全 文 ：江苏农业学报(Jiangsu J． of Agr． Sci．) ，2011，27(1) :226 ～ 227
周广生，张步彩，王永娟，等． 垂花香薷注射液接种鸡胚抗鸡新城疫病毒研究［J］．江苏农业学报，2011，27(1) :226-227．
垂花香薷注射液接种鸡胚抗鸡新城疫病毒研究
周广生， 张步彩， 王永娟， 王海燕， 刘玉华， 刘 莉， 郭方超
(江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏 泰州 225300)
收稿日期:2010-04-17
作者简介:周广生(1953-) ，男，江苏泗阳人，研究员，主要从事动物疫
病防治教学与研究。(Tel)13914543330;(E-mail)zgs5566
@ 126． com
关键词: 垂花香薷注射液;鸡新城疫病毒;鸡胚接种;血凝试验
中图分类号: S858． 31 文献标识码: A 文章编号: 1000-4440(2011)01-0226-02
Antiviral activity of Elsholtzia pmdulifora against Newcastle disease virus
by injecting liquid into chicken embryo
ZHOU Guang-sheng， ZHANG Bu-cai， WANG Yong-juan， WANG Hai-yan， LIU Yu-hua， LIU Li，
GUO Fang-chao
(Jiangsu College of Animal Husbandry and Veterinary，Taizhou 225300，China)
Key words: injection liquid of Elsholtzia pmdulifora;Newcastle disease virus; chicken embryo inoculation;
haemagglutination test
鸡新城疫是由新城疫病毒———禽副黏病毒血清 1 型病
毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，常呈败血症经
过，主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜
出血。发病率和死亡率高，是目前为害养鸡业比较严重的传
染病之一［1］。几十年来，本病主要采取预防接种来控制流
行，免疫效果比较好，但免疫程序不正确或疫苗保管不当时，
往往导致免疫失败而使鸡发病［2］。新城疫发生后，抗生素、
磺胺类药品无治疗作用。利巴韦林对鸡新城疫病毒有一定
作用，但效果也不是太理想，严重制约了养禽业的发展［3］。
本试验为了探讨垂花香薷注射液对鸡新城疫的治疗效果，进
行了垂花香薷注射液抗新城疫病毒的体外抑制试验［4］，旨
在为临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
1． 1． 1 试验鸡胚 SPF 鸡胚，购于山东省农业科学院家禽
研究所。
1． 1． 2 新城疫毒株 国内标准强毒株 F48E9，由哈尔滨兽医
研究所提供。
1． 1． 3 药品 中药垂花香薷 1 000 g 用水浸泡，煎煮 2 次，
合并煎液浓缩至稠状，加 95%乙醇沉淀 2 次，每次沉淀 48 h，
回收乙醇，将药液浓缩至 1 000 ml。垂花香薷注射液由江苏
畜牧兽医职业技术学院研制。利巴韦林注射剂由济南利民
制药有限公司生产，配成 0. 05 g /ml浓度。生理盐水注射液
由安徽双鹤药业有限责任公司生产。
1． 1． 4 1%鸡红细胞悬液的制备 无菌采鸡血加抗凝剂，离
心去血浆，沉淀用生理盐水洗涤 3 次，每次 2 000 r /min离心
10 min，然后去掉上清液，红细胞用生理盐水配成 1%的红细
胞悬液。
1． 2 试验分组
10 日龄鸡胚 124 枚，随机分成 2 组:第 1 组为药物毒性
试验，分为 5 小组，每小组 4 枚鸡胚，重复 3 次;第 2 组为垂
花香薷注射液对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用试验，分为 4
小组，每小组 16 枚鸡胚。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 半数致死量测定 将病毒尿囊液稀释不同倍数，接
种 SPF鸡胚，得出胚胎半数致死量。经过测定，鸡胚病毒尿
囊液半数致死量的稀释度为 1∶ 10 000 000，正式试验接种
稀释度用 1∶ 5 000 000的尿囊液。
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1． 3． 2 药物毒性试验 将垂花香薷注射液用生理盐水作 2
倍、3 倍、5 倍稀释，将中药注射液原液及不同浓度的药液各
接种于 4 枚 10 日龄鸡胚的尿囊液中，每只 0. 2 ml，置 37 ℃
恒温箱孵育 72 h，每天观察鸡胚存活情况，全部存活的最高
药物浓度为正式试验的起始浓度。同时以注射生理盐水为
对照组。
1． 3． 3 垂花香薷注射液对鸡新城疫病毒增殖的抑制试验
分为 4 组:Ⅰ组，病毒尿囊液 0. 1 ml，垂花香薷注射液 0. 2
ml;Ⅱ组，病毒尿囊液 0. 1 ml，西药利巴韦林 0. 2 ml;Ⅲ组，病
毒尿囊液 0. 1 ml，生理盐水 0. 2 ml;空白对照组，不接种病毒
尿囊液，不给药。病毒尿囊液接种浓度为 1∶ 5 000 000，中
药垂花香薷注射液接种浓度为原液。
上述鸡胚在 37 ℃恒温箱中孵育，每天照蛋 2 ～ 3 次，弃
去 24 h内死胚。收取 24 ～ 72 h死胚和 72 h活胚尿囊液，低
温保存备用。以血凝(HA)试验检测每组鸡胚尿囊液的病毒
滴度。
2 结 果
2． 1 中药注射液毒性试验
试验结果显示，接种各浓度中药注射液的鸡胚在 24 h、
48 h及 72 h后均无死亡，故用原液注射液为正式试验的起
始浓度。
2． 2 垂花香薷注射液对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用
Ⅰ组鸡胚在 24 ～ 72 h 死亡 4 枚，至 72 h 存活 12 枚，鸡
胚发育正常，无出血。收集 4 枚死亡鸡胚与 12 枚存活鸡胚
尿囊液，经检测 HA滴度均为 0。
Ⅱ组鸡胚在 24 ～ 72 h 死亡 10 枚，至 72 h 存活 6 枚，鸡
胚发育不良，全身弥漫性出血。收集 10 枚死胚尿囊液与 6
枚存活的鸡胚尿囊液，经检测 HA滴度为 6lg2。
Ⅲ组鸡胚在 24 ～ 72 h 内死亡 16 枚，鸡胚发育不良，全
身弥漫性出血。收集 16 枚鸡胚尿囊液，经检测 HA 滴度
为 8lg2。
Ⅳ组在 72 h内无鸡胚死亡，鸡胚发育正常，无出血。收
集所有活胚尿囊液，经检测 HA滴度为 0。
3 讨 论
本试验用的垂花香薷中药，是唇形科香薷属植物
Elshallzia pmdulifora W． W． Snith 的全草，生于海拔1 100 ～
2 400 m的湿润肥沃土壤、山谷边、开矿山坡、荒地、林缘或灌
丛间［5］。分布于云南省东南部、南部或西部等地［6］。现代
药学研究表明，垂花香薷有抗炎、抗菌、抗病毒等作用。现代
医学应用对垂花香薷研究较少，动物医学方面研究就更
少［7］。本试验结果表明，中药垂花香薷注射液对鸡胚无毒
性作用。垂花香薷注射液与鸡新城疫病毒同时接种鸡胚，能
完全抑制病毒在鸡胚中增殖。
参考文献:
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722周广生等:垂花香薷注射液接种鸡胚抗鸡新城疫病毒研究