全 文 ：37%。
结　果　白及提取纯化的最佳工艺为: 提取溶剂为
p H= 8. 5的碱水 ,三次提取固液体积比 ( W /V )为 1∶ 6∶ 5
∶ 5,温度为 90℃ ,提取时间为 3∶ 3∶ 2h;提取溶液过 LSA
- 21柱 ,加入 2. 5g ( N H4) 2CO3除去 Ca2+ ,过滤 ;用盐酸脱
蛋白 ,过滤 ,再加入 0. 5%的活性炭进行脱色 ,过滤 ;再用 4
倍量的乙醇沉淀 3次 ,最后用 80%乙醇洗渣 ,真空干燥后 ,
研磨得白色松散状粉末 ,测定多糖含量为 81. 37%。
讨　论　白及多糖由于其既是药物活性成分也是安
全的生物可降解的药用高分子材料 ,因而具有较大的应
用前景与研究价值。 但在研究与应用中往往由于其含量
与纯度低而受到限制 ,提取白及粗多糖是分离和纯化白
及多糖的关键 ,从实验结果看 ,将白及用本实验所确定的
最佳工艺提取后 ,经过 LAS- 21树脂柱等操作步骤纯化
后 ,其样品中多糖的含量可达 80%以上。说明采用本实验
所确定的提取工艺可以得到高纯度高含量的白及多糖 ,
以促进白及多糖的应用与研究。
参考文献
[ 1]　王　军 ,王春宏 ,任小玲等 . 白及胶的临床应
用 . 中国医院药学杂志 , 2004, 24( 9): 556-557
[ 2 ]　悦随士 .白及甘露聚糖的毒性研究 .中国实验
方剂学杂志 , 2003, 9( 1): 63-64
(收稿 2006-10-28;修回 2006-11-08)
草乌叶煎煮时间、给药剂量与解热功效的相关性研究*
张　宏　上海第二军医大学药学院 ( 200433)
余成浩　彭　成△　成都中医药大学 ( 610075)
　　摘　要:目的:研究草乌叶煎煮时间、给药剂量与解热功效的相关性 ,确定药物发挥功效
的最佳煎煮时间和给药剂量。方法:根据草乌叶清热解毒的功效 ,选择大鼠 2, 4-
二硝基苯酚发热模型 ,运用均匀设计和回归分析与药理实验相结合的方法 ,确
定草乌叶发挥解热作用的最佳煎煮时间和给药剂量。 结果:草乌叶能显著降低
2, 4- 二硝基苯酚所致发热大鼠的体温 ,草乌叶发挥解热功效的最佳时间为
6h,给药剂量为 0. 96g /kg。结论: 草乌叶具有显著的解热降温作用 ,解热作用与
煎煮时间、给药剂量显著相关。
　　主题词:乌头 /化学　乌头碱 /分析　乌头碱 /药理　　出率　煎药法
　　草乌叶 ( Fo lium Aconiti Kusne zo ffii I)为毛茛科乌头
属植物北乌头 Aconitum kusnezo ffii Reichb.的干燥叶 ,具
有清热解毒的作用 ,为蒙医常用药物 ,因其有毒 ,临床常
有中毒发生。影响草乌叶毒性和药效发挥的因素很多 ,其
中以煎煮时间和药物剂量最为重要。 煎煮时间应多久 ,药
物剂量应多大 ,才能保证乌头类有毒药物最佳功效的发
挥而又不致中毒? 对此 ,我们应用均匀设计方法进行了一
系列乌头类有毒药物煎煮时间、给药剂量与药物功效的
相关性研究 ,现将草乌叶解热功效与煎煮时间、给药剂量
的相关性研究报道如下。
1　实验材料
1. 1药物　草乌叶: 受试药物 ,购自成都荷花池市场 ,
经 本校生药 鉴定教研 室鉴定为 北乌头 Aconitum
kusnezoffii Reichb.的干燥叶 ,当年采收。 参见 2000年版
△通讯作者: 彭成 ,博士生导师。
* 基 金项 目: 国 家 自 然科 学 基 金 重点 项 目
( 30230410) ;教育部新世纪优秀人才支持计划 ( NCET-
04-0911) ;四川省重点基础研究项目 ( 04JY029-005)
《中华人民共和国药典》制剂通则项 ,以 3倍量水浸泡
30min,加至 10倍量水煎煮 ,煎煮时间分别取煮沸后
15min、 30min、 1h、 2h、 3h、 4h、 6h 7个时间点 ,煎煮完毕均
减压浓缩为每 ml含原生药 1g。根据均匀设计表 ,草乌叶煎
煮 15min、 30min、 1h、 2h、 3h、 4h、 6h 7个时间点的给药剂量
分别取临床剂量 ( 1. 2g /60kg· d- 1 )的 24倍、 3倍、 48倍、
12倍、 1倍 、 36倍和 6倍。 临用时用蒸馏水分别配制成 4.
8% 、 0. 6% 、 9. 6% 、 2. 4% 、 0. 2% 、 7. 2% 、 1. 2%的草乌叶药
液备用。
萘普生: 阳性药物 ,成都锦华药业有限责任公司生
产。批准文号: 国药准字 H51020774。生产批号: 040707。规
格: 0. 1g× 100片 /瓶。 实验时用蒸馏水配制成 2%的药液
备用。
1. 2动物　 SD大鼠 ,雌雄不拘 ,体重 180-220g。 由成
都中医药大学实验动物研究中心提供 ,实验动物生产许
可证号: 04-11。 检疫后备用。
2　实验方法　取 SD大鼠 90只 ,以 WMZ-03型电子
温度计测定大鼠肛温作为基础体温 ,测量时将大鼠仰位
固定于鼠板上 ,待其稳定后 ,在肛温计顶端涂少许液体石
225陕西中医 2007年第 28卷第 2期
蜡 ,轻缓送入肛门 2cm ,放置 30秒待电子肛温计指针稳定
后读数。 按基础体温高低随机分为模型对照组 ( N= 10)、
阳性对照组 ( N= 10)、草乌叶 15min组 ( N= 10)、 30min组
( N= 10)、 1h组 ( N= 10)、 2h组 ( N= 10)、 3h组 ( N= 10)、
4h组 ( N= 10)、 6h组 ( N= 10) ,按组分别灌胃蒸馏水、 2%
萘普生药液、 4. 8% 、 0. 6% 、 9. 6% 、 2. 4% 、 0. 2% 、 7. 2% 、 1.
2%的草乌叶药液。给药 1小时后 ,于大鼠背部皮下注射 0.
25% 2, 4-二硝基苯酚溶液 10ml /kg (精密称取 2, 4—二硝
基苯酚 150mg ,置于 80ml生理盐水中 ,滴加 5mol /L的
NaOH溶液 ,不断搅拌 ,待药液澄明变为亮黄色 ,再加入生
理盐水至 100ml) ,分别测定造模后 30min、 60min、 90min、
120min、 150min、 180min肛温 ,以给药前后温度之差进行
组间比较。实验数据用 SPSS11. 0统计软件处理 ,回归分
析采用均匀设计 1. 0专用软件处理。
3　实验结果　模型组 2, 4- 二硝基苯酚造模后
30min体温即显著升高 , 120min达高峰 ,持续 3h。 草乌叶
除 1h组外 ,其余各给药组体温均明显降低 ,尤以 6h组显
著 ,各时间段与模型组比较均有显著或极显著性差异。经
回归分析 ,草乌叶除 30min发挥药效的最优条件为 6h, 21.
12倍外 , 60min、 90min、 120min、 150min、 180min发挥药效
的最优条件均为 6h, 48倍。结果详见表 1。
根据筛选试验回归分析 ,草乌叶煎煮 6h剂量 48倍时
效果最好。 验证结果如表 2所示。
表 1　草乌叶对 2, 4-二硝基苯酚致热大鼠体温的影响 (x-±s )
组别 动物
(只 )
剂量
( g /kg )
30min(℃ ) 60min(℃ ) 90min(℃ ) 120mi n(℃ ) 150min(℃ ) 180min(℃ )
模型组 10 蒸馏水 1. 19±0. 89 1. 40±0. 94 1. 95±1. 12 2. 09± 0. 86 1. 64± 0. 86 1. 56± 0. 76
阳性组 10 0. 2 0. 15± 0. 48* * 0. 40± 0. 79* 0. 30± 1. 00* * 0. 52± 0. 66* * * 0. 48± 0. 53* * 0. 30± 0. 49* * *
草　 15min 10 0. 48 0. 50± 0. 32* 0. 88±0. 63 0. 89±0. 76* 0. 81± 0. 95* * 0. 99± 0. 98 0. 93± 0. 90
　　 30min 10 0. 06 0. 47±0. 75 0. 33± 1. 20* 0. 45±1. 33* 0. 40± 1. 14* * 0. 39±1. 13* 0. 42± 1. 02*
　　 1h 10 0. 96 1. 10±0. 59 0. 87±0. 67 1. 43±0. 99 1. 31± 1. 10 1. 30± 1. 01 1. 21± 0. 99
乌　 2h 10 0. 24 0. 67±0. 55 0. 58±0. 85 0. 89±0. 83* 1. 34±0. 69* 0. 76±0. 73* 0. 67± 0. 69*
　　 3h 10 0. 02 0. 76±0. 69 0. 83±1. 00 0. 84±0. 81* 1. 08±0. 85* 0. 90± 0. 82 0. 85± 0. 64*
　　 4h 10 0. 72 0. 71±0. 58 0. 37± 0. 91* 0. 92±0. 81* 0. 97± 0. 86* * 0. 84± 1. 22 1. 07± 1. 34
叶　 6h 10 0. 12 0. 32± 0. 84* 0. 30± 1. 02* 0. 49± 0. 89* * 0. 61± 0. 58* * * 0. 70± 0. 48* * 0. 79± 0. 69*
　　注:与模型组比较 ,* P < 0. 05,* * P < 0. 01,* * * P < 0. 001。
表 2　草乌叶对 2, 4-二硝基苯酚致热大鼠体温的影响 (x-±s )
组别 动物
(只 )
剂量
( g /kg )
30min(℃ ) 60min(℃ ) 90min(℃ ) 120mi n(℃ ) 150min(℃ ) 180min(℃ )
模型组 10 蒸馏水 1. 19±0. 89 1. 40±0. 94 1. 95±1. 12 2. 09± 0. 86 1. 64± 0. 86 1. 56± 0. 76
草乌叶 6h 10 0. 96 0. 27± 0. 34* * 0. 33± 0. 37* * 0. 48± 0. 52* * 0. 48± 0. 45* * * 0. 53± 0. 33* * 0. 34± 0. 35* * *
　　注:与模型组比较 ,* * P < 0. 01,* * * P < 0. 001。
　　讨　论　均匀设计方法是由方开泰教授和数学家王
元于 1978年共同提出 [1 ] ,他们根据多因素多水平试验设计
的要求 ,分析了正交设计“均匀分散、整齐可比”的原理 ,认
为 “均匀分散”是试验设计的本质 ,而 “整齐可比”只是便于
数据分析 ,可以去除 ,从而可大量增加试验水平数 ,试验次
数却增加很少。 由于均匀设计具有试验次数少 (每个因素
的每个水平仅做一次试验 ) ,试验范围可调 ,可用计算机处
理等特点 ,在药学研究中应用较多 [3～ 4] ,包括提取工艺、制
剂工艺、炮制工艺以及处方筛选等 ,大大节约了研究时间
和经费。 但采用均匀设计方法进行煎煮时间、给药剂量和
药物功效的相关性研究文献报道很少。
本实验研究结果表明 ,草乌叶能明显降低发热大鼠的
体温。 经回归分析和验证试验 ,草乌叶解热作用与煎煮时
间和给药剂量显著相关 ,发挥解热功效的最佳煎煮时间为
6h ,最佳给药剂量为 0. 96g /kg ( 48倍 )。
草乌叶主要含脂溶性生物碱乌头碱 ,具有很强的毒
性 ,同时又具有较强的解热降温功效 [5] ,但其不耐热 ,加热
后极易水解。煎煮 6小时后脂溶性有毒生物碱几乎完全水
解 ,提示 ,草乌叶在最佳煎煮时间、剂量下发挥解热功效的
物质基础并非乌头碱 ,但是否就是其水解产物 ,抑或其它
成分 ,尚需进一步研究。
参考文献
[ 1]　方开泰 .均匀设计—— 数论方法在试验设计中
的应用 .应用数学学报 , 1980, 3( 4): 363
[2 ]　苏维辉 ,任结梅 .均匀设计优选无糖益脑安神颗
粒剂工艺 [ J].时珍国医国药 , 2000, 11( 5): 402
[ 3]　周燕华 ,李爱媛 ,周　芳等 .均匀试验法对肉豆
蔻炮制工艺的研究 [ J].中国中药杂志 , 1998, 23( 6): 410
[ 4]　余日跃 ,朱家谷 ,谢文光等 .均匀设计法对大承
气汤泻下作用的实验研究 .中药药理与临床 , 1999, 15( 5):
7-9
[ 5 ]　刘天培 .中国乌头对血管的作用 .药学学报 ,
1966; 13( 4): 250
(收稿 2006-10-28;修回 2006-11-08)
226 陕西中医 2007年第 28卷第 2期