作 者 ：朱一伟
期 刊 ：安徽农业大学 2009年 S2期 页码：47
关键词：螺旋藻；载体构建；luxAB基因；
摘 要 ：本实验以建立和完善螺旋藻的遗传转化操作系统为目标,研究螺旋藻在液体和固体培养条件下对Amp(氨苄青霉素)的敏感度,确定筛选压力Amp的浓度;克隆报告基因luxAB片段,与含有Ubil启动子基因及amp基因的载体大片段连接重组,构建新的穿梭质粒载体;并对螺旋藻受体细胞进行预处理,抑制核酸酶活性,采用电击转化法将构建的新质粒载体转化螺旋藻细胞. Amp对钝顶螺旋藻A9藻株有较强抑制作用,液体培养时Amp对螺旋藻的最低抑制浓度为100μg·ml-1;固体培养时Amp对螺旋藻的最低抑制浓度约为200μg·ml-1。Amp适合作为螺旋藻的抗性筛选压力,筛选压力为200μg·ml-1...