全 文 ：甘木通提取物对家兔心肌缺血的保护作用
韶关学院英东生物工程学院 (韶关 512005)　胡宗礼　黄晓萍　陈王君霞
　　摘　要　 目的:探讨甘木通提取物对家兔急性心肌缺血的影响。方法:结扎家兔冠状动脉左
前降支建立急性心肌缺血模型 , 40只健康家兔平均分为假手术组、模型组、丹参对照组与甘木通
不同剂量组。 甘木通组分别给予浓度为 100%的甘木通提取液灌胃 (剂量分别为 1 ml /kg和 2
ml /kg ) ,连续 5d,丹参对照组于缺血前从耳缘静脉注射给药 ( 0. 2 mg /kg )。记录心肌缺血前后标
准肢体Ⅱ导联心电图 ,测定血清乳酸脱氢酶 ( LDH)、肌酸激酶 ( CK)、超氧化物歧化酶 ( SOD)活性
与脂质过氧化物丙二醛 ( MDA)的含量。结果:与模型组相比 ,甘木通提取物可明显对抗结扎家兔
冠状动脉左前降支引起的急性心肌缺血时心电图 S-T段的异常偏移及 T波抬高 ,减慢心率 ;显
著降低血清 LDH、 CK水平及 MDA含量和升高 SOD水平 (P < 0. 05或 P < 0. 01)。结论:甘木通
提取物对家兔急性心肌缺血有明显的保护作用。
　　主题词　心肌缺血 /病理生理学　乳酸脱氢酶 /血液　肌酸激酶 /血液　@甘木通　动物 ,实
验　大鼠
　　【中图分类号】　 R541　【文献标识码】　 A　【文章编号】　 1000-7377( 2010) 04-0393-03
Propective effects of extract of clematis f ilamentosa dunn on
myocardial ischemia in rabbits
Yingdong Bioengineering Schoo l o f Shaoguan Col leg e( Shaoguan 512005)
Hu Zong li　 Huang Xiaoping　 Chen Junxia
　　 ABSTRACT　 Objectiv e: To obse rve the effects o f ex tract o f Clematis filam ento sa Dunn ( CFD) on
acute myoca rdial ischemia in rabitts. Methods: The acute myocardia l isch emia model in rabbit was established by
lig ating the lef t anterio r descending branch o f co rona ry ar tery ( LAD) . 40 rabbits w ere div ided into the model
gr oup, sham g roup , C FD g roup and Salv iae M iltio r rhi zae g roup ( SM ) . The rabbits w er e administra ted CFD
( 1. 0 g /kg o r 2. 0 g /kg, ig ) fo r 5 day s in CFD g roup, and the SM g roup was administra ted SM injection ( 0. 2 mg /
kg , iv ) befor e liga ting LAD. The mind-lead ECG II w as described, and the lev els o f lactate dehydrogena se
( LDH) , creatine kinase ( CK ) , supero xide dismuta se ( SOD) and ma londia ldeh yde ( M DA) in serum w ere
dete rminated. Results: In CFD g roup, the ECG II wa s improved significantly, and the lev els o f LDH, CK and
MDA w ere decresed ma rkedly , w hile the SOD was increased obv iously ( compa red with the model g r oup, P < 0.
05 o r P < 0. 01) . Conclusion: Th e results suggest that CFD has marked protectiv e effects on acute myocardial
ischemia in rabbits.
　　 KEY WORDS　Myocardia l ischemia /physiopa tholog y　 Lactate dehydrogenase /blo od　 Crea tine kinase /
blood　@ Clematis filamento sa dunn　 Animals, labo ro tar y　 Ra ts
　　甘木通 ( Clematis filamentosa dunn, CFD)为毛茛
科铁线莲属常绿攀援藤本植物。味甘、性微寒 ,归肝经 ,
药用茎、叶 ,具有清热平肝、镇静安神、降压等功效 ,用
于防治高血压、冠心病等疗效显著 [1 ]。本实验将进一步
观察甘木通提取物对家兔急性心肌缺血的作用 ,并探
讨其作用机制。
材料与方法
1　实验材料
1. 1　主要实验仪器: RM-6240C型四道生理信号
采集处理系统: 成都仪器厂 ; 721型分光光度计: 上海
精密科学仪器有限公司 ; H-H601型超级恒温水浴锅:
393陕西医学杂志 2010年 4月第 39卷第 4期
江苏金坛市荣华仪器制造有限公司 ; KA-1000型台式
离心机: 上海安亭科学仪器厂 ; FW177型中草药粉碎
机:天津市泰斯特仪器有限公司 ; RE-52B型旋转蒸发
器:上海雅荣生化设备仪器有限公司。
1. 2　 实验药品与试剂:甘木通药材由广东雷霆
国药有限公司提供 ,并经广东省韶关市药品检验所江
兰英主任中药师鉴定 ;丹参注射液:辅仁药业集团有限
公司 (批号: 071112,规格: 0. 2 mg /ml ) ;乳酸脱氢酶
( LDH)试剂盒 (批号: 20070122)、肌酸激酶 ( CK)试剂
盒 (批号: 20070123)、超氧化物歧化酶 ( SO D)试剂盒
(批号: 20070123)、丙二醛 ( MDA )试剂盒 (批号:
20070122):均由南京建成生物工程研究生产 ;无水乙
醇 (分析纯 ):天津市永大化学试剂开发中心 ;乌拉坦
(化学纯 ):上海国药集团化学试剂有限公司。
2　 实验方法
2. 1　 甘木通提取物的制备:甘木通干燥茎叶粉
碎后过 60目筛 ,精确称取甘木通药材粉末 1 000 g分
批置于烧瓶内 ,第一次加 15倍量 ( W /V ) 70%乙醇于
90℃加热回流提取 1 h,抽滤 ,残渣继续加 10倍量
70%乙醇提取 2次 ,合并 3次滤液减压浓缩回收至无
醇味 ,将浓缩液转移到 1 000 m l容量瓶中 ,加蒸馏水至
刻度 ,即得每 1 m l含 1 g生药的提取液 ,冷藏备用。
2. 2　 实验模型的建立 [2 ]与分组: 家兔 (由本院动
物疫病研究所提供 )用 20%乌拉坦静脉注射 ( 2 ml /kg )
麻醉后记录标准肢体Ⅱ导联心电图 ,筛选心电图正常
的家兔 ,体重 2. 3～ 2. 8 kg ,雌雄不限。 40只被选家兔
平均分为对照组、假手术组、丹参组、 CFDⅠ 组和 CFD
Ⅱ组 , CFDⅠ 组和 CFDⅡ组用浓度为 100%的提取物
灌胃 (剂量分别为 1 ml /kg和 2 ml /kg ) , 2次 /d,连续
5d。 第 5d灌胃后 ,家兔麻醉、固定 ,从胸骨中线切开皮
肤 ,从胸骨左侧第 1～ 3肋间开胸 ,小心剪开心包膜 ,暴
露心脏 ,用圆形无创缝合针将 6 /0丝线于左心耳下方
左冠状动脉前降支 ( LAD) 3 mm处肌层穿过并结扎
(假手术组只穿线不结扎 ) ,丹参组于结扎前从耳缘静
脉注射给药 ( 0. 2 mg /kg ) ,假手术组和模型对照组给
予生理盐水 ( 1 ml /kg )。以标准肢体Ⅱ导联心电图 S-T
段抬高 0. 1 mV或 T波高耸、心肌颜色变暗为结扎成
功的标志。记录结扎前及结扎后Ⅱ导联心电图。60 min
后 ,立即从左心室取血 , 3 000 r /min离心 10 min分离
血清置冰箱保存待测。
2. 3　 观测指标:计算 LAD结扎前、后不同时间
Ⅱ导联心电图 S-T段偏移、 T波幅度的变化 ( mV )及心
率 ;同时严格按照试剂盒说明进行操作 ,测定血清
LDH、 CK、 SOD、 MDA水平 ,评价 CFD的作用。
3　统计学处理　实验数据以均数±标准差 (x-±
s )表示 ,进行方差分析和组间 t检验 ,以 P < 0. 05为有
显著性差异。
结　果
1　 甘木通提取物对心肌缺血家兔Ⅱ导联心电图
的影响　 与假手术组比 ,模型组家兔心电图 S-T段显
著偏移 , T波幅度显著升高 ,心率明显加快 ( P < 0.
01)。上述指标在甘木通不同剂量组和丹参组均有明显
改善 (与模型组相比 , P < 0. 05或 P < 0. 01) ,但仍显著
高于缺血前 ,甘木通组与丹参对照组间无明显差异 ,结
果见表 1～ 3。
表 1　 甘木通提取物对心肌缺血家兔心电图 S-T段偏移 ( mV)的影响 (x-± s ,n = 8)
组　别 剂量 缺血前 缺血 10min 缺血 30min 缺血 60min
假手术组 生理盐水 0. 041± 0. 018 0. 039± 0. 016 0. 042± 0. 017 0. 047± 0. 028
模型组 生理盐水 0. 038± 0. 016 0. 371± 0. 125※ 0. 817± 0. 167※ 0. 724± 0. 203※
CFDⅠ 组 1g /kg 0. 045± 0. 027 0. 243± 0. 122# 0. 629± 0. 124# 0. 473± 0. 192△
CFDⅡ组 2g /kg 0. 044± 0. 017 0. 201± 0. 112△ 0. 484± 0. 131△ 0. 411± 0. 177△
丹参组 0. 2mg /kg 0. 036± 0. 014 0. 186± 0. 098△ 0. 433± 0. 122△ 0. 358± 0. 129△
　　　注: 与假手术组比※P < 0. 01;与模型组比# P < 0. 05,△ P < 0. 01
表 2　甘木通提取物对心肌缺血家兔心电图 T波幅度 ( mV )的影响 ( x-± s ,n = 8)
组　别 剂量 缺血前 缺血 10min 缺血 30min 缺血 60min
假手术组 生理盐水 0. 148± 0. 027 0. 144± 0. 019 0. 155± 0. 024 0. 139± 0. 031
模型组 生理盐水 0. 124± 0. 012 0. 433± 0. 037※ 0. 374± 0. 069※ 0. 328± 0. 088※
CFDⅠ 组 1g /kg 0. 136± 0. 021 0. 198± 0. 032# 0. 189± 0. 018# 0. 194± 0. 045#
CFDⅡ组 2g /kg 0. 157± 0. 016 0. 217± 0. 045# 0. 205± 0. 037# 0. 199± 0. 031#
丹参组 0. 2mg /kg 0. 133± 0. 032 0. 225± 0. 033# 0. 212± 0. 021# 0. 206± 0. 046#
　　注: 与假手术组比※P < 0. 01;与模型组比# P < 0. 01
394 陕西医学杂志 2010年 4月第 39卷第 4期
表 3　甘木通提取物对心肌缺血家兔心率 (次 /min)的影响 ( x-± s ,n = 8)
组　别 剂量 缺血前 缺血 10min 缺血 30min 缺血 60min
假手术组 生理盐水 236. 7± 43. 4 246. 1± 35. 1 232. 5± 43. 7 241. 4± 38. 3
模型组 生理盐水 244. 2± 26. 4 362. 4± 56. 4※ 371. 3± 49. 3※ 366. 2± 40. 4※
CFDⅠ 组 1g /kg 241. 8± 29. 6 287. 7± 32. 6△ 284. 3± 33. 1△ 277. 3± 33. 4△
CFDⅡ组 2g /kg 256. 5± 32. 5 274. 5± 27. 7△ 268. 8± 45. 8△ 251. 4± 46. 6△
丹参组 0. 2mg /kg 248. 3± 28. 3 312. 2± 44. 6# 291. 2± 36. 5△ 292. 8± 41. 1△
　　注: 与假手术组比※P < 0. 01;与模型组比# P < 0. 05,△ P < 0. 01
　　 2　甘木通提取物对心肌缺血家兔血清 LDH、
CK、 SOD活性及 MDA含量的影响　 模型组家兔血
清 LDH、 CK和 SOD水平显著降低 ,而 MDA水平显
著升高 (与假手术组比 P < 0. 01)。甘木通不同剂量组
和丹参组均能明显降低心肌缺血家兔血清 LDH、 CK
和 MDA水平 ,升高 SOD水平 (与模型组相比 P < 0.
05或 P < 0. 01) ,而且甘木通高、低剂量组与丹参组无
明显差异 ,结果见表 4。
表 4　甘木通提取物对心肌缺血家兔血清 LDH、 CK、 SOD与 MDA的影响 (x-± s ,n= 8)
组　别 剂量 LDH( U /L ) CK ( U /L ) SOD( U /ml) MDA( nmol /ml)
假手术组 生理盐水 2155. 3± 647. 4 82. 8± 19. 4 247. 5± 33. 7 2. 48± 0. 82
模型组 生理盐水 4047. 5± 832. 3※ 151. 4± 30. 2※ 118. 3± 25. 3※ 6. 34± 1. 32※
CFDⅠ 组 1g /kg 3217. 4± 524. 1# 116. 6± 32. 1# 158. 1± 20. 2# 4. 43± 1. 46#
CFDⅡ组 2g /kg 2856. 1± 735. 5△ 104. 5± 27. 2△ 184. 8± 32. 8△ 3. 18± 1. 21△
丹参组 0. 2mg /kg 2648. 3± 728. 3△ 98. 2± 24. 7△ 191. 2± 36. 5△ 2. 98± 1. 37△
　　注: 与假手术组比* P < 0. 01;与模型组比# P < 0. 05,△ P < 0. 01
讨　论
大量的研究证实 ,心肌缺血时使心肌氧自由基大
量产生 ,而清除氧自由基的酶 SOD活性下降 ,导致氧
自由基在体内堆积 ,羟自由基生成增加 ,对心肌细胞膜
产生脂质过氧化作用 [ 3, 4] ,膜脂质过氧化产物 MDA增
高 ,破坏了细胞膜的结构和功能 ,使膜流动性下降通透
性增加 ,加速了心肌细胞损害程度 [5 ]。 心电图 ST段及
T波常用来反映心肌的缺血程度 [6, 7 ] ;血浆及心肌组织
中 LDH、 CK活性增加被认为是心肌细胞损伤最敏感
的指标 ,心肌酶释放入血的多少与心肌坏死程度呈正
相关 [ 8] ,因此测定心电图 ST段的偏移幅度、 T波的幅
度以及血清酶活性对于判断心肌缺血损伤的程度和范
围具有一定的参考价值 [2, 3, 8 ]。本实验结果显示 ,甘木
通提取物能明显降低急性心肌缺血家兔心电图 ST段
的偏移及 T波幅度 ,明显改善心肌缺血心电图 ,并能
显著降低心肌缺血家兔血清 LDH、 CK及 MDA水平 ,
明显升高血清 SOD水平 ,表明甘木通提取物通过提高
自由基清除能力对结扎家兔冠脉致心肌缺血发挥保护
作用 ,其确切的有效成份有待进一步研究。
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(收稿: 2009-06-23)
395陕西医学杂志 2010年 4月第 39卷第 4期