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马先蒿属三种植物提取物对小鼠氧化损伤的影响



全 文 :收稿日期:2003-09-15
基金项目:陕西省自然科学基金资助项目(2000SM20)
作者简介:邱娟(1978—), 女 ,陕西西安人 , 陕西师范大学硕士研究生.
*通讯联系人:杨建雄 , 男 ,陕西师范大学教授.
文章编号:1001-3857(2004)03-0094-04
马先蒿属三种植物提取物对小鼠氧化损伤的影响
邱 娟 ,  杨建雄* ,  李发荣
(陕西师范大学 生命科学学院 , 陕西 西安 710062)
摘 要:小鼠腹腔注射四氧嘧啶制成急性氧化损伤模型 ,测定不同组织及血浆中的抗氧化相关酶
SOD 、GSH-Px ,脂质过氧化产物 LPO , LF 以及氧化损伤相关酶 AKP 、ALT 、AST 等指标 ,研究了太
白参 、扭盔马先蒿和短茎马先蒿三种药用植物对小鼠氧化损伤的影响.结果表明 ,太白参 、扭盔马先
蒿和短茎马先蒿的正丁醇部位和水提取部位均可显著降低由四氧嘧啶引起的抗氧化酶活性的异常
升高 ,肝损伤及体内脂质过氧化产物的积累 ,抑制肝指数的异常降低.太白参 、扭盔马先蒿和短茎马
先蒿正丁醇提取部位和水提取部位均具有较好的抗氧化作用.
关键词:太白参;扭盔马先蒿;短茎马先蒿;抗氧化
中图分类号:Q946 文献标识码:A
Effects of three pedicularis plants extracts on oxidative lesion mice
QIU Juan , YANG Jian-xiong , LI Fa-rong
(College of Life Science , Shaanxi No rmal Universi ty , Xi′an 710062 , Shaanxi , China)
Abstract:To study on the anti-oxidative effect of BuOH ex tracts and w ater ext racts from P.decora ,
P .dav idii and P.artselaer , the acute o xidat ive lesion mice model is induced by peritoneal inject ion
allox an , enzyme relevant w ith anti-oxidative such as SOD , GSH-Px , the lipid hydroperoxide product
such as LPO , LF , and other enzyme relevant w ith oxidative lesion such as AKP , ALT , AST is
detected to observe the ef fect of different medicine.The results show that the BuOH extracts and
w ater-ex tracts of P.decora , P .dav idii and P.artselaeri can significantly decrease the abnormal
rise of ALT , AST , AKP , LPO , SOD , GSH-Px , Hb and LF caused by oxidat ive lesion , and
obviously inhibit abnormal decrease of liver index.It indicates that P.decora , P.dav idii and P.
artselaeri extracts have good anti-oxidative ef fects.
Key words:Taibai-ginsen;P.davidi i;P.artselaeri;anti-oxidative
  太白参(即美观马先蒿 P.decora Franch)、扭盔
马先蒿(P.davidi i Franch)和短茎马先蒿(P .
artseleari Max im)均为玄参科(Scrophularicene)马
先蒿属植物 ,民间将太白参的根部作为药材使用已
有悠久的历史[ 1] ,但有关其药理作用的研究却少有
报道.我们的前期工作表明 ,太白参对小鼠的氧化损
伤有保护作用[ 2 , 3] ,而扭盔马先蒿和短茎马先蒿的
药理作用尚未见报道.由于扭盔马先蒿和短茎马先
蒿的资源比太白参丰富 ,本实验以太白参为阳性药 ,
对比研究扭盔马先蒿和短茎马先蒿抗氧化损伤的作
用 ,为其开发利用提供实验依据.
1 材料与方法
1.1 药物处理
太白参 ,购自陕西省眉县国有药店;扭盔马先
蒿 、短茎马先蒿采于秦岭北坡 ,由陕西师范大学植物
第 32卷 第 3期 陕西师范大学学报(自然科学版) Vol.32 No.3
 2004年 9月 Journal of Shaanxi Normal University (Natural Science Edit ion) Sep.2004 
DOI :10.15983/j.cnki.jsnu.2004.03.027
教研室田先华副教授鉴定.精确称取太白参 、扭盔马
先蒿 、短茎马先蒿干燥粉末各 100 g ,分别加 10倍量
工业酒精以渗漉法提取 ,换用 60%工业酒精回流提
取 2次 ,将渗漉法和回流法所得提取液混合后浓缩 ,
浓缩液用正丁醇萃取 ,分别制备正丁醇提取部位和
水提取部位 ,浓缩 ,挥去溶剂至浸膏状 ,按 10g 生药/
(kg 体重·d)的剂量配成相应浓度的正丁醇溶液和
水溶液 ,冷藏备用.
1.2 动物分组及处理
ICR小鼠(由陕西省中医研究院实验动物中心
提供 ,体重 20±2 g ,陕医动证字 08-004号)80只 ,
随机分为 8组 ,每组 10只 ,雌雄各半.各组动物自由
饮食 ,阳性 Ⅰ组(太白参正丁醇溶组),阳性 Ⅱ组(太
白参水溶组),扭盔马先蒿 Ⅰ组(正丁醇溶组),扭盔
马先蒿 Ⅱ组(水溶组),短茎马先蒿 Ⅰ组(正丁醇溶
组)和短茎马先蒿 Ⅱ组(水溶组)分别按 10 g 生药/
(kg 体重·d)剂量灌胃给药 ,正常对照组 、模型对照
组以等体积生理盐水灌胃 ,20 d后禁食(不禁水)16
h ,除正常对照组外各组动物均腹腔注射四氧嘧啶
150 mg/kg 造成氧化损伤模型.72 h 后眼眶采血 ,
3.2%柠檬酸钠抗凝 ,离心分离红细胞和血浆 ,并取
肝 、脑组织制成 10%匀浆液备用.
1.3 测定方法
丙氨酸氨基移换酶(ALT)和天冬氨酸氨基移换
酶(AST)用赖氏比色法测定[ 3] ,碱性磷酸酶(AKP)
用氨基安替比林法测定[ 4] ,过氧化脂质(LPO)用硫
代巴比妥(TBA)比色法测定[ 5] ,超氧化物歧化酶
(SOD)用邻苯三酚法测定[ 6] ,谷胱甘肽过氧化物酶
(GSH-Px)用 5 ,5-二硫对硝基苯甲酸(DTNB)法测定[ 6] ,
血红蛋白(Hb)用氰化高铁法测定[ 7] ,脂褐素(LF)用荧
光法测定[ 8] ,实验所用试剂均为国产分析纯.
1.4 数据处理
实验数据用 X ±S 表示 ,用 SPSS10.软件进行
方差分析.
2 结果
2.1 马先蒿属三种植物提取物对小鼠红细胞抗氧
化能力的影响
表 1 结果显示 , 正常对照组 Hb 、LPO 、SOD 、
GSH-Px 均远低于模型对照组 ,数据差异有极显著
意义;太白参 、扭盔马先蒿和短茎马先蒿的 Ⅰ组 、Ⅱ
组的各项指标也低于模型对照组 ,除扭盔马先蒿 Ⅰ
组的SOD和 GSH-Px 外 ,数据差异均有显著意义.
表 1 马先蒿属三种植物提取物对小鼠红细胞抗氧化作用的影响( X±S , n=10)
Tab.1 Effects of extracts from three plants of pedicularis on
anti-oxidative activity of mice red blood cell( X±S , n=10)
组别 Hb/(g·L-1) LPO/(nmo l·m L-1) SOD/(U·nL-1) GSH-Px/(nmol·(100 m L·min)-1)
正常对照组 152±10** 42.8±9.8** 2.38±0.53 ** 11.1±1.5**
模型对照组 215±12 98.8±6.4 3.92±0.19 23.9±2.2
阳性Ⅰ组 167±9 ** 58.4±13.0 ** 2.66±0.67 ** 13.6±2.9**
阳性Ⅱ组 175±14** 64.3±13.7 ** 3.15±0.38 * 18.4±3.9**
扭盔马先蒿Ⅰ组 179±12** 72.1±18.4 ** 3.35±0.48 21.2±4.1
扭盔马先蒿Ⅱ组 174±11** 62.4±10.3 ** 3.04±0.51 * 18.3±2.1**
短茎马先蒿Ⅰ组 167±13** 58.9±4.0** 2.62±0.59 ** 13.2±2.1**
短茎马先蒿Ⅱ组 177±13** 61.9±8.4** 3.06±0.54 * 18.3±2.4**
  **, *表示和模型对照组对比 , P <0.01 , P<0.05.
2.2 马先蒿属三种植物提取物对小鼠血浆 AKP 、
ALT 、AST的影响
表 2 结果显示 , 模型对照组血浆 AKP 、A LT 、
AST 均高于正常对照组 , 数据差异有极显著意义;
各给药组的数据均低于模型对照组 ,除扭盔马先蒿
Ⅰ组的ALT 外 ,数据差异均有显著意义.
2.3 马先蒿属三种植物提取物对小鼠肝脏抗氧化
作用的影响
表 3结果表明 , 正常对照组的 LPO 、SOD 和
GSH-Px均低于模型对照组 ,而肝指数高于模型对
照 ,数据差异有极显著意义;各给药组的 LPO 、SOD
和 GSH-Px 均低于模型对照组 ,而肝指数高于模型
对照 ,数据差异有显著意义.
2.4 马先蒿属三种植物提取物对脑组织的抗氧化
作用
表 4结果显示 ,正常对照组的 LPO 、SOD 、GSH-
Px和 LF 均低于模型对照组 ,数据差异有极显著意
义;各给药组的 LPO 、SOD和 LF 数据均低于模型对
  第 3期 邱娟 等:马先蒿属三种植物提取物对小鼠氧化损伤的影响 95 
照组 ,数据差异有显著意义;GSH-Px 的数据与模型 组相比较有降低的趋势 ,但数据差异无显著意义.
表 2 马先蒿属三种植物提取物对小鼠血清 AKP 、ALT、AST的影响( X±S , n=10)
Tab.2 Effects of extracts from three plants of pedicularis on enzyme activity
of AKP 、ALT AND AST in mice serum( X±S , n=10)
组别 AKP/(金氏 U·100 mL-1) ALT/(赖氏 U·100 m L-1) AST/(赖氏 U·100 mL-1)
正常对照组 35.1±2.7** 74.0±5.0 ** 78.1±5.4**
模型对照组 47.1±3.9 101.1±9.9 104.0±12.2
阳性Ⅰ组 36.2±1.9** 81.8±3.4 ** 85.9±5.1**
阳性Ⅱ组 37.8±2.7** 88.1±7.5 * 89.8±8.0**
扭盔马先蒿Ⅰ组 37.0±2.9** 93.6±10.8 87.4±6.5**
扭盔马先蒿Ⅱ组 35.8±2.1** 84.6±4.3 ** 87.8±6.6**
短茎马先蒿Ⅰ组 36.4±1.7** 84.4±5.0 ** 83.8±4.5**
短茎马先蒿Ⅱ组 36.6±2.4** 85.3±13.0** 89.0±5.5**
  **, *表示和模型对照组对比 , P <0.01 , P<0.05
表 3 马先蒿属三种植物提取物对小鼠肝组织抗氧化作用的影响( X±S , n=10)
Tab.3 Effects of extracts from three plants of pedicularis on
anti-oxidative activity of mice liver tissue( X±S , n=10)
组别 LPO/(nmol·g-1肝)
SOD/
(U·g-1肝)
GSH-Px/
(nmol·g-1肝 min-1)
肝指数/
(g·100 g-1体重)
正常对照组 51.4±6.1** 19.4±3.0** 224±31** 5.09±0.35**
模型对照组 83.8±7.4 32.7±3.0 373±46 3.7±0.50
阳性Ⅰ组 55.7±4.8** 23.2±2.8** 285±29** 5.40±0.50**
阳性Ⅱ组 61.2±6.2** 26.0±3.2** 306±40* 5.32±0.41**
扭盔马先蒿Ⅰ组 61.8±6.5** 23.2±6.1** 312±53* 5.44±0.41**
扭盔马先蒿Ⅱ组 61.1±3.7** 23.8±5.0** 298±40** 5.65±0.41**
短茎马先蒿Ⅰ组 55.4±4.2** 20.9±2.5** 261±24** 5.32±0.44**
短茎马先蒿Ⅱ组 61.0±5.1** 24.3±3.2** 300±32** 5.48±0.28**
  **, *表示和模型对照组对比 , P <0.01 , P<0.05.
表 4 马先蒿属三种植物提取物对脑组织抗氧化作用的影响( X±S , n=10)
Tab.4 Effects of extracts from three plants of pedicularis on
anti-oxidative activity of mice brain tissue( X±S , n=10)
组别 LPO/(nmol·g-1脑) SOD/(U·g-1脑) GSH-Px(nmol·g -1min-1脑) LF/(U·g-1脑)
正常对照组 28.4±2.6** 20.0±1.9** 150±23** 202±16 **
模型对照组 37.6±4.8 41.7±4.2 204±40 250±25
阳性Ⅰ组 31.0±2.6** 26.8±4.0** 160±24 208±10 **
阳性Ⅱ组 32.0±3.0** 28.4±4.7** 180±36 214±14 **
扭盔马先蒿Ⅰ组 30.4±2.9** 26.7±3.8** 189±36 217±19 **
扭盔马先蒿Ⅱ组 31.5±3.2** 26.6±2.3** 165±34 211±11 **
短茎马先蒿Ⅰ组 30.9±2.2** 25.7±3.5** 158±24 211±13 **
短茎马先蒿Ⅱ组 31.7±3.5** 26.0±3.1** 164±32 217±16 **
  **, *表示和模型对照组对比 , P <0.01 , P<0.05.
96  陕西师范大学学报(自然科学版) 第 32卷
3 讨论
四氧嘧啶即阿脲(alloxan),是生物异源物质 ,可
在体内由酶促或非酶促反应分解而产生自由基.大
剂量四氧嘧啶的注入使小鼠机体内产生过多的自由
基 ,这些性质活泼的自由基攻击多种生物分子 ,激发
生物膜中不饱和脂肪酸脂质过氧化 ,生成有害代谢
产物如丙二醛等 ,它们能与含游离氨基的蛋白质 、核
酸等形成 Schiff 碱使生物分子交联 ,促使老化产物
LF 的生成 ,最终导致细胞组织结构与功能的损
伤[ 9] .SOD 、GSH-Px 是体内清除自由基的重要抗氧
化酶类.实验结果发现 ,太白参 、扭盔马先蒿和短茎
马先蒿可有效抑制四氧嘧啶产生的自由基所诱发的
LPO 、LF 含量和抗氧化酶 SOD 、GSH-Px 活力的代
偿性升高 ,表明了太白参 、扭盔马先蒿 、短茎马先蒿
均能提高机体抗氧化能力 ,降低自由基引起的氧化
损伤.
四氧嘧啶引发的 Hb 异常升高 ,可能是自由基
引发了体内生物大分子的破坏 ,同时加快了修复系
统的运转速度 ,提高了机体的耗氧量 ,从而应激性刺
激Hb代偿性升高 , 有关具体机制尚待研究.太白
参 、扭盔马先蒿 、短茎马先蒿可纠正自由基引发的
Hb异常升高 ,维持 Hb的正常生理浓度.
在临床诊断中 ,血清转氨酶 ALT 、AST 及 AKP
活力的升高常与肝组织的损伤程度呈平行关系.当
肝组织损伤或发生炎症时 ,转氨酶就渗逸到血液中 ,
AKP可能由于肝疾患不能通过胆汁排泄而引起血
清中活力增高.模型对照组血清酶 ALT 、AST 、AKP
的显著升高 ,以及肝指数的显著降低 ,均表明四氧嘧
啶在体内产生的自由基引起了肝细胞一定程度的损
伤 ,而太白参 、扭盔马先蒿和短茎马先蒿可以显著性
地降低血清酶 A LT 、AST 、和 AKP 的异常增高 ,抑
制肝指数的异常下降.
该实验显示 ,太白参 、扭盔马先蒿和短茎马先蒿
的正丁醇提取部位和水提取部位均具有较好的抗氧
化作用 ,水提取部位和正丁醇提取部位在作用效果
上相似 ,方差分析结果显示 ,不同提取部位及不同药
材的作用效果差别无显著意义 ,这与我们以前的研
究结果是一致的[ 3] .看来 ,水提取部位和正丁醇提取
部位均含有抗氧化成分 ,这对于进一步研究这三种
药材的活性成分有重要的参考价值.扭盔马先蒿 、短
茎马先蒿具有和太白参相似的抗氧化作用.这一结
果提示 ,民间将扭盔马先蒿 、短茎马先蒿作为太白参
类同品应用是有一定道理的.对资源更为丰富的扭
盔马先蒿 、短茎马先蒿的药理作用进行研究 ,对于开
发马先蒿属的药用植物资源有重要的意义.
参考文献:
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〔责任编辑 王 勇〕
  第 3期 邱娟 等:马先蒿属三种植物提取物对小鼠氧化损伤的影响 97