全 文 ：朱　英:女 , 1949年生 ,实验师
螺旋藻多糖含量测定
朱　英　罗永明　严喜鸾　曹　岚
江西中医学院 ,南昌　 330006
提要　用苯酚- 硫酸法进行螺旋藻多糖的含量测定 ,方法简便 ,结果准确 ,平均回收率为 99. 71% ,变异系数 1. 479%。
关键词　螺旋藻 ;　多糖 ;　含量测定
The Deterimination of Polysaccharides in Spitul inaMaxima
Zhu Ying , Luo Yongming, Yan Xiluan, et al
Jiangxi College o f TCM , Nanchang 330006
Abstract　 The deterimination of po ly saccharides in spi tulina maxima was made by a simple and precious method o f phe-
nol- sulphuric acid. The average ra te of recovery is 99. 71% and variation coefficient is 1. 479% .
Key words　 Spitulina maxima, Poly saccharides, Deterimination
　　螺旋藻属 ( Spitulina Turpin)属于原核植物的蓝藻门、蓝藻纲、
段殖体目颤藻科 ,含有极丰富营养成分和有抗辐射、抗肿瘤及调节
免疫功能的耐卤藻类。近几年的研究表明 ,螺旋藻中抗肿瘤和免疫
调节作用的生理活性物质是多糖 [1 ]。为此 ,我们采用苯酚—硫酸法
测定了其多糖的含量。
1　仪器和药品
721型分光光度计 (上海 ) , 5%苯酚液 (取苯酚 100 g ,加铝片
0. 1 g与碳酸氢钠 0. 05 g ,蒸馏 ,收集 182℃馏分 ,称取 10 g ,加水
190 g ,置棕色瓶中冷藏备用 ) ,螺旋藻干粉 (由南昌外贸博源公司
提供 ,品种为极大螺旋藻 Spirulina maxima )。
2　实验方法 [2 ]
2. 1　多糖的提取:称取螺旋藻干粉 100 g ,用工业乙醇水浴回流提
取 2次 ,过滤 ,残渣置搪瓷盘水浴挥尽乙醇 ,用 8倍、 6倍、 4倍量沸
水分别煮 1 h、 40 min、 30 min,合并 3次滤液 ,水浴浓缩至适量 ,放
冷后搅拌下加 3倍量乙醇使沉淀析出 ,置冰箱 4 h,离心 ,沉淀加蒸
馏水溶解 ,再加乙醇至含醇量为 80% ,静置一夜 ,将析出物抽干 ,
依次用乙醇、丙酮、乙醚抽洗多次 ,沉淀物 80℃烘干 ,即得淡绿色
粉末状螺旋藻多糖粗提物。
2. 2　标准曲线:精密称取 105℃干燥至恒重的葡萄糖 49. 7 mg ,置
100 ml容量瓶中 ,加蒸馏水溶解 ,稀释至刻度 ,摇匀。 制成标准溶
液 ( 0. 49 mg /m l)。精密吸取标准液 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0、 6. 0 ml
置 50 ml容量瓶中 ,加水至刻度 ,摇匀。 精密吸取上述各种浓度溶
液 2. 0 ml,另精密吸取蒸馏水 2. 0 ml作空白对照 ,置具塞试管中 ,
加 5%苯酚溶液 1. 0 ml,浓硫酸 5. 0 ml摇匀 ,于沸水浴中加热 15
min,冷却 ,于 490 nm波长测定吸收度值。 结果表明在 0. 00994～
0. 05964μg浓度范围内呈良好线性关系。 求得回归方程为 A =
0. 0457+ 0. 0105 X ,γ= 0. 9996, n= 6。
2. 3　回收率实验:按标准曲线项下的制备方法操作 ,以回归方程
计算糖量的回收率 ,结果见表 1,得平均回收率 99. 71% , n = 6,
CV= 1. 479%。
2. 4　稳定性实验: 取标准品及样品分别按分析方法操作 , 1次 /10
min,连续 40 min。 结果表明吸收度变化很小 ,不影响测定。
表 1　葡萄糖回收率实验结果
项　目 编　　　　号
1 2 3 4 5 6
x- S CV (% )
加入量 ( mg) 9. 94 19. 88 29. 82 39. 76 49. 70 59. 64 34. 79 18. 596 53. 45
A　　值 0. 147 0. 253 0. 360 0. 462 0. 574 0. 662 0. 41 0. 195 47. 47
回收量 (μg) 9. 68 19. 81 30. 04 39. 79 50. 50 58. 91 34. 79 18. 607 53. 48
回收率 (% ) 97. 43 99. 65 100. 74 100. 07 101. 61 98. 78 99. 71 1. 474 1. 479
2. 5　样品含量测定: 精密称取 105℃干燥至恒重的螺旋藻多糖
100. 2 mg ,置 100 ml容量瓶中 ,加水溶解并稀释至刻度 ,摇匀。 精
密吸取该溶液 2. 0 ml和 5. 0 ml置 50 ml容量瓶中 ,加水稀释至刻
度 ,摇匀 ,再精密吸取上述两种浓度溶液 2. 0 ml,按标准曲线项
下 ,置具塞试管中操作 ,以蒸馏水为空白对照 ,测定吸收度。结果见
表 2。
表 2　样品测定结果
样品量 (μg ) A值 检出量 (μg) 含量 (% )
40. 08 0. 150 0. 993 2. 5
100. 2 0. 330 2. 707 2. 7
3　讨论与小结
配制好的 5%苯酚溶液应冷藏避光保存 ,否则用苯酚—浓硫
酸作空白对照时 ,颜色变深 ,影响结果。
参考文献
1　曹和平 .螺旋藻多糖的研究 .药学学报 . 1995, 30( 11)∶ 858
2　唐晓玲 ,蒋桂平 ,高培源 ,等 .绞股蓝粘多糖的提取与初步分析 .中成药 .
1995, 11( 7)∶ 7
( 1998- 07- 03收稿 )
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时珍国医国药 1999年第 10卷第 2期 LIS HIZHEN M EDICINE AND M ATERIA MEDICA RESEARCH 1999 V OL. 10 NO. 2