全 文 ：东北铁线莲 [ClematismandshuricaRupr.C.terni-
floraDC.Var.mandshurica(Rupr.)Ohwi.〕别名辣蓼铁线
莲、山辣椒秧子,为毛茛科多年生攀援草本植物。其干燥
根及根茎入药,药材名为威灵仙[1],功效为通络止痛、祛
风除湿。有文献报道表明:威灵仙中的主要有效成分为
三萜皂苷类[2],其皂苷元为齐墩果酸(oleanolicacid)和
长春藤皂苷元 (hederagenin),其它尚有白头翁素
(anemonin)、白头翁内酯(anemonol)或原白头翁素
(protoanemonin)等[3]。齐墩果酸具有清热、消炎、抑菌、
强心、利尿和抑制S180瘤株生成的作用[4]。测定药材中齐
墩果酸含量在一定程度上能反映出药材中皂苷的含量,
从而反应药材的质量。以齐墩果酸为指标性成分对东北
铁线莲进行一个生长季内和不同年生根及根茎内有效
成分变化规律的研究,目的是探索1年内的最佳采收月
东北铁线莲最佳采收期的研究
(1.中国农业科学院特产研究所,吉林 吉林 132109; 2.吉林省扶余县三岔河农业科技站,吉林 松原 131200;
3.吉林省辽源市农业科学院,吉林 辽源 136200)
摘要:为探索东北铁线莲最佳采收时期,采用HPLC法测定可用于东北铁线莲药材质量控制的三萜苷元齐墩果酸的含量。以此
为指标,确定东北铁线莲最佳采收年度为生长第3～4年,最佳采收时期为8月下旬至9月中旬。
关键词:东北铁线莲;齐墩果酸;HPLC;最佳采收期
中图分类号:S567.23 文献标识码:A
StudyoftheBestHarvestTimeofClematismandshuricaRupr.
XUShi-quan1,WANGYing-ping1,SHAOCai1,
ZHANGChun-qing2,CHANGChun-mei2,CUIQiong3
(1.InstituteofSpecialWildEconomicAnimalandPlantScience,CAAS.,Jilin132109,China;
2.SanchaheScientificandTechnologicalAgricultureStation,FuyuCounty,jilin131200,China;
3.LiaoyuanAcdemicofAgriculturalScience,Liaoyuan,136200,china)
Abstract:ToexplorethebestharvesttimeofClematismandshuricaRupr.,AHPLCmethodwasestablishedtodetermineoleanolic
acidcontentsfromClematismandshuricaRupr.ThebestharvesttimeofClematismandshuricaRupr.isbetweenAug15andSep15of
the3~4growthperiods.
Keywords:ClematismandshuricaRupr.;Oleanolicacid;HPLC;Bestharvesttime
收稿日期:2007-09-20
基金项目:吉林省中药现代化重点项目(20050903-2)
作者简介:许世泉(1967-),男,吉林省临江市人,助理农艺师,从事中药栽培学研究。
许世泉 1,王英平 1,邵财 1,张春清 2,常春媚 2,崔琼 3
文章编号:1001-4721(2007)04-0025-03
特 产 研 究 SpecialWildEconomicAnimalandPlantResearch 25
DOI:10.16720/j.cnki.tcyj.2007.04.006
图2 不同年生根及根茎中齐墩果酸的含量
齐
墩
果
酸
含
量
(
m
g/
g)
8.2 8.27 9.4 9.11 9.18 9.25 10.2 10.9(月、日)
齐
墩
果
酸
含
量
(m
g/g
) 图1 不同采收期根中齐墩果酸含量齐
墩
果
酸
含
量
(
m
g/
g)
份和最佳采收年限,以摸索最佳采收期。
1 材料与仪器
1.1 材料
采自吉林省吉林市左家镇,经中国农业科学院特
产研究所王英平研究员鉴定为当地野生种东北铁线莲
的根及根茎。分别选取生长1~5年的植株,整株挖出,
进行不同年生的东北铁线莲根内有效成分变化规律研
究;另外,根据以往采收经验和相关文献报道,从 8月
20日起,每隔7d取样 1次,连续取到 10月初,共计取
样8次;所有样品去泥土,烘干粉碎至80目备用。
1.2 仪器
岛津HPLC色谱仪,含PGU-12AVP在线脱气机、
LC-10ATVP二元梯度泵、SPD-M10AVP二级管阵列检测
器、SIL-10ADVP自动进样器、Class-vp色谱工作站;法
国MetlerAL204电子天平;美国Milipore185型超纯
水器。
1.3 试剂与对照品
甲醇为色谱纯,乙醇、石油醚(60～90℃)均为分析
纯,天津协和医学科技公司生产;超纯水;齐墩果酸对照
品购自中国药品生物制品所。
2 方法
2.1 供试品溶液的制备
取供试品粉末 2g,加乙醇 50mL,加热回流 2h,滤
过,滤液浓缩至约 20mL,加盐酸3mL,加热回流1h,加
水 10mL,放冷,加石油醚(60～90℃)25mL振摇提取,
石油醚蒸干,残渣甲醇10mL溶解,作为供试品溶液。
2.2 对照品溶液的制备
精密称定齐墩果酸对照品适量,加甲醇配置成每
1mL含齐墩果酸0.58mg的对照品溶液。
2.3 色谱条件
色谱柱为 Shim-pack(岛津)C18柱 (250mm×
4.6mm;5μm);流动相:甲醇-水(80︰20);检测波长:
203nm;流速:1mL/min;柱温:室温;进样量:10μL。
2.4 方法学考察
2.4.1 线性关系考察 分别精密吸取齐墩果酸对照品
溶液0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL,用甲
醇定容于10mL容量瓶中,分别进样3次,各10μL,测
定其总峰面积值。以对照品进样量为横坐标,总峰面积
积分值为纵坐标绘制标准曲线并进行线性回归,得回归
方程 Y=426843101.732X+155478.250,r=0.9996。结果
表明,对照品浓度与总峰面积平均值呈良好的线性关
系,线性范围为0.004～0.015mg。齐墩果酸的保留时间
为12.5min.
2.4.2 精密度实验 精密吸取对照品溶液10μL,重复
进样 7次,以齐墩果酸对照品的总峰面积计算,其
RSD=1.4%。结果表明该方法重现性有良好的精密度。
2.4.3 重复性实验 精密称取东北铁线莲样品约 2g,
共7份,按2.1操作,各进样10μL测定,RSD=0.7%。结
果表明该方法重现性良好。
2.4.4 稳定性实验 精密称取东北铁线莲样品约 2g,
共 7份,按 2.1操作,于 1h、2h、4h、8h、12h、24h各进样
10μL,以齐墩果酸对照品的总峰面积计算,其
RSD=1.95%,表明供试品溶液在24h内稳定。
2.4.5 回收率测定 采取加样回收法,精密称取东北
铁线莲样品约2g,共7份,加入一定量的对照品,按2.1
操作并测定其含量,平均回收率为94.2%,RSD=1.45%。
2.4.6 样品含量测定 取供试样品溶液,进样 10μL
入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,并计算各样品齐
墩果酸的含量。
3 结果与讨论
3.1 同一生长季内有效成分变化规律(见图1)
从图1可知,在同一生长季节内,以9月4日至9月
18日前后根中齐墩果酸含量最高,分别为14.4711mg/g、
12.4926mg/g和11.4989mg/g,在8月27日前后仍能达
到10mg/g以上,而其余采收日期的样品齐墩果酸含量均
低于10mg/g,因2005年版《中华人民共和国药典》中并
没有对威灵仙中有效成分齐墩果酸有含量要求,因此,选
取齐墩果酸含量最高时为最佳采收期。
3.2 不同年生齐墩果酸的量变化规律(见图2)
从图2可以看出,1～5年生东北铁线莲,根及根茎
中的齐墩果酸含量是随生长年限的增加而上升的。1～2
年生的铁线莲齐墩果酸含量偏低,仅能达到3～5年生
植株齐墩果酸含量的20%左右,说明1～2生铁线莲不
(下转第29页)
特 产 研 究 2007年第4期26
2.4 抗氧化剂VE、PG对核桃楸油的影响
核桃楸油含有丰富的不饱和脂肪酸,在一定的温
度、光线等条件下,不饱和脂肪酸易发生自动氧化和分
解,造成油脂氧化。提高油脂抗氧化性能的方法比较多,
如低温、密闭贮藏、使用脱氧剂及抗氧化剂等。其中添加
抗氧化剂是一种简单、经济而又理想的方法。目前国内
外常用的抗氧化剂主要有:丁基羟基茴香醚(BHA)、二
丁基羟基甲苯(BHT)、没食子酸丙酯(PG)及抗坏血酸[3]。
由于毒性问题,BHT在美国和日本已停止使用,BHA
在日本已禁止使用。本文选择VE、PG两种天然抗氧化
剂进行实验,其结果如图4。
图4 抗氧化剂VE、PG对核桃楸油的影响
由图4可见,核桃楸油在添加了PG和VE这两种
抗氧化剂后,过氧化值一直保持很低的水平,而且添加
量对其影响不是很大,两种抗氧化剂对核桃楸油的稳定
性都起到了积极的作用,而在高温63(±1)℃下过氧化
值发生了很大的变化,随着处理时间的延长而增大。所
以,在高温下可以添加适当的抗氧化剂防止核桃楸油发
生氧化。
3 结论
3.1 温度对核桃楸油的氧化有明显的作用,高温能加
速油脂的氧化速度。
3.2 金属离子Cu2+、Fe3+能促进核桃楸油的氧化,并且
Cu2+的影响程度要比Fe3+大。
3.3 在太阳直射光条件下,核桃楸油发生了剧烈的氧
化,而避光的条件下氧化不明显。
3.4 抗氧化剂 VE、PG能明显防止核桃楸油在高温条
件下的氧化。
3.5 核桃楸油应避光低温保存,避免用金属容器。在环
境温度较高的情况下,要添加抗氧化剂。
致谢:感谢韩春艳同学在实验中的大力支持。
参 考 文 献
[1]杜香莉.我国核桃资源的综合利用研究[J].西北林学院学
报,2003,(18):66-68.
[2]郗荣庭,张毅萍.中国果树志 -核桃卷[M].北京:中国林业
出版社,1996.
[3]李书国,李雪梅,等.精制核桃油生产工艺及其氧化稳定性
的研究[J].中国油脂,2003,28(10):27-31.
(上接第26页)
适合采收。从第3年开始,根生长迅速,有效成分含量增
加明显,无论从有效成分含量,还是根及根茎的生物产
量,都符合采收要求。第4年后齐墩果酸含量增加不明
显。因此,最佳采收年限为第3年及第4年。
综上所述,东北铁线莲的最佳采收年生为3～4年
生,最佳采收期为 8月下旬至 9月中旬(8月 27日～9
月18日)。
参 考 文 献
[1]国家药典委员会,中华人民共和国药典(2005版一部)[S].
北京:化学工业出版社,2005.175.
[2]吴寿金,赵泰,秦永琪.现代中草药成分化学 [M].北京:
中国医药科技出版社,2002.486.
[3]阴健.中药现代研究与临床应用Ⅱ[M].北京:中医古籍
出版社,1997.268-271.
[4]国家医药管理局中草药情报中心站,植物药有效成分手
册[M].北京:人民出版社,1996,768.
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
赵垦田,等:核桃楸油氧化稳定性的研究第4期
时间（d）
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