全 文 ：藏药叶蒙(短尾铁线莲)有效部位的研究
马 涛 肖 品 聂 磊
(青海大学医学院药学系，青海 西宁 810001)
摘 要:目的:研究、确定短尾铁线莲抗炎的有效部位。方法 在 SD大鼠体内致成炎性病症，用短尾铁线莲提取物、齐墩果
酸粗提物对抗实验性足踝肿胀。结果 对三组实验组、对照组的数据进行分析，结果具有统计学差异(P ＜ 0． 01)。结论 短
尾铁线莲具有明显的抗炎镇痛作用，其有效部位是齐墩果酸。
关键词:短尾铁线莲;齐墩果酸
中图分类号:R291． 4 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2012)12 － 0027 － 03
藏药“叶蒙”，为毛茛科铁线莲属植物，其花白色的在
青藏高原上只有短尾铁线莲 Clematis brevicaudata DC．比较
符合藏文献的描述〔1〕，《宇妥本草》中“敛黄水”的功效与现
代医学的抗炎、镇痛相一致。本着开发藏药的目的，本文
用抗炎镇痛的药效学方法进行实验研究同时确定其有效
部位，收到满意的效果，现报道如下。
1 薄层色谱
1． 1 仪器和试剂:GOOD see － 1 薄层色谱摄影仪(上海科
哲生化科技有限公司) ;DL － 360E 型智能超声波清洗仪
(上海之信仪器有限公司) ;SHZ － III型循环水真空泵 (上
海亚荣生化仪器厂) ;95%乙醇(分析纯)、重蒸馏水、乙酸、
丙酮、甲醇、三氯甲烷均为分析纯;齐墩果酸对照品(由中
国药品生物制品检定所提供，批号:110773 － 201011) ;短尾
铁线莲对照药材(由青海省药品检验所提供) ;实验用短尾
铁线莲(购自青海省九康中藏药材市场，由中药学教授魏
全嘉鉴定)。
1． 2 实验方法
1． 2． 1 供试品溶液的制备 :对照药材与实验用药材分别
粉碎(过 80 目筛)、用石油醚脱脂，滤渣用 95%乙醇加热回
流 3 次，合并后趁热过滤，滤液减压回收乙醇，滤渣用少量
乙醇溶解，作为薄层色谱分析的点样溶液。
1． 2． 2 对照品溶液的制备:取齐墩果酸的对照品加甲醇
制成每 1mL含 1mg的溶液，作为对照品溶液。
1． 2． 3 对照药材品溶液的制备:取短尾铁线莲的对照药
材加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液，作为对照药材溶液。
1． 2． 4 薄层层析条件选择:硅胶 G 板(青岛海洋化工分
厂，规格 50 × 100) ;展开剂:三氯甲烷 －甲醇 －水(13:7:2)
的上层溶液，三氯甲烷 －丙酮 －乙酸(12:3:0． 7)的上层溶
液;显色剂:10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热至斑点显色
清晰〔2〕。
1． 2． 5 操作:硅胶 G 板:从左到右点样，用相应的展开剂
分别展开，显色剂显色。
注:左图中，从左往右点样依次是齐墩果酸对照溶液、齐墩
果酸粗提物溶液、短尾铁线莲的对照药材溶液、实验用药
材溶液;右图中，从左往右点样依次是齐墩果酸对照溶液、
齐墩果酸粗提物溶液。黑色斑点表示齐墩果酸。
1． 3 实验结果
用三氯甲烷 －甲醇 －水(13:7:2)展开剂展开的齐墩
果酸对照品、药材对照品、供试品和齐墩果酸粗提品，斑点
清晰，无拖尾现象，在紫外灯(365nm)下，对照药材斑点、供
试品斑点、粗提品斑点在与对照品斑点相同的位置上，并
显出紫蓝色，其 Rf均为 0． 54。初步鉴定结果是:短尾铁线
莲中含有齐墩果酸。
2 抗炎实验
2． 1 仪器、试剂与动物
2． 1． 1 仪器:RE － 52A 旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器
厂) ;SHZ － III型循环水真空泵 (上海亚荣生化仪器厂) ;
DL － 360E智能超声波清洗器 (上海之信仪器有限公司) ;
HH －4 数显恒温水浴锅 (国华电器有限公司) ;TD 电子天
平(余姚市金诺天平仪器有限公司) ;一次性无菌注射器
(1mL) (江西金山医疗器械有限责任公司) ;一次性无菌注
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DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2012.12.021
射器(10mL) (陕西省华秦医疗器械厂)。
2． 1． 2 试剂与动物:短尾铁线莲醇溶物混悬液、齐墩果酸
粗提物混悬液(由青海大学医学院中药实验室制作提供)、
新鲜鸡蛋 1 个、生理盐水、乙酰水杨酸(吉林省三精医药有
限责任公司，批准文号:国药准字 H22022732 ) ;无水乙醇、
三氯甲烷、吐温 80、浓盐酸均为分析纯;SD 大鼠(由青海省
地方病防治所提供，动物证号:青医动管:001 号)
2． 2 实验用短尾铁线莲成分提取:以 95%乙醇为溶剂供
试液的制备工艺 称取短尾铁线莲 400． 00g 用 3924mL95%
乙醇超声提取 2h，过滤得到乙醇提取液，对药渣进行二次
超声提取，将所得乙醇提取液与前者混合，于 60℃水浴锅
加热一个夜晚，得到烯醇提取液。用旋转蒸发仪 50℃回
流，回收乙醇，得浸膏。用三氯甲烷:乙醇 = 14:6 的混合液
作为萃取剂，对浸膏进行萃取，得到乙醇提取液、三氯甲烷
提取液和残渣(舍弃)。对三氯甲烷提取液在微热条件下
边搅拌边加热至 45℃，静置一个夜晚，加蒸馏水至 1:1，加
热蒸发除去三氯甲烷，与齐墩果酸粗提物分别用 95%乙醇
溶解，再加热蒸发，留出部分样品备用，将剩余部分加蒸馏
水至 1:1，加 1mL“吐温 80”制得混悬液。
2． 3 致炎剂制备:将新鲜鸡蛋清与蒸馏水按 1:9 混合制
得致炎剂。
2． 4 动物分组及给药:取 40 只 SD大鼠随机分为 A、B、C、
D、E5 组，分别为阴性对照组、乙酰水杨酸阳性对照组、齐
墩果酸粗提取物溶液液 LD50 的 1 /3 给药量组、乙醇提取
液 LD50 的 1 /5 给药量组、乙醇提取液 LD50 的 1 /3 给药量
组。对每组大鼠编号、称重、测量右后脚踝周长、计算给药
量。在给药 1 /2h后，对每只大鼠注射致炎剂。此后，每间
隔 15min测量同一部位的周长〔3〕。
2． 5 实验数据:实验数据见表 1。
表 1 SD大鼠右后脚踝周长变化数值(cm)
组别 原脚踝周长 致炎 15 致炎 30 致炎 45 致炎 50 致炎 75(min)
A 2． 52 0． 47 2． 50 0． 51 2． 52 0． 48 2． 49 0． 51 2． 53 0． 60 2． 52 0． 61
B 2． 61 0． 52 3． 40 1． 21 3． 31 1． 07 3． 17 0． 78 3． 12 1． 02 2． 99 0． 43
C 2． 37 0． 45 2． 80 0． 72※ 2． 75 0． 47※ 2． 61 0． 47· 2． 60 0． 49 2． 49 0． 4
D 2． 55 0． 61 2． 67 0． 57※ 2． 58 0． 41· 2． 57 0． 59· 2． 57 0． 61· 2． 57 0． 4
E 2． 63 0． 43 2． 61 0． 43· 2． 55 0． 45※ 2． 51 0． 71 2． 50 0． 77 2． 50 0． 73
注:与 A组比较，·表示 P ＜ 0． 05，具有统计学差异;※表示 P ＜ 0． 01 ，具有统计学明显差异。
2． 5 实验结果:由数据可知，短尾铁线莲乙醇提取液对
抗脚踝肿胀效果强于复方乙酰水杨酸的抗炎作用，同时也
比齐墩果酸的抗炎效果好;同一部位提取液不同的给药剂
量在抗炎效果中也起不同作用。
3 高效液相法
3． 1 仪器与材料:高效液相色谱仪(日本岛津) ，LC －
10AT泵，ZA － 100 进样器，N2000 工作站，SPD － 10A 检测
器，SY1200T超声波清洗器，ZF － 1 型三用紫外分析仪。齐
墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110773 －
200811) ，试剂除乙腈为色谱纯外，其他均为分析纯，水为
重蒸馏水。
3． 2 方法
3． 2． 1 色谱条件:色谱柱:HYPERSIL (C18 200mmx4． 6mm
，5μm) ，流动相:乙腈 － 0． 5%冰乙酸(85:20) ，流速:0．
8mL，检测波长 210nm，温度:室温。
3． 2． 2 对照品溶液的制备:精密称取齐墩果酸对照品 10．
08mg，加甲醇定容至 50mL，精密吸取 5mL，置 10mL 量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0． 45μm)滤过，取滤
液作为对照品溶液。
3． 2． 3 齐墩果酸粗提物溶液的制备:取齐墩果酸粗提物，
加甲醇定容至 50mL，精密吸取 5mL，置 10mL 量瓶中，加甲
醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0． 45μm)滤过，取滤液齐墩果
酸粗提物作为溶液。
3． 2． 4 供试品溶液的制备:取原药短尾铁线莲，研细，精密
称取，置小烧杯中，加入适量甲醇超声提取 30min，过滤，置
25mL容量瓶中，定容后摇匀，作为供试品溶液〔4〕。
3． 2． 5 标准曲线的绘制:精密吸取齐墩果酸对照品溶液 2、4、
10、16、20μL依次进样，测定峰面积，以进样量为横坐标(X)，以
色谱峰的峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得回归线方程:
y =227323． 17x －193813． 14 ，相关系数 r =0. 9978。表明齐墩果
酸在 0． 2 ～2． 0μg范围内线性关系良好。
(1)齐墩果酸对照品
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3． 3 结果:经结果对比可知:供试品与齐墩果酸对照品在
相同时间点出峰，说明可以采用高效液相色谱法鉴别出短
尾铁线莲中齐墩果酸的存在。
4 讨论
短尾铁线莲是独具高原特色的常用藏药之一。藏医
认为短尾铁线莲有“提升胃温;破穿肿瘤，托脓”的作用。
《形态比喻》记载说，“铁线莲为治寒性肿瘤良药，味辛、微
甘，功效提升胃温，治肿瘤，引黄水。”中医称该属黄花铁线
莲为铁线透骨草，具有祛风湿、止痹痛的功能，铁线莲属药
物威灵仙具有祛风除湿，通络止痛，消痰水，散癖积的作
用。威灵仙所含成分与短尾铁线莲相同，应与短尾铁线莲
具有相同作用。相关文献报道证明，木犀科植物齐墩果的
叶、女贞果实、龙胆科植物青叶胆全草、伞形科植物大星芹
的叶、根中含有相对丰富的齐墩果酸，具有抗炎、镇痛作
用〔5〕。本实验表明，短尾铁线莲中主要成分是齐墩果酸，
实验结果表明，在对抗 SD大鼠足肿胀试验中，P ＜ 0． 01，具
有统计学差异，这与藏医学中相关医学的文献记录相一
致。作为毛茛科的药用植物，短尾铁线莲分布广泛、储存
量大，是独具高原特色的藏药之一，具有良好的开发利用
价值。
参考文献
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青海人民出版社，1991． 248．
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果酸的含量〔A〕． 海口:中国热带医学，2007，07(3) :
1087 ～ 1089．
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肿胀影响的实验研究〔R〕．当代医学，2010，21(2):2．
〔4〕李梦． HPLC 法测定女贞子中齐墩果酸的含量〔A〕． 合
肥:安徽农业科学，2008，10525 ～ 10526．
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〔6〕戴岳等．齐墩果酸的抗炎作用〔J〕．北京:中国药理学与毒
理学杂志，1989，3(2):96 ．
2012 年 9 月 15 日收稿
Research on the effective parts from Clematis brevicaudata DC．
Ma Tao ，Xiao Pin ，Nie Lei
(department of pharmacy ，medical college of Qinghai University，810001)
Abstract :Objective To conduct a research on Clematis brevicaudata DC． ． and ensure the anti － inflammatory effective parts
of it ． Methods Extract of Clematis brevicaudata DC． and Oleanolic Acid were used in the pharmacodynamic experiment in which
SD rats were made as inflammatory models ． Results By analyzing the results of the three control groups and experimental group da-
tas ，statistical diversities were found(P ＜ 0，01)． Conclusion Clematis brevicaudata DC． has significant anti － inflammatory anal-
gesic effect ． And the effective part is Oleanolic Acid ．
Key words :Clematis brevicaudata DC．;Oleanolic Acid
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