全 文 ：绵马贯众可溶性粉对人工感染鸡传染性
法氏囊病的疗效评价
张强１，李明哲２，杨宗让３，师宁宁１，杨群辉１，文鹏程１，何诚１
（１．中国农业大学动物医学院，北京　１００１９３；２．朝鲜惠山农林大学，朝鲜惠山　ＨＳ００１；
３．宝鸡市陈仓区畜牧局，陕西宝鸡　７２１３００）
摘要：通过建立人工感染鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）模型，本试验旨在验证绵马贯众可溶性粉对ＩＢＤＶ的治疗效果。
试验将９５只２１日龄的ＳＰＦ鸡随机分为７组，包括绵马贯众可溶性粉高（１９８ｍｇ／ｋｇ）、中（９９ｍｇ／ｋｇ）、低剂量组（５０ｍｇ／ｋｇ）及
朝鲜绵马贯众组（９９ｍｇ／ｋｇ）、黄芪多糖组（９９ｍｇ／ｋｇ）、感染对照组（染毒不给药）和健康对照组。以ＩＢＤＶ　ＬＸ毒株经鼻腔感
染３６ｈ后，连续口服以上药物５ｄ，评价其增重率、治愈率、成活率和免疫器官指数。结果显示：①人工感染ＩＢＤＶ后，绵马贯
众可溶性粉中、低剂量组相对增重率均极显著高于朝鲜绵马贯众组（Ｐ＜０．０１），绵马贯众可溶性粉低剂量组显著高于绵马贯
众可溶性粉中剂量组和黄芪多糖组（Ｐ＜０．０５），且绵马贯众可溶性粉中剂量组与黄芪多糖组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５）；②绵马
贯众可溶性粉高、中、低３个剂量组成活率分别为８０％、８０％和７３．３％，均显著高于朝鲜绵马贯众组（６６．７％）、黄芪多糖组
（５３．３％）和感染对照组（６０．０％）（Ｐ＜０．０５）；其相对应的治愈率也均显著高于朝鲜绵马贯众组和黄芪多糖组（Ｐ＜０．０５）。③在胸
腺指数、脾脏指数方面，绵马贯众可溶性粉中、低剂量组与朝鲜绵马贯众组、黄芪多糖组相比差异均不显著（Ｐ＞０．０５），但显著高
于感染对照组（Ｐ＜０．０５）；法氏囊指数差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。结果显示绵马贯众可溶性粉以５０ｍｇ／ｋｇ连续口服５ｄ，通过提
高胸腺指数和脾脏指数而发挥免疫增强功效，有效治疗人工感染鸡传染性法氏囊病，且成活率和治愈率均高于黄芪多糖。
关键词：绵马贯众可溶性粉；朝鲜贯众；传染性法氏囊病；疗效；鸡
中图分类号：Ｓ８５３．７　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１６７１－７２３６（２０１４）１１－０２４２－０５
收稿日期：２０１４－０４－０２
作者简介：张强（１９９０－），男，山东人，学士，研究方向：畜禽传染
病防治。
李明哲（１９７０－），男，朝鲜人，硕士，研究方向：畜禽传
染病防治。
张强和李明哲对本文具有同等贡献，并列为第一
作者。
通信作者：何诚（１９６６－），男，宁夏人，教授，研究方向：天然药物
抗病毒成分解析和利用。
基金项目：广东省教育部产学研结合项目（２００８Ｂ０９０５００１５５）。
　　传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒（ｉｎ－
ｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｂｕｒｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｖｉｒｕｓ，ＩＢＤＶ）感染引起鸡和
火鸡的一种免疫抑制性、高度接触传染性疫病。由
于ＩＢＤＶ在外界环境中较稳定，一旦感染，病毒持续
存活并诱发新的感染。虽然疫苗是防制ＩＢＤＶ的有
效方法，但随着ＩＢＤＶ强毒株、变异株的不断出现，
可能会造成免疫失败（Ｈａｆｅｚ等，２００３）。因此，临床
上已选择使用大剂量的ＩＢＤＶ高免卵黄抗体注射进
行预防和治疗，但高免卵黄抗体中携带的新城疫病
毒抗体会影响新城疫免疫程序，造成临床散发性新
城疫的流行和暴发（李树梅等，２０１０）。中兽药是中
国长期检验有效的药物，被广泛应用于畜禽病毒病
和细菌病的防制。临床上，随着清热解表类中药材
（穿心莲、板蓝根、野菊花、柴胡、金银花等）成本的不
断增加，导致部分企业在药物生产过程中添加大量
的抗病毒药物、解表药，严重危害了动物性食品安
全。２０１２年农业部出台了相关管理规定和实施不
定期的监察，试图降低抗病毒西药、解热镇痛类药的
滥用（中华人民共和国农业部公告第１８４８号）。与
此同时，中兽药防制畜禽病毒病功效受到多方专家
的质疑。
绵马贯众已被中国历版药典收载，国内已有许
多关于绵马贯众组方治疗多种感染性疾病如细菌性
肺炎、上呼吸道感染及病毒感染引起的甲型流感、肝
炎和艾滋病等的文献和专利报道（齐峰等，２００７）。
绵马贯众可溶性粉剂是将药材经乙酸乙酯和乙醇提
取，获得浸膏后，加工制成的可溶性粉剂。中国农业
大学动物医学院天然药物实验室前期研究结果显示
可有效防制传染性法氏囊病和肾型传染性支气管炎
（杨群辉，２０１３）。因此，本试验拟以人工感染ＩＢＤＶ
为发病模型，评价来源于中国东北地区和朝鲜地区
的绵马贯众治疗ＩＢＤＶ的疗效及推荐使用剂量。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　药物　黄芪多糖口服液，１ｍＬ相当于原生
·２４２· 疾病防治 中国畜牧兽医 　２０１４年第４１卷第１１期
药材１．５０ｇ，由山东明发兽药股份有限公司生产，批
号：２０１３０８２０；东北绵马贯众购自河北省安国中药材
批发市场；绵马贯众可溶性粉剂由中国农业大学动
物医学院天然药物实验室制备，每克粉剂含间苯三
酚０．２５ｇ；朝鲜绵马贯众购自朝鲜两江道中药材批
发市场；朝鲜绵马贯众口服液由中国农业大学动物医
学院天然药物实验室制备，含间苯三酚０．２２ｇ／ｍＬ。
１．１．２　毒株　１０４．０　ＥＬＤ５０／０．２ｍＬ的强毒ＩＢＤＶ
ＬＸ毒株由北京农业科学院畜牧兽医研究所刘爵研
究员惠赠。
１．１．３　试验动物与饲料　９５只２１日龄ＳＰＦ雏鸡
购自北京维通利华实验动物技术有限公司。饲料购
自北京科澳协力饲料有限公司，饲料合格证号
［ＳＹＸＫ（京）２００９－００１２］。
１．２　方法
１．２．１　试验动物分组　将９５只２１日龄的ＳＰＦ鸡
随机分为７组，分别为：绵马贯众可溶性粉高
（１９８ｍｇ／ｋｇ）、中（９９ｍｇ／ｋｇ）、低剂量组（５０ｍｇ／ｋｇ）
及朝 鲜 绵 马 贯 众 组 （９９ ｍｇ／ｋｇ）、黄 芪 多 糖 组
（９９ｍｇ／ｋｇ），每组１５只。同时，设置感染对照组和
健康对照组，每组１０只。给药组、感染对照组和健
康对照组分别饲养在不同隔离器内，防止交叉传染。
１．２．２　攻毒与给药　给药前ＳＰＦ鸡经鼻腔接种
０．２ｍＬ强毒ＩＢＤＶ　ＬＸ株（含１０４．０　ＥＩＤ５０／０．２ｍＬ），
接种病毒后３６ｈ口服灌胃给药，连续给药５ｄ，每天
１次，停药观察３ｄ后剖检和测定（李树梅等，２０１０）。
１．２．３　评价指标
１．２．３．１　整体观察指标　攻毒后每天观察鸡的精
神状态、发病、死亡情况及剖检情况。
１．２．３．２　增重率　试验开始前和结束后对所有鸡
进行称重，计算平均相对增重和相对增重率。相对
增重率（％）＝各组平均相对增重／健康对照组相对
增重×１００％。
１．２．３．３　治愈率和成活率测定　ＩＢＤＶ接种后２～
５ｄ计录死亡数量，根据成活鸡数计算成活率，成活
率（％）＝成活数量／试验数量×１００％。给药前测定
感染鸡发蔫、沉郁数量，给药５ｄ后精神恢复、采食
恢复的记录为康复鸡。治愈率（％）＝康复鸡数／发
病数量×１００％。
１．２．３．４　免疫器官指数　试验结束后将鸡安乐死，
称体重及脾脏、法氏囊重量，计算免疫器官指数（Ｌｕｋ－
ｅｒｔ等，１９９１），其计算公式为：法氏囊指数（％）＝法氏
囊重量／体重×１００％；脾脏指数（％）＝脾脏重量／体
重×１００％；胸腺指数（％）＝胸腺重量／体重×１００％。
１．２．４　数据的分析与处理　试验数据用 Ｅｘｃｅｌ
２００３和ＳＰＳＳ　１３．０统计软件进行数据处理，试验数
据以平均值表示，差异显著为Ｐ＜０．０５，差异极显著
为Ｐ＜０．０１。
２　结果与分析
２．１　整体指标观察结果　攻毒后鸡群很快出现打
蔫的现象，羽毛蓬松，精神沉郁，采食量和饮水量下
降，３ｄ左右出现死亡高峰。剖检可见感染ＩＢＤＶ鸡
呈胶冻样水肿、质脆或严重出血呈“血葫芦状”等症
状，肾脏肿大及腺胃和肌胃交界还有条纹状出血等
典型病理变化。
２．２　药物对增重的影响　由表１可知，绵马贯众可
溶性粉高、中、低剂量组相对增重率分别为３１．６％、
４９．０％和６３．４％，黄芪多糖组为５２．７％，朝鲜绵马
贯众组３５．９％。统计结果显示绵马贯众可溶性粉
低剂量组相对增重率较高，与绵马贯众可溶性粉高
剂量组、朝鲜绵马贯众组相比均差异极显著（Ｐ＜
０．０１），与绵马贯众可溶性粉中剂量组、黄芪多糖组
相比均差异显著（Ｐ＜０．０５）。但绵马贯众可溶性粉
中剂量组与黄芪多糖组相比差异不显著（Ｐ＞
０．０５），朝鲜绵马贯众组与绵马贯众可溶性粉高剂量
组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５）。
表１　药物对鸡增重的影响
分组 数量（只） 初始体重（ｇ） 末体重（ｇ） 相对增重（ｇ） 相对增重率（％）
绵马贯众可溶性粉高剂量组 １５　 ２１０．７　 ２４３．６　 ３２．９　 ３１．６Ａａ
绵马贯众可溶性粉中剂量组 １５　 １８９．１　 ２４０．１　 ５１．０　 ４９．０Ｂｃ
绵马贯众可溶性粉低剂量组 １５　 ２０７．９　 ２７３．８　 ６５．９　 ６３．４Ｂｂ
黄芪多糖组 １５　 １９７．７　 ２５２．５　 ５４．８　 ５２．７Ｂｃ
朝鲜绵马贯众组 １５　 １９６．４　 ２３３．８　 ３７．４　 ３５．９Ａａ
感染对照组 １０　 ２０９．０　 ２３９．１　 ３０．１　 ２８．９Ａａ
健康对照组 １０　 １６９．７　 ２７３．７　 １０４．０　 １００．０Ｃｄ
　　注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）；肩标不同大写字母表示差异极显著（Ｐ＜０．０１）；肩标相同字母或无字母标注表
示差异不显著（Ｐ＞０．０５）。下同。
·３４２·中国畜牧兽医 　２０１４年第４１卷第１１期 疾病防治
２．３　药物对治愈率和成活率的影响　由表２可知，
绵马贯众可溶性粉高、中、低剂量组、黄芪多糖组和
朝鲜绵马贯众组成活率分别为８０．０％、８０．０％、
７３．３％、５３．３％和６６．７％；治愈率分别为１００．０％、
８８．９％、８８．９％、７２．３％、７０．０％。感染对照组成活
率、治愈率分别为６０．０％、２５．０％。经过统计学分
析，绵马贯众可溶性粉高、中和低剂量组成活率、治
愈率均显著高于黄芪多糖组和朝鲜绵马贯众组
（Ｐ＜０．０５），但绵马贯众可溶性粉高、中和低剂量组
之间及朝鲜绵马贯众组和黄芪多糖组之间差异均不
显著（Ｐ＞０．０５）。
表２　药物对治愈率、存活率的影响
分组 发病数（只）
治疗５ｄ后治愈情况 治疗５ｄ后成活情况
治愈数（只） 治愈率（％） 成活数量（只） 成活率（％）
绵马贯众可溶性粉高剂量组 ８　 ８　 １００．０Ａａ　 １２　 ８０．０Ａａ
绵马贯众可溶性粉中剂量组 ９　 ８　 ８８．９Ａａ　 １２　 ８０．０Ａａ
绵马贯众可溶性粉低剂量组 ９　 ８　 ８８．９Ａａ　 １１　 ７３．３Ａａ
黄芪多糖组 １１　 ８　 ７２．３ＡＢｂ　 ８　 ５３．３Ａｃ
朝鲜绵马贯众组 １０　 ７　 ７０．０ＡＢｂ　 １０　 ６６．７Ａｃ
感染对照组 ８　 １　 ２５．０Ｂｃ　 ６　 ６０．０Ｂｃ
健康对照组 ０　 ０ － １０　 １００．０Ｃｂ
２．４　药物对免疫器官指数的影响　法氏囊指数：朝
鲜绵马贯众组法氏囊指数显著高于绵马贯众可溶性
粉高、中、低剂量组及黄芪多糖组、感染对照组（Ｐ＜
０．０５），但绵马贯众可溶性粉高、中、低剂量组及黄芪
多糖组、感染对照组的法氏囊指数之间差异均不显
著（Ｐ＞０．０５）。脾脏指数：与感染对照组相比，绵马
贯众可溶性粉高、中、低剂量组、黄芪多糖组和朝鲜
绵马贯众组均差异显著（Ｐ＜０．０５），但绵马贯众可
溶性粉高剂量组显著低于绵马贯众可溶性粉中、低
剂量组（Ｐ＜０．０５）。胸腺指数：与感染对照组相比，
绵马贯众可溶性粉高、中、低剂量组、黄芪多糖组、朝
鲜绵马贯众组均差异显著（Ｐ＜０．０５）；但绵马贯众
可溶性粉高、中、低剂量组及黄芪多糖组、朝鲜绵马
贯众组间差异均不显著（Ｐ＞０．０５）（表３）。
表３　药物对免疫器官指数的影响
分组 只数（只） 法氏囊指数（％） 脾脏指数（％） 胸腺指数（％）
绵马贯众可溶性粉高剂量组 １２　 ０．１３Ａａ　 ０．１９Ａａ　 ０．１７Ａａ
绵马贯众可溶性粉中剂量组 １２　 ０．１４Ａａ　 ０．２４Ａｂ　 ０．２１Ａａ
绵马贯众可溶性粉低剂量组 １１　 ０．１４Ａａ　 ０．２８Ａｂ　 ０．１８Ａａ
黄芪多糖组 ８　 ０．１２Ａａ　 ０．２７Ａｂ　 ０．１６Ａａ
朝鲜绵马贯众组 １０　 ０．２４Ａｂ　 ０．２３Ａｂ　 ０．２０Ａａ
感染对照组 ６　 ０．１０Ａａ　 ０．１２Ａｃ　 ０．０７Ａｂ
健康对照组 １０　 ０．５０Ｂｃ　 ０．４１Ｂｃ　 ０．１９Ａａ
３　讨论
３．１　绵马贯众可溶性粉对鸡传染性法氏囊病的疗
效和应用　感染ＩＢＤＶ后可引起尖峰式的高死亡现
象，同时诱发免疫抑制而导致其他疾病的感染和免
疫失败。因此，保护感染鸡群存活数量和防制免疫
器官萎缩是控制鸡传染性法氏囊病的关键（Ｏｕ等，
２０１３）。本试验结果显示绵马贯众可溶性粉低剂量
组口服灌胃后显著提高家禽的相对增重率，与黄芪
多糖组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。同时，成活率和
治愈率均显著高于黄芪多糖组和朝鲜绵马贯众组，
成活率达７３．３％～８０．０％，治愈率达８８．９％～
１００．０％。连续口服灌胃５ｄ后，９９和５０ｍｇ／ｋｇ绵
马贯众可显著提高脾脏指数和胸腺指数（Ｐ＜
０．０５）。本试验结果表明绵马贯众可溶性粉以
５０ｍｇ／ｋｇ口服灌胃５ｄ可显著提高鸡的成活率和治
愈率，在防制ＩＢＤＶ人工感染中具有良好的效果和
开发前景。给药方式上，与卵黄抗体注射相比，绵马
贯众可溶性粉可以饮水给药、应激反应小、降低劳动
强度、提高工作效率。因此有望替代高免卵黄抗体、
黄芪多糖防制临床传染性法氏囊病的发生和流行。
朝鲜绵马贯众口服液与绵马贯众可溶性粉在防
制鸡传染性法氏囊病上的差异性：在相对增重率、治
愈率和成活率方面，绵马贯众可溶性粉显著高于朝
鲜绵马贯众（Ｐ＜０．０５）。但脾脏指数、法氏囊指数
·４４２· 疾病防治 中国畜牧兽医 　２０１４年第４１卷第１１期
和胸腺指数方面，朝鲜绵马贯众与绵马贯众可溶性
粉差异不显著（Ｐ＞０．０５）。这提示朝鲜绵马贯众可
增强鸡的免疫功能，其保护率差异原因在于口服液溶
剂成分降低了家禽对药物的适口性，从而影响了感染
鸡群的采食量，造成相对日增重降低。此外，可能与
朝鲜绵马贯众中有效成分———总间苯三酚含量低有
关。绵马贯众可溶性粉总间苯三酚含量（０．２５ｇ／ｇ）
高于朝鲜绵马贯众口服液（０．２２ｇ／ｍＬ），其含量的
差异与药物采摘季节有关。本次使用的朝鲜绵马贯
众采摘于秋季，而东北绵马贯众一般在春季采摘，不
同采摘季节造成了绵马贯众总间苯三酚含量的
差异。
３．２　绵马贯众可溶性粉抗ＩＢＤＶ的可能作用机制
　绵马贯众富含多聚间苯三酚类成分，多聚间苯三
酚类衍生物是绵马贯众抗流感病毒活性部位的主要
成分。但由于该类成分一般是结构相似的一系列同
系物共存于植物体内，不稳定，难以分离，常获得绵
马酸类的混合物（刘钊，２０１０）。绵马贯众具有抗乙
型肝炎、抗疱疹病毒和抗艾滋病的作用（Ｌｅｅ等，
２００８；孙科峰等，２０１０）。绵马贯众可溶性粉治疗鸡
传染性法氏囊病的可能机制：①缓解发病症状，提高
感染鸡的采食量。绵马贯众富含大量的间苯三酚类
化合物，这类化合物具有抗出血功效。始载于《神农
本草经》，绵马贯众性微寒、味苦、有小毒；具有清热
解毒、止血、杀虫作用。绵马贯众炭具有收敛止血之
功效（卫莹芳，２０１０）。ＩＢＤＶ感染鸡后造成鸡死亡
主要因素在于弥散性血管内出血造成血液循环障碍
而衰竭死亡。绵马贯众可溶性粉低剂量组相对增重
率显著性高于黄芪多糖组（Ｐ＜０．０５），这说明绵马
贯众可溶性粉能缓解症状从而提高了成活率。②通
过提高鸡的免疫器官指数而发挥免疫增强效果。胸
腺是鸡的一级免疫器官，是雏鸡血液淋巴细胞的来
源。脾脏也是重要的免疫器官之一，能产生大量、丰
富的Ｂ淋巴细胞，可分泌特异性的抗体。动物免疫
器官是免疫活性细胞发育、定居、增殖的场所，因此
机体的免疫功能决定于免疫器官的状况（杨汉春，
２００３）。无论是绵马贯众可溶性粉，还是朝鲜绵马贯
众口服液均显著提高了脾脏指数和胸腺指数，其结
果与黄芪多糖组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５），这提
示绵马贯众通过提高脾脏、胸腺免疫器官的功能而
发挥抗病毒作用。③通过提高采食量而发挥抗病毒
功效。与感染对照组相比，绵马贯众可溶性粉中、低
剂量组可显著性增加相对增重率（Ｐ＜０．０５），这有
利于缓解ＩＢＤＶ感染后造成的食欲下降，增强感染
鸡群的抗病力。其他清热类的中兽药常因苦味大，
造成鸡采食量下降而影响药物的疗效。
４　小结
本试 验 结 果 显 示 绵 马 贯 众 可 溶 性 粉 以
５０ｍｇ／ｋｇ体重口服灌胃，连续给药５ｄ，通过提高机
体免疫力、增加采食量可有效防制鸡传染性法氏囊
病的人工感染，且治疗效果优于黄芪多糖口服液和
朝鲜绵马贯众口服液。
参 考 文 献
１　卫莹芳．中药鉴定学［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２０１０．
２　刘钊．绵马贯众抗感染活性成分研究［Ｄ］．北京：北京协和医学
院，２０１０．
３　孙科峰，于艳，李丽静，等．绵马观众水和乙醇提取物抗病毒的实
验研究［Ｊ］．中国中西医结合儿科学，２０１０，２（４）：３１９～３２１．
４　齐峰，王娥丽．常用药材绵马贯众活性成分研究［Ｊ］．天津医科
大学学报，２００７（２）：１９１～１９３．
５　李树梅，张发明，何诚，等．乌梅酸枣仁提取物对人工感染鸡传染
性法氏囊病的疗效试验 ［Ｊ］．中国畜牧兽医，２０１０，３７（８）：
１４９～１５２．
６　杨汉春．动物免疫学［Ｍ］．第２版．北京：中国农业大学出版
社，２００３．
７　杨群辉．绵马贯众山楂颗粒安全性和药效学评价［Ｄ］．北京：中国
农业大学，２０１３．
８　Ｃａｌｎｅｋ　Ｂ　Ｗ，Ｂａｒｎｅｓ　Ｈ　Ｊ，Ｂｅａｒｄ　Ｃ　Ｗ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆ
ｐｏｕｌｔｒｙ［Ｍ］．Ｉｏｗａ，Ｓｔａｔｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ，Ａｍｅｓ，ＩＯ，１９９１．
９　Ｈａｆｅｚ　Ｈ　Ｍ，Ｐｒｕｓａｓ　Ｃ，Ｒａｕｅ　Ｒ．Ｖｅｒｙ　ｖｉｒｕｌｅｎｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｂｕｒｓａｌ
ｄｉｓｅａｓｅ　ｖｉｒｕｓ（ｖｖＩＢＤＶ）ｉｎ　ｖａｃｃｉｎａｔｅｄ　ｂｒｏｉｌｅｒ　ｆｌｏｃｋ：Ｃｏｕｒｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｄｉｓｅａｓｅ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｓｔｒａｉｎ［Ｊ］．
Ａｒｃｈ　Ｇｅｆｌｕｇｅｌｋｄ，２００３，６７：２～５．
１０Ｌｅｅ　Ｊ　Ｓ，Ｍｉｙａｓｈｉｒｏ　Ｈ，Ｎａｋａｍｕｒａ　Ｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｗｏ　ｎｅｗ　ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ
ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｒｈｉｚｏｍｅ　ｏｆ　Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ　ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａ，ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ－１
ｐｒｏｔｅａｓｅ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ　Ｐｈａｒｍ　Ｂｕｌ （Ｔｏｋｙｏ），２００８，５６：７１１～７１４．
１１Ｏｕ　Ｃ　Ｂ，Ｓｈｉ　Ｎ　Ｎ，Ｐａｎ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｍ－
ｂｉｎｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｈｅｒｂａｌ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｇａｉｎｓｔ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｂｕｒｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ
ｉｎ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］．Ｐａｋｉｓｔａｎ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１３，３３（３）：
３０４～３０８．
Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ　Ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａｅ
Ｓｏｌｕｂｌｅ　Ｐｏｗｄｅｒ　ａｇａｉｎｓｔ　Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｂｕｒｓａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｖｉｒｕｓ
ＺＨＡＮＧ　Ｑｉａｎｇ１，ＬＩ　Ｍｉｎｇ－ｚｈｅ２，ＹＡＮＧ　Ｚｏｎｇ－ｒａｎｇ３，ＳＨＩ　Ｎｉｎｇ－ｎｉｎｇ１，
·５４２·中国畜牧兽医 　２０１４年第４１卷第１１期 疾病防治
ＹＡＮＧ　Ｑｕｎ－ｈｕｉ　１，ＷＥＮ　Ｐｅｎｇ－ｃｈｅｎｇ１，ＨＥ　Ｃｈｅｎｇ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｉｎａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００１９３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋｏｒｅａｎ　Ｈｕｉｓｈａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ
Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｉｓｈａｎ　ＨＳ００１，Ｋｏｒｅａ；３．Ｂａｏｊｉ　Ｃｈｅｎｃａｎｇ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　Ｂｕｒｅａｕ，Ｂａｏｊｉ　７２１３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｔｕｄｙ　ｗａｓ　ａｉｍｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ　Ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａｅ （ＲＤＣ）ｓｏｌｕｂｌｅ
ｐｏｗｄｅｒ　ｉｎ　ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｂｕｒｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｖｉｒｕｓ（ＩＢＤＶ）．Ｆｉｒｓｔｌｙ，ＳＰＦ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｗｅｒｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＩＢＤＶ
ＬＸ　ｓｔｒａｉｎ　ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｍｏｄｅｌ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｏｆ　ｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅ，ｌｏｗ　３ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ　ｏｒａｌｙ
ｗｉｔｈ　１９８，９９ａｎｄ　５０ｍｇ／ｋｇ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｋｏｒｅａｎ　ＲＤＣ　ｏｒａｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｒ
Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｏｒ　５ｄａｙｓ　ａｓ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｃｈｉｃｋｅｎ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＩＢＤＶ　ａｎｄ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ＩＢＤＶ　ｗｅｒｅ
ｒｅｇａｒｄｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｇａｉｎ，ｃｕｒｅ　ｒａｔｅ，ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｉｍｍｕｎｅ　ｏｒｇａｎ　ｉｎ－
ｄｅｘ　ｗｅｒｅ　ｅｍｐｌｏｙｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｉｃａｃｉｅｓ．Ａｆｔｅｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ＩＢＤＶ，ａｎ　ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ
ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｇａｉｎ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　Ｋｏｒｅａｎ　ＲＤＣ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜
０．０１）．ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｅｒ　ｐｏｗｄｅｒ　ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　Ａｓｔｒａｇａ－
ｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｈａｒｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｈｏｗｅｖｅｒ，ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ
ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＞０．０５）．Ｗｉｔｈ　ｒｅｓｐｅｃｔ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ，８０％ｃｈｉｃｋｅｎ　ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ　ｆｒｏｍ　ＩＢＤＶ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅ，ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　Ｋｏｒｅａｎ　ＲＤＣ
ｇｒｏｕｐ（６６．７％）ａｎｄ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ（５３．３％）（Ｐ＜０．０５）．Ｉｎ　ｔｅｒｍｓ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｏｒｇａｎ　ｉｎｄｅｘ，ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ　ｔｈｙｍｕｓ　ａｎｄ　ｓｐｌｅｅｎｓ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｅｓ　ｇｒｏｕｐｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｆ　ｂｕｒｓａｌ　ｉｎｄｅｘ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ａｍｏｎｇ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ
ｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ，Ｋｏｒｅａｎ　ＲＤＣ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＞０．０５）．Ｉｎ　ｓｕｍｍａｒｙ，ｃｈｉｃｋｅｎ
ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ　ｏｒａｌｙ　ｗｉｔｈ　５０ｍｇ／ｋｇ　ＲＤＣ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ　ｆｏｒ　５ｄａｙｓ　ｗｏｕｌｄ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ
ｏｆ　ｔｈｙｍｕｓ　ａｎｄ　ｓｐｌｅｅｎ　ｉｎｄｅｘｅｓ，ｌｅａｄｉｎｇ　ｔｏ　ｈｉｇｈ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｙ　ｃｈａｌｅｎｇｅ　ｗｉｔｈ　ＩＢＤＶ．Ｗｉｔｈ　ｒｅｓｐｅｃｔ　ｔｏ　ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ｉｔ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ　Ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａｅ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｗｄｅｒ；Ｋｏｒｅａｎ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｄｒｙｏｐｔｅｒｉｓ　Ｃｒａｓｓｉｒｈｉｚｏｍａｅ；ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ
ｂｕｒｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ；ｅｆｆｉｃａｃｙ；ｃｈｉｃｋｅｎ
（责任编辑　吴　艳
櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅
）
猪ＤＢＣ１基因的克隆及鉴定
Ｋｎｕｄ　Ｌａｒｓｅｎ等著　晋大鹏摘译　吴艳校
　　摘要：膀胱癌缺失基因１（ＤＢＣ１）是一个肿瘤抑制基因，
参与调节细胞生长和细胞程序性死亡。本试验对猪ＤＢＣ１
基因ｃＤＮＡ 进行了克隆及鉴定。ＲＴ－ＰＣＲ 结果发现，猪
ＤＢＣ１基因ｃＤＮＡ包含１个２２８３ｂｐ的开放阅读框（ＯＲＦ），
编码７６１个氨基酸，分子质量为８８．６ｋｕ，等电点为９．１；其
氨基酸序列与人（９９％）和鼠（９８％）有很高的同源性。猪
ＤＢＣ１基因定位于１号染色体上；其启动子区神经元特异性
表达元件有高度的保守性。猪ＤＢＣ１基因在脑组织中高表
达。运用亚硫酸氢钠测序法检测猪ＤＢＣ１基因在大脑和肝
脏中的甲基化状态，结果发现，ＤＢＣ１外显子１及启动子序
列的甲基化（１％～４％）显著低于ＤＢＣ１基因自身的甲基化
（５３％～６１％）。猪ＤＢＣ１基因ｃＤＮＡ、启动子序列及ＤＢＣ１
基因外显子１序列均已提交至 ＧｅｎＢａｎｋ，登录号分别为：
ＫＦ７３３４４２和ＫＪ３９６１９３。
关键词：ＤＢＣ１；表达；甲基化；猪
（原载：Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ　Ｒｅｐ，２０１４，Ｅｐｕｂ　ａｈｅａｄ　ｏｆ　ｐｒｉｎｔ）
·６４２· 疾病防治 中国畜牧兽医 　２０１４年第４１卷第１１期