全 文 ：麦类作物学报　２０１２，３２（５）：８８０－８８４
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ　Ｃｒｏｐｓ
网络出版时间：２０１２－０８－２３　１７：１９
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／６１．１３５９．Ｓ．２０１２０８２３．１７１９．２０１２０５．０＿０３０．ｈｔｍｌ
西藏林芝小麦条锈菌的分子群体遗传结构分析
＊
王雅婷１，杨敏娜２＊，鲁传强１，康振生１，王保通１，胡小平１
（１．西北农林科技大学植保学院／作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌７１２１００；
２．西藏农牧学院植物科学技术学院，西藏林芝８６００００）
摘　要：为了明确西藏林芝地区小麦条锈菌的分子群体遗传结构，２０１０年，从西藏林芝地区的米林县、
林芝县、波密县和工布江达县共采集到２５９个小麦条锈菌标样，利用１０对小麦条锈菌ＳＳＲ引物进行了群体
遗传研究。结果表明，该地区小麦条锈菌的遗传多样性水平较低，群体存在一定的遗传分化，群体间遗传变异
占总变异的１２％，群体内遗传变异占８８％，不同群体间存在着频繁的菌源交流。
关键词：小麦条锈菌；西藏林芝；群体遗传结构
中图分类号：Ｓ４３５．１２１；Ｓ３３０　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００９－１０４１（２０１２）０５－０８８０－０５
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｐｕｃｃｉｎｉａ　ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ
ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｉｎ　Ｎｙｉｎｇｃｈｉ　ｏｆ　Ｔｉｂｅｔ
ＷＡＮＧ　Ｙａ－ｔｉｎｇ１，ＹＡＮＧ　Ｍｉｎ－ｎａ２＊，ＬＵ　Ｃｈｕａｎ－ｑｉａｎｇ１，ＫＡＮＧ　Ｚｈｅｎ－ｓｈｅｎｇ１，
ＷＡＮＧ　Ｂａｏ－ｔｏｎｇ１，ＨＵ　Ｘｉａｏ－ｐｉｎｇ１
（１．Ｓｔａｔｅ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｃｒｏｐ　Ｓｔｒｅｓｓ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｉｎ　Ａｒｉｄ　Ａｒｅａｓ，Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，
Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｉｂｅｔ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｌｉｎｚｈｉ，Ｔｉｂｅｔ　８６００００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎｙｉｎｇｃｈｉ　ｏｆ　Ｔｉｂｅｔ　ｉｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｏｆ　ｗｈｅａｔ　ｓｔｒｉｐｅ　ｒｕｓｔ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　Ｐｕｃｃｉｎｉａ
ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ（ＰＳＴ）ｉｎ　Ｃｈｉｎａ，ｂｕｔ　ｎｏ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ
ＰＳＴ　ａｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｕｎｔｉｌ　ｎｏｗ．Ｔｗｏ　ｈｕｎｄｒｅｄ　ｆｉｆｔｙ　ｎｉｎｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｏｆ　ＰＳＴ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｍｉｌｉｎ，Ｎｙｉｎｇ－
ｃｈｉ，Ｂｏｍｉ　ａｎｄ　Ｇｏｎｇｂｕｊｉａｎｇｄａ　ｏｆ　Ｔｉｂｅｔ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ＰＳＴ　ｗａｓ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　１０
ｐａｉｒ　ｏｆ　ＳＳＲ　ｐｒｉｍｅｒｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ＰＳＴ　ｆｒｏｍ　ｔｈｏｓｅ　ｒｅｇｉｏｎｓ
ｏｆ　Ｔｉｂｅｔ　ｗａｓ　ｌｏｗ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ａｍｏｎｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　１２％ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ
ｃａｍｅ　ｆｒｏｍ　ａｍｏｎｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，８８％ｃａｍｅ　ｆｒｏｍ　ｗｉｔｈｉｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ＰＳＴ　ｏｃ－
ｃｕｒｒｅｄ　ａｍｏｎｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｕｃｃｉｎｉａ　ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ；Ｎｙｉｎｇｃｈｉ；ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
　　小麦条锈病菌（Ｐｕｃｃｉｎｉａ　ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．
ｔｒｉｔｉｃｉ）喜凉怕热，主要在纬度较高或高海拔地区
越夏，而且具有远距离气流传播的特点，常常造成
严重的产量损失，是我国小麦安全生产中最严重
的威胁之一［１］。我国学者已对西北、华北、西南主
要流行区的小麦条锈菌群体遗传多样性和遗传结
构进行了广泛深入的研究［２－３］，研究表明，我国小
麦条锈菌保持着较高的遗传多样性水平，各种群
间存在着差异，群体间和群体内都存在着一定的
遗传分化，遗传变异主要存在于群体内部，并且发
＊ 收稿日期：２０１２－０４－２７　　　修回日期：２０１２－０６－０１
基金项目：国家自然科学基金项目（３１０７１６４０，３１０７１６５２和３０９６０２１４）；农业行业计划（２００９０３０３５）资助。
作者简介：王雅婷（１９８４－），女，硕士研究生，主要从事植物病理学研究。
＊：同等贡献作者。
通讯作者：胡小平（１９７１－），男，教授，博士生导师，主要从事植物病理学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｐｈｕ＠ｎｗｓｕａｆ．ｅｄｕ．ｃｎ
现个别种群间基因交流频繁，存在共享指纹现象。
长期以来，由于西藏地区地理位置和交通等方面
的原因，关于西藏小麦条锈病的研究较少。１９９０
－１９９３年，王宗华等［４］对西藏小麦条锈病进行了
阶段性研究，基本弄清了西藏小麦条锈病区域流
行规律、越夏越冬规律［５－６］、品种抗病性变异原
因［７］，开展了综合防治技术方面的研究［８］，但是缺
乏关于西藏小麦条锈菌的群体遗传多样性研究。
因此，本研究利用ＳＳＲ标记对从西藏林芝地区的
米林县、林芝县、波密县和工布江达县等地采集到
的２５９个小麦条锈菌标样，进行了群体遗传结构
研究，旨在为相关研究提供参考。
１　材料与方法
１．１　标样采集与菌种繁殖
２０１０年５－６月份，采集了林芝地区的米林
县、林芝县、波密县和工布江达县小麦条锈菌标样
共计４３５份，繁殖成活标样为２５９份（表１），在感
病品种铭贤１６９上采用单孢子堆接种方法隔离繁
殖，收集新鲜夏孢子并真空封存，于－８０℃保存
备用。
表１　林芝地区小麦条锈菌标样信息
Ｔａｂｌｅ　１　Ｓａｍｐｌｅ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｕｃｃｉｎｉａ　ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ
ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ　Ｎｙｉｎｇｃｈｉ
采集地点 经度 纬度 海拔／ｍ 采集数量 成活数量
米林县派镇岗嘎村 Ｅ９４°１８′４５．４″ Ｎ２９°１６′４７．６″ ２　９３４　 ３９　 ２７
米林县羌纳乡米尼村 Ｅ９４°３３′５９．７″ Ｎ２９°２２′１０．７″ ２　９３６　 ３９　 ２６
米林县丹娘乡啷嘎村 Ｅ９４°４２′１１．１″ Ｎ２９°２６′３３．６″ ２　９６０　 ２７　 １１
米林县羌纳乡朗多村 Ｅ９４°２６′１．６″ Ｎ２９°２１′４６．３″ ２　９３１　 ２３　 １９
米林县南伊乡 Ｅ９４°０′４１．９″ Ｎ２９°１１′２０．３″ ２　９６０　 ３５　 １１
小计 ― ― ― １６３　 ９４
林芝县八一镇杰麦村 Ｅ９４°２５′１９．４″ Ｎ２９°３４′１５．５″ ２　９６２　 １６　 １０
林芝县布久乡 Ｅ９４°２５′１．５″ Ｎ２９°８′４０．１″ ２　９４３　 １７　 ８
林芝县布久镇 Ｅ９４°２６′４１．４″ Ｎ２９°２８′３０．８″ ２　９４３　 ２７　 ２１
林芝县布久乡嘎玛村 Ｅ９４°２７′９．６″ Ｎ２９°２５′５９．１″ ２　９３８　 １３　 １２
林芝县更张乡 Ｅ９４°１′５０．３″ Ｎ２９°４５′１７．１″ ３　１０２　 ３０　 １０
林芝县百吧镇 Ｅ９３°４８′１″ Ｎ２９°４８′１８．０″ ３　１７４　 ６　 ３
林芝县八一镇东如村 Ｅ９４°２０′５３．６″ Ｎ２９°３８′１２．０″ ３　０００　 １０　 ５
小计 ― ― ― １１９　 ６９
波密县 Ｅ９５°５８′０５．３″ Ｎ２９°４５′３２．８″ ３　０７４　 １９　 １２
波密松宗镇 Ｅ９５°４８′１４．８″ Ｎ２９°４８′３７．７″ ２　８１２　 ２７　 ２０
波密帕隆藏布 Ｅ９５°３８′４６．６″ Ｎ２９°５４′１０．５″ ２　７２０　 １３　 ９
波密古乡 Ｅ９５°２９′９．２″ Ｎ２９°５４′３８．３″ ２　６４８　 ７　 ３
波密古乡 Ｅ９５°１８′３２．５″ Ｎ２９°５９′４９．１″ ２　４４８　 １９　 １３
波密然乌镇 Ｅ９５°３４′４．１″ Ｎ２９°３３′２７．２″ ３　１９０　 ９　 ６
波密然乌镇 Ｅ９６°３６′３８．６″ Ｎ２９°２９′３５．７″ ３　０８６　 １４　 ８
波密松宗镇 Ｅ９６°５′７．５″ Ｎ２９°４４′４７．７″ ３　０４６　 ２４　 １３
波密县郊 Ｅ９５°４６′４２．７″ Ｎ２９°５０′３５．４″ ２　７５５　 １３　 ７
小计 ― ― ― １４５　 ９１
工布江达县 Ｅ９３°３６′４５．８″ Ｎ２９°５４′２１．８″ ３　２４９　 ８　 ５
小计 ― ― ― ８　 ５
总计 ― ― ― ４３５　 ２５９
１．２　条锈菌夏孢子基因组ＤＮＡ的提取
基因组ＤＮＡ的提取参照 Ｗａｎｇ　ｅｔ　ａｌ［９］的方
法加以改进：取１０～１５ｍｇ新鲜小麦条锈菌夏孢
子于１．５ｍＬ离心管中，加入５０μＬ抽提缓冲液；
用电钻加研磨棒研磨样品（冰上操作）３～５ｍｉｎ，
再加入３００μＬ抽提缓冲液，涡旋混匀；每管加
·１８８·第５期　　　　　　　　　王雅婷等：西藏林芝小麦条锈菌的分子群体遗传结构分析
３０μＬ　２０％的ＳＤＳ、２０μＬ　５ｍｏｌ·Ｌ
－１　ＮａＣｌ和
３０μＬ　ＣＴＡＢ／ＮａＣｌ溶液，颠倒混匀，６５℃温育１ｈ
（２０ｍｉｎ颠倒一次）；加入等体积的苯酚、氯仿、异
戊醇，轻轻颠倒混匀，１２　０００ｒ·ｍｉｎ－１，４℃离心
１２ｍｉｎ；取上清液，加３５０μＬ的氯仿，轻轻颠倒混
匀，１２　０００ｒ·ｍｉｎ－１，于４℃下离心１０ｍｉｎ；取上
清液加入等体积的预冷异丙醇，－２０℃放置
１－２ｈ；１２　５００ｒ·ｍｉｎ－１，４℃离心１５ｍｉｎ，弃液
体，加４００μＬ　７０％乙醇（预冷）清洗两次，每次洗
后４℃离心５ｍｉｎ，弃上清，室温干燥，加入３０μＬ
ＴＥ溶解。然后用４μＬ（１０ｍｇ·ｍＬ
－１）ＲＮａｓｅＡ
酶３７℃温育０．５－１ｈ去除 ＲＮＡ，进一步纯化
ＤＮＡ。将提取的ＤＮＡ用超纯水稀释至５０ｎｇ·
μＬ
－１，－８０℃保存备用。
１．３　ＰＣＲ产物的扩增及检测
采用１０对ＳＳＲ引物（表２）对小麦条锈菌基
因组ＤＮＡ进行扩增。ＰＣＲ反应体系（２５μＬ）：１０
×Ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｂｕｆｆｅｒ　２．５μＬ，ＭｇＣｌ２（２５ｍｍｏｌ·
Ｌ－１）１．７μＬ，ｄＮＴＰ（２．５ｍｍｏｌ·Ｌ
－１）２．０Ｌ，正向
引物（１０μｍｏｌ·Ｌ
－１）０．５μＬ，反向引物（１０μｍｏｌ
·Ｌ－１）０．５μＬ，Ｔａｑ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（５Ｕ·μＬ
－１）０．２
μＬ，ＤＮＡ（５０ｎｇ·μＬ
－１）１．０μＬ，ｄｄＨ２Ｏ　１６．６
μＬ。扩增反应在ＰＴＣ－２００（ＢＩＯ－ＲＡＤ）上进行。
ＰＣＲ扩增反应程序：９４℃变性４ｍｉｎ；９４℃变性４５
ｓ，６４℃退火４５ｓ，每循环一次降０．７℃，７２℃延伸
４５ｓ，１０个循环；９４℃变性４５ｓ，５４℃退火４５ｓ，
７２℃延伸４５ｓ，２５个循环；７２℃延伸１０ｍｉｎ，４℃
终止反应。扩增产物经６％变性聚丙烯酰胺凝胶
（ＰＡＧＥ）电泳分离和银染显示。
１．４　统计分析
电泳图谱中的每一条带视为一个分子标记，
并代表一个引物的结合位点。根据条带确定产物
分子量，排除模糊不清和无法准确标识的条带，构
建０，１二元数据矩阵。利用ＰＯＰＧＥＮＥ　ｖｅｒｓｉｏｎ
１．３２软件［１０］计算多态性条带数ＮＰ、多态性条带
百分率Ｐ、等位基因观测数Ｎａ、有效等位基因数
Ｎｅ、基因多样性指数Ｈ、Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数Ｉ。应
用Ｎｅｉ［１１］基因多度法计算遗传分化系数Ｇｓｔ，总
遗传多样性Ｈｔ，群体内遗传多样性Ｈｓ，群体间遗
传多样性Ｄｓｔ。按照 Ｗｒｉｇｈｔ的Ｆｓｔ法［１２］计算反
映基因流强度的居群每代迁移数（Ｎｍ），其关系
为：Ｎｍ（Ｗ）＝（１－Ｆｓｔ）／４　Ｆｓｔ，Ｆｓｔ可认为等同于
Ｇｓｔ。根据ＰＯＰＧＥＮＥ　ｖｅｒｓｉｏｎ　１．３２软件计算获
得的相似系数，用 ＮＴＳＹＳｐｃ－２．１１Ｆ软件ＳＨＡＮ
程序中的 ＵＰＧＭＡ 方法进行聚类分析，并通过
Ｔｒｅｅ　ｐｌｏｔ模块生成聚类图。
２　结果与分析
２．１　林芝地区小麦条锈菌的遗传多样性水平
１０对ＳＳＲ引物对２５９份标样共扩增出４３个
位点，其中多态性位点３５个，多态性位点百分率
为８１．４０％。每一对引物扩增条带平均值为４．３
个，多态性条带平均值为３．５个，整体多态性水平
较高，各引物所揭示的遗传多样性水平不同
（图１）。
　　由表３可见，不同群体的遗传多样性水平具
有显著差异。在物种水平上，观察等位基因数
（Ｎａ）为１．８１，有效等位基因数目（Ｎｅ）为１．１７，
Ｎｅｉ’ｓ基因多样性指数（Ｈ）为０．１３，Ｓｈａｎｎｏｎ信
息指数（Ｉ）为０．２３。在群体水平上，多态位点百
分率（Ｐ）为９．３０％～８１．４０％，平均为５５．２３％，观
察等位基因数（Ｎａ）为１．０９～１．８１，平均为１．５５，
有效等位基因数目（Ｎｅ）为１．０６～１．２１，平均为
１．１５，Ｎｅｉ’ｓ基因多样性指数（Ｈ）为０．０４～０．１４，
平均为０．１０，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｉ）为０．０５～
０．２４，平均为０．１７。米林县和林芝县的群体遗传
多样性水平相对较高，波密县和工布江达县的遗
传多样性水平相对较低，林芝地区总体遗传多样
性水平较低。
表２　ＳＳＲ体系所选用的引物
Ｔａｂｌｅ　２　Ｐｒｉｍｅｒｓ　ｏｆ　ＳＳＲ－ＰＣＲ
合成引物
名称 引物序列５′－３′
退火温度
／℃
ＣＰＳ０８Ｆ
ＣＰＳ０８Ｒ
ＧＡＴＡＡＧＡＡＡＣＡＡＧＧＧＡＣＡＧＣ
ＣＡＧＴＧＡＡＣＣＣＡＡＴＴＡＣＴＣＡＧ ５５
ＣＰＳ０９Ｆ
ＣＰＳ０９Ｒ
ＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＣＴＧＡＧＣ
ＡＧＡＡＡＡＣＧＧＡＡＴＧＴＡＡＴＧＴＧ ５８
ＣＰＳ１０Ｆ
ＣＰＳ１０Ｒ
ＴＣＴＡＣＴＧＧＧＣＡＧＡＣＴＧＧＴＣ
ＣＧＧＴＴＴＧＴＴＴＴＧＴＣＧＴＴＴＣ ５６
ＲＪ１８Ｆ
ＲＪ１８Ｒ
ＣＴＧＣＣＣＡＴＧＣＴＣＴＴＣＧＴＣ
ＧＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＣＴＧＣＴＧ ５６
ＲＪ２０Ｆ
ＲＪ２０Ｒ
ＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＣＧＣＡＣＣＣＧ
ＣＣＴＣＣＧＡＴＴＧＧＣＴＴＡＧＧＣ ５６
ＲＪ２１Ｆ
ＲＪ２１Ｒ
ＴＴＣＣＴＧＧＡＴＴＧＡＡＴＴＣＧＴＣＧ
ＣＡＧＴＴＣＴＣＡＣＴＣＧＧＡＣＣＣＡＧ ５８
ＲＪ２４Ｆ
ＲＪ２４Ｒ
ＴＴＧＣＴＧＡＧＴＡＧＴＴＴＧＣＧＧＴＧＡＧ
ＣＴＣＡＡＧＣＣＣＡＴＣＣＴＣＣＡＡＣＣ ５４
ＣＰＳ１５Ｆ
ＣＰＳ１５Ｒ
ＧＡＴＧＧＧＧＡＡＡＡＧＴＡＡＧＡＡＧＴ
ＧＧＴＧＧＧＧＧＡＴＧＴＡＡＧＴＡＴＧＴＡ ５８
ＣＰＳ３４Ｆ
ＣＰＳ３４Ｒ
ＧＴＴＧＧＣＴＡＣＧＡＧＴＧＧＴＣＡＴＣ
ＴＡＡＣＡＣＴＡＣＡＣＡＡＡＡＧＧＧＧＴＣ ５８
ＣＰＳ３６Ｆ
ＣＰＳ３６Ｒ
ＴＣＣＡＧＧＣＡＧＴＡＡＡＴＣＡＧＡＣＧＣ
ＡＴＣＡＧＣＡＧＧＴＧＴＡＧＣＣＣＣＡＴＣ ５４
·２８８· 麦　类　作　物　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第３２卷
图１　２５９份小麦条锈菌标样的ＳＳＲ分子标记电泳图（ＲＪ１８）
Ｆｉｇ．１　Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　２５９ｓａｍｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｐｕｃｃｉｎｉａ　ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｓｃａｎｎｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ＳＳＲ　ｐｒｉｍｅｒ　ＲＪ１８
表３　林芝地区小麦条锈病菌遗传多样性水平
Ｔａｂｌｅ　３　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｐ．ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｉｎ　Ｎｙｉｎｇｃｈｉ
群体 Ｎａ　 Ｎｅ　 Ｈ　 Ｉ　 ＮＰ　 Ｐ／％
米林县 １．８１　 １．１８　 ０．１３　 ０．２４　 ３５　 ８１．４０
林芝县 １．７４　 １．２１　 ０．１４　 ０．２３　 ３２　 ７４．４２
波密县 １．５６　 １．１３　 ０．１０　 ０．１６　 ２４　 ５５．８１
工布江达县 １．０９　 １．０６　 ０．０４　 ０．０５　 ４　 ９．３０
群体平均水平 １．５５　 １．１５　 ０．１０　 ０．１７　 ２３．８　 ５５．２３
物种水平 １．８１　 １．１７　 ０．１３　 ０．２３　 ３５　 ８１．４０
　　Ｎａ：观察等位基因数；Ｎｅ：有效等位基因数；Ｈ：Ｎｅｉ’ｓ，基因多样性指数；Ｉ：Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数；ＮＰ：多态性位点数；Ｐ：多态位点百
分率。
２．２　小麦条锈菌的群体遗传关系
ＳＳＲ标记结果表明，林芝地区小麦条锈菌群
体总的遗传多样性（Ｈｔ）、群体内的遗传多样性
（Ｈｓ）和群体间遗传多样性（Ｄｓｔ）分别为０．１２、
０．１０和０．０２，具有遗传分化现象，遗传分化系数
（Ｇｓｔ）为０．１２，群体内遗传变异占总变异的８８％，
群体间遗传变异占１２％，群体内多样性大于群体
间多样性。基因流Ｎｍ参数值为１．９０，表明林芝
地区群体间菌源交流频繁。聚类分析结果表明，４
个种群可分为２个类群，林芝地区的工布江达县
·３８８·第５期　　　　　　　　　王雅婷等：西藏林芝小麦条锈菌的分子群体遗传结构分析
为一个类群（Ｇｒｏｕｐ　Ｂ），另外３个种群为一个类
群（Ｇｒｏｕｐ　Ａ）；其中Ｇｒｏｕｐ　Ａ又可分为两个亚群，
即米林县为一个亚群（Ｓｕｂｇｒｏｕｐ　Ｂ），林芝县和波
密县为一个亚群（Ｓｕｂｇｒｏｕｐ　Ａ）（图２）。
图２　小麦条锈病菌４个自然种群的ＵＰＧＭＡ树状聚类图
Ｆｉｇ．２　ＵＰＧＭＡ　ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ　ｏｆ　４ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
ｏｆ　Ｐ．ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｉｎ
Ｎｙｉｎｇｃｈｉ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＳＳＲ　ｍａｒｋｅｒ
３　讨 论
传统的病原菌毒性鉴定及病害调查方法对监
测病害的流行、制定调控策略等起到了十分重要
的作用［１３］。传统的小麦条锈菌生理小种鉴定因
受寄主的选择，其结果只代表了病菌群体内遗传
变异很少的一部分，不能完全反映其遗传本质，存
在一定的局限性［１４］。ＤＮＡ标记通常在遗传上是
中性的，可用于反映病菌菌系间的亲缘关系、群体
遗传结构及其动态［１］。西藏林芝地区位于西藏自
治区东南部，东部和北部分别与昌都地区、那曲地
区相连，西部和西南部分别与拉萨、山南两地（市）
相连，南部与印度、缅甸两国接壤，是西藏小麦的
主要种植区。本研究在西藏林芝地区四个县进行
了小麦条锈菌的大规模采样和分子标记分析，结
果发现林芝地区小麦条锈菌四个群体间的基因流
Ｎｍ为１．９０，群体之间菌源相互交流十分频繁。
群体间和群体内都存在着一定的遗传分化，群体
间的遗传变异占总变异的１２％，群体内遗传变异
占８８％，遗传变异主要存在于群体内部，这与陈
长卿等［１５－１７］关于我国其他地区小麦条锈菌种群结
构的研究结果相一致。林芝地区的米林县和林芝
县小麦条锈菌群体遗传多样性相对丰富，波密县
次之，工布江达县最低，整体的遗传多样性水平并
不丰富。这可能跟当地种植的小麦品种、气候状
况、环境条件、地理特征等有关。我国西藏小麦
条锈菌与内地菌源，以及与雅鲁藏布江河谷相连
的印度、孟加拉等国家间是否存在着交流关系等
问题，尚需要进行大规模、大面积采集小麦条锈菌
标样进行研究。
参考文献：
［１］李振岐，曾士迈．中国小麦锈病［Ｍ］．北京：中国农业出版社，
２００２：１－１１．
［２］Ｓｈａｎ　Ｗ　Ｘ，Ｃｈｅｎ　Ｓ　Ｙ，Ｋａｎｇ　Ｚ　Ｓ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　Ｐｕｃｃｉｎｉａ
ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ　Ｗｅｓｔｅｎｄ．ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｇｅ－
ｎｏｍｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ ［Ｊ］．Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
Ｂｏｔａｎｙ，１９９８，７６：５８７－５９５．
［３］Ｌｕ　Ｎ　Ｈ，Ｗａｎｇ　Ｊ　Ｆ，Ｃｈｅｎ　Ｘ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｐａｔｉａｌ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｒｅｇｉｏｎａｌ　ｓｐｒｅａｄ　ｏｆ　Ｐ．ｓｔｒｉｆｏｒｍｉｓ　ｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ　ｉｎ　Ｎｏｒｔｈ－
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·４８８· 麦　类　作　物　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第３２卷