全 文 ：文章编号:1001 － 4829(2012)01 － 0343 － 03
收稿日期:2011 － 03 － 04
基金项目:云南省农业科学院基金资助项目“乡土园林树种—
栒子资源的开发利用研究”
作者简介:毕海林(1979 －) ，男，云南巍山人，助理研究员，主要
从事植物组织培养研究，* 为通讯作者，E-mail:enleiyin@ 163．
com。
黄杨叶栒子组织培养与快速繁殖技术研究
毕海林 ，和加卫 ，杨正松 ，杨洪涛 ，和文佳 ，李 燕*
(云南省农业科学院高山经济植物研究所，云南 丽江 674100)
摘 要:采用组织培养技术，以幼嫩茎段为接种外植体，对黄杨叶栒子进行快速繁殖研究。结果表明，1 /2 MS + 6-BA 1． 0 mg /L +
IBA 0． 1 mg /L为黄杨叶栒子较佳的启动培养基，MS + 6-BA 1． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L 为较佳的增殖培养基，在生根阶段，以 1 /2
MS + IBA 2． 0 mg /L + NAA 0． 5 mg /L为较佳培养基，一定量的 IBA和 NAA互作时，黄杨叶栒子的生根率最高，生根时间最短。
关键词:黄杨叶栒子;幼嫩茎段;组织培养;生根
中图分类号:Q949 文献标识码:A
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Cotoneaster buxifolius
BI Hai-lin，HE Jia-wei，YANG Zheng-song，YANG Hong-tao，HE Wen-jia，LI Yan*
(Institute of Alpine Economic Plant，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Yunnan Lijiang 674100，China)
Abstract:The techniques of tissue culture and rapid propagation on Cotoneaster buxifolius were studied by using young stem with single bud
as explants． The results showed that the initiating medium was 1 /2 MS + 6-BA 1． 0 mg /L + IBA 0． 1 mg /L，the subculture medium was MS +
6-BA 1． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L ，the rootage medium was 1 /2MS + IBA 2． 0 mg /L + NAA 0． 5 mg /L and rooting rate was the highest and
rooting time was the shortest for Cotoneaster buxifolius when some measure of IBA and NAA interacted in the medium．
Key words:Cotoneaster buxifolius;Young stem;Tissue culture;Radication
黄杨叶栒子(Cotoneaster buxifolius)为蔷薇科
(Rosaceae)栒子属(Cotoneaster)植物，常绿至半常绿
灌木，高 1 ～ 3 m，果实红色，分布于云南、贵州、四
川、西藏等地，不丹、印度、缅甸、尼泊尔也有分布。
生长于海拔 1000 ～ 3300 m的地区，多生在多石砾坡
地及灌木丛中［1］。黄杨叶栒子是常绿小灌木，果实
红色，株形美观，夏季开出密集的花束，秋季结出艳
丽的果实，在庭园中还可以修剪成绿篱，因此可作为
一种很好的园林绿化树种。刘泽勇［2］、李晓玲［3］、
马冬菁［4］等先后对小叶栒子、平枝栒子、水栒子进
行了组织培养研究，但黄杨叶栒子的组织培养研究
尚未见报道，且黄杨叶栒子扦插极难生根。因此对
其进行组织培养快速繁殖技术研究，对保存中国的
栒子种质资源和合理开发利用具有重要的作用［5］。
1 材料与方法
1． 1 材料
黄杨叶栒子采自云南省农科院高山经济植物研
究所试验基地，以其幼嫩茎段为接种外植体。
1． 2 方法
1． 2． 1 外植体的预处理 选择生长健壮且无病虫
害的植株，将幼嫩枝条剪成 1 cm 的小段，先用洗衣
粉液浸泡 5 min，流水冲洗 1 h，然后放在超净台用
70 %酒精消毒 30 s，再用 0． 1 %升汞溶液处理，无
菌水浸洗 5 次后供接种用。
1． 2． 2 芽的诱导分化 取消毒过的外植体茎段接
种到 4 种诱导培养基上，诱导培养基见表 1。25 d
后统计外植体的污染情况。对没有污染的芽体进行
观察记录。
1． 2． 3 丛生芽的继代增殖 将初代培养的芽接种
到 8 种增殖培养基上，增殖培养基见表 2。每瓶接 4
个芽，一段时间后统计增殖系数。
1． 2． 4 生根培养及炼苗 将增殖苗接种到 8 种生
343
2012 年 25 卷 1 期
Vol. 25 No. 1
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
表 1 不同激素配比对黄杨叶栒子外植体萌发和形成愈伤组织的影响
Table 1 Effect of different combination hormones on germination and callus induction of explants of Cotoneaster buxifolius
培养基 Medium
培养基
Medium
6-BA
(mg /L)
IBA
(mg /L)
接种数
No． of
explants
inoculated
萌发数
No． of
germination
成愈数
No． of
callus induction
愈伤组织生长情况
Condition of callus growth
1 /2MS 0． 5 0 20 17 5 很少部分芽体基部长有淡黄绿色愈伤组织
1 /2MS 0． 5 0． 1 20 18 19 绝大多数芽体基部长有淡黄绿色愈伤组织
1 /2MS 1． 0 0 20 20 4 很少部分芽体基部长有淡黄绿色愈伤组织
1 /2MS 1． 0 0． 1 20 20 20 全部芽体基部长有淡黄绿色愈伤组织
根培养基中。生根培养基见表 3。每瓶接 20 苗，观
察记录生根时间，一段时间后统计生根率。
1． 2． 5 培养条件 培养温度为 23 ℃，光照强度为
1500 lx，光照时间为 12 h /d，培养基 pH5． 8。
2 结果与分析
2． 1 不同激素配比对黄杨叶栒子外植体萌发和形
成愈伤组织的影响
由表 1 可看出，加有 1． 0 mg /L 6-BA 的培养基
中，外植体均萌发;而加有 0． 5 mg /L 6-BA的培养基
中，绝大多数外植体都萌发，而极少数外植体虽然没
有坏死，但茎段上的腋芽没有伸开。因此，较高浓
度的细胞分裂素更有利于黄杨叶栒子外植体的萌
发。另外，加有 0． 1 mg /L IBA 的培养基中，绝大多
数茎段基部都形成少量淡黄绿色愈伤组织，而未加
IBA的培养基中，只有极少数茎段基部形成愈伤组
织。在以后的继代培养中发现，芽体基部形成的少
量愈伤组织有利于丛生芽的分化。但形成的愈伤组
织不宜太大，若基部形成的愈伤组织过多，不利于丛
生芽的分化。因此生长素要适量，不宜过高。
2． 2 不同激素浓度对黄杨叶栒子增殖的影响
由表 2 可看出，细胞分裂素 6-BA浓度较低时，
表 2 不同浓度 6-BA和 IBA对黄杨叶栒子增殖的影响
Table 2 Effect of different combinations 6-BA and IBA on multiplication of Cotoneaster buxifolius
培养基 Medium
培养基 Medium 6-BA(mg /L) IBA(mg /L)
接种数
No． of
inoculation
增殖系数
Proliferating
coefficient
芽分化及生长情况
Differentiation and
growth of buds
MS 0． 5 0． 1 20 2． 1 芽基部长出较疏松的淡黄色愈伤组织
MS 1． 0 0． 1 20 3． 0 芽基部长出较疏松的黄绿色愈伤组织
MS 1． 5 0． 1 20 5． 2 芽基部长出较紧密的黄绿色愈伤组织
MS 2． 0 0． 1 20 3． 1 芽基部长出紧密的黄绿色愈伤组织
MS 0． 5 0 20 2． 0 芽基部长出少量黄绿色愈伤组织
MS 1． 0 0 20 2． 8 芽基部长出极少量愈伤组织
MS 1． 5 0 20 4． 5 芽基部基本不长愈伤组织
MS 2． 0 0 20 3． 0 芽基部基本不长愈伤组织
表 3 不同激素配比对黄杨叶栒子生根的影响
Table 3 Effect of different combinations hormones on radication of Cotoneaster buxifolius
培养基 Medium
培养基 Medium IBA(mg /L) NAA(mg /L)
生根时间(d)
Rooting time
生根率(%)
Rooting rate
1 /2MS 0． 5 0 48 65． 6
1 /2MS 1． 0 0 45 73． 3
1 /2MS 2． 0 0 39 82． 0
1 /2MS 3． 0 0 42 79． 6
1 /2MS 0． 5 0． 5 40 74． 5
1 /2MS 1． 0 0． 5 38 83． 6
1 /2MS 2． 0 0． 5 28 89． 3
1 /2MS 3． 0 0． 5 30 86． 6
443 西 南 农 业 学 报 25 卷
增值系数较低，随着细胞分裂素浓度的增高，增值系
数随之增高，但高到一定程度时，增殖系数又会明显
降低。说明较高浓度的细胞分裂素会抑制黄杨叶栒
子的增殖。而在相同浓度的细胞分裂素中，加入适
量生长素 IBA，增值系数会略有升高，说明一定量的
生长素会促进黄杨叶栒子的增殖。但观察发现，加
有生长素的培养基中，芽体基部形成的愈伤组织较
多，如果较多的愈伤组织很难分化成芽时，会阻碍黄
杨叶栒子的增殖。因此，在黄杨叶栒子的增殖中，细
胞分裂素 6-BA和生长素 IBA 对黄杨叶栒子增殖有
显著影响，当 6-BA浓度为 1． 5 mg /L 和 IBA 浓度为
0． 1 mg /L时，黄杨叶栒子的增殖系数最高。
2． 3 不同激素配比对栒子生根的影响
由表 3 可看出，IBA 和 NAA 浓度较低时，生根
率较低;随着激素浓度的增加，生根率也随之增高，
但激素浓度高到一定程度时，生根率又会明显降低。
说明较高浓度的激素会抑制黄杨叶栒子的生根。当
IBA浓度相同时，加有一定量的 NAA 在培养基中，
生根率会高的多，说明一定量的 IBA和 NAA互作会
显著促进黄杨叶栒子的生根。而且，不同浓度的生
长素对黄杨叶栒子生根时间和生根率的影响是一致
的。培养基中生长素浓度较低时，黄杨叶栒子需要
较长时间才能生根，随着生长素浓度的增高，生根时
间缩短。当一定量的 IBA和 NAA互作时，黄杨叶栒
子的生根时间最短，为 28 d 左右。因此，在黄杨叶
栒子的生根阶段，生长素对黄杨叶栒子生根有显著
影响，且对生根时间和生根率的影响是一致的。当
IBA浓度为 2． 0 mg /L，NAA 浓度为 0． 5 mg /L 时黄
杨叶栒子的生根率最高，达 89． 3 %，生根所需时间
最短，但为 28 d左右。
2． 4 栒子试管苗的炼苗及移栽
当根长至 1 cm 左右，把试管瓶移到室温条件
下，3 d后微开瓶，再过 2 d 后全开瓶，3 d 后进行炼
苗移栽。移栽前，以草炭土作为苗床基质，用消毒剂
将苗床进行消毒。移栽时尽量剪去叶片，移栽后要
注意保持空气湿度，尽可能保证温度，遮荫养护后，
成活率可达 90 %以上。
3 讨 论
栒子属很多种都可利用硬枝扦插来繁殖，但黄
杨叶栒子扦插极难生根。本试验中，黄杨叶栒子难
生根的特性也进一步得到了验证。在植物组织培养
中，很多植物在生根培养阶段都容易诱导生根，且 7
～ 10 d就能长出根原基。但在本实验中，黄杨叶栒
子在最适宜的生根培养基中，需 28 d 左右才长出根
原基，在其它配方的培养基中，最长需要 46 d 左右
才长出根原基。由此可见，黄杨叶栒子的确较难生
根，因此其不适宜扦插繁殖。本实验结果表明，黄杨
叶栒子的启动阶段，以 1 /2 MS + 6-BA 1． 0 mg /L +
IBA 0． 1 mg /L为较佳的启动培养基。在增殖阶段，
细胞分裂素和生长素的配比要适量，以 MS + 6-BA
1． 5 mg /L + IBA 0． 1 mg /L为较佳的增殖培养基，一
定量的生长素会促进黄杨叶栒子的增殖。在生根阶
段，不同浓度的生长素对黄杨叶栒子生根时间和生
根率的影响是一致的。生根培养以 1 /2 MS + IBA
2． 0 mg /L + NAA 0． 5 mg /L 为较佳培养基。一定量
的 IBA和 NAA 互作时，黄杨叶栒子的生根时间最
短，但需 28 d左右才长出根原基，且根较少。
参考文献:
［1］中国科学院昆明植物研究所． 云南植物志(第十二卷) ［M］． 北
京:科学出版社，2006． 328 － 329．
［2］刘泽勇，孙朝晖，曾春凤．小叶栒子的组织培养［J］．植物生理学
通讯，2005，41(3) :338．
［3］李晓玲，李毅丹．平枝栒子的组织培养和快速繁殖［J］．植物生理
学通讯，2006，42(3) :476．
［4］马冬菁，叶景丰，陈 罡，等．水栒子的组织培养与快速繁殖［J］．
植物生理学通讯，2008，44(1) :134．
［5］刘玉冬，刘艳军，杨静慧，等．栒子组织培养快繁技术研究［J］．
安徽农业科学，2009，37(9) :3947 － 3948．
［6］莫磊兴，李小泉，林贵美，等．火鹤花离体培养育苗技术研究［J］．
西南农业学报，2003，16(1) :126 － 128．
［7］谭和平，余桂容，杜文平，等． 不同茶树品种组培快繁技术研究
［J］．西南农业学报，2003，16(1) :102 – 104．
［8］孙雁霞，林桂芸，王跃华，等． 川厚朴愈伤组织培养的初步研究
［J］．西南农业学报，2004，17(2) :228 － 230．
［9］皮 伟，李名扬，郑 丽．草地早熟禾组织培养研究［J］．西南农
业学报，2004，17(2) :267 － 270．
［10］孟静静，李 慧，宋旭丽，等． 红莓组织培养及快速繁殖技术
［J］．西南农业学报，2010，23(6) :2155 － 2157．
(责任编辑 王家银)
5431 期 毕海林等:黄杨叶栒子组织培养与快速繁殖技术研究