全 文 ：林业科学 现代农业科技 2013年第 17期
毛茛科 （Ranunculaceae）铁线莲属 （Clematis L.）植物为
常绿或落叶攀援灌木，该属植物枝叶扶苏，花大色艳，花型
多变，花期长，园艺用途广泛，观赏价值高，是非常优良的垂
直绿化材料，可点缀于围墙、栅栏、棚架或作绿篱，同时也可
配置于假山或岩石园中彰显独特风格， 是非常优良的垂直
绿化材料。此外，还具有较高的药用价值。但是铁线莲属植
物存在结实少或萌发时间长、发芽率低等问题，不宜采用有
性繁殖，使得其园林栽培应用受到限制 [1]。里昂城（Ville de
lyon）是铁线莲属栽培观赏植物，使用组织培养技术可以快
速繁殖大量无菌组培苗，解决铁线莲属植物在常规繁育中
种子轻、成活率低、被毛等问题[2-4]。
1 材料与方法
1.1 试验材料
春季选取从欧洲引种的六年生铁线莲观赏品种里昂城
健壮无病虫害的当年生嫩茎，以其茎段、茎节、花为外植体
进行组织培养。
1.2 试验方法
将采好的材料用肥皂水浸泡 20min后用清水冲洗 30min，
再在超净工作台中用 0.1%升汞溶液中浸泡灭菌 3 min，用无
菌水清洗 4 次后进行接种。 以 MS 培养基为基本培养基，附
加不同浓度的萘乙酸（NAA）、6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）和细
胞分裂素（KT）来诱导愈伤组织和侧芽。将里昂城的外植体
接种到 MS+2 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+1 mg/L KT 培养基
中来比较不同外植体的诱导效果。将接种好的外植体放在
温度 20~22℃、光照 12 h/d 的环境中进行培养。
2 结果与分析
2.1 外植体选择
外植体的选择是进行组织培养建立无菌体系以及植株
再生的关键前提。理论上所有的植物细胞都具有“全能性”，
但要表达还是需要一定条件，除了植物生长调节剂和无机
盐外，还需要一些极端的诱导因子，涉及到细胞全能性及全
能性表达、分化和脱分化以及基因差别表达 [5-6]。因此，接种
时要选择在培养时易起反应、易进行再分化产生植株的部
位作为试验材料。试验选取不同粗细程度嫩茎探讨其对里
昂城成活率的影响。从表 1 可以看出，里昂城较细的嫩茎成
活率仅为 8.0%，而较粗嫩茎成活率达 96.7%，较细嫩茎的成
活率远小于较粗嫩茎。
2.2 愈伤组织的诱导
里昂城在接种后 4 d就有茎节发芽，第 5 天茎段和茎段
基部开始膨大，第 10 天开始长出淡黄色至绿色愈伤组织，
但愈伤组织颜色不均匀，从黄色到绿色都有而且黄色愈伤
组织较多呈颗粒状，质地较硬，生长缓慢且很少进行分化。
从表 2 可以看出，同一品种不同外植体诱导效果相差
较大。接种 30 d 后里昂城花诱导率可达 100%，而茎段和茎
节都未超过 70%，但是有 1/3的茎节长出侧芽。
2.3 愈伤组织增殖
将里昂城长出愈伤组织的茎段、茎节和花转接到 MS+
3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 和 MS+3.0 mg/L
6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L KT 中，发现其增殖很快，3 d
后就能观察到愈伤组织明显增大，第 13天愈伤组织增大 1倍，
第 8 天时茎节长出第 1个丛生芽。
（下转第 188 页）
表 1 里昂城嫩茎粗细程度对成活率的影响
嫩茎粗细 接种数∥个 成活数∥个 成活率∥%
粗 150 145 96.7
细 150 12 8.0
表 2 里昂城不同接种部位愈伤及侧芽诱导情况
接种
部位
接种数
个
形成愈伤组
织数∥个
愈伤诱
导率∥%
长侧芽茎节
数∥个
侧芽诱导
率∥%
茎段 105 73 69.5 0 0
茎节 105 67 63.8 34 32.4
花 105 105 100.0 0 0
铁线莲里昂城的组织培养研究
吴 荣
（西南林业大学园林学院，云南昆明 650224）
摘要 以铁线莲里昂城的茎段、茎节和花为外植体，在 MS 基本培养基中添加 2.0、3.0 mg/L6-BA，0.05、0.1 mg/LNAA 和 1.5、2.0 mg/L KT，
对其进行初代诱导和继代增殖培养。结果表明：粗嫩茎的成活率远高于细嫩茎，可达到 96.7%；MS+2.0 mg/L6-BA+0.05 mg/LNAA+1.0 mg/L
KT 对里昂城花的诱导优于茎段和茎节，高达 100%；MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 适合愈伤组织的增殖，茎段、茎节和花的
愈伤增殖率均在 90%以上。
关键词 铁线莲；里昂城；组织培养；诱导；增殖
中图分类号 S682.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）17-0186-01
Study on Tissue Culture of Clematis ′Ville de lyon′
WU Rong
（Faculty of Landscape Architecture，Southwest Forestry University，Kunming Yunnan 650224）
Abstract Callus and adventitions bud of Clematis ′Ville de lyon′ were induced with stem and flowers as explants and with the MS added
different 6-BA（2.0，3.0 mg/L），NAA（0.05，0.1 mg/L）and KT（1.5，2.0 mg/L）as nutrient medium. The results showed that the thicker immature stem′s
survival rate was far above the thiner，up to 96.7%，flowers in MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L KT was superior to better than stem，up to
100%，the suit multiplied medium was MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT，the rate of increase was over 90%.
Key words Clematis；Ville de lyon；tissue culture；induction；proliferation
作者简介 吴荣（1980-），女，湖南南县人，硕士，讲师，从事园林植物与
观赏园艺研究工作。
收稿日期 2013-07-18
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林业科学 现代农业科技 2013年第 17期
接种部位 培养基配方 接种数∥个 增殖数∥个 增殖率∥%
茎段 MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 75 71 94.7
花 MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 75 75 100.0
茎节 MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 75 75 100.0
茎节 MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L KT 75 8 10.7
表 3 KT不同浓度对里昂城外植体的增殖情况
（上接第 186页）
从表 3可以看出，不同浓度 KT 对愈伤组织增殖效果差
异很大，1.5 mg/L KT 对茎段、茎节和花的愈伤增殖率均在
90%以上，而 2.0 mg/L KT 对茎节愈伤增殖率仅有 10.7%。由
此可见，并不是 KT浓度越高对愈伤诱导率越有利。当 KT为
1.5 mg/L 时形成的愈伤组织色泽比较整齐，泛着黄绿色光
泽，质地较软，不成坚硬的粒状物，说明 MS+3.0 mg/L 6-BA+
0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 较适合愈伤组织的增殖。
3 结论与讨论
试验结果表明，粗嫩茎的成活率远高于细嫩茎，可达到
96.7%；MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L KT 对里
昂城花的诱导优于茎段和茎节，高达 100%；MS+3.0 mg/L 6-
BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L KT 适合愈伤组织的增殖，茎段、
茎节和花的愈伤增殖率均在 90%以上。
较细的嫩茎含营养少，形成层薄壁细胞少或没有，与培
养基接触面小，不易吸收营养或因切口收缩而吸收不到营
养，消毒过程很容易死亡；花的诱导效果优于其他外植体可
能是因为植物的花比一般器官和组织营养含量高，且含生
殖细胞，所以比其他部位更易诱导愈伤组织。
4 参考文献
[1] 蔡正旺,黄勇.铁线莲属植物的研究进展[J].安徽农业科学，2008（18）：
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2002，113（9）：61.
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南植物研究，2002，24（3）：392-396.
[4] 蔡艳飞，李世峰，李涵，等.中国铁线莲属植物研究进展 [J].中国农学
通报，2009，25（4）：195-198.
[5] 黄坚钦.植物细胞的分化与脱分化[J].浙江林学院学报，2001，18（1）：
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[6] 巩振辉，申书兴.植物组织培养[M].北京：化学工业出版社，2007.
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折断花枝。
2.7 病虫害防治
贡菊主要病害为褐斑病、霜霉病、锈病、白绢病、枯萎病
等，虫害主要为蛴螬、蚜虫、斜纹夜蛾、天牛等。应以农业措
施、物理技术和生物防治为主，辅助化学防治 [4]。褐斑病为贡
菊主要病害，苗期到采收期均可发病。该病从基部叶片边缘
开始发病，后逐渐蔓延到上部叶片。被害叶片出现斑点，初
为黄斑，后转为褐色，病斑不规则。病叶一般不脱落。在防治
上，实行 2~3 年轮作；合理密植，改善通风透光条件；增施钾
肥，提高抗性；加强田间管理，避免土壤湿度过高。可选用石
灰等量式波尔多液或铜铵合剂每月喷施 2~3次预防；当田
间叶片发病率达 3%时，选用石灰等量式波尔多液、石硫合
剂、咪鲜胺、雷多米尔+王铜、噻菌灵、甲基托布津等喷雾防
治。霜霉病为贡菊重要病害之一，主要在春、秋季发病，表现
为叶片发病产生不规则褪绿斑，叶绿微上卷，叶背布满白
色菌丝。春、秋 2季大雨前后，可选用 0.2%小苏打液喷雾，或
高锰酸钾 800～1 000倍液喷雾预防，效果很明显。发病初期，
可选用小苏打、高锰酸钾、霜脲锰锌、雷多米尔、乙膦铝等喷
雾防治，注意轮换用药。枯萎病夏秋发病严重，叶片上出现
黑褐色病斑，边缘有微波纹状，很快失水下垂，根部及茎基
部受害变为黑褐色。在防治上，施石灰调节 pH 值；定植时施
药土；移栽时，苗根蘸高锰酸钾等药液消毒；增施钾肥，提高
抗性；加强田间管理，避免雨天积水。发病初期，可用高锰酸
钾、恶霉灵、敌磺钠等对水，对病株及周边植株进行灌根。白
绢病、锈病可选用三唑酮、井冈霉素、硫酸铜、高锰酸钾、石
灰等量式波尔多液、苯醚甲环唑、氟硅唑等农药防治。
防治蚜虫可覆盖银灰色地膜驱避；搭架后拉 3~4 cm 宽
银灰色塑料带驱避；悬挂黄油板诱杀。另可选用啶虫脒、吡
虫啉等喷雾防治。防治蛴螬可于种植前施茶枯 150 kg/hm2，
或 5%辛硫磷颗粒剂 60 kg/hm2，或用阿维菌素 3 000~4 500
g/hm2对水全田喷雾，然后再翻耕。生产中发现，可用阿维菌
素等对水灌根。在天牛防治上，4 月中旬至 6 月，凡遇晴朗天
气，于 12：00—14：00 到菊苗地中巡视 1 遍，此时菊天牛都
清楚地暴露在嫩稍的茎上，十分易捉，在捉成虫的同时，找
出有萎蔫迹象的嫩梢，掐掉 8~10 cm 长的嫩稍装入袋中集
中处理。另可在成虫羽化盛期，在闷热天中午，选用甲维盐、
阿维菌素等喷雾杀灭。
2.8 采收与加工
贡菊采收与加工要求应掌握 “采花无杂质，摊花要均
匀，焙花不焙焦”的原则。于菊花生长到盛花期开始采收。待
贡菊花瓣平直、花心散开 60%~70%，花色洁白时采摘，选择
晴天采摘，不要采露水花。采摘下来鲜花及时烘焙，如来不
及烘焙可用竹匾等摊晾在洁净的通风处，避免农药等污染，
厚度不得超过 6 cm，时间不得超过 12 h，以免堆沤发热，甚
至霉烂，以保证花色纯白。一般分 3 批采摘，每批都要抢连
绵阴雨天气前采完。
采用烘房烘花，烘房大小可根据贡菊生产量多少而定，
烘架上下屉间距 13~15 cm，烘屉圆形、方形均可，烘屉宽度
以 70~80 cm 最佳。将鲜花铺上烘屉 ，屉上摊花，要朵朵近
靠、均匀，厚度 5~6 cm。烘花分 3 个阶段连续进行，第 1 阶
段，烘房内的温度控制在 40 ℃左右，以手放在烘屉上不烫
手为宜，烘焙 3~4 h。第 2 阶段，保持烘焙温度在 80 ℃，维持
5~6 h。第 3 阶段，将温度慢慢降低，将花烘干，取出烘屉，收
藏干花。烘制过程中，要勤观察，勤调换，使菊花能快速烘
干，确保菊花干燥，颜色洁白鲜活，外形整齐美观。烘焙出来
的花颜色越鲜嫩洁白，越像刚摘的新鲜花，质量就越好。
3 参考文献
[1] 李顺平 .黄山贡菊优质高产栽培技术 [J].现代农业科技 ，2011（16）：
118-119.
[2] 罗益珍，吴卫章，赖淑华，等 .贡菊的繁育及栽培管理技术[J].中国园
艺文摘，2013（3）：136-137.
[3] 柯紫英.菊栽培技术[J].现代农业科技，2008（15）：69，72.
[4] 丰玉成，余宜顺，何建江.贡菊主要病虫害及综合防治技术[J].杭州农
业与科技，2009（4）：39-40.
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