全 文 ：国际濒危植物羊耳蒜中化学成分的气相色谱 -质谱联用分析■
湖北民族学院医学院(恩施 445000)　　　　　　　　　刘杰书　李泳锋
湖北省生物资源保护与利用重点实验室(恩施 445000)　刘金龙　　　　
摘　要:目的:国际濒危植物羊耳蒜是土家医学名贵草药 , 具有显著活血调经 , 止血 , 止痛 , 强心 , 镇静功效 , 但目前未见研究
其成分报道 , 本研究其所含化学成分 , 为开发新药做建立理论基础。方法:采用气相色谱 -质谱联用(GC-MS)法对国际濒
危植物羊耳蒜超声波提取法所得乙醇提取物进行分析。结果:羊耳蒜提取物共检测出 31个峰中现已鉴定出 21个化合物 ,
主要是生物碱 、脂肪酸及小分子的分配性物质。结论:羊耳蒜中含有有效成分生物碱具有开发研究价值。
关键词:濒危植物;羊耳蒜;气相色谱 -质谱联用;超声波提取法
中图分类号:R297.3　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)06-0050-02
　　羊耳兰属 , 兰科 ,约 250种 , 广泛分布于全球热带与亚
热带地区 , 少数种类也见于北温带 , 我国有 45种 , 约有 19
种产台湾 , 其余以西南为最多。 由于生态的破坏和过度的
采掘 , 在全球现已处于濒危阶段 , 现已被国际贸易公司公约
规定的保护野生兰科植物的一种。羊耳蒜 , 兰科羊耳兰属
植物羊耳蒜 Liparisjaponica(Miq.)Maxim.,以带根全草入
药 , 夏秋采收 , 洗净晒干。 在土家医药学中全草有活血调
经 , 止血 , 止痛 , 强心 , 镇静的功效 〔1〕。能治疗崩漏 , 白
带 , 产后腹痛 , 外伤急救等病症。现国内外还未见其对羊
耳蒜的化学成分研究的相关报道 〔2〕 , 为此对羊耳蒜的中药
化学成分进行的研究。 本实验用超声细胞粉碎机进行提
取 , 用气相色谱 -质谱联用分析其中化学成分 , 用 NIST
谱图库检索鉴定化合物。用峰面积归一化法计算各峰的相
对含量。
1　材料与仪器
1.1　仪器采用美国 AgilentGC6890N/MS5975i气相色谱 -
质谱 -计算机联 GC-MS-DS)。;AW120型电子分析天平
(新疆嘉颖科技有限公司 ,精度 0.1mg);JY96-Ⅱ超声细胞
粉碎机(宁波新芝生科技股份有限公司);旋转蒸发器 RE-
52(上海亚荣生化仪器厂);飞鹤离心机 AnkeTGL-16G
等。
1.2　羊耳蒜(购买于咸丰县药商 , 湖北民族学院医学院刘
杰书鉴定 , 为羊耳蒜);乙醇 、无水硫酸钠等试剂均为优级
纯。
2　方法与结果
2.1　色谱柱为 HP-5MS弹性石英毛细管柱(30m×0.
25mm×0.25μm);升温程序:从 60℃开始 , 保温 2min, 以
5℃· min-1升温到 160℃, 保温 1min, 再以 10℃· min-1升
温到 240℃, 保温 2min。汽化室温度 260℃;载气:高纯氦
气;载气流量 10ml· min-1;分流比 20:1, 进样量 0.1μl。
　■基金项目:国家民委科研基金项目 , 08HB03
　作者简介:(1962～ )湖北建始人 ,副教授 、副主任药师 ,硕士生导
师 ,主要从事民族医药的开发与研究 , 13886783358, kjxyljs@ 163.
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2.2　质谱条件质谱的电离方式为 EI, 灯丝电流 0.6mA;电
子能量 70eV,倍增器电压 1023V, 离子源 200℃, 扫描周期
0.5S,溶剂延迟 3.0min,扫描范围 50 ～ 550amu.
2.3　将羊耳蒜干全草在 60℃烘箱烘至衡重后用粉碎机粉
碎 120目 -精密称取干粉末 2g置 50ml烧杯中 -加 20ml乙
醇 -置于超声细胞粉碎机 500w处提取 15min提取液 -用
离心机离心除杂 , 离心液用旋转蒸发器回收乙醇 -得浸膏
-加入石油醚除色素并将沉淀物 -乙醇溶解 , 乙醇液检测
成分 ,转移至 5ml量瓶中 , 加乙醇至刻度 ,摇匀 , 即得。
2.4　样品测定精确吸取供试品溶液 1,注入气相色谱仪中 ,
对羊耳蒜进行 GC-MS分析 , 得到羊耳蒜的 GC-MS总离
子流图 ,见图 1。启动 P6890MS化学工作站 , 利用 NIST05-
Wiley275质谱库对各色谱峰进行检索 , 根据质谱数据 、相对
保留时间和有关参考文献 , 确认中各化学成分。 通过 Shi-
madzuGC-MSsolution数据处理系统 , 按照峰面积归一法
进行定量分析 ,得出羊耳蒜中各化学成分的相对质量分数。
2.5　结果供试品溶液经 GC-MS联用仪分析鉴定 ,在确定
各对照组分质谱数据和扫描峰号后 , 用 NIST谱库进行检
索 ,并核对标准质谱图及有关资料 , 从中分离 、鉴定出 21个
化合物 ,结果见表 1及图 1。图 1羊耳蒜 GC-MS总离子流
图。
图 1　羊耳蒜GC-MS总离子流图
50 　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2009年 6月第 6期DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.06.030
表 1　羊耳蒜乙醇提取物化学成分及相对百分含量
RT 组分名称 分子量 分子式 相对百分含量(%)
4.590 Maleicanhydride顺丁烯二酐 98 C4H2O3 1.26
7.832 Benzenamine, 3, 4-dimethyl- 3, 4-二甲苯胺 121 C8H11N 0.94
7.837 5, 6, 7, 8-Tetrahydroindolizine5, 6, 7, 8-四氢氮茚 121 C8H11N 1.67
8.921 Benzofuran, 2, 3-dihydro- 2, 3-二氢 -苯并呋喃 120 C8H8O 10.96
8.999 2-Furancarboxaldehyde, 5-(hydroxym 5-甲基 -2-呋喃甲醛 126 C6H6O3 1.64
10.295 Benzaldehyde, 4-hydroxy- 4-羟基苯甲醛 122 C7H6O2 0.89
10.741 Vanillin3-甲氧基 -4-羟基苯甲醛 152 C8H8O3 0.95
14.166 Tetradecanoicacid肉豆蔻酸 228 C14H28O2 0.66
15.012 Procerin 230 C15H18O2 45.03
15.207 Phyto 278 C20H40O 1.25
16.815 n-Hexadecanoicacid十 六烷酸 256 C16H32O2 5.81
19.217 3-Methyl-1-phenyl-2-azafluorene1-苯基 -3-甲基 -2-氮杂芴 257 C19H15N 2.58
19.369 9, 12-Octadecadienoicacid(Z, Z)-(Z, Z)-9, 12-十八烷二烯酸 280 C18H32O2 2.93
19.456 9, 12, 15-Octadecatrienoicacid, 2, 3-dihydroxypropylester, (Z, Z, Z)- 280 C21H36O4 5.55
19.807 Octadecanoicacid硬脂酸 284 C18H36O2 1.31
21.112 Eudesma-5, 11(13)-dien-8, 12-olide桉叶油二烯 5, 11(13)-内酯 -
8, 12 232 C15H20O2 1.94
21.684 5, 8-Dimethoxy-2, 3, 10, 10a-tetrahydro-1H, -4aH-phenanthrene-4, 9-dione 274 C16H18O4 13.14
27.111 5-Methoxy-2-nitro-10H-acridin-9-one 270 C14H10N2O4 1.68
29.153 Verazine藜芦嗪 397 C27H43NO 9.15
30.762 Stigmasta-5, 22-dien-3-ol, acetate, (3a)- 438 C31H50O 0.13
31.560 8-Alyl-2-oxo-2H-chromene-3-carboxylicacid 368 C22H28N2O3 3.63
3　讨　论
羊耳蒜是土家族医药特色药物之一 , 其临床疗效在长
期医疗实践中 , 效果显著 , 现从乙醇提取液共检测出 31个
峰中现已鉴定出 21个化合物 , 还有 10个未鉴定出来并其
提取液挥干加氨水液溶解用酸调 pH至酸性加雷氏盐均产
生红色沉淀 , 羊耳酸含有季安性生物碱 , 〔3〕本实验现已对羊
耳蒜进行驯化成功 , 现已对其进行组织培养过程中 ,为拯救
濒危植物 、储备物种资源作进一步的科学研究起到积极作
用 , 将为以后开发新药提供理论依据及资源。
参考文献
〔1〕方志先 , 赵晖 , 赵敬华.土家族药物志(下册)〔M〕.北
京:中国医药科技出版社 , 2006.796-797.
〔2〕宋立人.中华本草 〔M〕.8卷.上海:科学技术出版社 ,
1999.736-737.
〔3〕肖崇厚.中药化学〔M〕.上海:科学技术出版社 , 2007.92.
2009年 4月 13日收稿
AnalysisofChemicalCompositions
ofLiparisjaponica(Miq.)MaximbyGC-MS
LiYong-feng, LiuJie-shu, LiuJin-long
　　(MedicineHubeiInstituteforNationalities, Enshi, Hubei, 445000 , China;BiologicResources
　　ProtectionandUtilizationofHubeiProvince, HubeiInstituteforNationalities, Enshi, Hubei, 445000, China)
Abstract:Objective:InternationalendangeredplantsLiparisjaponica(Miq.)MaximTujiaarevaluableherbalmedi-
cine, asignificantHuoxueTiaojing, bleeding, pain, cardiac, sedativeefects, butnostudyofitscomponentsisreported
inthisstudycontainedchemicalcomposition, forthedevelopmentofnewdrugssetuptodotheoryfoundation.Meth-
ods:ThechemicalcomponentsofLiparisjaponica(Miq.)Maximextractsseparatedbyultrasonicextractionmethodwere
analyzedcomparativelybyGC-MS.Results:Liparisjaponica(Miq.)Maximextractdetectedatotalof31peaksinthe
nowidentified21compounds, mainlyalkaloids, fatyacidsandsmalmoleculesofphenolsubstances.Conclusion:Lipar-
isjaponica(Miq.)Maximspeciescontainactiveingredientswiththedevelopmentoftheresearchvalueofalkaloids.
Keywords:endangeredplants;Liparisjaponica;GC-MS;ultrasonicextractionmethod
512009年 6月第 6期　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志