3. 5 的甲醇 /磷酸盐缓冲液(85 /15 含 0. 4%四丁基氢氧化铵)，波长 215 nm，流速 1. 0 mL /min。结果:熊果酸线性
范围为 0. 82 ～ 4. 1 μg(r = 0. 999 8);平均回收率为 98. 52%，RSD 1. 47%;齐墩果酸线性范围为 0. 80 ～ 4. 0 μg(r =
0. 999 9);平均回收率为 98. 13%，RSD 1. 61%。结论:该方法简便灵敏且分离效果较好，可以作为山楂中熊果酸和齐墩
果酸的质量控制方法。
中图分类号:R927. 11 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2010)05-0862-03
山楂为蔷薇科植物山楂 Crataegus pinnatifida Bge. 的干
燥果实，具有消食健胃.行气散瘀作用。用于肉食积滞，胃腕
胀满，瘀血经闭，高脂血症［1］。现代药理研究表明熊果酸和
齐墩果酸是山楂降血脂的主要活性成分，且含量较高［2］。熊
果酸和齐墩果酸为一对异构体，含量测定多采用高效液相色
谱法［3，4］，但在检测过程中发现两组分分离效果不好且拖尾
因子过大。本文建立的反相高效液相色谱法很好的解决了
这两点，并对 3 个批号的样品进行了含量测定，结果令人满
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意。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试剂 Waters510 高效液相色谱仪(WDL-95 色
谱工作站，Waters484 紫外检测器，Waters7725i 进样阀);Sar-
torius BS110S电子天平(万分之一);PHS-3C 型精密 pH 计
(上海精密科学仪器有限公司雷磁仪器厂)。二蒸水;四丁
基氢氧化铵、磷酸盐等均为分析纯;甲醇为色谱纯。熊果酸
和齐墩果酸含量测定用对照品(0742-9909 和 110709-
200505)购自中国药品生物制品检定所;山楂提取物为本所
自制。
1. 2 样品制备
对照品溶液:取熊果酸和齐墩果酸对照品约 12 mg，精
密称定，置 50 mL量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，摇
匀，作为对照品溶液。
供试品溶液:取山楂提取物约 25 mg，精密称定，置 50
mL量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品
溶液。
1. 3 色谱条件 分析柱采用 μBandapakTM C18柱，300 mm ×
3. 9 mm ID，10 μm粒径(美国Waters公司);流动相为 pH3. 5
的甲醇 /磷酸盐缓冲液(85 /15 含 0. 4%四丁基氢氧化铵)，波
长 215 nm，流速 1. 0 mL /min，柱温:40 ℃。
2 结果
2. 1 pH的影响 分别配制 pH值为 2. 5、3. 0、3. 5、4. 0、4. 5、
5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、7. 0、7. 5、8. 0 的磷酸盐缓冲液 /甲醇为
50 /50 的流动相，按上述分析方法分离样品溶液。结果表
明:pH在 3. 5 时熊果酸和齐墩果酸的峰形和分离度较好;pH
升高，峰形变窄、保留时间缩短，但熊果酸与齐墩果酸部分重
叠;pH降低，峰形变宽、保留时间延长。故选择 pH为 3. 5 左
右。
2. 2 四丁基氢氧化铵的影响 分别配制含四丁基氢氧化铵
为 0. 2%、0. 4%、0. 6%、0. 8%(v /v)的流动相，按上述方法分
析样品溶液。结果表明:四丁基氢氧化铵浓度由 0. 2%增加
到 0. 4% 时，峰形变窄、拖尾因子变小;由 0. 4% 增加到
0. 6%、0. 8%时，峰形和拖尾因子无明显变化。故选用四丁
基氢氧化铵浓度为 0. 4%。
2. 3 甲醇浓度的影响 配制甲醇 /磷酸盐缓冲液不同比例
的流动相，按上述方法分析样品溶液。结果表明:甲醇比例
在 85%时，既保持了良好的峰形、分离度和拖尾因子，又有
合适的分析时间，故选择甲醇 /磷酸盐缓冲液为 85 /15。
2. 4 标准曲线 精密吸取对照品溶液 2、4、6、8、10 μL分别
注入高效液相色谱仪测定峰面积，以质量对峰面积回归得标
准曲线方程。熊果酸:Y = 51 024X + 996 0(r = 0. 999 8)，线
性范围为 0. 82 ～ 4. 1 μg;齐墩果酸:Y = 48 839X + 6 932(r =
0. 999 9)，线性范围为 0. 80 ～ 4. 0 μg。
2. 5 精密度 用以上色谱条件将对照品溶液和样品溶液连
续进样 5 次，熊果酸的 RSD 为 0. 57%，齐墩果酸的 RSD 为
0. 52%。
2. 6 重现性 制备供试品溶液 5 份，各吸取 5 μL 进样分
析，计算含量。熊果酸的 RSD 为 0. 75%，齐墩果酸的 RSD
为 0. 68%。
2. 7 稳定性 取供试品溶液分别于配制后 0、1、3、5、21、23、
25 h依法测定，熊果酸的 RSD 为 1. 45%，齐墩果酸的 RSD
为 1. 25%。
2. 8 回收率 采用加样回收(n = 5)，精密称取已知含量山
楂提取物 10 mg，精密加入熊果酸对照品液 10 mL 和齐墩果
酸对照品液 3 mL，加流动相稀释至刻度，摇匀，按以上色谱
条件测定，计算。熊果酸的平均回收率:98. 52%，RSD
1. 47%;齐墩果酸的平均回收率:98. 13%，RSD 1. 61%。
2. 9 样品分析 取三批山楂提取物，按供试品溶液制备项
下配制，测定含量，结果见表 1、图 1 和图 2。
表 1 山楂提取物中熊果酸和齐墩果酸含量测定
化合物
含量 /%
批号 990904 批号 990905 批号 990906
熊果酸 42. 17 42. 39 43. 16
齐墩果酸 11. 72 12. 13 11. 25
图 1 对照品 HPLC图谱
1.齐墩果酸 2.熊果酸
图 2 山楂提取物 HPLC图谱
1.齐墩果酸 2.熊果酸
3 讨论
拖尾因子是高效液相色谱定量分析时非常重要的一个
影响因素，特别是在相邻两峰靠得比较近得时候，直接关系
定量的准确性。本文方法在建立时尝试了甲醇-水、乙腈-
水、甲醇-磷酸盐缓冲液、乙腈-磷酸盐缓冲液等多个流动相，
甲醇-磷酸盐缓冲液体系表现出了较好的分离度和峰形，但
拖尾因子仍较大。为了解决这一问题，尝试了在甲醇-磷酸
盐缓冲液体系中加三乙胺和四丁基氢氧化铵。三乙胺的加
入对峰形和拖尾因子没有明显影响，但四丁基氢氧化铵加入
后，熊果酸和齐墩果酸的峰形明显变窄、拖尾因子变小。可
能的原因是四丁基氢氧化铵加入后与两种成分结合生成离
子对，改善了在 C18色谱柱上的保留。
在反相柱上甲醇的比例增减对熊果酸和齐墩果酸的保
留和分离度有影响。选择的流动相体系既要使两组分能与
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众多杂质分离，又要保证有合适的分析时间。
经全波长紫外-可见扫描，熊果酸和齐墩果酸的最大吸
收波长为 207 nm;由于甲醇在此波长处有较强的末端吸收，
为了减少干扰又尽量不降低灵敏度，确定在 215 nm 波长测
定熊果酸和齐墩果酸含量。
本法应用时，应注意 pH 值的稳定，过高或过低都将影
响色谱峰的分离度、峰形和拖尾因子，建议将 pH 值稳定在
3. 5。流动相长时间放置再使用会导致组分保留时间延长，
宜现配现用。
经不同品牌的 C18色谱柱测试，方法的重现性较好。本
法曾用于不同产地山楂提取物的含量测定，色谱峰的分离
度、峰形和拖尾因子均较好。
参考文献:
［1］ 中国药典［S］.一部. 2005:22-22.
［2］ 阴 健，郭力弓.中药现代研究与临床应用［M］. 北京:学苑出
版社，1993:101-108.
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量［J］. 海峡药学，2007，19(3):43-45.
苦芪滴丸成型工艺研究
董晓茜1， 李 贺1， 单 玉1，2， 张振秋1*
(1.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600;2.辽河油田石化医院，辽宁 盘锦 124022)
收稿日期:2009-01-15
作者简介:李 贺(1984 －)，女，硕士生，研究方向:中药制剂分析。Tel:15840913186 E-mail:amanda04111013@ 163. com
* 通讯作者:张振秋，男，教授，Tel.(0411)87586058，zhangzhenqiu@ sina. com
关键词:苦芪滴丸;成型工艺;正交试验
摘要:目的:确定苦芪滴丸的成型工艺。方法:以滴丸的外观质量为评价标准，对基质与冷凝液的选择、滴速、滴距采用单
因素平行实验法;以滴丸的溶散时限、外观质量及丸重差异为考察指标，对提取物与基质的用量配比、滴制温度、冷凝剂
温度采用正交试验法，优选出最佳滴制条件。结果:最佳工艺为 PEG6000-PEG4000 = 3:2 作为基质，药物与基质比为 1:
2，液体石蜡(上层)-二甲基硅油(下层)= 1:3 作为冷却剂，药液温度 80 ℃，以每分钟 20 ～ 25 滴的速度，滴入 10 ℃左右
的冷却剂中，滴距为 5 ～ 8 cm，滴丸外观质量最好。结论:通过上述试验确定的成型工艺合理，所制滴丸符合药典规定。
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2010)05-0864-03
病毒性心肌炎近年来发病率在我国呈上升趋势，目前国
内外均无特异疗法和药物。苦芪滴丸是根据临床用药经验
组成的中药复方制剂，用于治疗病毒性心肌炎具有一定疗
效。本文对苦芪滴丸的成型工艺进行研究［1-2］。
1 实验材料、试剂与仪器设备
1. 1 材料 苦参、黄芪均为市售药材，经辽宁中医药大学药
学院李峰教授鉴定黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus
membranaceus(Fisch.)Bge. var. mongholicus(Bge.)Hsiao 的干
燥根，苦参为豆科植物苦参 Sophora flavescens Ait.的干燥根。
1. 2 试剂 PEG4000(中国医药(集团)上海化学试剂公
司)、PEG6000(沈阳化学试剂厂)、二甲基硅油(天津市科密
欧化学试剂开发中心)、液体石蜡(抚顺汇融药业有限公
司)、乙醇为分析纯。
1. 3 仪器设备 滴丸制备装置(自制)、ZB-1C 智能崩解仪
(天津大学精密仪器厂)、AR2140 电子分析天平(上海奥豪
斯公司)、4-H数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造
有限公司)。
2 方法与结果
2. 1 提取物的制备 苦芪滴丸中有效成分为黄芪总皂苷和
苦参总生物碱，两者均为极性成分，易溶于醇，因此，选择乙
醇为提取溶剂。按组方比例，经正交试验得到最佳提取工
艺:黄芪与苦参称取适量，加入 6 倍量 60%的乙醇提取 1 h，
滤过，再加入 6 倍量 60%的乙醇提取 1 h，滤过，共 3 次，合并
滤液，滤液静置过夜，倾出上清液，回收乙醇，减压干燥成干
膏，研碎成细粉，过 100 目筛，备用。
2. 2 冷却剂的选择 将 PEG4000 与提取物细粉(2:1)混熔
后分别滴入到柱长为 110 cm 冷却柱中的不同冷却剂中，考
察沉降时间、外观(圆整度，光洁度)、气味等。结果发现，以
液体石蜡或食用油为冷却剂时，滴丸下降速度快、容易互相
黏结、滴丸圆整度不好;以二甲基硅油为冷却剂时，滴丸下降
速度过慢，空气不易逸出，易带针状拖尾。因此以不同比例
液体石蜡(上层)和二甲基硅油(下层)为冷却剂再次进行考
察，结果见表 1。
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